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UNIVERSIDAD NACIONAL “SANTIAGO ANTÚNEZ DE MAYOLO”

FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

INFORME DE LABORATORIO N°02

“BIOENSAYO DE TOXICIDAD CON ALEVINOS DE TRUCHA”

ALUMNOS:

 Alvarado Zamudio Karla


 Chávez Rímac Katherine
 Huamán Aguilar Lorgio
 López Egusquiza Mary
 Rosales López Ángel

DOCENTE:

Montano Chávez YeidyNayclin

CURSO:

Biotecnología Ambiental
I. INTRODUCCION

Los bioensayos de ecotoxicidad son una herramienta empleada en laevaluación de los


efectos de las sustancias potencialmente tóxicas. Los bioensayos ayudan a calcular el riesgo
ambientalde los tóxicos valorando la probabilidad de que los efectos adversos por la
actividad humana puedan ocurrir, la evaluación puede involucrar agentesquímicos, físicos y
biológicos estresantes. La evaluación del riesgoes juzgada basándose en el efecto teórico
del contaminante sobre los organismosy los valores calculados a partir de los bioensayos
Desde el punto de vista de la protección del ambiente, se trata dedeterminar en los estudios
de ecotoxicología acuática la concentración del tóxicoque se puede permitir en un cuerpo
de agua, sin que cause daño significativo alos organismos acuáticos. Para después
establecer, con losresultados obtenidos, los valores máximos permisibles de dicho tóxico,
los cualesson empleados como herramientas para establecer parámetros de
controlambiental.

El empleo de alevines en los bioensayos de toxicidad es recomendado poragencias de


protección ambiental como la US EPA y Environment Canadá, sobretodo porque los
bioensayos con peces adultos proveen poca información sobre elefecto de los
contaminantes en el ambiente acuático, al existir la posibilidad deque los peces adultos ya
estén acondicionados a un medio adverso. Con la información obtenida con los bioensayos
más la evaluación delriesgo ecológico se aportan antecedentes técnicos que puedan ser
útiles parapropuestas de normas de protección para la fauna ictiológica y los
recursosacuáticos del país.
II. JUSTIFICACION

El presente informe se enfocará en los bioensayos de toxicidad pues estos permiten evaluar
el grado de afectación que una sustancia química tiene en organismos vivos y los cuales
pueden ser agudos o crónicos. En la evaluación de la contaminación acuática los
bioensayos de toxicidad son necesarias, debido a que las pruebas fisicoquímicas no resultan
suficientes para la valoración de los potenciales efectos sobre los organismos en diversos
ecosistemas, no siendo posible determinar, por ejemplo, la interacción de los factores
químicos y los efectos tóxicos de los contaminantes. Siendo así de suma importancia la
realización de bioensayos para la determinación de niveles toxicológicos.

III. OBJETIVOS

3.1. General

 Determinar el grado de toxicidad que pueden ocasionar los contaminantes


en los alevinos de truchas a través de bioensayos.

3.2. Específicos

 Determinar el tiempo de resistencia de los alevinos de truchas a la


exposición de contaminantes.
 Interpretar los efectos fisiológicos de los contaminantes en los alevinos
de truchas.
IV. REVISION BIBLIOGRAFICA

ECOSISTEMAS ACUÁTICOS.

Barros Santiago (2008), manifiesta que estos ecosistemas son importantes para la
naturaleza, del agua dulce de los ríos, se debe tener en cuenta su variedad de composición.
En estos existe mayor interacción de factores bióticos y abióticos que son modificados
drásticamente por cualquier fenómeno.

CONTAMINACIÓN DE ECOSISTEMAS ACUÁTICOS

El crecimiento de la población a nivel mundial ha incrementado los niveles de


contaminación. Esta contaminación está relacionada con el vertido de agua de desecho de
origen doméstico e industrial a los cuerpos de agua, incorporación de microorganismos y
productos químicos. Estas materias deterioran la calidad del agua y la hacen inútil para los
usos pretendidos.

EFECTO DE LA CONTAMINACIÓN SOBRE LOS ORGANISMOS ACUÁTICOS

Los organismos vivos que habitan en el agua, presentan adaptaciones evolutivas a unas
determinadas condiciones ambientales, presentan unos límites de tolerancia a las diferentes
alteraciones de las mismas. Estos límites de tolerancia varían, frente a una determinada
alteración se encuentran organismos sensibles que no soportan las nuevas condiciones
impuestas comportándose como intolerantes, mientras que otros, que son tolerantes no se
ven afectados. Si la perturbación llega a un nivel letal para los intolerantes, estos mueren y
su lugar es ocupado por comunidades de organismos tolerantes. Cada especie en particular,
gracias a su conformación genética específica, está en la capacidad de sobrevivir
únicamente dentro de determinados rangos ambientales. De este modo, la presencia de una
de estas especies, señala condiciones ambientales particulares, al encontrarse una variable
fisicoquímica en un rango definido, se sugiere su presencia o ausencia.

Los efectos más comunes son:


o Modificando las características de la calidad del agua como: Temperatura, oxígeno
disuelto, sales nutrientes, etc. Este favorece a la proliferación de algas o la anoxia;
poniendo en riesgo las especies.
o A través de los tejidos animales por las biotoxinas, los microorganismos patógenos
y sustancias químicas adversas que hacen que la producción no sea apta para el
consumo humano (Alzieu, 1991)

BIOENSAYOS

Alvarez (1996), dice que los bioensayos sirven para evaluar los efectos nocivos de
diferentes tipos de agentes externos que producen sobre los seres vivos, también nos
permite evaluar la toxicidad de sustancias químicas aisladas o mezclas que se encuentran en
el agua, suelo o aire en niveles dañinos. La contaminación de un río es capaz de producir un
daño a los seres vivos presentes en ella.

Zambrano A. y Molina S (2012), dicen que los bioensayos son pruebas biológicas que
sirven para determinar el grado de toxicidad de sustancias extrañas presentes en el medio
donde habitan y que producen efectos nocivos que muchas veces pueden generar su
extinción.

Los bioensayos, son definidos como el método utilizado para evaluar la potencia relativa de
un agente tóxico, sobre un organismo vivo, a través de la comparación de ese agente, con el
efecto de una solución patrón o estándar.

BIOINDICADORES

Son especies de organismos que ayudan a descifrar cualquier fenómeno o acontecimiento


actual o pasado, relacionado con el estudio de un ambiente. Las especies tienen
requerimientos físicos, químicos, de estructura del hábitat y de relaciones con otras
especies. A cada especie o población, le corresponden determinados límites de estas
condiciones ambientales, entre las cuales los organismos pueden sobrevivir (límites
máximos), crecer (intermedios) y reproducirse (límites más estrechos). Cuando más
estrechos sean sus límites de tolerancia, mayor será su utilidad como indicador ecológico.
ALEVINES DE TRUCHA

Las truchas en sus aletas carecen de espinas, y todas las especies tienen una pequeña aleta
adiposa en el lomo, cerca de la cola, requieren aguas frías, limpias y saturadas en oxígeno,
habita en ríos rápidos, arroyos, lagos y presas, con temperaturas de 0.6 °C a 23.9 °C como
máximo en períodos cortos, y promedios de 10 a 18°C, el PH óptimo fluctúa entre 6.7 y
8.6, que requiere aguas ligeramente alcalinas con más de 65 ppm de sales de calcio.

TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus mykiss)

Barros Santiago (2008), la trucha es el nombre común dado a varias especies de peces de
agua dulce pertenecientes a la familia del salmón, Salmonidae. La trucha arcoíris o cabeza
de Acero presenta cuerpo alargado, fusiforme y cabeza que termina en una boca grande
puntiaguda hendida hacia el nivel de los ojos y con una fila de dientes fuertes en cada una
de las mandíbulas que le permiten aprisionar la presa.

TABLA N°01: Generalidades de la Trucha Arcoíris (Oncorhynchus mykiss)

FUENTE: Investigación de campo. Escuela José María Morelos. Michoacán, México. Año
2002.
TABLA N° 02: Características de las aguas apropiadas para Oncorhynchus mykiss.

FUENTE: GUITIERRES LOPEZ, Samir. Investigación de campo Esc. JoseMaria


Morelos, Michoacan. 2002.

TOXICIDAD

Se denomina toxicidad a la actividad tóxica y específica de una sustancia, vinculada a la


estructura química de una sustancia exógena al organismo (xenobiótico) por su interacción
con moléculas endógenas (receptor). Precisamente esta actividad biológica, es la que
permite juzgar acerca de la capacidad que posee una sustancia para poder actuar como
nociva para un organismo vivo, bajo unas determinadas condiciones. Es así que un
potencial de un compuesto para causar lesiones o enfermedades, cuando se administra en
dosis únicas o en dosis múltiples en un periodo cortó (24 horas). Estos efectos se basan en
los mecanismos de la acción química, en la cual se pueden apreciar alteraciones fisiológicas
poco después de su administración (la muerte).

PRUEBAS DE TOXICIDAD

Esta prueba nos permite obtener información útil para lograr protección de los seres vivos
acuáticos, de los peligros ocasionados por las sustancias arrojados por el hombre al
ambiente. En el caso de peces, cuando el tóxico esta disuelto en el agua, lugar de la dosis se
reporta la concentración del tóxico que presenta, esta es la variable contra la cual se gráfica
la respuesta tóxica. A las exposiciones a concentraciones que producen la muerte en 96
horas o menos se les denominan exposiciones agudas, mientras que las exposiciones de
mayor duración a concentraciones sub letales se les denomina exposiciones crónicas. La
duración de estas exposiciones crónicas experimentales puede ser por un período del
desarrollo, ser vitalicias o extenderse por períodos de más de una generación.

CONTAMINACIÓN POR RELAVE MINERO

Los relaves (o cola) son desechos tóxicos subproductos de procesos mineros y


concentración de minerales, usualmente una mezcla de tierra, minerales, agua y rocas.

Los relaves contienen altas concentraciones de químicos y elementos que alteran el medio
ambiente, Causa la acidificación de las aguas la cual amenaza a los recursos (suelo, flora,
fauna y al hombre mismo) e incrementa la solubilidad de contaminantes tóxicos esto
provoca a menudo, situaciones críticas agudas para la sostenibilidad de la biósfera.

CONTAMINACIÓN POR KRESO

Los Desinfectantes son preparaciones con propiedades germicidas y bactericidas, es decir,


que eliminan microorganismos patógenos. Los desinfectantes deben su acción a los
ingredientes activos que contienen. Entre los principales tenemos: El fenol, cresol, aceite de
pino, Alcoholisopropilico, etc. Los ingredientes activos son complementados
emulsificantes y otros ingredientes inertes como el agua, colorantes, fijadores, etc.

CONTAMINACIÓN POR DICLORURO DE MERCURIO

Es el compuesto químico de mercurio y cloro con la fórmula HgCl2. Es un reactivo


cristalino blanco sólido y un compuesto molecular. Es un compuesto muy tóxico. Causa
náuseas, vómitos, diarreas, daño renal, vómitos de sangre, hemorragia del estómago,
intestinos y otros órganos (especialmente -como suelen hacerlo los compuestos derivados
del mercurio- en el cerebro). La ingesta 1 o 2 g causa casi siempre la muerte.
CONTAMINACIÓN POR DETERGENTE

El poder contaminante de los detergentes se manifiesta en los vegetales acuáticos


inhibiendo el proceso de la fotosíntesis originando la muerte de la flora y la fauna acuáticas.
A los peces les produce lesiones en las branquias, dificultándoles la respiración y
provocándoles la muerte.

Químicamente es una sal alcalina de un ácido graso de cadena larga. Los detergentes son
una mezcla de muchas sustancias. El componente activo de un detergente es similar al de
un jabón, su molécula tiene también una larga cadena lipófila y una terminación hidrófila.
Suele ser un producto sintético normalmente derivado del petróleo.

Inhiben la oxidación, alteran la transferencia y disolución del oxígeno entre la superficie y


el aire (medio óptimo para el desarrollo de especies acuáticas), dificultando la
autodepuración de las corrientes de agua. Perturban la sedimentación, impiden el desarrollo
de las algas. Alteran el olor y sabor de las aguas potables, efectos tóxicos que dependen del
tipo de detergente, sensibilidad de los microorganismos y condiciones del medio acuático.
V. MATERIALES Y REACTIVOS

5.1. Materiales:

CINCO BALONES DE
FONDOPLANO.
Es un frasco de cuello largo y cuerpo
esférico. Está hecho generalmente de
vidrio o plástico especial. Gracias a
su base redondeada permite agitar o
remover fácilmente su contenido sin
poder derramar ninguna sustancia
fuera de su envase por precaución.

CINCO ALEVINOS DE TRUCHA.

La trucha arco iris (Oncorhynchus


mykiss), es originaria de. Se definió la
trucha arco iris como la especie de
mejor condición para cultivo, por su
facilidad de adaptación y se puede
considerar como la especie que inició
la piscicultura.

5.2. Reactivos:

250 ML DE AGUA DE MESA.


agua potable tratada, adicionada o no
con gas carbónico (anhídrido
carbónico), con o sin la adición de
saborizantes y colorantes
alimentarios permitidos, embotellada
por procedimientos sanitarios, en
envases herméticos e inocuos.
150 ML DE DICLORURO DE
MERCURIO.
Es un compuesto inorgánico muy
tóxico. Causa náuseas, vómitos,
diarreas, daño renal, vómitos de
sangre, hemorragia del estómago,
intestinos y otros órganos. La ingesta
de 1 o 2 gramos causan casi siempre
la muerte.

500 ML DE DETERGENTE.
Los detergentes son sustancias
químicas que tienen la capacidad de
deshacer o separar la suciedad que
está en la superficie de un objeto sin
corroerlo ni dañarlo y se les conoce
como agentes limpiadores. Los
detergentes tienen la capacidad de
contener ácidos, fosfatos o álcalis y
pueden llegar a utilizarse como
elementos antisépticos.

400 ML DE RELAVE MINERO


Es un conjunto de desechos tóxicos
de procesos mineros de la
concentración de minerales,
usualmente constituido por una
mezcla de rocas molidas, agua y
minerales de ganga, aunque también
se encuentran bajas concentraciones
de metales pesados, tales como cobre,
plomo, mercurio y metaloides como
el arsénico
400 ML DE KRESO AL 50 %

Es un poderoso desinfectante que


posee “Cresoles” capaces de
neutralizar y destruir la formación de
gérmenes que causan el mal olor.

VI. PROCEDIMIENTO
Metodología

La metodología usada para lograr los objetivos planteados fue muestra experimental con los
Oncorhynchus Mykiss (truchas) obtenidos de la piscicultura, con un peso aproximado de 5-
8 g y una longitud estándar de 4-5 cm. Se recolectaron muestras sanas, que fueron
trasladados en un envase hasta el laboratorio de Biotecnología Ambiental. Las truchas
mencionadas fueron evaluadas en base a su comportamiento que manifestaban ante cada
uno de las soluciones usadas.

Procedimiento Experimental

1. Se vertió aproximadamente 250 ml de agua de mesa en un matraz, el agua de mesa


tuvo un pH= 7. Seguidamente se introdujo el Oncorhynchus Mykiss y se midió el
tiempo de sobrevivencia.
2. Se vertió 500 ml de agua más 2.5 gr de detergente en un matraz, dicha solución tuvo
un pH=9. Seguidamente se introdujo el Oncorhynchus Mykiss y se midió el tiempo
de sobrevivencia.

3. Se echó 400 ml de relave minero en un matraz, el relave minero tenía un pH= 1 en


un matraz. Seguidamente se introdujo el Oncorhynchus Mykiss y se midió el tiempo
de sobrevivencia.
4. Se echó 400 ml de kreso en un matraz el cual tenía un pH= 6. Seguidamente se
introdujo el Oncorhynchus Mykiss y se midió el tiempo de sobrevivencia.

5. Se colocó 150 ml de HgCl2 en un matraz el cual tenía un pH=5-7. Seguidamente se


introdujo el Oncorhynchus Mykiss y se midió el tiempo de sobrevivencia.
VII. RESULTADOS Y RECOMENDACIONES

Para el desarrollo y análisis de las pruebas de toxicidad con los diferentes agentes tóxicos,
se adoptó el método del Bioensayo. A continuación, se expresan los resultados obtenidos en
la práctica de laboratorio, son los siguiente:

Cuadro: Resultados de la prueba de toxicidad de los alevinos de Trucha

N° Compuestos Dosis o observación Tiempo de pH


concentración muerte
(min)

1 Agua de 250 ml El alevino se encuentra No muere 7


tranquilo, no se perturba
mesa porque el agua esta
(control) oxigenada.

2 Dicloruro de 150 ml al El mercurio afecta el 1’57’’ 5-7


0.1% sistema nervioso central del
Mercurio alevino y causa su
desequilibrio y
descoordinación.
A medida que transcurre el
tiempo el alevino pierde su
color y se torna claro.
3 Detergente 500 ml El alevino al inicio se 5’17” 9
muestra conforme, pero
luego entra en caos
.
4 Agua de 400 ml Pierde el equilibrio, 3’35” 1
Relave regurgita la comida
5 Kreso 400 ml al 50% El alevino no soporta mucho 1’28” 6
tiempo.
Imagen: Alevinos después de haberse sometido a distintos contaminantes

Cuadro: Tiempo de resistencia vs contaminante

INTERPRETACION

De la investigación abordada

Después de incorporar el Oncorhynchus Mikiss al detergente disuelto se observó una rápida


reacción fisiológica del animal ya que el detergente se introduce por los poros y ocasiona el
desprendimiento de la mucosa de Oncorhynchus Mikiss.

Después de incorporar el Oncorhynchus Mikiss al relave minero se evidencia la falta de


oxigeno disuelto por su ascenso a la superficie para captar el oxígeno.
Cuando incorporamos el Oncorhynchus Mikiss al kreso este ataca al sistema nervioso por
ser desinfectante con propiedades germicidas y bactericidas mastranto el alevino menor
tiempo de resistencia.

Cuando incorporamos el Oncorhynchus Mikiss a la muestra de control negativo (dicloruro


de mercurio) causa vomitos ataca especialmente al cerebro como suelen hacerlo los
compuestos derivados del mercurio, mostro menor resistencia en comparación con el
detergente, relave minero y agua de mesa, excepto con el kreso.

Cuando incorporamos el Oncorhynchus Mikiss a la muestra de control positivo (agua de


mesa), este demostró mayor resistencia en comparación con el detergente, kreso, relave
minero y dicloruro de mercurio.

Del grupo

Agua de mesa tiene un pH neutro, es ahí donde el alevino no sufre ninguna perturbación y
sigue respirando conformemente.

A un contaminante con un pH alcalino como es el de detergente, el alevino muestra una


mejor resistencia con respecto a los otros contaminantes.

A pesar de que el agua de relave tiene baja pH igual a 1, el alevino no muere tan fácilmente
VIII. CONCLUSIONES

 El contaminante más nocivo para los alevino (Oncorhynchus Mikiss) es el


kreso en comparación con el dicloruro de mercurio, agua con detergente y agua
de relave.

 El tiempo de resistencia de los alevinos (Oncorhynchus Mikiss) en el agua con


detergente, Agua de relave, dicloruro de mercurio y kreso es de 5’17”, 3’35”,
1’57’’ y 1’28” respectivamente.

 Las reacciones fisiológicas fueron desprendimiento de mucosa, arritmia cardiaca


por falta de oxigeno, problemas en el sistema nervicioso y vómitos.

IX. RECOMENDACIONES

 Tener cuidado en el majeo de los contaminantes, para evitar cualquier problema


de intoxicación.

 Tener un seguimiento minucioso de los cambios de agua y tiempos de


experimentación.

 No verter los restos de los contaminantes utilizados en el conducto de desagüe


del laboratorio, porque se contamina el agua.
X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

o Escriba Escalante, H. (2016). “Ecotoxicidad del diclofenaco de uso veterinario en


Hyalellacurvispina (Amphypoda)”. Recuperado de:
file:///H:/info%20de%20biotecno/TESIS%20B766_Esc.pdf
o Jaramillo, R. y Murillo F. (2014). “BIOACUMULACIÓN DE METALES PESADOS
EN PECES Y ANÁLISIS DE AGUA DEL RÍO SANTA Y DE LA LAGUNA
CHINANCOCHA-LLANGANUCO PERIODO 2012 – 20132”. Recuperado de:
file:///H:/info%20de%20biotecno/Tesis_Alvarez_y_Amancio_2014.pdf
o Valverde, E. (2015). “Bioensayo Agudo con Sulfato de Cobre en Alevinos de Carpa
Cyprinus Carpio (LINNAEUS, 1758) y su Posible Impacto Debido a la Actividad
Minera”. Recuperado de:
http://cybertesis.uni.edu.pe/bitstream/uni/2186/1/valverde_oe.pdf?fbclid=IwAR36v
_lR8oT6O4TKligsbnacIwjea63ZkZbBLk8unTj6SNxKuKBD0_eJjOw
o Corpus, M. et. (2012). “Bioensayo con alevinos de trucha”. Recuperado de:
file:///C:/Users/HP/Downloads/scrdownloader.com_86nd2de1zj.pdf