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UNA NOTA SOBRE EL TEÑIDO DE TELAS DE LANA UTILIZANDO TINTES NATURALES

EXTRAÍDOS DE HONGOS QUE HABITAN LA MADERA PODRIDA

Vicente A. Hernández 1,*, Felipe A. Galleguillos 1, Nicole Sagredo 1 and Angela Machuca 2
1 Biotechnology Center, University of Concepción, Concepción 4030000, Chile; felipe.fel1ga21-
gmail.com (F.A.G.); nsagredonh-gmail.com (N.S.)
2 School of Science and Technology, Universidad de Concepción, Campus Los Angeles, Los
Angeles 4440000, Chile; angmachu-udec.cl
* Correspondence: vhernandezc-udec.cl; Tel: 56-41-2661449
Received: 14 December 2017; Accepted: 14 February 2018; Published: 19 Feb

Resumen: Los aislados fúngicos obtenidos de muestras de madera podrida fueron identificados y
seleccionados por su capacidad para producir colorantes fúngicos en medios líquidos. Los aislados
fúngicos produjeron tintes extracelulares naturales con colores que van del rojo al naranja, amarillo
y púrpura. Los tintes de dos de estos hongos, Talaromyces australis (rojo) y Penicillium murcianum
(amarillo), fueron extraídos y utilizados para teñir muestras de lana en una máquina Data Color
Ahiba IR Pro-Trade (modelo Top Speed II). La naturaleza proteica de la lana interactuó
Resumen: hongos aislados obtenidos a partir de madera podrida muestras fueron identificados y
seleccionados por su capacidad de producir hongos colorantes en medios líquidos. Aislamientos
de hongo naturales producidos extracelulares tintes con colores que van del rojo al naranja,
amarillo y violeta. Los tintes de dos de estos hongos, Talaromyces australis (rojo) y Penicillium
murcianum (amarillo), se extrajeron y se utilizaba para teñir la lana muestras en un color con datos
Ahiba IR Pro-Trade (modelo Top Speed II) de la máquina. La proteína natural de la lana
interactuaron nos
Extracto: Fungoso aísla obtenido de muestras de madera putrefactas fueron identificados y
seleccionados por su capacidad de producir tintes fungosos en medios líquidos. Fungoso aísla
tintes extracelulares naturales producidos con colores en los límites de rojo a naranja, amarillo y
morado. Los tintes de dos de estos hongos, Talaromyces australis (rojo) y Penicillium murcianum
(amarillo), fueron extraídos y usados para teñir muestras de lana en un Color de Datos a favor de
Comercio de Ahiba IR (modelo Top Speed II) máquina. La naturaleza de la proteína de lana se
relacionó nosotros

1. Introducción
La demanda mundial de pigmentos y colorantes naturales ha aumentado en los últimos
años, impulsada por una importante conciencia de los clientes sobre el efecto nocivo de
varios colorantes sintéticos sobre la salud humana y el medio ambiente [1–4]. Se espera que
la demanda de pigmentos y colorantes naturales alcance los 10 millones de toneladas en
2017 [5]. Los pigmentos y colorantes naturales han sido aislados desde tiempos antiguos de
diferentes fuentes, tales como plantas, bacterias y hongos [6–10]. Hoy en día pigmentos
naturales y colorantes mapuede ser una alternativa real a sus homólogos artificiales en una
amplia gama de aplicaciones en las industrias alimentaria, cosmética, farmacéutica y textil
[5,11
En el teñido de productos textiles, se han notificado una serie de problemas ambientales
asociados con la descarga de tintes artificiales al medio ambiente. Muchos de estos
compuestos son conocidos por sus efectos mutagénicos, cancerígenos, alérgicos y
citotóxicos [12]. En este sentido, el uso de colorantes naturales aparece como una alternativa
para reducir el impacto ambiental de esta industria. Algunos estudios muestran avances
significativos en el uso de pigmentos naturales y colorantes de hongos a telas de color [2,13–
15]. Por ejemplo, pigmentos fúngicos de Chlorociboria aeruginosa (Oeder) Seaver y
Scytalidium cuboideum (Sacc. y Ellis) Sigler y Kang y Scytalidium ganodermophthorum
Kang, Sigler, Lee y Yun se han utilizado para la tinción de poliéster, poliamida, algodón y
lana [15]. Del mismo modo, la firmeza del color de los tejidos naturales y sintéticos se estudió
recientemente con pigmentos verdes de C. aeruginosa, pigmentos rojos de S. cuboideum y
pigmentos amarillos de S. ganodermophthorum [16]. Preocupaciones relacionadas con la a
presencia de metabolitos tóxicos en pigmentos y colorantes producidos por hongos se
elevan comúnmente al evaluar su uso para productos manufacturados. En este sentido, la
adecuada identificación de las cepas fúngicas y la realización de pruebas de toxicidad es
clave para garantizar un entorno seguro para los trabajadores y los productos inofensivos
para los usuarios finales
En esta nota, se estudió el potencial de los hongos filamentosos aislados de la madera
podrida para producir tintes naturales utilizables para el teñido de tela de lana. Los hongos
fueron aislados, identificados y probados en su capacidad para producir tintes extracelulares,
es decir, compuestos solubles en agua con afinidad por un soporte textil, en medios líquidos.
A partir de entonces, los tintes (rojo y amarillo) obtenidos de dos hongos seleccionados se
utilizaron para teñir telas de lana en una máquina Data Color Ahiba IR Pro-Trade (modelo
Top Speed II). La firmeza del color cuando se evaluó el lavado en las muestras temidas.
2. Materiales y métodos

2.1. Aislamiento e Identificación de Hongos


Hongos, recogidos de troncos de Nothofagus spp. en descomposición ubicados en el
centro y sur de Chile (Lircay, región del Maule, 35.6097o S, 70.9663o W; Nonguén, Región
Bio-Bio, 36.8980o S, 72.9815o W; Oncol, Región de Los Ríos, 39.7001o S, 73.3261o W; y
Chiloe, región de Los Lagos, 42.6459o S, 73.9354o W), , se aislaron en platos de Petri con
medios sólidos (20 g de extracto-agar de malta L-1, 200 mg de estreptomicina). Los aislados
fueron identificados por técnicas moleculares de acuerdo con el método descrito por Doyle y
Doyle [17]. En resumen, la extracción de ADN de micelio fúngico se realizó mediante el uso
de fenol-cloroformo y precipitación con isopropanol. La amplificación del espaciador interno
transcrito (ITS) correspondiente incluyó el uso de imprimaciones universales ITS1F y ITS4
[18] y los siguientes ciclos de temperatura: : 94 °C durante 4 min, 30 ciclos de 94 oC 40 s, 60
oC 40 s, 72 oC durante 1 min y un paso final de alargamiento de 72 oC para 10 min. Los
productos de PCR resultantes se secuenciaron en las instalaciones de Macrogen en Seúl,
Corea. La identidad y la cobertura de las secuencias se evaluó en la base de datos de
GenBank utilizando el algoritmo BLAST disponible en el sitio web,
https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi [19].
2.2. Producción de Dyes

Los aislados de hongos se cultivaron en medios líquidos que contenían 20 g de


extracto de malta L-1, 200 mg de estreptomicina L-1 y agua destilada, pH 5.6. Un conjunto
de 15 matraces de vidrio (1L) que contenían 500 ml de medios líquidos fueron autoclavedos
a 121 oC durante 21 min y luego individualmente inoculados con cinco tapones de agar (5
mm) de cada hongo (n.o 3). Los frascos se incubaron a 130 rpm a 30 oC, durante 12 días.
Después, los medios líquidos de cada matraz se recogieron y filtraron utilizando papel
Whatman No4 (Whatman plc, Maidstone, Inglaterra) y se almacena a 4oC. Los medios
líquidos de color obtenidos después del cultivo se extrajeron con acetato de etilo 1:3 en un
embudo de separación de 2 L. Después de la extracción la fase orgánica se concentró en un
rotevaporador a 50oC; 120 rpm, hasta el secado. La producción de cada tinte se cuantificó
por diferencias de peso.

2.3. Teñido de tela

Los tintes secos (amarillo y rojo) obtenidos a partir de dos hongos seleccionados se
utilizaron para teñir muestras de lana. La lana fue seleccionada debido a su afinidad con los
tintes aniónicos [20], como los aislados de otros hongos productores de tinte [21]. Crossville
Fabric Chile S.A. (Tomé, Chile), una empresa textil interesada en la incorporación de tintes
naturales en la fabricación de sus productos textiles, donó muestras de lana 100% (5 x 10
cm2; 5 g) con una estructura de salga, 275 g/m2, que fueron teñidos en un Data Color Ahiba
IR Pro-Comercio Máquina (modelo Top Speed II, Datacolor, NJ, USA). Los dos extractos de
hongos secos fueron re-solubilizados en agua destilada a 0,1 g/L y colocados en recipientes
separados en la máquina de teñido con sus respectivas muestras de lana (n.o 3). El teñido
se llevó a cabo a 98oC durante 30 min sin la incorporación de un pretratamiento mordaz.
Después de teñir las muestras de lana se secaron a temperatura ambiente durante la noche
y su color se midió en un espectrofotómetro CM-5, Konica Minolta, Tokio, Japón. Las
lecturas de color se expresaron en las coordenadas cie Lab*. A partir de entonces, las
muestras fueron sometidas a lavado en húmedo de acuerdo con el protocolo establecido por
el departamento de control de calidad de Crossville Fabric Chile S.A. El protocolo, inspirado
en la norma AATCC 61/2013 [22] es utilizado por la empresa como una prueba rápida en
muestras temidas, e implica un ciclo de inmersión y agitación (60 rpm) durante 15 min, 60
oC, en agua destilada con el detergente aniónico Verolan NBO (1 g L-1). Las muestras se
secaron a temperatura ambiente durante la noche. El color de las muestras lavadas se
determinó de nuevo con el
espectrofotómetro y se utiliza para calcular la diferencia de color después del lavado (�E). �E informó que la solidez del
color al lavado.
3. Resultados
3.1. Aislamiento e Identificación de Hongos
Cinco hongos ascomicetos capaz de producir colorantes fueron aislados e identificados por técnicas moleculares. Los
hongos incluyen especies de Penicillium, Trichoderma, Talaromyces y Fusarium. La identidad en todos los casos fue de un
99% o superior. Los resultados se muestran en la Tabla 1.
Tabla 1. Identificación de los hongos aislados a partir de muestras de madera podrida

Aislar el GenBank de Identidad de Nombre % (alto) Número de Acceso de la Secuencia de Tamaño (pb)

1 Penicillium murcianum 100 NR138358 575


2 Talaromyces australis 99 NR147431 509
3 Trichoderma spirale 99 KP009301 549
4 Talaromyces sp. 100 LT558966 522
5 Fusarium oxysporum 100 KR997535 479

3.2. La producción de Hongos Colorantes


Tintes naturales producidos por los cinco identificados aislamientos en medios líquidos, se representan en la Tabla 2. El
rendimiento de los tintes osciló entre 0,1 a 0,28 g L−1, y el color obtenido es de color rojo (T. australis), amarillo (P.
murcianum y T. spirale), naranja (Talaromyces sp.) y el púrpura (F. oxysporum). Debido a su color y la producción de
colorantes, T. australis y P. murcianum fueron seleccionados para la prueba adicional sobre el teñido de la tela de lana.
Además, la literatura indica que el colorante rojo de T. australis son monascus tipo de metabolitos, es decir,
principalmente una mezcla de rubropunctamine y monascorubramine [21,23]. Asimismo, informó de los metabolitos de P.
murcianum son la griseofulvina y penicillic ácido [24]. El uso de estos compuestos en los alimentos y los productos
farmacéuticos consejos sobre la probabilidad de no tóxicos de la naturaleza de los tintes obtenidos de estos hongos.

Tabla 2. El rendimiento y el color de los colorantes producidos en medios líquidos por hongos aislados a partir
de muestras de madera podrida
Los hongos Colorantes Rendimiento (g L−1) de Color
Talaromyces australis 0.22 rojo *
Penicillium murcianum 0.28 amarillo*
Talaromyces sp . 0.10 naranja
Trichoderma spirale 0.24 amarillo
Fusarium oxysporum 0.25 purpura

*Seleccionado para tejidos de lana teñido

3.3. Tintura de la Lana de las Muestras

Tintes naturales extraídos de T. australis y P. murcianum medios líquidos se re-disuelve en agua y se utiliza para teñir la lana
de las muestras. El color obtenido a 0.1 g L−1 de concentración de ambos colorantes parecía apropiado para aplicaciones textiles. La
diferencia de Color después del lavado indican una buena interacción de lana con los hongos de los colorantes. Las mediciones de
Color y color de diferencias después de la mojada de lavado se muestran en la Tabla 3. Aparición de control, teñido y lavado de las
muestras se muestra en la Figura 1

Tabla 3. El Color de las lecturas y de diferencia de color de las muestras teñidas antes y después de la mojada de lavado.

Tela De Lana CIE L*a*b* Color ∆E

Antes De Lavar Después Del Lavado

rojo 2.1 (0.9)


L* = 52 (0.2), a* = 24.5 (1.6), L* = 52.5 (0.7), a* = 23.1 (0.3),
b* = 17 (0.5) b* = 6.2 (0.1)

amarillo L* = 54.4 (1.0), a* = 6.3 (0), L* = 54.4 (0.7), a* = 6.4 (0.2), 2.9(0.5)
b* = 28.5 (0.2) b* = 25.6 (0.7)

Figura 1. La lana de las muestras teñidas con tintes de P. murcianum y T. australis, antes y después del lavado. (A) Control, (B)
Muestra teñida con P. murcianum colorantes, (C) Muestra teñida con P. murcianum tintes después del lavado, (D) de la Muestra
teñida con T. australis colorantes (E) de la Muestra teñida con T. australis tintes después del lavado.

4. Discusión
Cinco aislamientos fueron obtenidos a partir de la madera podrida muestras y después del cultivo en medio líquido pr
oducido diferentes tintes naturales. Los aislamientos correspondieron a los hongos filamentosos Talaromyces australi
s, Penicillium murcianum, Talaromyces sp., Trichoderma spirale y Fusarium oxysporum. Todos estos hongos se encue
ntran la promoción de la coloración de la fibra de madera en la madera podrida muestras de debajo de la corteza de l
a muestra de los registros. La gama de colorantes obtenidos variaron desde el amarillo, el rojo, el naranja y el morad
o. Los colores específicos que están relacionados con la presencia de diferentes metabolitos secretada por los hongos
, que pueden tener un papel protector contra otros microorganismos o a factores ambientales [25,26]. Todos los met
abolitos de hongos, se mostró a ser soluble en agua, que se distingue de otros hongos de color metabolitos utilizado
experimentalmente para teñir telas. Por ejemplo, los producidos por C. aeruginosa, S. cuboideum y S. ganodermopht
horum, que no son altamente solubles en agua [27]. Solubilidad en agua aumenta las posibilidades de incorporar los
hongos metabolitos directamente en industrial procesos de tintura, como soluble en agua teñido de productos que ya
están en uso a nivel industrial. T. australis y P. murcianum colorantes fueron seleccionados para llevar a cabo un est
udio exploratorio de la prueba en la tela de lana. La proteína de la naturaleza de la lana se relacionó bien con los hon
gos de los tintes de la producción de los colores adecuados para la producción de la decoración y de prendas de vesti
r de tejidos, cuando se aplica a una concentración de 0.1 g L−1. Resultados de la solidez del color al lavado confirmó
la afinidad de los colorantes con la lana como las muestras teñidas mantiene su color en rangos aceptables después d
el lavado, sin la incorporación de un mordanting pretratamiento o el uso de la fijación de los agentes. Cultivos líquido
s de pigmentos y colorantes de la producción de hongos, incluyendo Talaromyces spp. se han utilizado para teñir tela
s directamente después de la filtración de micelio y esporas [14,28,29]. Color obtenido mediante este método de apli
cación depende en gran medida de la rentabilidad del color de los metabolitos en los medios de comunicación. Ya que
tal el rendimiento puede variar de un lote de cultura a otra un estrecho control de la inoculación y condiciones de cult
ivo es necesario para lograr una adecuada color de la reproducibilidad. Por otro lado, la extracción y posterior re-solu
bilización de los colorantes a concentraciones específicas parece menos complejo método para lograr el color de la re
producibilidad, que es un requisito para estandarizar la producción de teñido de productos a nivel industrial. En esta
nota el potencial de los tintes naturales obtenidos a partir de la madera podrida que habitan los hongos se demostró
en el plazo de producción, extracción, y la aplicabilidad en tela de lana. Sin embargo, antes de que el uso de estos co
lorantes naturales que se puede llegar a la aplicación industrial más investigaciones son necesarias en una serie de te
mas. Por lo tanto, es necesario descartar la presencia de metabolitos tóxicos por medio de las pruebas de toxicidad y
también por la determinación de la estructura química de los colorantes. Del mismo modo, es necesario estudiar el p
otencial de los otros tres hongos colorantes obtenidos en esta investigación y para aumentar la gama de colores por
continuar la búsqueda de nuevos aislamientos. Además, es importante

para el estudio de los métodos para aumentar el rendimiento de los tintes en medios líquidos, con el fin de disminuir el costo de
producción, prueba de la aplicabilidad en otras telas, de completar una serie de pruebas de solidez del color, y verificar si el teñido
de las condiciones utilizadas a nivel industrial puede afectar el uso de estos colorantes naturales. A pesar de la cantidad de
investigación que aún es necesario llevar a cabo, la posibilidad de utilizar los colorantes naturales a partir de hongos aislados en el
teñido de telas aparece por todos los medios posibles.

Agradecimientos: Este trabajo fue financiado por el Fondo para la Promoción del Desarrollo Científico y Tecnológico (FONDEF),
Conicyt-Chile, a través del Proyecto ID15I10105: "Pigmentos naturales de alto desempeño: una alternativa ecológica en la
manufactura de telas de alta calidad", el Centro de Biotecnología de la Universidad de Concepción y Crossville Fabric Chile S. A.

Aportes del autor: Vicente A. Hernández y Felipe Galleguillos A. concebido y diseñado los experimentos; Felipe Galleguillos A. y
Nicole Sagredo realizaron los experimentos; Vicente A. Hernández y Á ngela Machuca analizado los datos; Vicente A. Hernández y Á
ngela Machuca contribuido reactivos/materiales/herramientas de análisis; Vicente A. Hernández y Á ngela Machuca escribió el
documento.

Conflictos de Interés: Los autores declaran ningún conflicto de interés. La fundación patrocina no tuvo ningún papel en el diseño del
estudio; en la recolección, análisis o interpretación de los datos; en la escritura del manuscrito, y en la decisión de publicar los
resultados.

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