JURNAL PRAKTIKUM

APLIKASI PERUBAHAN BIOKIMIA PASCA PANEN

SIFAT SPEKTRAL MOLEKUL

NAMA : MONIVIA CHANDRA
NIM : G031 17 1304
KELOMPOK : IV (EMPAT)
ASISTEN : NANDITA IRSA ULUL NURHISNA

LABORATORIUM KIMIA ANALISA DAN PENGAWASAN MUTU PANGAN

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGAN
DEPARTEMEN TEKNOLOGI PERTANIAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2019
 SIFAT SPEKTRAL MOLEKUL

M Chandra1), NIU Nurhisna2)

1)
Mahasiswa Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Universitas Hasanuddin
2)
Asisten Mata Kuliah Aplikasi Perubahan Biokimia Pasca Panen, Program Studi Ilmu dan Teknologi
Pangan, Universitas Hasanuddin

ABSTRACT

Chemical has a very important role in everyday life. These chemicals have different
characteristics between one and another, which is usually called spectral characteristic
of molecules. The spectral characteristic of molecules is one of the parameters of a
compound (molecules). This property can be changed/damaged by a given treatment,
such as heat, pH, heavy metals, and so on. Based on these characteristics, the spectral
characteristic of the molecule will be carried out by using BSA (Bovine Serum Albumin)
solution. BSA is a polypeptide derived from cattle. This solution can be changed if given
treatment. Based on this matter, practicum will be carried out with the aim to determine
the effect of adding chemicals, including NaOH, HCl, CuSO4, and FeSO4 and the effect
of changes in pH on the BSA structure and to determine the effect of pH changes on the
BSA structure. This practicum is carried out by making BSA solution, blank solutions,
and testing the spectral properties of molecules. Based on the practicum carried out, the
results obtained indicate that the addition of chemicals will have an effect on the
absorbance value of a sample. Besides that, the pH changes and the addition of heavy
metals will cause a damaged to the spectral characteristic of BSA, so that absorbance
value obtained will also be changed.
Keyword: Absorbanse, BSA, spectral

I. PENDAHULUAN (menunjukkan) keadaan utuh atau

a. Latar Belakang
Ilmu kimia memegang peranan yang
sangat penting karena dapat digunakan
di dalam kehidupan sehari-hari
(menggunakan zat-zat kimia). Zat-zat
kimia tersebut memiliki karakteristik
yang berbeda antara satu dengan yang
lain akibat adanya sifat spektral dari
molekul. Molekul merupakan bagian
terkecil dari zat. Adapun sifat spektal
molekul merupakan salah satu
parameter suatu senyawa (molekul).
Molekul-molekul yang memiliki
peranan penting pada bidang biologi
tentu memiliki sifat-sifat spektral yang
berbeda. Peranan dari sifat spektral
tersebut yaitu untuk mencerminkan
tidaknya suatu molekul. Sifat spektral
ini berasal dari hasil interaksi antara
energi radiasi (baik itu penyerapan,
pantulan maupun hamburan) dengan
atom-atom atau molekul-molekul
penyusun materi.
Salah satu jenis molekul yang
menyusun suatu bahan pangan adalah
protein. Protein merupakan salah satu
makromolekul penting yang memiliki
peranan sangat besar di dalam tubuh,
diantaranya sebagai penyusun sel dan
jaringan. Selain itu, protein juga
merupakan dasar dari pembentukan
otot, organ, dan sistem kekebalan tubuh.
Protein penyusun setiap bahan pangan
memiliki kandungan yang berbeda-
beda. Salah satu jenis protein yang
terdapat pada bahan makanan adalah
albumin pada telur. Selain itu, protein
juga dapat ditemukan pada Bovine
Serum Albumin (BSA).
Bovine Serum Albumin (BSA)
merupakan polipeptida yang berasal
dari sapi. Karakteristik dari BSA, yaitu
umumnya akan mengalami perubahan
struktur akibat pemanasan, pH, logam
berat serta penambahan zat-zat kimia
lain. Sifat dan karakteristik tersebut
merupakan sifat spektral molekul BSA
yang dapat diketahui dengan melakukan
pengukuran absorbansi menggunakan
spektrofotometer. Berdasarkan hal
tersebut, maka akan dilakukan
praktikum sifat spektral molekul dengan
menggunakan penambahan asam, basa
maupun logam berat.
b. Rumusan Masalah
Berdasarkan praktikum yang
dilakukan, pemecahan masalah yang
akan diselesaikan adalah mengenai
pengaruh penambahan zat-zat kimia
serta pengaruh perubahan pH terhadap
struktur BSA.
c. Tujuan Praktikum
Tujuan praktikum ini, antara lain
sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui pengaruh
penambahan zat-zat kimia, antara
lain NaOH, HCl, CuSO4, dan FeSO4.
2. Untuk mengetahui pengaruh
perubahan pH terhadap struktur
Bovine Serum Albumin (BSA).
II. METODOLOGI PRAKTIKUM
a. Waktu dan Tempat
Praktikum Sifat Spektral Molekul
dilaksanakan pada hari Kamis, 14 Maret
2019 pukul 09.10-15.00 WITA,
bertempat di Laboratorium Kimia
Analisa dan Pengawasan Mutu Pangan,
Program Studi Ilmu dan Teknologi
Pangan, Departemen Teknologi
Pertanian, Fakultas Pertanian,
Universitas Hasanuddin, Makassar.
b. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada
praktikum ini berupa spektrofotometer
(Sequioia turner), gelas kimia 100 mL
(Pyrex), cawan Schott (Pyrex), labu
ukur 100 mL (Pyrex), pipet volume 10
mL (Pyrex), tabung reaksi (Pyrex), bulb
(Supertek)c, timbangan analitik
(Thermo Genesys 20), batang pengaduk
(Pyrex), dan pipet ukur 2 mL (Pyrex).
Bahan yang digunakan pada
praktikum ini berupa larutan CuSO4,
larutan Bovine Serum Albumin (BSA),
NaOH, HCl, FeSO4, kertas indikator
universal, dan akuades.
c. Prosedur Praktikum Sifat Spektral
Molekul
1. Prosedur Pembuatan Larutan
Bovine Serum Albumin (BSA)
Padatan Bovine Serum Albumin
(BSA) ditimbang sebanyak 0,05 gram
menggunakan timbangan analitik di
dalam cawan Schott. Padatan BSA
kemudian dilarutkan ke dalam
100 mL akuades dan dihomogenkan
menggunakan batang pengaduk.
2. Prosedur Pembuatan Larutan
Blanko
Sebanyak 5 mL akuades dipipet
menggunakan pipet volume dan
dimasukkan ke dalam 9 tabung reaksi.
Masing-masing tabung kemudian diberi
reagen sesuai dengan perlakuan. Sampel
lalu diukur nilai pH-nya dan diinkubasi
selama 30 menit pada suhu 5oC. Sampel
yang telah diinkubasi selanjutnya
dimasukkan ke dalam kuvet yang
kemudian akan digunakan sebagai
larutan blanko dengan panjang
gelombang 195, 197, 200, 205, 210,
240, 250, dan 300.
3. Prosedur Pengujian Sifat Spektral masing-masing ditambahkan sebanyak
Molekul 2,5 dan 0,5 mL larutan CuSO4 serta
pada tabung VIII dan IX masing-masing
Larutan BSA dipipet sebanyak 5 mL
ditambahkan sebanyak 2,5 dan 0,5 mL
menggunakan pipet volume dan
larutan FeSO4. Sampel kemudian
dimasukkan ke dalam 9 tabung reaksi.
dihomogenkan dan diukur pH-nya
Masing-masing tabung diberikan
menggunakan indikator pH. Sampel lalu
perlakuan yang berbeda. Tabung I
diinkubasi pada suhu 5oC selama 30
hanya berisi larutan BSA. Tabung II
menit dan diukur nilai absorbansinya
dan III masing-masing ditambahkan
dengan menggunakan panjang
sebanyak 2,5 dan 0,5 mL larutan NaOH.
gelombang 195, 197 200, 205, 210, 240,
Tabung IV dan V masing-masing
250, dan 300.
ditambahkan sebanyak 2,5 dan 0,5 mL
larutan HCl. Tabung VI dan VII

III. HASIL DAN PEMBAHASAN

a. Hasil
Tabel hasil praktikum Sifat Spektral
Molekul, antara lain sebagai berikut:
Tabel 07. Hasil Praktikum Sifat Spektral Molekul
Sampel pH Absorbansi pada Panjang Gelombang (nm)
195 197 200 205 210 240 250 300
BSA 6 0,873 3,000 3,000 3,000 3,000 0,546 0,138 3,000
BSA + 2,5 11 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 3,000 1,227 0,913 3,000
mL NaOH
BSA + 0,5 9 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 0,981 0,616 0,185
mL NaOH
BSA + 2,5 2 -0,100 3,000 3,000 3,000 3,000 0,251 -0,002 -0,100
mL HCl
BSA + 0,5 3 3,000 3,000 3,000 3,000 3,000 0,454 0,127 1,085
mL HCl
BSA + 2,5 3 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 0,309
mL CuSO4
BSA + 0,5 4 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,001 -0,100
mL CuSO4
BSA + 2,5 4 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,10 -0,100 0,114
mL FeSO4
BSA + 0,5 5 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 -0,100 1,755 0,642 0,024
mL FeSO4
Sumber: Data Primer Hasil Praktikum Aplikasi Perubahan Biokimia Pasca Panen,
2019.
diendapkan menggunakan garam netral
b. Pembahasan
berkonsentrasi tinggi seperti ammonium
BSA merupakan polipeptida yang sulfat. Hal ini dikarenakan kelarutan
berasal dari sapi. Protein globular pada dari protein (BSA) akan berkurang
BSA tersusun dari dua puluh asam sehingga protein akan terpisah sebagai
amino esensial (terdiri dari 583 unit) endapan. Pengendapan ini terjadi akibat
dengan asam amino terbanyak terdapat kemampuan ion garam untuk
pada leusin, yaitu sebesar 60 unit dan menghidrasi, sehingga terjadi kompetisi
lisin sebesar 59 unit. Larutan BSA dapat antara garam anorganik dengan molekul
larut di dalam air serta hanya dapat protein untuk mengikat air. Karena
garam anorganik lebih menarik air,
maka jumlah air yang tersedia pada
molekul protein akan berkurang. Selain
itu, albumin yang terdapat pada larutan
BSA dapat mengalami koagulasi pada
pemanasan diatas 50oC. Proses
koagulasi ini akan membuat albumin
membentuk agregat hidrofobik yang
tidak akan kembali ke bentuk
monomernya walaupun telah
didinginkan. Larutan BSA memiliki
kisaran titik isoelektrik antara pH
4,7-5,2. Albumin memiliki rongga
hidrofobik yang dapat mengikat asam
lemak, bilirubin, hormon, dan obat.
Larutan ini sering digunakan sebagai
penstabil untuk protein terlarut. Selain
itu, BSA juga dapat digunakan sebagai
larutan standar untuk mengkalibrasi
protein pada suatu bahan pangan.
Larutan standar (larutan baku)
merupakan larutan yang konsentrasinya
telah diketahui. Larutan ini berfungsi
sebagai pembanding dengan sampel
yang akan dianalisis. Suatu larutan
standar dapat dibuat dengan cara
melarutkan sejumlah bahan tertentu ke
dalam volume larutan yang telah diukur.
Larutan standar terdiri dari dua macam,
yaitu larutan standar primer dan larutan
standar sekunder. Larutan standar
primer merupakan larutan yang
memiliki kemurnian tinggi, sedangkan
larutan standar sekunder merupakan
larutan yang perlu distandarisasi
terlebih dahulu dengan menggunakan
larutan standar primer. Hal ini sesuai
dengan pernyataan Juhairiyah (2015),
yang menyatakan bahwa BSA
merupakan suatu protein globular yang
tersusun dari dua puluh asam amino
esensial.
Larutan yang akan digunakan dalam
penggunaan spektrofotometer adalah
larutan blanko. Larutan blanko
merupakan larutan yang tidak
mengandung analit untuk dianalisis.
Analit adalah sebuah zat yang diukur
jumlahnya. Jika analit-nya adalah
protein, maka jumlah dari konsentrasi
proteinnya telah diketahui. Hal inilah
yang membedakan antara larutan
standar dan blanko. Jika larutan blanko
tidak mengandung analit, maka larutan
standar mengandung analit. Fungsi dari
larutan blanko adalah untuk mengukur
perbedaan absorbsi antara sampel
dengan blanko (sebagai pembanding)
serta berfungsi untuk mengoreksi
intensitas sinar karena pantulan dan
hamburan. Larutan ini memiliki warna
bening serta memiliki sifat yang tidak
menyerap warna dari spektrum sinar
tampak. Pembuatan larutan blanko
dilakukan dengan cara memipet akuades
kemudian ditambahkan dengan zat yang
sesuai dengan perlakuan sampel yang
akan diukur absorbansinya. Hal ini
sesuai dengan pernyataan Torowati dan
Galuh (2014), yang menyatakan bahwa
larutan blanko merupakan larutan yang
tidak mengandung analit.
Semua molekul memiliki sifat dan
karakteristik yang berbeda antara satu
dengan lainnya. Hal inilah yang
menyebabkan sifat spektral pada
molekul juga berbeda. Spektral
merupakan hasil interaksi antara energi
elektromagentik (EM) dengan suatu
objek. adapun sifat spektral molekul
merupakan sifat dasar yang dimiliki
oleh suatu molekul. Sifat inilah yang
akan menentukan karakteristik dari
suatu molekul. Akibatnya, terdapat
perbedaan antara molekul yang satu
dengan molekul lain. Karna menjadi
karakteristik dari suatu molekul, maka
sifat spektral berfungsi untuk
mencerminkan (menunjukkan) keadaan
utuh atau tidaknya suatu molekul akibat
adanya interaksi dengan suatu
bahan/objek. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Komiyatun (2014), yang
menyatakan bahwa sifat spektral
molekul merupakan sifat dasar yang
menentukan karakteristik molekul.
 Adanya penambahan asam akan
mempengaruhi sifat spektral dari
molekul protein. Protein merupakan
senyawa amfoter yang dapat bereaksi
dengan asam maupun basa. Hal ini
disebabkan karena molekulnya
mempunyai muatan positif dan negatif.
Nilai pH pada saat asam amino tidak
memiliki muatan disebut dengan titik
isoelektrik. Saat titik isoelektrik dicapai,
jumlah muatan positif dan negatifnya
adalah sama. Penambahan asam akan
meningkatkan jumlah H+ sehingga
menyebabkan pH dari protein berada di
bawah titik isoelektrik (protein
bermuatan positif). Kondisi ini
menyebabkan dispersi menjadi tidak
stabil sehingga terjadi koagulasi pada
protein. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Naga, dkk (2010), yang
menyatakan bahwa ketika protein
ditambahkan dengan asam, maka akan
terjadi koagulasi pada protein.
Adanya penambahan basa akan
mempengaruhi sifat spektral dari
molekul protein. Ketika pH netral
(protein berada pada titik isoelektrik),
kebanyakan protein bermuatan negatif
dan hanya sedikit yang bermuatan
positif. Ketika protein berada pada pH
ekstrem (protein tidak berada pada titik
isoelektrik), gaya tolak elektrostatik
molekul protein yang disebabkan oleh
muatan tinggi akan mengakibatkan
struktur protein menjadi bengkak dan
terbuka. Derajat terbukanya struktur
protein ini lebih besar pada pH alkali
(basa) dibandingkan pada pH asam. Hal
ini dikarenakan pada kondisi alkali,
akan terjadi ionisasi gugus karboksil,
fenolik, dan sulfihidril sehingga
menyebabkan struktur protein menjadi
terbuka. Setelah struktur dari protein
terbuka, maka akan terjadi pengikatan
kembali pada gugus tersebut. Namun,
protein tidak lagi terdispersi sebagai
satu koloid sehingga mengakibatkan
terjadinya koagulasi. Meskipun
demikian, pada sejumlah kasus
hidrolisis ikatan peptida secara parsial
(sebagian), memungkinkan terjadinya
pemecahan ikatan hidrogen dan
hidrofobik yang menyebabkan kelarutan
akan berkurang dan struktur molekulnya
tidak akan kembali ke bentuk awal.
Protein-protein tersebut akan
membentuk agregat dan endapan.
Berdasarkan penjelasan tersebut, maka
dapat diketahui bahwa penambahan
asam maupun basa akan menyebabkan
jembatan garam yang terdapat pada
protein menjadi kacau, akibatnya ion
positif dan ion negatif dari garam dapat
berganti pasangan dengan ion positif
dan negatif dari asam maupun basa
sehingga jembatan garam pada protein
menjadi kacau dan menyebabkan
terjadinya denaturasi protein. Terdapat
dua jenis dalam denaturasi protein, yaitu
pengembangan rantai peptida dan
pemecahan protein menjadi unit yang
lebih kecil tanpa disertai pengembangan
molekul. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Rais (2017), yang
menyatakan bahwa penambahan basa
akan menyebabkan struktur dari protein
menjadi bengkak dan terbuka.
Pernyataan ini juga didukung oleh
pernyataan Anggraeni (2008), yang
menyatakan bahwa pada sejumlah
kasus, pemecahan ikatan hidrogen dan
hidrofobik akan menyebabkan struktur
molekul protein tidak dapat kembali ke
bentuk awal.
Penambahan asam maupun basa akan
memberikan pengaruh yang berbeda
jika dibandingkan dengan penambahan
logam berat. Penambahan asam maupun
basa akan menyebabkan jembatan
garam menjadi kacau (terjadinya
pemutusan jembatan logam/ikatan
peptida), sedangkan dengan adanya
penambahan logam, maka akan
mempengaruhi sifat stabilitas dari
protein. Hal ini dikarenakan garam
mampu mengikat air secara kuat dan
mengubah sifat hidrasi protein (protein
yang tersusun/dikelilingi dengan
molekul air). Protein akan mengalami
presipitasi (pengendapan) bila bereaksi
dengan ion logam, seperti Ag+, Ca2+,
Zn2+, Hg2+, Fe2+, Cu2+, dan Pb2+. Jumlah
endapan yang dihasilkan dipengaruhi
oleh kereaktifan logam berat yang
ditambahkan. Ketika konsentrasi garam
yang ditambahkan rendah, garam akan
menstabilkan struktur protein karena
meningkatkan hidratasi protein dan
terikat lemah pada protein. Sebaliknya,
garam juga dapat menyebabkan
ketidakstabilan struktur protein karena
menurunkan hidrasi protein dan
berikatan kuat dengan protein. Pengaruh
garam untuk stabilisasi atau
destabilisasi struktur protein berkaitan
dengan konsentrasi dan pengaruhnya
terhadap ikatan dengan air. Peningkatan
stabilitas protein pada kadar garam
rendah disebabkan peningkatan ikatan
hidrogen antarmolekul air. Sebaliknya,
pada konsentrasi tinggi, garam
mendenaturasi protein karena merusak
struktur air sehingga air menjadi pelarut
yang baik untuk residu nonpolar
protein. Namun, selain hal tersebut,
logam berat juga mampu menarik sulfur
pada protein sehingga mengganggu
ikatan disulfida dalam protein, yang
akan menyebabkan protein mengalami
denaturasi. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Rais (2017), yang
menyatakan bahwa ketika konsentrasi
garam yang ditambahkan rendah, maka
garam akan menstabilkan struktur
protein. Sebaliknya, ketika konsentrasi
garam yang ditambahkan banyak, maka
garam akan mendenaturasi protein
akibat rusaknya struktur air.
Berdasarkan praktikum yang
dilakukan, diperoleh hasil yang
menunjukkan bahwa semakin tinggi
konsentrasi zat terlarut yang digunakan,
maka tingkat kepekatan juga akan
semakin tinggi sehingga nilai
absorbansi yang diperoleh juga akan
semakin tinggi. Hal ini terlihat dari
perolehan nilai absorbansi larutan BSA
+ 0,5 mL HCl dan larutan BSA + 0,5
mL FeSO4. Nilai absorbansi yang
diperoleh pada larutan BSA + 0,5 mL
HCl adalah sebesar 0,454 pada panjang
gelombang 197 dan 0,127 pada panjang
gelombang 200. Adapun nilai
absorbansi yang diperoleh pada larutan
BSA + FeSO4 adalah sebesar 0,642
pada panjang gelombang 250. Hasil ini
dikarenakan larutan FeSO4 yang
digunakan merupakan larutan pekat
sehingga nilai absorbansi yang
diperoleh lebih tinggi dibandingkan
dengan menggunakan larutan HCl yang
hanya memiliki konsentrasi 0,1 N (tidak
pekat). Berdasarkan hasil tersebut,
terdapat beberapa sampel yang nilai
absorbansinya tidak diperoleh. Hal ini
diduga akibat larutan yang digunakan
terlalu pekat/terlalu encer. Sampel yang
terlalu encer akan mengakibatkan tidak
diperolehnya nilai absorbansi dari hasil
pengukuran. Adapun sampel yang
terlalu pekat akan mengakibatkan
konsentrasi yang diperoleh sangat
tinggi, sehingga diperlukan pengenceran
ataupun penambahan panjang
gelombang sehingga nilai absorbansi
dari sampel tersebut dapat terbaca. Hal
ini sesuai dengan pernyataan Sitorus
(2016), yang menyatakan bahwa
semakin tinggi konsentrasi yang
digunakan, maka nilai absorbansinya
juga akan semaki tinggi. Hal ini juga
didukung oleh pernyataan
Mustikaningrum (2015), yang
menyatakan bahwa sampel yang
memiliki kepekatan yang tinggi akan
menyebabkan nilai absorbansi yang
diperoleh semakin besar.
Nilai absorbansi dari suatu sampel
juga dipengaruhi oleh warna
komplementer. Warna komplementer
merupakan warna yang diserap oleh
suatu senyawa atau unsur. Berdasarkan
hasil praktikum tersebut, terdapat
sampel yang tidak diperoleh nilai
absorbansinya akibat panjang
gelombang yang digunakan tidak sesuai
dengan panjang gelombang dari sampel
tersebut. Sampel yang tidak diperoleh
nilai absorbansinya terdapat pada
larutan BSA + CuSO4. Hal ini
dikarenakan sampel tersebut memiliki
warna biru bening. Warna biru bening
pada sampel tersebut memiliki warna
komplementer kuning dengan panjang
gelombang 400-480. Hal inilah yang
menyebabkan nilai absorbansi tersebut
tidak terbaca. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Permatasari (2015), yang
menyatakan bahwa warna yang diserap
dari sampel akan menghasilkan warna
komplementer dengan panjang
gelombang yang sesuai.
Kerusakan spektral pada molekul
juga merupakan salah satu faktor yang
mempengaruhi nilai dari absorbansi
yang diperoleh. Berdasarkan hasil
tersebut, terdapat sampel yang tidak
diperoleh nilai absorbansinya akibat
reagen yang ditambahkan memiliki
tingkat kepekatan yang tinggi dan
disertai dengan penambahan volume
dalam jumlah banyak sehingga
menyebabkan pantulan yang dihasilkan
tinggi. Contoh dari sampel tersebut
adalah pada larutan BSA + 2,5 mL
FeSO4. Larutan FeSO4 yang digunakan
merupakan larutan pekat (dengan
konsentrasinya yang tinggi) sehingga
perlu diencerkan terlebih dahulu untuk
diperoleh nilai absorbansinya. Nilai
absorbansi yang diperoleh didasarkan
pada kemampuan suatu molekul dalam
menyerap energi elektromagentik yang
tinggi tetapi pantulan yang dihasilkan
rendah. Begitu pula sebaliknya, terdapat
molekul yang mempunyai daya serap
terhadap elektromagentik rendah dan
pantulannya tinggi. Berdasarkan hal
tersebut, maka dengan penambahan
reagen dalam jumlah besar dapat
menyebabkan perubahan sifat spektral
dari molekul BSA tersebut, sehingga
menyebabkan daya serap yang
dihasilkan rendah. Hal ini sesuai dengan
pernyataan Rais (2017), yang
menyatakan bahwa nilai absorbansi
diperoleh atas kemampuan suatu
molekul dalam menyerap energi
elektromagentik dan pantulan yang
dihasilkan.
IV. PENUTUP
IV.1 Kesimpulan
Berdasarkan praktikum yang
dilakukan, kesimpulan yang dapat
diperoleh antara lain:
1. Penambahan zat-zat kimia akan
memberikan pengaruh terhadap nilai
absorbansi suatu sampel.
Penambahan zat-zat tersebut akan
mempengaruhi konsentrasi dari suatu
larutan. Semakin tinggi konsentrasi
suatu larutan, maka absorbansi yang
diperoleh juga akan semakin tinggi.
Selain itu, konsentrasi yang tinggi
juga akan membuat larutan menjadi
semakin pekat.
2. Adanya perubahan pH dan
penambahan garam logam berat akan
mengakibatkan terjadinya koagulasi
(pengendapan) pada larutan BSA.
Akibatnya, cahaya yang dilewatkan
oleh spektrofotometer akan susah
menembus sampel, oleh karena itu
dibutuhkan panjang gelombang yang
lebih besar.
IV.2 Saran
Sebaiknya juga menggunakan
larutan yang memiliki sifat basa lemah
maupun asam lemah dalam melakukan
pengujian agar sifat dari spektral
molekul dapat diketahui secara detail
bila diberikan penambahan asam lemah
dan kuat maupun basa lemah dan kuat.
 DAFTAR PUSTAKA Rais, A. F. 2017. Analisis Profil Protein
Ikan Nila (Oreochromis
Anggraeni, A. A. 2008. Kimia Pangan.
niloticus) Berbasis SDS-
Universitas Negeri
Page Berdasarkan Variasi
Yogyakarta. Yogyakarta
Lama Marinasi dan
Juhairiyah, F. 2015. Pengaruh Konsentrasi Asam Cuka.
Perbandingan Pereaksi dan Tesis. Universitas
Waktu Reaksi terhadap Muhammadiyah. Semarang
Konjugasi Low Methoxyl
Sitorus, R. A. R. 2016. Penetapan Kadar
Pektin dengan BSA
Campuran Rifampisin dan
Menggunakan Katalis
Isoniazid dalam Sediaan
EDAC. Skripsi. Universitas
Tablet secara
Gadjah Mada. Yogyakarta
Spektrofotometri Ultraviolet
Komiyatun, N. 2014. Sifat Spektral dari dengan Metode Panjang
Masalah Sturm-Liouville Gelombang Berganda.
Fraksional dengan Potensial Skripsi. Universitas
Coulomb. Skripsi. Sumatera Utara. Medan
Universitas Sebelas Maret.
Torowati dan Galuh, B. S. 2014.
Surakarta
Penentuan Nilai Limit
Mustikaningrum, M. 2015. Aplikasi Deteksi dan Kuantisasi Alat
Metode Spektrofotometri Titrasi Potensiometer untuk
Visibel Genesys-20 untuk Analisis Uranium. Jurnal
Mengukur Kadar Teknologi Bahan Bakar
Curcuminoid pada Nuklir 13(7): 9-15
Temulawak (Curcuma
xanthorrhiza). Laporan LAMPIRAN
Tugas Akhir. Universitas Lampiran 9. Diagram Alir Prosedur
Diponegoro. Semarang Praktikum Sifat Spektral
Naga, W. S., Adiguna, B., Molekul
Retnoningtyas, E. S., dan 1. Prosedur Pembuatan Larutan Bovine
Ayucitra, A. 2010. Serum Albumin (BSA)
Koagulasi Protein dari
Ekstrak Bij Kecipir dengan Padatan BSA
Metode Pemanasan. Jurnal
Widya Teknik 9(1): 1-11
Permatasari, R. D. 2015. Pengaruh Jenis
Ditimbang sebanyak
Pelarut pada Analisa Zat
0,05 gram
Anthosianin dari Kulit
Manggis (Gacinia
mangostana L.) dengan
Metode Spektrofotometer Aquades 100 ml Dilarutkan
Visible Genesys 20.
Laporan Tugas Akhir.
Universitas Diponegoro.
Semarang Larutan BSA
2. Prosedur Pembuatan Larutan Blanko Lampiran 10. Gambar Hasil Praktikum
Sifat Spektral Molekul
Aquades
1. Gambar larutan beserta pH
Larutan pH
Dipipet sebanyak 5 ml Larutan BSA

Dimasukkan ke dalam
9 tabung reaksi

Ditambahkan reagen Larutan BSA +

pada masing-masing
tabung sesuai NaOH 2,5 mL
perlakuan

Diukur pH

Diinkubasi pada suhu Larutan BSA +

50C selama 30 menit NaOH 0,5 mL

Diukur absorbansi
pada panjang
gelombang 195, 197,
200, 205, 210, 240,
250 dan 300
Larutan BSA +
HCl 2,5 mL
Absorbansi
larutan blanko

3. Prosedur Pengujian Sifat Spektral

Molekul
Larutan BSA

Larutan BSA +
HCl 0,5 mL
Dipipet sebanyak 5 ml

Reagen sesuai Dimasukkan ke dalam

perlakuan 9 tabung reaksi

Diukur pH

Diinkubasi pada suhu Larutan BSA +

50C selama 30 menit
CuSO4 2,5 mL
Diukur absorbansi
pada panjang
gelombang 195, 197,
200, 205, 210, 240,
250 dan 300

Absorbansi
larutan blanko
 Larutan pH
Larutan BSA +
CuSO4 0,5 mL

Perlakuan 3
Larutan BSA +
FeSO4 2,5 mL

Larutan BSA +
FeSO4 0,5 mL Perlakuan 4

Sumber: Data Primer Hasil Praktikum

Aplikasi Perubahan Biokimia
Pasca Panen, 2019.
2. Gambar hasil pengukuran absorbansi Perlakuan 5

Perlakuan 1

Perlakuan 6

Perlakuan 2
Perlakuan 7

Perlakuan 8

Perlakuan 9