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Cuestionario de Practica , 2019

Cuestionario de Práctica para Prueba de Grado de Dpl. Laboratorio Clínico

Tema: HEMATOLOGÍA
1. Respecto a los leucocitos indique cuáles son mononucleares y cuáles
son polimorfonucleares.
Mononucleados:

• Linfocitos
• Monocitos
Polimorfonucleados:
• Neutrofilos
• Eosinofilos
• Basofilos

2. Indique todas las formas inmaduras de los neutrófilos:


Mieloblasto→ Promielocito→ Mielocito→ Metamielocito→ Neutrófilo en
Banda→ Neutrófilo segmentado

3. Describa las funciones de cada uno de los leucocitos.


a. Linfocitos: Hay dos tipos:
Los Linfocitos T, atacan y destruyen ya sea por fagocitosis o liberación
sustancias, a las células propias que han sido infectadas por el
patógeno.
Los Linfocitos B, como células plasmáticas crean anticuerpos
inmunoglobulinas específicas para las bacterias, las toxinas o los virus
invasores.
b. Monocitos: Se encargan de “limpiar” células muertas o sustancias
extrañas del organismo mediante la fagocitosis. Activan la respuesta
inmunitaria.

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c. Neutrófilos: Se encuentra en el mayor porcentaje. Se encargan de


llegar al sitio de infección para defender al organismo de infecciones
bacterianas mediante la liberación de sustancias.
d. Eosinófilos: Combaten la inflamación, las reacciones alérgicas y los
procesos infecciosos causado por parásitos.
e. Basófilos: Liberan histamina o heparina para ayudar a controlar las
reacciones alérgicas y los ataques de asma.

4. ¿Cuál es el método de referencia para medir la concentración de la


Hemoglobina y cuál es el nombre del reactivo utilizado en este método
de referencia?
• El método de referencia es “Cianmetahemoglobina” y el nombre del
reactivo es Drabkin.

5. Indique cual es el colorante que se utiliza para la determinación de


reticulocitos y qué casos el recuento debe ser corregido tanto en
adultos como en niños.

• El colorante usado es el Azul de Cresil Brillante. Hay que Corregir el


recuento cuando el hematocrito se encuentra menor al 30%.
% 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 × 𝐻𝑡𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑎𝑐𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒
𝐶𝑜𝑟𝑟𝑒𝑐𝑐𝑖ó𝑛 𝑅𝑒𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 ∶
𝐻𝑡𝑜 𝑛𝑜𝑟𝑚𝑎𝑙 (45%)

𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 𝐶𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠


% 𝑅𝑒𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠: × 100
1000 (5 𝑐𝑎𝑚𝑝𝑜𝑠 𝑑𝑒 200 𝑒𝑟𝑖𝑡𝑟𝑜𝑠 𝑎𝑝𝑟𝑜𝑥)

6. Respecto a la eritropoyesis, indique: donde se forman los glóbulos


rojos, cuales son los nombres de las células precursoras
hematopoyéticas en cada paso de su proceso de desarrollo, cual
hormona estimula la producción de eritrocitos y en donde se produce.
• Los Glóbulos Rojos se forman en la medula ósea y el proceso es:
Hemocitoblasto→ Proeritroblasto→ Eritroblasto→ Eritroblasto
ortocromático → Reticulocito→ Eritrocito
• La hormona es la Eritropoyetina y se produce en los riñones.

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7. En cuanto a la anemia, indique al menos 5 causas, cuales analitos son


útiles para evaluar la anemia. Indique como se clasifican las anemias.

Causas de la Anemia

• Pérdida de sangre •Pocas vitaminas (B12 o Folato)


(hemorragia). •Alteraciones en la Medula Ósea
•Falta de producción de glóbulos •Embarazo
rojos ( eritropoyetina). •Trastornos autoinmunitarios
•Mayor velocidad de destrucción •Enfermedades crónicas
de los glóbulos rojos. •Adquiridas / hereditarias
•Escasez de Fe+
Analitos

♦Ferritina: Es la forma de almacenamiento intracelular del hierro. Una


cantidad muy pequeña se encuentra en el suero. En la inflamación, la
enfermedad hepática y las enfermedades malignas, los niveles de ferritina
pueden aumentar porque en estos pacientes la ferritina puede aparecer
falsamente elevada o normal, cuando en realidad las reservas son bajas.
♦ Hierro sérico: Se refiere a los iones férricos (Fe3+) unidos a la transferrina
sérica. La concentración sérica de hierro es muy variable y está afectada por
la ingesta dietética de hierro, la inflamación y la infección.
♦ Transferrina: Es la principal proteína de transporte del hierro en el plasma.
Aumenta en la deficiencia de hierro para maximizar la utilización del hierro
disponible.

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La TIBC es una prueba alternativa a la transferrina; refleja la disponibilidad de


sitios de unión al hierro en la transferrina. Los valores aumentan en la
deficiencia de hierro y disminuyen en la sobrecarga de hierro. Algunos
laboratorios miden el hierro insaturado (UIBC) y calculan la TIBC agregando
del hierro sérico al UIBC.
♦ Saturación de transferrina: La saturación de la transferrina es un índice
que mide el porcentaje de hierro que está siendo transportado por la
transferrina del total de la capacidad disponible. Típicamente, la transferrina
está 30% saturada con hierro. La saturación de transferrina aumenta en la
sobrecarga de hierro y cae en la deficiencia de hierro, pero no refleja
cuantitativamente el aumento del hierro sérico debido a que la ingesta
dietética de hierro puede provocar un aumento de la saturación de la
transferrina.

Tipos de anemias
• Anemia por Deficiencia de B12: Causada por una baja en el número de
glóbulos rojos debido a una falta de esta vitamina
• Anemia por Deficiencia de Folato: Provocada por una disminución en la
cantidad de glóbulos rojos debido a una falta de folato, tipo de vitamina B
también denominada ácido fólico.
• Anemia Ferropénica: Ocurre cuando el cuerpo no tiene suficiente cantidad
hierro, mineral que ayuda a producir glóbulos rojos.
• Anemia por Enfermedad Crónica: Propia de aquellos pacientes que
presentan una enfermedad prolongada catalogada como crónica.
• Anemia Hemolítica: Es aquella en la que los glóbulos rojos se destruyen
antes de lo previsto, es decir 120 días.
• Anemia Aplásica Idiopática: Afección en la cual la médula ósea no
produce suficientes células sanguíneas.
• Anemia Megaloblástica: Los glóbulos rojos son más grandes de lo normal.
• Anemia Perniciosa: Disminución en los glóbulos rojos que ocurre cuando
el intestino no puede absorber apropiadamente la vitamina B12.
• Anemia Drepanocítica: Enfermedad que se transmite de padres a hijos.
Los glóbulos rojos, que normalmente tienen la forma de un disco, presentan
una forma semilunar.
• Talasemia: Es un trastorno sanguíneo que se transmite de padres a hijos
(hereditario) en el cual el cuerpo produce una forma anormal de
hemoglobina, la proteína en los glóbulos rojos que transporta el oxígeno.
Este trastorno ocasiona la destrucción de grandes cantidades de los
glóbulos rojos, lo cual lleva a que se presente anemia

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8. ¿Cuáles son los índices hematimétricos, como se calculan y cuál es la


utilidad de cada uno? Cuáles son los resultados esperados en cada uno
de acuerdo con los tipos de anemia más comunes.
• Volumen Corpuscular Medio (VCM): Nos indica el tamaño de los
glóbulos rojos (Anisocitosis: Macrocitos, Mormoncitos-Macrocitos)
𝐻𝑡𝑜 𝑥 100
𝑉𝐶𝑀:
𝑅𝐵𝐶
• Hemoglobina Corpuscular Media (HCM): Nos indica la cantidad de Hb
en cada glóbulo rojo (Hipocromía-Normocrómica- Hipercromía)
𝐻𝑏 𝑥 100
𝐻𝐶𝑀:
𝑅𝐵𝐶
• Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM): Nos
indica la concentración promedio de Hb en los glóbulos rojos
comparado con el hematocrito.
𝐻𝑏 𝑥 100
𝐶𝐻𝐶𝑀:
𝐻𝑡𝑜

9. ¿Cuánto es la vida promedio de un eritrocito en sangre periférica?


• Los eritrocitos viven de 100 a 120 días (alrededor de 3 meses).

10. Indique cuales son los parámetros que se evalúan en la morfología de


glóbulos rojos.
• Se evalúa la Poiquilocitosis (Diferentes formas) y la Anisocitosis
(Diferentes tamaños)

11. ¿Cuál es la función de las plaquetas y a partir de que célula se forman?


• La función de las plaquetas es crean un tapón cuando hay una ruptura
en la piel para evitar la pérdida de sangre.
• Se forma a partir de los Megacariocitos.

12. Escriba cada uno de los exámenes que se utilizan para evaluar la
coagulación:
• TIEMPO DE PROTROMBINA (TP): Explora la coagulación extrínseca.
La prueba consiste en medir el tiempo de coagulación de un plasma
citratado en presencia de tromboplastina (mezcla de factor tisular con
fosfolípidos) e iones calcio.
Principio: El TP consiste en determinar el tiempo de coagulación de un
plasma en presencia de tromboplastina tisular y de calcio (CaCl2).
• TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA (TPT): Explora los
factores o componentes plasmáticos relacionados con las vías
intrínseca y común de la coagulación. La prueba consiste en medir el
tiempo de coagulación del plasma citratado en presencia de
tromboplastina parcial (la fracción fosfolipídica de la tromboplastina,

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denominada cefalina), un activador de carga negativa (que puede ser


de distinto tipo, por ej. sílica).
Principio: Consiste en determinar el tiempo de coagulación de un
plasma a 37 °C en presencia de un sustituto plaquetario (cefalina) y de
un activador
• FIBRINÓGENO: El fibrinógeno es un factor de la coagulación (factor I),
una proteína esencial para la formación del coágulo sanguíneo. Se
dispone de dos tipos de pruebas para evaluar el fibrinógeno: la prueba
de actividad de fibrinógeno evalúa cómo funciona el fibrinógeno en el
momento de formar un coágulo mientras que la prueba de fibrinógeno
antígeno mide la cantidad de fibrinógeno en sangre. Es independiente
de posibles alteraciones que afecten las vías extrínseca e intrínseca.
Principio: Esta prueba permite evaluar la etapa de fibrinoformación, al
medir el tiempo de coagulación del plasma citratado cuando se le
agrega como reactivo trombina.
• INR: Se utiliza el ISI o índice de sensibilidad internacional que se
calcula a partir de la comparación de los tiempos obtenidos de
muestras de pacientes con la tromboplastina (TP) comparado con una
tromboplastina patrón internacional.

13. Escriba los exámenes y su utilidad para las pruebas de laboratorio


utilizadas para estudiar los pacientes que han tenido trombosis.
• Dímero D: Es un análisis de sangre que mide una sustancia que se
libera en la sangre cuando un coágulo se desintegra. Si el resultado de
esta prueba es negativo, significa que es probable que el paciente no
tenga un coágulo sanguíneo.

14. Describa cada una de las técnicas de laboratorio utilizadas en la prueba


de Velocidad de Eritrosedimentación y para qué sirve esta prueba.

Técnicas manuales
Método de Wintrobe:
Para medir la VSG hay diversos procedimientos; en 1974, Wintrobe
describió el método que:
1. Requiere 1 ml de sangre venosa anticoagulada con EDTA.
2. La sangre se coloca en el tubo de Wintrobe (tubo de vidrio con
un diámetro de 3 mm y graduado en mm en una escala de 0 a
10 cm)
3. Se deja reposar a temperatura ambiente durante una hora en
un soporte para mantener la posición vertical.
4. Al término, se cuantifica la sedimentación en milímetros desde
el borde superior del plasma hasta la base de las células.

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Método de Westergreen:
Validada y aceptada por el Comité Internacional de Estandarización en
Hematología y descrita en 1988.
1. Se extraer sangre venosa y mezclarla con citrato trisódico al
3.8% como anticoagulante.
2. Luego se vierte en un tubo de cristal de 300 ± 1.5 mm de
longitud y 2.55 ± 0.15 mm de diámetro, con una escala
graduada en mm de 0 a 200, y se coloca en posición vertical
durante 24 horas.
3. Las lecturas en milímetros (a partir del borde superior del
plasma y hasta las células) se realizan después de una, dos y
24 horas.
Técnica automatizada
Se toma la muestra en un tubo delgado de tapón negro con citrato de
sodio al 3,2%, se homogeniza bien y posteriormente se introduce en el
equipo con su número de identificación y luego de un tiempo nos da el
resultado en mm/h.
Esta prueba nos indica si hay o no algún tipo de inflamación en el
cuerpo. No nos indica específicamente en donde, pero sabemos que si
hay un proceso infamatorio.

15. Describa la función del hierro en la eritropoyesis.


• Su función es la formación de la Hemoglobina.
• ¿Como? Comienza cuando los eritrocitos están en estado de
proeritroblastos y continua incluso en la fase de reticulocitos, cuando
estas células abandonan la medula ósea y entran al torrente
sanguíneo.
En primer lugar, la succinil-co A, formada en el ciclo metabólico de
Krebs, se une a la glicina para formar una molécula de pirrol. A su vez,
cuatro pirroles se combinan para formar la protoporfirina IX, que a su
vez se combina con el hierro para formar para formar la molécula de
hemo.
Finalmente, cada molécula de hemo se combina con una cadena
polipeptidica larga, denominada globina sintetizada por los ribosomas,
formando una subunidad de hemoglobina llamada cadena de
hemoglobina.
Tema: QUÍMICA CLÍNICA
1. Escriba al menos 5 posibles errores preanalíticos
• Etiquetar mal los tubos.
• Utilizar un tubo incorrecto o en el orden incorrecto.
• No obtener la cantidad adecuada de muestra.
• Llenado erróneo de la boleta de exámenes.
• La aplicación prolongada del torniquete.
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2. Escriba y explique 5 medidas de seguridad que debemos tener en el


Laboratorio
• Vestimenta y accesorios: Es obligatorio el utilizar bata durante todo el
tiempo de trabajo en el laboratorio. Cuando se va a extraer muestra,
es requisito la utilización de guantes de protección. Es recomendable
el uso de lentes de protección.
• No se permite comer ni tomar en el área de trabajo.
• No se permite fumar.
• Aplicación de cosméticos: No permitido en el área de trabajo.
• Lentes de contacto: No se permite su manipulación en el área de
trabajo.
• Cabello: Se recomienda que las damas aseguren por detrás su
cabello, de forma tal que no entren en contacto con superficies
contaminadas.
• Lavado de las manos: Las manos deben ser lavadas con frecuencia
durante todo el día de labor, antes y después del contacto con los
pacientes, antes de comer o tomar y antes de salir del laboratorio.
• El personal debe ser informado sobre las normas de trabajo. También
del plan de seguridad y emergencia del laboratorio, y características
específicas de peligrosidad de los productos. Además de instalaciones
y operaciones de uso habitual en el laboratorio.

3. ¿Cuál es el fundamento de la espectrofotometría?


• Ley de Beer: Establece que la concentración de una sustancia es
directamente proporcional a la cantidad de luz absorbida o
inversamente proporcional al logaritmo de luz transmitida.

4. ¿Qué es una metodología de punto final y qué es una metodología de


monitoreo continuo?
• Metodología de punto final: Se hace una sola medición, se combina
los reactantes, la reacción procede por un tiempo determinado y luego
se detiene la reacción y se hace una medición de la cantidad de
reacción que ha ocurrido.
• Metodología de monitoreo continuo: Se hacen mediciones
múltiples, normalmente de cambio de absorbancia (∆Abs), ya sea a
intervalos de tiempo específicos o en forma continua mediante un
espectrofotómetro.

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5. Elabore una tabla con los valores normales y los deseables en el perfil
de lípidos.

LIPOPROTEINAS NORMALES DESEABLES


Triglicéridos Menor a 150 mg/dL 150 mg/dL y 199 mg/dL
Colesterol Menor a 200 Entre 200 mg/dL y
mg/dL 240 mg/dL
HDL Entre 40 mg/dL y Mayor de 60 mg/dL
60 mg/dL
LDL Menor a 100 Entre 100 mg/dL y
mg/dL 129 mg/dL
VLDL Entre 2 mg/dL y Menor a 30 mg/dL
20 mg/dL

6. Describa al menos 5 exámenes que se utilizan para el diagnóstico de


diabetes.
• Glucosa en ayunas
• Glucosa Post-Comidas
• Prueba de Tolerancia la Glucosa (PTOG)
• Curvas de glucosa e insulina.
• Hemoglobina glicosilada
• Índice de HOMA-IR

7. Escriba al menos 5 síntomas de diabetes


• Constante necesidad de orinar
• Sed inusual
• Hambre extrema
• Pérdida inusual de peso
• Fatiga e irritabilidad extremas
• Visión borrosa
• Cortes/moretones que tardan en sanar
• Hormigueo o entumecimiento en las manos o los pies
8. Escriba los tipos de diabetes que se reconocen por la ADA.
a. Diabetes Tipo I: Destrucción de las células Beta  del páncreas con
déficit absoluto de insulina. (Autoanticuerpos).
b. Diabetes Tipo II: Pérdida progresiva de la secreción de insulina con
resistencia a la insulina. (deficiencia de insulina relativa).
c. Diabetes Mellitus Gestacional: Diabetes que se diagnostica en el
segundo a tercer trimestre del embarazo.
d. Diabetes especificas por otras causas: MODY, Fibrosis quística,
diabetes inducida por medicamentos, etc.

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9. Describa ampliamente al menos 4 pruebas para evaluar la función renal,


tanto en sangre como en orina.
• Nitrógeno Ureico (Urea)
• Creatinina
• Aclaramiento endógeno de creatinina
• Proteinuria
• Ácido úrico

10. Escriba al menos 5 pruebas de laboratorio utilizadas para el diagnóstico


del infarto al miocardio, empezando desde los marcadores que
aparecen primero después de la lesión al miocardio.
• Troponina T • CPK-MB
• Troponina I • Mioglobina
• Péptido nautriuretico (BNP) • AST/ DHL (Muy lerdas en
• CPK elevarse)

11. ¿Cuáles exámenes se utilizan para evaluar la función hepática?


• Bilirrubinas (Directa, Indirecta y Totales)
• Transaminasas: AST ALT
• GGT
• ALP
• Albumina

12. ¿Cuál es el fundamento de la potenciometría?


• Esta prueba se basa en la determinación de la actividad de iones
hidrógeno, empleando un instrumento potenciométrico, con
sensibilidad para reproducir pH de 0.05 o 0.005 unidades usando un
electrodo indicador al ión hidrógeno como un electrodo de vidrio y un
electrodo de referencia apropiado, detectando el aparato el potencial
en milivolts (mV) y en unidades de pH.
• Miden la diferencia de potencial entre dos electrodos de una célula
galvánica en condiciones de intensidad de corriente cero, siendo su
objetivo determinar la concentración de los analitos a partir de los
datos de potenciales de electrodo.
13. Indique cinco condiciones para el transporte de muestras para gases
arteriales.
• Se tiene que transportar en Frío.
• Sellado con goma para evitar evaporación de los gases.
• Usar una jeringa con Heparina como anticoagulante
• Extracción Anaerobia.
• No puede haber burbujas de aire.
• Se analiza casi inmediatamente (10 a 15 min).
• Seleccionar Arteria y no Vena.
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Tema: ANATOMÍA Y FISIOLOGÍA


1. ¿Qué es una hormona?
• Es un mensajero químico, es una sustancia secretada en la sangre
por una célula o grupo de células para su transporte a una célula
diana donde ejerce su efecto a muy bajas concentraciones.
2. Escriba 5 órganos del sistema endocrino y las hormonas que produce
cada uno de ellos
Órganos Hormonas
Hipotálamo Hormonas tróficas (Dopamina, TRH,
CRH, Somatostatina, GHRH, GnRH)
Neurohipófisis Oxitocina
(Hipófisis posterior) Hormona Antidiurética (Vasopresina)
Prolactina (PRL)
Tirotropina o Hormona tiroestimulante
(TSH)
Adrenocorticotropina o Hormona
Adenohipófisis
adrenocorticotrópica (ACTH)
(Hipófisis anterior)
Somatotropina o Hormona del
crecimiento (GN)
Hormona Foliculoestimulante (FSH)
Hormona Luteinizante (LH)
Triyodotironina y tiroxina
Glándula paratiroidea Calcitonina
Riñón Eritropoyetina

3. ¿Cuáles son las funciones del páncreas y que enzimas y hormonas


secreta?
• Función exocrina: Es fundamental en el proceso de la digestión,
cuya función consiste en descomponer químicamente las grasas y
proteínas ingeridas en pequeñas porciones que pueden ser
absorbidas por el intestino. El páncreas segrega enzimas como la
amilasa y lipasa, y se encarga de la secreción de bicarbonato.
• Función endocrina: Producción de hormonas o sustancias que
circulan en el torrente sanguíneo para influir en otra parte distinta del
organismo. La más importante de ellas es la insulina, fundamental
para la regulación de los niveles de azúcar en la sangre. Pero
también secreta hormonas como Glucagón, Somatostatina,
Polipéptido pancreático.

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Tema: MICROBIOLOGÍA
1. Escriba la definición de:
Virus: Microorganismo compuesto de material genético protegido por un
envoltorio proteico, que causa diversas enfermedades introduciéndose como
parásito en una célula para reproducirse en ella.
Hongo: Los hongos por sus características forman un reino llamado Fungi,
caracterizado por poseer una estructura celular eucariota, carecen de
clorofila, unicelulares (levaduras) o pluricelulares (hongos filamentosos),
típicamente inmóviles, de nutrición heterótrofa y de reproducción sexuada
y/o asexuada (esporas). Existen 2 grandes grupos de hongos: 1. Hongos
levaduriformes 2. Hongos filamentosos o miceliados o mohos.
Bacteria: Organismo microscópico unicelular, carente de núcleo, que se
multiplica por división celular sencilla o por esporas. Las bacterias son los
agentes causantes de numerosas enfermedades
Protozoario: Los protozoos son seres vivos unicelulares, desprovistos de
clorofila y heterótrofos. Se multiplican por mitosis y algunos tienen también
reproducción sexual. Al menos en un estadio de su ciclo biológico son
móviles, utilizando distintos sistemas de locomoción.

2. Escriba el fundamento de la tinción de Gram.


Técnica y Fundamento
Esta es una técnica que presenta 4 pasos fundamentales: tinción, fijación
con el mordiente, decoloración y contratinción. Permite colorear y diferenciar
a las bacterias.
1. El cristal violeta es el primer colorante utilizado. El mismo tiene
afinidad por el peptidoglicano y teñirá de morado a todas las
bacterias presentes.
2. Luego se coloca el Lugol, que actúa como mordiente, es decir,
inducirá a la formación de complejos insolubles de cristal violeta-
yodo dentro de la pared.
Las bacterias Gram positivas, al tener una pared gruesa de
peptidoglicano, forman más complejos (cristal violeta-yodo), por
tanto, retienen el colorante. Mientras, las bacterias Gram negativas
poseen una capa delgada de peptidoglicano, lo que hace que las
bacterias formen menos complejos que las Gram positivas.
3. Posteriormente viene el paso de la decoloración, donde las bacterias
Gram negativas como contienen una membrana externa rica en
lipopolisacáridos, las grasas son destruidas por el contacto con el
alcohol acetona, por lo que la membrana externa se desestabiliza,
siendo liberado el cristal violeta.
4. Es así como luego es contrateñida con la safranina o fucsina básica,
tomando el color rojo las bacterias gram negativas.

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Entonces las bacterias gram positivas pueden retener el cristal


violeta y se visualizan de color morado, mientras que las baterias
gram negativas no retiene el cristal violeta predomina el colorante de
la safranina y se visualizan de color rosado.

3. ¿Cuál es la estructura celular de las bacterias Gram Negativas y las


Gram Positivas?

4. Cómo se clasifican las bacterias según:

Temperatura óptima de crecimiento:


• Termofilas: Se desarrollan en medios con temperaturas entre los
50°c y los 60°c
• Mesofilas: Viven en ambientes con temperaturas entre los 20°c y los
40°c
• Psicrofilas: Habitan en sitios con temperaturas entre los 10°c y 20°c
Atmósfera de crecimiento:
• Aerobias estrictas: Necesitan oxígeno para su crecimiento
obligatoriamente.
• Anaerobias estrictas: No necesitan oxígeno para su crecimiento.
• Anaerobios facultativos: Puede necesitar o no oxígeno para su
crecimiento.
• Microaerófilos: Necesitan un 12% de oxígeno para su crecimiento.

5. ¿Cuál es la definición de bacteria anaerobia? ¿Cómo se cultivan en el


laboratorio?
Anaerobia: No necesita oxígeno para su crecimiento.
-En el laboratorio se utiliza una jarra especial con cierre hermético, donde
colocamos el cultivo y luego introducimos un sobre para crear la atmosfera
libre del oxígeno.

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-Antes se utilizaba una jarra que tuviera tapa rosca y se colocaba una
candela encendida y luego tapábamos la jarra para que esta quemara el
oxígeno que quedaba en la jarra.

6. ¿Cuál es el fundamento y como se realizan las siguientes pruebas:


• Catalasa: La catalasa es una enzima que se encuentra en la mayoría de
los microorganismos aerobios y anaerobios facultativos. Se encuentra
normalmente junto a la cromoxidasa y es la responsable del desdoble del
H2O2.
¿Cómo? Se pone en contacto el microorganismo problema con agua
oxigenada. Si se desdobla y aparece O2 el microorganismo es catalasa
positiva. Aparecen burbujas por lo que es fácil identificarlas.
• Coagulasa: Es una enzima producida por un determinado
microorganismo capaz de coagular el plasma sanguíneo. Su aplicación
clínica más importante es la ayuda a la diferenciación del Staphylococcus
aureus de otros Staphylococcus.
¿Cómo? Al poner en contacto el microorganismo problema con plasma,
si el microorganismo posee la enzima coagulasa, el plasma coagula.
• Oxidasa: La oxidasa es una denominación genérica de una enzima que
recibe el nombre de citocromo oxidasa. Se puede definir como una
enzima que cataliza electrones cuando son transferidos desde un sustrato
al oxígeno. Se ha detectado en microorganismos aerobios y anaerobios
facultativos y no se detecta en anaerobios estrictos.
¿Cómo? Se pone en contacto un microorganismo problema con un
sustrato que cambia de color cuando se oxida. Si el microorganismo
posee la enzima oxidará el sustrato y se podrá detectar.

7. ¿Qué es un medio de cultivo selectivo y qué es un medio diferencial?


Escriba 5 ejemplos de cada uno y cuál o cuáles componentes los
hacen selectivos y/o diferenciales.

SELECTIVO DIFERENCIAL
Se utiliza para facilitar Se utilizan para poner en evidencia
nutricionalmente el crecimiento de características bioquímicas que
una población microbiana ayuden a diferencia géneros o
específica especies

Agar Levine
Selectivo para bacilos gram (-) de Nos permiten diferenciar los
rápido desarrollo e inhiben gram (+) microorganismos capaces de utilizar
por la eosina y el azul de metileno. lactosa o sacarosa.

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Agar Mac Conkey


Selectivo para la familia de las Nos permiten diferenciar las
Enterobacterias e inhiben gram (+) Enterobacterias fermentadoras o no
por las sales biliares y el cristal fermentadoras de lactosa, por
violeta. medio del rojo neutro.
Agar Manitol Sal
Selectivo para el crecimiento de Permite diferenciar los
cocos gram (+) e inhibe a otros microorganismos capaces de
microorganismos por la alta Cn de fermentar el manitol en la alta Cn
Cloruro de Sodio. de sal en el medio.
Agar Salmonella Shigella
Selectivo para Enterobacterias del Permite diferenciar por el tiosulfato
género Salmonella y Shigella, de sodio y el citrato férrico las
inhiben gram (+) y la mayoría de bacterias capaces de producir
gram (-) por las sales biliares, sulfuro de hidrogeno formando un
citrato de sodio y verde brillante. precipitado negro de sulfuro férrico.
Agar Sangre
No es Selectivo, permite el Permite diferenciar a
crecimiento de la mayoría de los Estreptococos por el tipo de
microorganismos no exigentes. hemolisis producida por la
sangre adicionada en el medio.

8. Describa 5 mecanismos de resistencia de las bacterias


• Enzimas hidrolíticas: Las bacterias sintetizan enzimas que hidrolizan
al antimicrobiano, destruyendo su acción antibacteriana, sin tener
posibilidad de actuar sobre el microorganismo.
• Bomba de eflujo: Transporta al antimicrobiano hacia el exterior de la
célula sin modificaciones, pero sin acción antimicrobiana.
• Disminución de la permeabilidad de la pared celular al ingreso del
antimicrobiano: Cambios en el diámetro y/o número de porinas
pueden bloquear el ingreso del antimicrobiano a la bacteria.
Alteraciones de las membranas bacterianas. Alteraciones en la
entrada de antibióticos. Aumento de la salida de antibióticos.
• Modificación del sitio de activo: La modificación de un aminoácido
genera un blanco diferente y así disminuye la afinidad de unión por el
antimicrobiano.
• Modificación del sitio de entrada
• Modificación de la vida metabólica

9. ¿Qué es una micobacteria?


Las micobacterias son bacilos aerobios pequeños, de crecimiento lento.
Tienen como característica distintiva una envoltura celular compleja rica en

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lípidos responsable de su clasificación como ácido alcohol resistentes (o


sea, resistentes a la decoloración por ácido después de su tinción con
carbofucsina) y la relativa resistencia a la tinción con la técnica de Gram. La
infección micobacteriana más difundida es la tuberculosis (TBC).

10. Describa la tinción de Ziehl Neelsen y su utilidad:


• Es una técnica de coloración para identificar microorganismos alcohol-
ácido resistentes (AAR).
• Fundamento: El fundamento de esta técnica de tinción se basa en las
propiedades de la pared celular de estos microorganismos. La pared está
formada por un tipo de ácidos grasos llamados ácidos micólicos; estos se
caracterizan por presentar cadenas muy largas.
En la tinción de Ziehl-Neelsen se utiliza el compuesto fenólico carbol
fucsina, un colorante básico. Este tiene la capacidad de interactuar con los
ácidos grasos de la pared celular, la cual es de textura cerosa a
temperatura ambiente.
La tinción con carbol fucsina es mejorada en presencia de calor, debido a
que la cera se derrite y las moléculas de colorante se mueven con mayor
rapidez hacia el interior de la pared celular.
El ácido que se usa posteriormente sirve para decolorar las células que no
fueron teñidas porque su pared no era lo suficientemente afín al colorante;
por lo tanto, la fuerza del decolorante ácido es capaz de eliminar el
colorante ácido. Las células que resisten esta decoloración se llaman
ácido-resistentes.
Reactivos:
•Carbol fucsina al 0,3 % (Colorante primario)
•Ácido alcohol al 3 % o Ácido sulfúrico al 25 %. (Decolorante)
•Azul de Metileno al 0,3 % o Verde Malaquita al 0,5 %. (Colorante de
contraste)
Procedimientos:
1. Preparar un frotis de la muestra, se deja secar y luego se fija con
calor.
2. Se le cubre con Fucsina por 5 minutos. Se deben de realizar de 3 a 5
vapores con el mechero, apenas se observe un humo blanco (Quitar
del mechero para evitar quemar la muestra). Luego enjuagar con
agua.
3. Se cubre con Alcohol-Acido durante 3 a 5 minutos, o hasta que se
observe bien decolorado. (Va a depender del grosor del frotis). Luego
se vuelve a enjuagar bien.
4. Se cubre con Azul de metileno durante 2 a 3 minutos, luego se
enjuaga y se deja secar bien.
5. Observar en el microscopio con el lente de inmersión (100x)

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11. ¿Qué se utiliza para el montaje de muestras para la observación directa


por hongos? ¿Cuál colorante se utiliza para la observación de hongos
a partir de los medios de cultivo?
• Para la observación directa de hongos se utiliza KOH (hidróxido de
potasio) al 40% para uñas y al 10% para piel.
• Para la observación de hongos a partir de medios de cultivo se usa el
colorante Azul de Lactofenol (El reactivo Azul de Lactofenol actúa
como agente aclarante por la acción de combinada del fenol y el
ácido láctico, mientras que el colorante Azul de metilo se une a la
quitina de las paredes celulares de los hongos, que quedan teñidas
de azul oscuro. La elevada concentración de fenol inactiva a los
enzimas hidrolíticos evitando la lisis celular).

12. ¿Cuáles son los medios de cultivo que se utilizan para los hongos?
• Agar Mycosel
• Agar Sabouraud

13. Describa 4 pruebas diagnósticas que se pueden utilizar para los virus
• Prueba de anticuerpos. Los anticuerpos son sustancias producidas
por el sistema inmunitario del cuerpo para combatir una infección viral
específica. Los anticuerpos se adhieren a una célula infectada por el
virus y hacen que el virus se destruya.
• Prueba de detección de antígenos virales. Los antígenos virales se
desarrollan en la superficie de las células infectadas con un virus
específico. La prueba de detección de antígeno viral se hace sobre
una muestra de tejido que puede estar infectado.
• Cultivo viral. Esta es una prueba para detectar un virus que puede
causar una infección. Una muestra de líquido o de tejido corporal se
añade a un cultivo celular para hacer que se desarrolle un virus.
• Prueba de detección de ADN o ARN viral. Al utilizar una muestra
de tejido, sangre u otros líquidos (como el líquido cefalorraquídeo),
este tipo de prueba detecta material genético (ADN o ARN) de un
virus específico.

Tema: INMUNOHEMATOLOGÍA Y BANCO DE SANGRE


1. Escriba 10 requisitos indispensables para donar sangre (Costa Rica).
◊ Ser mayor de edad.
◊ Portar un documento de identidad.
◊ Pesar mínimo 50 kg.
◊ Hemoglobina mayor a 12,5 g/dL.
◊ Hematocrito mayor a 38%.
◊ Temperatura menor a 37,5 °c

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◊ Presión arterial menor de 180/100.


◊ Pulso menor a 100 ppm.
◊ No requiere estar en ayunas, pero se quiere desayunar ligero.
◊ No realizar donaciones en un periodo muy corto (Hombres: cada 3
meses / Mujeres : cada 4 meses)
◊ Estar en condiciones óptimas de salud al momento de la donación. No
haber presentado ningún tipo de síntomas de enfermedad en las 2
últimas semanas. (Gripe, alergias)
◊ No estar tomando antibióticos o algún medicamento (Indicar).
◊ Completar una entrevista escrita y oral y ser aprobada por el médico.

2. ¿Qué tipos de donadores de sangre existen?


• Donadores altruistas (voluntarios)
• Donadores de reposición

3. Escriba 5 medicamentos que son causa de diferimiento para donar


sangre.
• Accutane (Acné) • Drogas inyectables
• Tegison (Psoriasis) • Aspirina
• Insulina Bovina • Antibióticos

4. Cuáles carbohidratos definen los grupos sanguíneos A y B


A: n-acetil galactosamina
B: galactosa
5. Describa la genética del sistema ABO
• Los grupos sanguíneos son carbohidratos de membrana y son
hereditarios, están calificados por un gen y siguen un patrón de
herencia mendeliana. El gen ABO tiene 3 tipos de alelos: alelo A, B y
O. Los alelos A y B son dominantes por igual (codominantes), mientras
que el alelo O es recesivo. y es una molécula que está en la
membrana del GR. Deben descubrirse un anticuerpo contra esa
molécula. La combinación entre estos alelos da lugar a los distintos
grupos sanguíneos.
6. ¿Qué son los anticuerpos naturales del sistema ABO?
• Son anticuerpos que se crean contra los grupos sanguíneos que no
tenemos:
A: Anti-B O: Anti-A y Anti-B
B: Anti-A AB: No genera anticuerpos naturales
7. ¿Qué es el fenotipo Bombay?
• Los genes poseen enzimas y estas se unen por medio de una
sustancia H, cuando no se encuentra esta molécula base “H” se les
llama fenotipo Bombay (Se genera anticuerpos Anti-H).

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• Las personas de fenotipo Bombay son individuos muy raros, que son
homocigóticos hh, y no pueden producir sustancia H. Se comportan
como el grupo O, aunque hayan heredado los genes A o B. Producen
anticuerpos anti-A, anti-B y anti-H, que aglutinan hematíes A, B, AB y
O, por lo que solo pueden recibir sangre de otro individuo de fenotipo
Bombay.

8. ¿Qué son los hemocomponentes y cómo se obtiene cada uno de ellos?


• Los hemocomponentes son las fracciones que podemos obtener de la
sangre.
El fraccionamiento consiste en someter al fluido sanguíneo a una serie de
procesos de purificación y concentración que permiten obtener un
producto terapéutico seguro y eficaz, por medio de la centrifugación.
a) Glóbulos Rojos empacados: Se centrifuga a baja Almac: 1 a 6 °c
velocidad, se separan en bolsa satélite para Aprox: 220mL
obtener Plasma Rico en Plaquetas. Tiempo: 35 días

b) Plasma Rico en Plaquetas: Se centrifuga a Almac: 20 a 26 °c,


alta velocidad, se separan en bolsa satélite el Agitación constante
Aprox: 50mL
Plasma Fresco que se procede a congelar.
Tiempo: 5 días

c) Plasma Fresco Congelado: Luego de


Almac: -18 °c
descongelarse, se centrifuga a alta velocidad, Aprox: 180mL
para separar en bolsa satélite los Tiempo: 1 año
crioprecipitados.

d) Crioprecipitados: Se obtienen descongelando el Almac: -18 °c


Plasma Fresco Congelado, eliminar el Aprox: --
Tiempo: 1 año
sobrenadante y volver a congelar.

9. Describa las proteínas del sistema Rh, como es la herencia de cada una
de ellas.
• La proteína de sistema Rh se llama proteína D (Gen RHD), esta define
si es Rh+ o Rh- al tenerla o no, pero también el sistema Rh tiene una
proteína CE (Gen RHCE), tanto Rh+ como Rh-.
• El Gen RHCE posee antígenos C – E y ha mutado y posee dos
antígenos más c – e.
• Estas proteínas se heredan por halotipos, que son genes que se
heredan en pares.

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10. Describa las variantes del sistema Rh


• D Débil (Cuantitativa): Normalmente se producen entre 30 mil copias,
con esta variable se va a producir menos de 10 mil copias.
• D Parcial (Cualitativa): Normalmente hay 6 vueltas a la membrana,
con esta variable va a producir que le falten vueltas o partes de la
proteína.
11. Escriba 3 diferencias entre el sistema ABO y el sistema Rh

ABO Rh
Posee anticuerpos No posee anticuerpos
naturales naturales
Son de tipo IgM Son de tipo IgG
Son carbohidratos Son proteínas

12. Explique cómo se realizan las pruebas de Coombs directo y Coombs


indirecto, para que sirven cada una de ellas.
• Coombs directo (PAD): Sirve para detectar anticuerpos IgG
adheridos al glóbulo rojo. Proceso In vivo.
1. Se tomo una muestra con EDTA y se centrifuga.
2. Se realiza una suspensión de los glóbulos rojos en solución
salina al 3%.
3. Se un tubo de colocan 3 gotas de la suspensión y se le agrega
solución salina, para realizar lavados, luego se centrifuga por 2-
3 minutos, luego se decanta rápido que solo quede el botón de
glóbulos rojos y se realiza el procedimiento 2 veces más con
solución salina (lavados).
4. Luego de realizar los 3 lavados, se le agregan 2-3 gotas de
reactivo Coombs, se homogeniza y se centrifuga.
5. Se observa si hay o no aglutinación.
• Coombs indirecto (PAI): Sirve para detectar anticuerpos IgG contra
grupos sanguíneas con células rastreadoras en el plasma del paciente.
Proceso In Vitro.
1. Se tomo una muestra con EDTA y se centrifuga.
2. Se utilizan 3 tubo y se rotulan (I, II, III) donde se agregan 100µL
de plasma a cada uno .
3. Se toman las 3 células rastreadoras (O+ O+ O-)(RAI o EAI) y se
agregan 50 µL de cada una en un tubo distinto.
4. Se agregan 100 µL de albumina a cada uno de los tubos.
5. Se incuba a 37°c durante 30 minutos.
6. Luego de la incubación se le agregan 100 µL del reactivo
Coombs y se centrifuga.
7. Observación si hay o no aglutinación.

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13. ¿Cuáles son las pruebas pre transfusionales y como se realiza cada una
de ellas?
• Grupo Sanguíneo: Se realiza una suspensión de glóbulos rojos en
solución salina al 3%, luego se utilizan 3 tubos donde se van a agregar
una gota de la suspensión a cada uno y dos gotas de reactivo. (1. Anti-
A / 2. Anti-B / 3. Anti-D). Se centrifugan por 30 segundos y le observa
si hay o no aglutinación en los tubos para saber qué tipo de sangre y
Rh es el paciente.
• Fenotipo Rh completo y Kell: Se realiza una suspensión de glóbulos
rojos para identificar el fenotipo en tarjeta (C, c, E, e) y anti-Kell (K).
• Prueba Cruzada: Se pone a reaccionar el plasma del paciente contra
los glóbulos rojos de la bolsa de sangre y se centrifuga. Si aglutina No
es compatible, si no aglutina es compatible.
• Prueba de antiglobulina Directa (PAD): Se realiza una suspensión
de glóbulos rojos y luego se agrega el Coombs para observar o no
aglutinación.
• Prueba de antiglobulina Indirecta (PAI): Se utiliza el plasma del
paciente contra las células rastreadoras (RAI- EAI), se incuban y luego
se le agrega el Coombs.

14. Explique al menos 3 reacciones transfusionales y cómo pueden


evitarse.
AGUDAS INMUNES
1. Reacción Transfusional hemolítica aguda: Causa Fiebre, taquicardia,
hemolisis, coagulación intravascular diseminada (CID) y es causada por
la incompatibilidad ABO principalmente.
•Se puede prevenir verificando bien el grupo sanguíneo del paciente,
escribiéndolo de forma clara para evitar confusiones por la letra.
2. Reacción Transfusional Febril no hemolítica: Causa fiebre, escalofrío,
cefalea, ansiedad y es causada por leucocitos y citoquinas, las cuales
están listas para atacar.
•Se puede prevenir con Leucoreductores
3. Reacción Transfusional Alérgica: Causa urticaria, prurito, edema
anafilaxia y es causada por pacientes deficientes de IgA y con Ac anti-
IgA.
•Se puede prevenir evitando transfundir plasma. Si se detecta rápido se
procede a suspender la transfusión, mantener la vena permeable con
solución salina y administrar antihistamínico y en caso de anafilaxia se
administra adrenalina, esteroide y oxigenoterapia.
4. Reacción Transfusional Related Acute Lung Injury (TRALI): Causa
fiebre, escalofríos, cianosis, hipotensión, edema pulmonar bilateral.
•Se puede prevenir al No usar plasma Femenino, usar hemocomponentes
frescos, Plaquetas con soluciones preservantes y tamizajes por Ac anti
HLA anti NHA. Es mortal.
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AGUDAS NO INMUNES
1. Reacción Transfusion Associated Circulatory Overload (TACO):
Causa Hipertensión, distención yugular, troponina aumentada y es más
frecuente en ancianos y niños. Lo que pasa es que cuando el líquido
en el cuerpo no sale por la orina, sale por los pulmones y se ahogan.
•Se puede prevenir con diuréticos, infusión lenta de la sangre y soporte
ventilatorio.
TARDÍAS INMUNES
1. Reacción Transfusional Hemolítica Tardía (RTHR): Causa fiebre y
anemia días o semanas después con elevación del título en horas/días
y destrucción de los hematíes transfundidos. Generalmente son
hemolisis de tipo extravascular por Ac IgG, aunque pueden ser Ac
activadores de complemento y producir cuadros hemolíticos
intravasculares.

TARDÍAS NO INMUNES
1. Infecciones: Es causada por contaminación de la sangre,
enfermedades en periodo de ventana, infecciones emergentes,
bacterias que sobreviven en refrigeración, HIV, HCV, HBV.
2. Reacción Transfusional Injerto contra Huésped TA GVHD: Es una
enfermedad poco frecuente pero muy grave producida por los linfocitos
T del donante que producen anticuerpos contra diferentes células.
Los linfocitos transfundidos injertan en el receptor, proliferan y
producen anticuerpos capaces de lesionar diferentes órganos, en una
reacción mediada por células natural killer y por citoquinas. Los
órganos principalmente afectados son la piel, el hígado el intestino y
las células hematopoyéticas.
Ocurre en los 8 – 10 días y es 100% Mortal.
• Se puede prevenir con Irradiación de las bolsas de sangre.

15. ¿Que son las anemias hemolíticas autoinmunes (AHA)? ¿Qué le sucede
al paciente? E indique los tipos.
• Las anemias hemolíticas autoinmunes ocurren cuando tenemos un
autoanticuerpo que ataca a los glóbulos rojos propios.
¿Cómo? Este autoanticuerpo activa un complemento y produce
hemolisis intravascular o extravascular.
• ¿Qué sucede?
▪ Produce Anemia, por que hay sangrados y falta de nutrientes.
▪ La DHL  ya que esta se encuentra en el glóbulo rojo por lo que
cuando hay hemolisis se libera aumentándose en sangre.
▪ En un frotis de sangre podemos ver Esquizocitos
▪ Los Reticulocitos  y posiblemente los Eritroblastos .
▪ El Coombs Directo (PAD) es positiva (+).

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• Tipos de Anemias Hemolíticas Autoinmunes:


1. AHA1: Se da por Ac calientes y es de tipo IgG. El Ac
involucrado actúa a 37°c.
2. AHA2: Se da por Ac fríos y es de tipo IgM. El Ac actúa a
temperatura ambiente.

Tema: PARASITOLOGIA
1. Describa al menos 4 protozoarios de importancia médica, respecto a su
clasificación, morfología y características de sus formas infectantes.

PROTOZOARIOS
ENTAMOEBOSIS o AMEBIASIS
Trofozoíto: Los trofozoítos presentan un solo núcleo con
un cariosoma característico grande, excéntrico y rugoso,
Entamoeba con cromatina periférica irregular. El citoplasma es grueso
coli y vacuolado. Miden entre 20 a 25 µm
Quiste: Quistes maduros típicos con 8 núcleos,
cromatoidales astillados que miden entre 15 a 25 µm.
Trofozoíto: Presentan un núcleo con fina cromatina
periférica y un cariosoma central. El citoplasma es
Entamoeba finamente granular. Miden de 10 a 60 µm.
histolytica Quiste: Los quistes maduros poseen 4 núcleos posee
cromatoidales con puntas redondeadas. Miden de 10 a 20
µm.
Trofozoíto: Presentan un núcleo con fina cromatina
Entamoeba periférica y un cariosoma central. El citoplasma es
hartmanni finamente granular. Miden de 8 a 10 µm
(Mini Quiste: Cuando maduran los quistes, presentan 4 núcleos y
histolytica) cuerpos cromatoidales alargados con puntas redondeadas.
Miden usualmente de 6 a 8 µm
GIARDIASIS o GIARDIOSIS
Trofozoíto: Miden 10 - 12 µm de longitud, son
piriformes, con superficie dorsal convexa y
ventral cóncava. Sus movimientos son en
espiral. Las estructuras internas que pueden
apreciarse son: dos núcleos con endosoma,
cuerpos medianos, paquete de axonemas con cuerpos
Lamblia basales del cual derivan 4 pares de flagelos.
intestinalis Quiste: Formas de resistencia, ovales, miden
entre 11-14 µm de longitud y contienen 2 a 4
núcleos, y estructuras residuales de la forma
vegetativa (axonemas, restos de disco adhesivo
y cuerpos medianos). La resistente pared quística está
formada por una capa filamentosa externa y una capa
membranosa interna.

2. ¿Cuáles son las formas vegetativas e infectantes de un protozoario?


• Vegetativa o activa: El trofozoíto
• Infectante, resistente o inactivo: El quiste

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