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Malajovich (2014) y Cornejo (2014), señalaron las siguientes etapas que ocurren durante la extracción de
ADN de células vegetales:
1. Lisis Celular
Las células se rompen utilizando medios mecánicos y químicos. La pared celular (si está presente),
membrana celular, y la membrana nuclear (si está presente) deben ser destruidos para liberar el ADN. Las
membranas celulares están compuestas de grasas y proteínas que se pueden disolver con el detergente (en
este detergente de lavandería experimento). Las células vegetales, levaduras y muchas células bacterianas
están rodeadas por una pared celular que puede ser destruida con una fuerza mecánica tal como mezcla o
molienda, o con la digestión enzimática en el caso de membranas nucleares se encuentran en las células
eucariotas.
2. Purificación
Una vez que las células se rompen, todo el contenido celular se mezcla. La mayoría de las manipulaciones
de ADN requieren que el ADN esté libre de proteínas y de ARN. En el laboratorio se puede utilizar enzimas
digestivas de proteínas, calor, algunas sustancias químicas y disolventes orgánicos tales como fenol para
inactivar las enzimas y elimina las proteínas que puedan contaminar el ADN .En esta práctica, se utilizara
la papaína.
3. Precipitación y Concentración
ADN es soluble en agua e insoluble en alcohol. Para visualizar el ADN, se adiciona etanol o soluciones
con altas concentraciones de iones de sodio o amonio que se unen a los grupos fosfato, estos componentes
químicos reducen las fuerzas repulsivas entre las cadenas y permite que el ADN se pliegue sobre sí mismo
haciéndolo insoluble, el ADN formará una masa fibrosa en la interfaz del alcohol y las capas acuosas.
Bibliografía