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INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA

Practica número 2, PARTE 3: identificación de aminoácidos libres en harina de maíz / kumis


por CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Fabián Arturo Hernández Lizcano

1620871

Valeria Meza Villamizar

1611452

Dianid García

1611392

Universidad francisco de paula Santander

Facultad de ciencias agrarias y del ambiente

Departamento de química

Docente: Brito Carreño Francisco Ramón


Introducción

Es una técnica de separación de una mezcla haciéndolos pasar a través de una fase estacionaria
mediante el flujo de una fase móvil.

El objetivo de la fase móvil es transportar la mezcla mientras que en la fase estacionaria es retrasar
el paso de los componentes así cuando los componentes de la mezcla pasan a través del sistema
son separados en distintos momentos según su afinidad con la estación estacionaria

Según la naturaleza de la fase móvil, los métodos cromatógrafos se dividen en 2 grandes grupos

Cromatografía

gases: cuando la fase móvil es un gas Liquido: cuando la fase móvil es un liquido

fase móvil

Liquido Solido Liquido Solido

Fase
estacionaria

Columna
plana Columna
Columna plana
Según como este depositada la fase estacionaria la cromatografía se clasifica en cromatografía plana
y cromatografía de columna.

La cromatografía de capa fina corresponde a una cromatografía plana-solido. Con la fase


estacionaria depositada en una placa de vidrio, aluminio o plástico, Todas las técnicas
cromatografías dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases
inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y
que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un
líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido, todos los sólidos finalmente tiene
poder de absorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente'
todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de
adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

Concepto de Rf: es la relación entre la distancia recorrida por el soluto y por el eluyente desde el
origen de la placa, el cual tiene un valor constante

𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜 (𝑥)


𝑅𝐹:
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑒𝑙𝑢𝑦𝑒𝑛𝑡𝑒 (𝑦)

El valor de Rf depende de las condiciones en las


cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente,
eluyente, así como las condiciones de la placa,
temperatura, vapor de saturación, etc."). Tiene una
reproducibilidad de t 20%, por lo que es mejor
correr duplicados de la misma Placa.
Materiales utilizados en la práctica:

Placa silicagel

Valina

Tirosina Triptófano Lisina


Secador de cabello

Cámara de cromatografía

Nos tocó utilizar la estufa de secado


para calentar la Placa silicagel ya que
se habían llegado el secador
Procedimiento:

 Primero que todo marcar un trazo de 1 cm en la placa silicagel en ambos lados

 Se le agrego 5 gotas de valina con un capilar y proseguimos a secarlo con un secador


traído por la compañera

Capilar con valina

 se le agrego 5 gotas de triptófano con un capilar y proseguimos a secarlo con un secador

Capilar con triptófano


 Se le agrego 5 gotas de tirosina con un capilar y proseguimos a secarlo con el secador

Capilar con tirosina

 Hacemos una mezcla con la valina, tirosina, triptófano, lisina dentro de un vaso
precipitado

 Se le agrego 5 gotas de la muestra de maíz de la clase pasada y proseguimos a secarla con


el secador

Muestra de maíz
 Se le agrego 5 gotas de la muestra de kumis de la clase pasada y proseguimos a secarla
con el secador

Muestra de kumis

 Se introdujo la placa silicagel dentro de la cámara cromatografía y después de un rato se le


agrego más solvente porque no se estaba dando el resultado que se esperaba

Se le agrego más solvente a la cámara


Placa silicagel cromatografía

 Clasificación de todos los aminoácidos, frente absorbente 4cm

Solo absorbió 4cm


 se colocó la placa en la estufa de secado porque se llevaron el secador

 Sacamos la placa silicagel de la estufa y se le esparció nihidrina con un espray

Nihidrina en espray
 Como se puede visualizar, lo morado o purpura representa a los pocos aminoácidos que se
revelaron gracias a la nihidrina aplicada con el espray

Aminoácidos

Anexo: en esta imagen se puede observar el resultado que se le hizo a otro grupo de laboratorio
visualizando de manera concreta las manchas de color purpura o violeta
Conclusiones:

 En esta práctica no se logró visualizar correctamente la técnica de cromatografía de capa


fina por errores humanos cometidos durante la practica

 La cromatografía de capa fina es un método muy útil, rápido y barato que se puede utilizar
principalmente para la identificación de algunas sustancias conocidas en una mezcla por
su comparación con un patrón de sustancia pura

Bibliografía:

solo se tomaron como base para la realización de este informe de cromatografía en capa fina

 http://organica1.org/1311/1311_6.pdf
 https://es.slideshare.net/yerga/cromatografia-de-capa-fina
 https://tv.upc.edu/contenidos/cromatografia-en-capa-fina-es?set_language=es
 https://www.academia.edu/25178894/CROMATOGRAFIA_EN_CAPA_FINA_A_ANALISIS

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