DETERMINACIÓN DE HIERRO

Un método excelente y muy sensible para la determinación del hierro se basa en la formación de un
complejo rojo-naranja de hierro (II) con o-fenantrolina. La o-fenantrolina es una base débil; en
disolución ácida, la principal especie es el ión fenantrolina PhH+. Así, la reacción de formación del
complejo se describe bien según la ecuación:

Fe2+ + 3PhH + ------ Fe (Ph)3 2++ 3H+

La constante de equilibrio de esta reacción es de 2.5*106 a 25°C. La formación cuantitativa del

complejo se observa en el margen de pH comprendido entre 2 y 9. Se recomienda un pH próximo a
4 para evitar la precipitación de diversas sales de hierro como puede ser el fosfato. Al utilizar o-
fenantrolina para analizar el hierro, se añade un exceso de reductor a la disolución para mantener el
hierro en el estado +2; para este fin sirve la hidroquinona así como el clorhidrato de hidroxilamina.
Una vez formado el color del complejo es estable durante largos períodos de tiempo.

Determinados iones interfieren en el análisis del hierro, y por tanto, no interesan que estén presentes.
Estos generalmente comprenden iones coloreados, la plata y el bismuto que precipitan con el
reactivo y el cadmio, mercurio y zinc que forman complejos solubles incoloros con el reactivo y
rebajan la intensidad del color. En ciertas condiciones el molibdeno, tungsteno, cobre, cobalto,
níquel y estaño pueden también interferir. El experimento puede realizarse con un espectrofotómetro
y el rango optimo se encuentra entre 500 y 520 nm.

Disoluciones especiales

Clorhidrato de hidroxilamina al 10%. Se disuelven 10 g de H2NOH. HCl en unos 100 mL de agua.

Buffer de pH 4

o-fenantrolina, 0.3% del monohidrato en agua. Se pueden agregar algunas gotas de ácido nítrico
diluido para ayudar a disolver la fenantrolina. Se guarda en un lugar oscuro. Se rechaza el reactivo
cuando comience a tomar color.

Disolución patrón de hierro de 0.1 mg de Fe/mL. Se disuelven 0.1400 g de FeSO4.(NH4)2.SO4.

6H2O, calidad reactivo para análisis en 50 mL de agua que contenga 1 mL de H2SO4 concentrado.
Se pasa un matraz aforado y se diluye 200 mL exactamente.

Preparación de la curva de calibración

Se coloca una alícuota de 2 mL de la disolución patrón de hierro en un vaso de precipitado y se
agrega 2 mL de hidroxilamina. Se ajusta el pH de esta solución a 4 con un pHmetro, agregando
solución buffer de pH 4 y ajustando con la ayuda de HCl o NaOH diluido. Se lleva
cuantitativamente esta solución a un balón de 100 ml y se agrega 3 mL de la disolución de la o
fenantrolina. Se diluye hasta la marca.

Se limpian las cubetas del instrumento, se lava con la disolución del complejo y a continuación se
llenan. Se lava y se llena la segunda cubeta con una disolución en blanco, que contiene todos los
reactivos menos el hierro. Se secan con cuidado las paredes de la cubeta y se colocan en el
instrumento. Se realiza un barrido de absorbancia en función de la longitud de onda del patrón en
contraste con la prueba del blanco.

Se preparan tres patrones más, como mínimo, dentro del intervalo lineal del equipo y se traza la
curva de calibración del instrumento.

Análisis de la muestra

Se pone en un vaso de precipitado una alícuota de 5 mL de la muestra, se ajusta el pH de esta

solución de la misma manera como se llevó a cabo para preparar los patrones de curva de
calibración. Se lleva cuantitativamente esta solución a un balón de 100 ml y se agrega 3 mL de la
disolución de la o-fenantrolina y se enrasa y mide la absorbancia. Se repite el análisis, de ser
necesario, utilizando cantidades de muestra que den una absorbancia dentro del intervalo de la curva
de calibración.

Se calculan los miligramos de hierro por litro de disolución de la muestra.

Notas:

 La intensidad del color del complejo de hierro es independiente del pH, en rango de 2 a 9.
 La o-fenantrolina en solución se descompone fácilmente, se recomienda su preparación el
mismo día para asegurar la formación del complejo.
 El hierro debe estar en estado de oxidación 2, el agente reductor se debe adicionar antes de
desarrollar el color. Se puede utilizar Hidroxilamina, en forma de cloruro:

2Fe+3 + 2NH2OH + 2OH- ------2Fe+2+ N2 + 4H2O

  Se deben esperar 10 minutos para que se desarrolle la máxima intensidad de color antes de
realizar la medición de la absorbancia.
 Debido a la interferencia del Cu no se puede determinar hierro en bronce o latón

DETERMINACIÓN DE HIERRO COMO COMPLEJO CON OFENANTROLINA

Un método muy sensible para la determinación del hierro se basa en la formación de un complejo
rojo-naranja de hierro (II) con o-fenantrolina. La o-fenantrolina es una base PhH+. débil y en
disolución ácida, la principal especie es el ión fenantrolina, La reacción de formación del complejo
se describe según la ecuación:

Fe2+ + 3PhH + ------ Fe (Ph)3 2+ + 3H+ K= 2.5x106 a 25°C

Previo al acomplejamiento, las soluciones de Fe deben ser tratadas con un reductor para Fe+2.

asegurar que todo el hierro se encuentre como ión Para ello se emplea un exceso de hidroquinona o
clorhidrato de hidroxilamina en solución:

2Fe+3 + 2NH2OH + 2OH- ------2Fe+2+ N2 + 4H2O

La formación cuantitativa del complejo se observa en el intervalo de pH 2-9. Se recomienda un pH

próximo a 4 para evitar la precipitación de diversas sales de hierro como puede ser el fosfato. Una
vez formado el color del complejo es estable durante largos períodos de tiempo. Se debe esperar 10
minutos para que se desarrolle la máxima intensidad de color antes de realizar la medición de la
absorbancia. La lectura de la absorbancia se realiza en el intervalo de 500 a 520 nm.

Determinados iones interfieren en el análisis del hierro, y por tanto, no interesan que estén presentes.
Estos generalmente comprenden iones coloreados, la plata y el bismuto que precipitan con el
reactivo y el cadmio, mercurio y zinc que forman complejos solubles incoloros con el reactivo y
rebajan la intensidad del color. En ciertas condiciones el molibdeno, tungsteno, cobre, cobalto,
níquel y estaño pueden también interferir.

Reactivos requeridos

- Clorhidrato de hidroxilamina (H2NOH.HCl) al 10% p/p. Prepare 10 mL.

- Buffer de pH 4 de ácido acético/acetato de sodio

- o-fenantrolina: 25 mL al 0,3% p/p del monohidrato en agua. Se pueden agregar algunas gotas de
ácido nítrico diluido para ayudar la disolución. Se guarda en un lugar oscuro. Se rechaza el reactivo
cuando comience a tomar color.

- Solución patrón de 1000 mg/L de Fe preparado a partir de FeSO4.(NH4)2.SO4.6H2O.

Preparación de la curva de calibración

El intervalo de la curva de calibración es de 1 a 4 mg/L de Fe. Los estándares se preparan colocando

la alícuota de la solución patrón de hierro en un vaso de precipitado, se agrega 0,5 mL de
hidroxilamina y se ajusta el pH a 4, con la ayuda de HCl o NaOH 1 M (emplee un pHmetro para
realizar la medida del pH). Posteriormente, se agrega 2 mL de la solución buffer de pH 4 y se
trasvasa cuantitativamente a un balón de 25 mL, donde se agrega 1 mL de la disolución de la o-
fenantrolina, antes de aforar con agua destilada. Para la lectura de la señal, se determina primero la
longitud de onda de trabajo haciendo un barrido de absorbancia en función de la longitud de onda,
colocando el blanco apropiado (agua en este caso) en la cubeta de referencia.

Análisis de la muestra

Coloque en un vaso de precipitado una alícuota de la muestra, agregue 0,5 mL de hidroxilamina y

ajuste el pH a 4 de la misma manera que se hizo con los patrones de calibración. Lleve
cuantitativamente esta solución a un balón de 25 mL y agregue 1 mL de la disolución de la o-
fenantrolina, enrase y mida la absorbancia. Ajuste el factor de dilución de la muestra de manera que
la lectura se encuentre dentro del intervalo de la curva de calibración.

Nota: La determinación de Fe en bronce no es posible debido a la interferencia del Cu, quien

también se acompleja con la o-fenantrolina.

3.-MATERIAL Y APARATOS

Espectrofotómetro ultravioleta-visible.

Matraz aforado de 100 mL

Pipetas de 5, 10, 15, 20 y 25 mL

4.-REACTIVOS

Sal de Möhr, Fe
(NH4)2(SO4)2.6H2O

Clorhidrato de hidroxilamina

Acetato de sodio

1,10-Fenantrolina

5.-PROCEDIMIENTO

- Solución estándar de hierro (II). Prepare una solución estándar de hierro pesando 0.0702 g de
sulfato férrico amónico, Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O. Transfiera cuantitativamente la muestra pesada a
un matraz volumétrico de un litro y añada suficiente agua para disolver la sal. Añada 2,5 mL de
ácido sulfúrico concentrado, afore exactamente hasta la marca con agua destilada y mezcle a la
perfección. Esta solución contiene 10,0 mg de hierro por litro (10 ppm); si se pesa una cantidad
distinta a la indicada, calcule la concentración.

- Solución de 1,10-fenantrolina. Disuelva 100 mg de monohidrato de 1,10-fenantrolina en 100 mL

de agua destilada.

-Solución de cloruro de hidroxilamonio. Disuelva 10 g de cloruro de hidroxilamonio en 100 mL de

agua destilada.

- Solución de acetato de sodio. Disuelva 10 g de acetato de sodio en 100 mL de agua destilada.

- De la disolución patrón de Fe, tomar las alícuotas a calcular que permitan preparar diluciones de 1,
2, 3, 4 y 5 ppm en balones aforados de 100 mL. Añadir a cada balón aforado 0,5 mL del reactivo
clorhidrato de hidroxilamina, 1,25 mL de solución de acetato de sodio y 1,25 mL de fenantrolina.

- Obtenga el espectro de absorción de la solución de 3 mg/L midiendo la absorbancia de 400 a 700

nm aproximadamente (o el ámbito que abarque el instrumento). Tome lecturas a intervalos de 25 nm
hasta llegar cerca del máximo de absorción, en cuyo caso deben tomarse lecturas a intervalos de 5
nm o 10 nm.

Siga las indicaciones del instructor para manejar el aparato. La solución de referencia será el blanco.
Haga un grafico de la absorbancia en función de la longitud de onda y elija la longitud de absorción
máxima. Basándose en la concentración molar de la solución de hierro y en la longitud de la celda,
calcule la absortividad molar del complejo de hierro (II)-fenantrolina en el máximo de absorción.
- Antes de efectuar las mediciones de absorbancia, deben transcurrir por lo menos 15 minutos
después de haber añadido los reactivos, para que el color del complejo se desarrolle en su totalidad.
Una vez desarrollado, el color es estable durante varios días.

- Repetir el mismo proceso con la muestra. Es posible que la muestra requiera ser diluida, en caso de
poseer mucho hierro.

- Calcule el límite de detección y cuantificación preparando 5 soluciones blanco (agua, solución de

1,10 fenantrolina, solución de acetato de sodio). Realice las lecturas de las soluciones de los blancos
a la misma longitud de onda de máxima absorción del complejo de hierro (II)-fenantrolina. Calcule
la desviación estándar de las lecturas de absorbancia y emplee las ecuaciones (que usted debe
conocer, y si no, investigar) para calcular el límite de detección y de cuantificación.

BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA

1. Sandel E. B. “Colorimetric Determination of Traces of Metals” 3era edición, Interscience

Publishers, New Cork, 1959.

2. Snell, F. D. y Snell C. T. “Colorimetric Methodes of Análisis” 3era edición, Vol. II, D Van
Nostrand Company, 1941.

3. Day R. A. y Underwood A.L “Quimica Analitica Cuantitativa” 5ta Edicion, Cap 22 Pag. 788-792.
Prentice Hall Hispanoamérica. 1989

4. Vogel Arthur “Química Analítica Cuantitativa: Teoría y Practica” 2da edición, Vol. II, Cap. V,
Editorial Kapelusz, Buenos Aires, 1969.

5. Chamberlin G. J. y Thomas L. C. “Colorimetric Chemical Analytical Methods”, 9na edición,

Tintameter Ltd, England, 1980.

6. Mellon, “Analytical adsorption Spectroscopy” John Wiley and Sons, New York, 1957.

Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. Crouch “Química Analítica” 7ma edición, Cap. 7. 27,
McGraw-Hill, Mexico, 2001.

El estudiante debe investigar todos los detalles del principio del método (reacción del hierro con la
fenantrolina, papel del clorhidrato de hidroxilamina, del acetato de sodio, estructura del reactivo
fenantrolina, estabilidad del color obtenido…)