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FLUJOGRAMA: PRÁCTICA N°2: EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE LÍPIDOS COMPLEJOS CEREBRALES

NOMBRE Y APELLIDOS: ARIANA YUI GONGORA - GRUPO: LUNES – MESA: 1

INICIO 1

Contiene lecitina,
Pesar 20 g de cefalina, grasas,
Contiene
cerebro colesterol y restos Fracción A Fracción B
esfingomielina
de esfingomielina (Etérea) (Alcohólica)
y cerebrósidos
y cerebrósidos
Triturarlo en el
mortero
Concentrar a En el tubo 1, En el tubo 2, agregar
baño maría colocar la fracción 0,5 ml de a-naftol al
Secarlo 5% en etanol
parcialmente en un
beaker
Agregar 0,5 ml de
Agitar
α-naftol al 5% en
Agregar 50 mL de ¿El volumen etanol
etanol final es la
No Dejar caer lentamente
mitad del
Agitar por las paredes 1 ml
volumen
de H2SO4, procurado
Llevar a ebullición inicial?
no agitar
por 3 minutos
Dejar caer
lentamente por
Se realiza una Si las paredes 1 mL Fin
filtración con ayuda de H2SO4 ,
de una gasa Agregar acetona procurado no
agitar

Concentrar el
filtrado con ayuda Aparición de un Reconocimiento de
de la estufa ¿Se observa anillo rosado
No cerebrósidos
un
precipitado?

Fin
Si
¿El volumen No
total es 30 mL?
Separar el precipitado y el
sobrenadante por centrifugación

Si

Adicionar 25 mL de Agregar 2 mL de TCA Agregar 10 mL de éter al


éter 5% al precipitado sobrenadante

Agitar Añadir 1 mL de Separar la fracción etérea


molibdato de
amonio 2,5% y 1 mL
Separar las fases en de solución de Secar la muestra en la estufa
una pera de sulfito
decantación
Resuspender la muestra en
Dejar reposar 2 mL de cloroformo

1
Reconocimiento Adicionar H2SO4
Aparición de una
de lecitina como
coloración azul
fosfolípidos
Interpretar los resultados Reconocimiento de
colesterol
Fin
Fin