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FACULTAD DE INGENIERÍA
Departamento de Ingeniería Química
Nombres
Maria Paula Rozo Charris 1152471286
Juliana Atehortúa Muñoz 1152468424
Mateo Jiménez Figueroa 1152453145
Título de la Práctica
ACTIVIDAD CATALÌTICA DE LA A-AMILASA Y VARIABLES QUE LA AFECTAN
A los tubos 4, 5 y 6 se les adicionó la misma cantidad de DNS. Finalmente, todos los tubos
se llevan a calentamiento por 5 minutos a 90ºC, pasado este tiempo se someten a un
baño de hielo por 5 minutos.
BLANCO 0,074 0
1’ 2,96 2,846
2’ 0,475 1,095
3’ 1,950 4,67
4 0,255 0,113
5 0,375 0,171
6 0,493 0,228
En la práctica de manejo de materiales y equipos tenemos la curva de absorbancia versus
concentración de glucosa, que se realiza a partir de una solución madre de glucosa:
0,255 − 0,022 𝑔
= 0,113 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
2,064 𝐿
0,375 − 0,022 𝑔
= 0,171 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
2,064 𝐿
0,493 − 0,022 𝑔
= 0,228 𝑑𝑒 𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
2,064 𝐿
Para hallar la cantidad de enzima es importante tener en cuenta el factor de dilución que
corresponde a:
µ𝑀 µ𝑀
8779,058 𝐿 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 292,63 𝐿
𝐴𝐸 = =
20𝑚𝑖𝑛 ∗ (0,5 ∗ 3)𝑚𝑙 𝑚𝑖𝑛 ∗ 𝑚𝑙
µ𝑀 µ𝑀
1353,27 𝐿 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 45,109 𝐿
𝐴𝐸 = =
20𝑚𝑖𝑛 ∗ (0,5 ∗ 3)𝑚𝑙 𝑚𝑖𝑛 ∗ 𝑚𝑙
µ𝑀 µ𝑀
5760,56 𝐿 𝑑𝑒 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 192,018 𝐿
𝐴𝐸 = =
20𝑚𝑖𝑛 ∗ (0,5 ∗ 3)𝑚𝑙 𝑚𝑖𝑛 ∗ 𝑚𝑙
Procedimiento llevado a cabo con Lugol.
Por otro lado, el Lugol es una disolución que se utiliza como indicador en la prueba del
yodo y sirve para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas
dextrinas, formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por presentar
distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula de polisacárido.
En esta prueba se notó cambio de color en los tubos 1, 2 y 3, debido a que estos eran
quienes contenían la enzima comercial (Termamyl 120L). Esta reacción es el resultado
de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo
presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del
almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando
un color azul oscuro a negro.
Conclusiones (20%)
Según los resultados obtenidos puede concluirse que tanto el pH y la temperatura afectan
la actividad enzimática, incluso llegando a desnaturalizar la proteína y haciendo que la
enzima pierda sus propiedades catalíticas.
Gracias a los cálculos y al análisis realizado pudo establecerse que los valores óptimos
para que se dé la mayor actividad enzimática son un pH= 6,3 debido a que en este punto
la enzima también posee la mayor actividad catalítica.
Se pudo concluir que tanto el pH como la temperatura afectan la actividad enzimática. Por
ejemplo, a pH muy ácido o muy básico se desnaturaliza la proteína, reduciéndose así su
actividad enzimática y catalítica. En última instancia, la velocidad de la reacción o catálisis
varía de acuerdo a la concentración del sustrato, pues al aumentar la concentración de
sustrato, la actividad enzimática aumenta, hasta alcanzar la velocidad máxima, punto
donde la enzima se satura.
Referencias
http://libroelectronico.uaa.mx/capitulo-6-enzimas/efecto-del-ph-y-la-temperat.html
https://www.blogdebiologia.com/factores-que-afectan-la-actividad-
enzimatica.html