UNIVERSIDAD NACIONAL DE JULIACA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA EN INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS

“MEDIOS DE CULTIVO”

IV SEMESTRE

IMFORME
MICROBIOLOGIA

Presentado por:
Damian Quispe Ticona

Docente(a): Ing.
EDWIN CHILA CHOQUE

Juliaca, 15de julio del 2019

 MEDIOS DE CULTIVO

I. INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es cualquier sustancia cuyo interior o sobre la cual pueden
desarrollarse los microorganismos en el laboratorio.
El desarrollo o cosecha de microorganismos obtenidos en el medio se denomina cultivo,
cuando los microorganismos de un cultivo son de la misma especie, se dice que es un
cultivo puro; cuando dos o más especies de microorganismos se desarrollan en un medio,
se le conoce con un cultivo mixto; si un cultivo contiene accidentalmente más de una
especie de microorganismos, se habla de un cultivo contaminado.
II. OBJETIVOS
 Demostrar que los gérmenes tienen requerimientos nutritivos variados, los que
son tomados en cuenta al preparar un medio de cultivo.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.
 Obtener un cultivo aislado a partir de una muestra de microbios preexistente.
 Aprender sobre los distintos medios de cultivo existentes.

III. MARCO TEORICO

Composición de un Medio de cultivo
a. Sustancias nutritivas apropiadas (proteinas, carbohidratos, sales minerales, agua,
etc.)
b. Tener un pH conveniente; generalmente de 6.8 a 7.6.
c. Estar previamente esterilizados.
d. Estar protegidos de contaminación.
Finalidad de los medios de cultivo
a. Aislamiento de gérmenes
b. Identificación
c. Conservación de bacterias
d. Clasificación
e. Obtención de toxinas
f. Recolección o cosecha para preparación de vacunas.
Clasificación de los medios de cultivo
A. Por su naturaleza: Pueden ser:
1. Naturales. - En la naturaleza existen varias sustancias que pueden utilizarse como
medios de cultivo, Ejm. La sangre, la leche, o el suero sanguíneo estéril que se
usa para cultivar bacterias patógenas.
 2. Artificiales. - Pueden estar compuestos por gran variedad de materias y se
subdividen en:
a) Sintéticos. - Son medios cuya composición química es conocida. Ejm :
aminoácidos, azucares, vitaminas.
b) No sintéticos. - Son medios cuya composición química es desconocida.
Ej.: leche, extracto de levadura, etc.
Los medios sintéticos y no sintéticos se clasifican en:
a) Medios Líquidos. - Ej.: el caldo nutritivo
b) Medios Sólidos. - Pueden ser:
Reversibles o licuables: Cuando a temperaturas corrientes de 20 ºC permanecen sólidos,
pero que pueden ser licuados mediante aplicación de calor sin alterar sus características
nutritivas. Ej.: Agar Nutritivo, Agar Mac Conkey.
Irreversibles y no licuables: Son aquellos que una vez solidificados no pueden ser licuados
nuevamente por medio de calor, porque tienen elementos termolábiles en su constitución.
ej.: Agar sangre, agar huevo, etc.(Martin 2013)
B. Por la función que desempeñan. - Pueden ser:
1. Comunes. - Permiten el desarrollo indiscriminado de todo tipo de microorganismos.
ej.: Agar Nutritivo, Caldo Nutritivo, Agar Plate Count, Gelatina, etc.
2. Especiales. - Pueden ser: a.
a. Medios mejorados. - Son aquellos a los que se les agrega determinadas sustancias
nutritivas como sangre, yema de huevo; las cuales estimulan las exigencias nutritivas de
ciertos microorganismos. ej.: Agar sangre, caldo suero, agar suero, etc.
b. Medios Selectivos. - Se caracterizan por poseer en su composición sustancias que
favorecen el desarrollo de determinados microorganismos, inhibiendo el de otros. Ejm.
Agar SS, agar Baird Parker, agar mac Conkey, etc.
c. Medios diferenciales. - Son los que ponen de manifiesto algunas propiedades
bioquímicas del microorganismo como formación de gas, cambios en el pH, fenómenos
de óxido- reducción, etc. ej.: Agar gelatina, caldo nitratado, agar Kliger, caldo glucosado,
etc.
Composición y preparación de algunos medios de cultivo
A. Medios Líquidos
a) Caldo Nutritivo
i) Extracto de carne (Bacto-Geef Extract)
ii) Peptona ( Bacto-Lactose) - Agua destilada
b) Caldo Lactosa
i) Extracto de carne
ii) Peptona
iii) Lactosa (Bacto-Lactose) - Agua destilada
c) Agua peptonada de Koch
i) Peptona
 ii) Cloruro de sodio - Agua destilada
B. Medios Sólidos
a) Agar Nutritivo
i) Extracto de carne
ii) Peptona
iii) Agar
iv) Agua destilada - pH 7.0 - 0.1
b) Gelatina Nutritiva - Peptona
i) Extracto de carne (Bacto Beef Extract) - Gelatina
ii) Agua destilada - pH 7 - 0.1
c) Agar Sangre
El agar sangre es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5
% de sangre ovina, también puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de
Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver
la capacidad hemolítica1 de los microorganismos patógenos (que es un factor de
Virulencia). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el
tipo de hemólisis que posee:(Ingenier et al. 2017)
Alfa: halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a
metahemoglobina en el medios.(López and Torres 2006)
Beta: halos incoloros (hemolisis total) ? Gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis)
COMPOSICIÓN
- Infusión de corazón de buey (Beef Herat Infusión From) 3 gr.
- Peptona
- Cloruro de Sodio - Agar
- Agua destilada

IV. MATERIALES Y EQUIPOS

4.1Materiales
- Tubos de ensayo
- Placas Petri
- Probetas
- Matraz de Erlenmeyer
- Mecheros
- Tuberculina de 10 ml (2 unidades)
- Piceta
- Agua destilada
- Materiales considerados en la práctica.

4.2. Equipos
- Autoclave
- Estufa
 V. PROCEDIMIENTO
1. Pesar las sustancias indicadas en las formulas respectivas, calculando las cantidades en
relación con los volúmenes requeridas.
2. Disolverlas en la cantidad de agua destilada necesaria llevando a 45 a 50°C.
3. Filtrar si es necesario, enfriar moderadamente y ajustar el pH entre 6.8 y 7.4 u otro que
fuera indicado.
4. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 121 ºC. 5. El medio estéril se enfría
rápidamente a 45 – 50 ºC y mientras todavía se encuentra líquido, se le añade de forma
aséptica 5% de sangre estéril desfibrinada; se mescla bien evitando que se incorporen
burbujas de aire.
6. Repartir en placas Petri previamente esterilizados, siempre frente a una llama (Mechero
de Bunsen o alcohol). Para una mejor conservación de la placa de Agar Sangre y para
obtener halos hemolíticos más claros ajustar el pH a 6,8 ±0,2.
Los medios sólidos se reparten en placas Petri o en tubos de prueba teniendo cuidado de
darles la inclinación que deben tomar al tiempo de ser empleados antes de que enfríen y
solidifiquen.
Los medios líquidos se reparten en tubos de prueba en ambiente estéril.
7. Incubar a 37º C de 24 a 48 horas.
Al final, el medio queda listo para su empleo y se almacenará de preferencia en la nevera.
También pueden almacenarse al medio ambiente. Es deseable guardar losmedios
preparados en bolsas de nylon herméticamente cerradas para evitar un deterioro muy
rápido por disecación.

VI. RESULTADOS

6.1 preparación del agar sangre

18 ml * 14 placas = 198 ml}

40𝑔______________________1000𝑚𝑙
𝑥_____________________198𝑚𝑙
𝑥 = 7.92𝑔
 6.2 Agar sangre humano al 5%

198ml____________100%
X________________5%
X=9.9ml

Se observó que claramente hubo crecimiento de microorganismos, y que se lograron aislar

varias colonias, que se identifican como pequeñas manchas en la placa de Petri.

Las bacterias más abundantes en las manos son los bacilos, bacterias comunes que se
encuentran en muchos ambientes. En las huellas dactilares es común encontrar
estafilococos, que son las bacterias responsables de las enfermedades comunes.
Las colonias blancas en torno a las huellas dactilares son probablemente estafilococos,
los amarillos micrococos y las más rojizas bacterias del género serratia.

VII. CONCLUSIONES
A pesar de todo, gracias a esta experiencia pudimos aplicar los conocimientos adquiridos
en las cátedras del curso “Biología de los microorganismos” y además ahondar más en
estos mismos de manera mucho más dinámica y didáctica. Se conoció de forma más
práctica cómo se llevan a cabo las normas y procedimientos para el aislamiento de
microbios y la formación de colonias
 También podemos concluir a partir de los conocimientos adquiridos en esta experiencia
que los procesos de esterilización, desinfección y demás son importantísimos en la
microbiología, ya que son la puerta para la siembra y el aislamiento de colonias de
microorganismos, y por ende al estudio serio de estos para el avance de la ciencia.
Con esto podemos decir que las bases para el estudio de los microorganismos se
encuentran en el aislamiento de estos mismos mediante el uso de técnicas de:
esterilización, desinfección, aislamiento de medios de cultivos y siembra. Todo esto para
poder ser manipulados y estudiados de mejor manera.

VIII. RECOMENDACIONES

Asegurarse de que el medio de cultivo este perfectamente fundido (sin grumos y de un

color claro) antes de ser vertido a las cajas Petri.
Antes de esterilizar el material para su desecho, retirar etiquetas, maskin-tape y escritura
con plumón
IX. BIBLIOGRAFIA
Ingenier, Microorganismos et al. 2017. “Ciencias Para Ingeniería - Microbiología
Informe Laboratorio 2 : Medios de Cultivos y Tipos de Siembras.”
López, Leonor, and Carola Torres. 2006. “Trabajo Práctico N ° 3 : Preparación Del
Material Para El Trabajo En Microbiología Limpieza y Esterilización.”
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf.
Martin, Ruth. 2013. “Practica2ME_20131.” : 1–12.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/P2.MediosCultivoEsterilizacion_2089
1.pdf.

X. XII. CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es importante determinar el pH de un medio de cultivo?
La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los
microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro,
aunque los hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe olvidar que la
presencia de ácidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano
pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales.
XI. ANEXOS