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UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL

DESARROLLO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

EFECTO ANTIMICÓTICO IN VITRO EXTRACTO


HIDROALCOHÓLICO DE LAS FLORES DE Tropaeolum majus L.
(MASTUERZO) FRENTE A Trichophyton rubrum.

SANTA CRUZ GRANDA ROBER

ASESOR: Q.F. Tasayco Yataco Nesquen


Lima Perú
2018
EFECTO ANTIMICÓTICO IN VITRO DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE LAS
FLORES DE Tropaeolum majus L. (MASTUERZO) FRENTE A Trichophyton
rubrum.

INDICE GENERAL

DEDICATORIA
AGRADECIMIENTO
INTRODUCCIÓN
CAPÍTULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1. Descripción de la realidad problemática
1.1. Formulación del Problema
1.2.1. Problema general
1.2.2. Problemas específicos
1.2. Objetivos
1.3.1. Objetivo general
1.3.2. Objetivos específicos
1.3. Justificación
CAPÍTULO II: FUNDAMENTOS TEÓRICOS
2.1. Antecedentes
2.1.1. Antecedentes Nacionales
2.1.2. Antecedentes Internacionales
2.2. BASES TEÓRICAS
2.2.1 Dermatofitosis por Trichophyton rubrum
2.2.2 Trichophyton rubrum
2.2.2.1 Taxonomía
2.2.3 Diagnóstico de las infecciones micóticas superficiales
2.2.3.1 Examen mediante luz de Wood
2.2.3.2 Procedimientos micológicos
2.2.3.3 Toma de muestra
2.2.3.4 Examen microscópico
2.2.3.5 Cultivo
2.2.3.6 Epidemiología
2.2.3.7 Factores predisponentes
2.2.3.8 Patogénesis

2
2.2.4 TIÑA DE LA CARA
2.2.4.1 Etiología
2.2.4.2 Tratamiento
2.2.4.3 TIÑA DEL CUERPO
2.2.4.4 Etiología
2.2.4.5 Epidemiología
2.2.4.6 Clínica
2.2.4.7 Tratamiento
2.2.5 Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
2.2.5.1 Descripción botánica
2.2.5.2 Clasificación taxonómica
2.2.5.3 Hábitat y distribución
2.2.5.4. Propagación
2.2.5.5. Partes utilizadas
2.2.5.6. Composición química
2.2.5.7 Usos terapéuticos
2.2.5.8 Mecanismos de Acción
2.2.5.9 Toxicidad
2.3. Marco conceptual
2.4. Hipótesis y Variables
2.4.1. Hipótesis general
2.4.2. Hipótesis específica
2.4.3. Operacionalización de variables e indicadores
CAPÍTULO III: MÉTODODOLOGÍA
3.1. Tipo y diseño de investigación
3.2. Descripción del método y diseño
3.2. Población y muestra
3.3. Técnicas e instrumentos de recolección de datos
3.4. Técnicas de procesamiento y análisis de datos
CAPÍTULO IV: PRESENTACIÓN Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
4.1. Presentación de resultados
4.2. Discusión
CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. Conclusiones

3
5.2. Recomendaciones
ANEXOS

4
DEDICATORIA

A Dios.
Por haberme permitido llegar hasta este punto y haberme
dado salud para lograr mis objetivos.
A mis maestros.
Por su tiempo compartido y por impulsar el desarrollo de
nuestra formación profesional. Rober.

5
AGRADECIMIENTO

A nuestra querida Alma Mater, la Universidad interamericana


para el desarrollo (UNID) a nuestros docentes, por
esforzarse día a día y darnos lo mejor de sus conocimientos
durante todos los años de estudios superiores, va nuestro
sincero agradecimiento por toda la responsabilidad que cae
sobre ellos.

En primer lugar a Dios por haberme guiado por el camino de


la felicidad hasta ahora; en segundo lugar a cada uno de los
que son parte de mi familia.

Nuestro más profundo y sincero agradecimiento al Dr. Q.F.


Tasayco Yataco Nesquen por su asesoramiento para la
realización de este trabajo de investigación.
A dios por permitirme tener tan buena experiencia dentro de
mi universidad, a mis padres por el apoyo incondicional.

Los autores.

6
INTRODUCCIÓN

La dermatofitosis representa la micosis superficial causada por un grupo


heterogéneo de hongos que tienen la capacidad de invadir tejidos queratinizados
de hombres y animales, los géneros comúnmente involucrados en estas
infecciones son Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton. A nivel mundial
se estima que aproximadamente el 20-25% de la población es afectada por esta
patología. En la región Amazonas, este problema presenta la mayor incidencia
de las infecciones superficiales micóticas, respecto al Perú la dermatomicosis
más frecuente es la onicomicosis con un 43,6% y el agente patógeno de mayor
prevalencia es el Trichophyton rubrum con un 33,2%, siendo el responsable de
las principales consultas médicas por micosis en el pie, ingle y uñas1.

El mastuerzo (Tropaeolum majus) es una planta originaria del Perú, cultivada


desde épocas prehispánicas, que pertenece a la familia de las tropeoláceas.
Presenta hojas redondeadas, con flores de color amarillo, anaranjado o rojizo y
crece a manera de enredadera, Esta especie vegetal (mastuerzo) contiene una
gran variedad de principios activos, entre los que destacan glucotropaeolina
(bencilglucosinolato) y quercetina (flavonoide). El bencilisotiocianato, que se
origina como producto de la degradación de glucotropaeolina, protege a la planta
contra el ataque de bacterias, hongos e insectos y además le confiere
propiedades bactericidas y antifúngicas cuando se la emplea en medicina
tradicional2.

7
CAPÍTULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.4. Descripción de la realidad problemática


En nuestro país, las dermatomicosis representan uno de los
principales motivos de consulta dermatológica, constituyendo un
verdadero problema de salud pública por su alta morbilidad.
Las dermatomicosis son un grupo de lesiones clínicas que se
presentan en piel y sus anexos (pelos y uñas) y según el grado de
profundidad anatómica que afecte el hongo, se las clasifica en
superficiales y cutáneas3.
Las dermatomicosis son causadas más comúnmente por los
dermatofitos. El dermatofito antropofílico Trichophyton rubrum
sigue siendo el agente causal más frecuente en todo el mundo. Las
enzimas queratinolíticas, por ejemplo, hidrolasas y queratinasas,
son importantes factores de virulencia de T. rubrum.
Recientemente, la cisteína dioxigenasa se encontró como nuevo
factor de virulencia. Los factores de predisposición del huésped
desempeñan un papel igualmente importante para el desarrollo de
la dermatofitosis de la piel y las uñas. La insuficiencia venosa
crónica, la diabetes mellitus, los trastornos de la inmunidad celular
y la predisposición genética deben considerarse factores de riesgo
para la onicomicosis. Una nueva tendencia alarmante es el
creciente número de casos de onicomicosis, principalmente debido
a T. rubrum, en la infancia4.

8
1.5. Formulación del Problema

1.2.1. Problema general

¿Presentará efecto antimicótico in vitro el extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(Mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum?

1.2.2. Problemas específicos

¿Cuáles serán los principales constituyentes químicos del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus
L. (mastuerzo)?

¿Cuál será la concentración efectiva media del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(Mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum?

¿Cuál será la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la


concentración mínima fungicida (CMF) del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(Mastuerzo)?

1.6. Objetivos

1.3.1. Objetivo general

Determinar el efecto antimicótico in vitro del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(Mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum.

1.3.2. Objetivos específicos

Determinar los principales constituyentes químicos del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus
L. (mastuerzo).

9
Determinar la concentración efectiva media del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum.

Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la


concentración mínima fungicida (CMF) del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(mastuerzo)

1.7. Justificación

Las micosis superficiales se encuentran entre las formas más


frecuentes de infecciones en los humanos. Se estima que afectan
un 20-25 % de la población mundial y su incidencia está
constantemente en incremento. La distribución de las infecciones
dermatofíticas y sus agentes causales varían según la región
geográfica y está influenciada por varios factores, como el tipo de
población, clima, estilo de vida, migración, prácticas culturales,
condiciones socioeconómicas, entre otras5.
Es por este motivo que lleva a investigar acerca del efecto
antimicótico in vitro del extracto hidroalcohólico de las flores de
Tropaeolum majus L. (mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum, la
cual es causante de afecciones micóticas por lo tanto nos permitirá
determinar si se puede indicar en afecciones micóticas producidas
por Trichophyton rubrum.
Esto nos permitirá formular una loción a base extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. (mastuerzo)
y ayudara a pacientes que presenten afecciones micóticas
producidas por Trichophyton rubrum.

10
CAPÍTULO II: FUNDAMENTOS TEÓRICOS

2.1. Antecedentes
2.1.1. Antecedentes Nacionales

Aguilar D. et. al. 2017, “Efecto del extracto etanólico de


Tropaeolum majus “mastuerzo” sobre micosis inducida por
Trichophyton mentagrophytes en Rattus norvegicus”,
evaluaron el efecto del extracto etanólico de Tropaeolum
majus “mastuerzo” sobre la micosis inducida por
Trichophyton mentagrophytes en Rattus norvegicus. El cual
concluyeron que el extracto etanólico de Tropaeolum majus
“mastuerzo” tiene efecto antimicótico sobre la infección
producida por Trichophyton mentagrophytes en Rattus
norvegicus, pudiendo ser una alternativa segura al
tratamiento tópico de esta tiña.

Aguilar S. et. al 2018, “Actividad antifúngica in vitro del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus
L. “mastuerzo” frente a Sporothrix schenckii tanto en forma
de levadura como de filamento. trabajaron para cada forma
de crecimiento en una placa control y cinco placas problema
con agar Sabouraud como medio de cultivo; a las placas
problema agregaron el extracto hidroalcohólico de las flores
de Tropaeolum majus L. a concentraciones de 5, 10, 20, 40
y 80μL/mL, Los resultados se contrastaron y compararon
con la prueba estadística U de Mann–Whitney, concluyeron
que el extracto hidroalcohólico tiene actividad antifúngica in
vitro frente a Sporothrix schenckii en sus dos formas de
crecimiento.

Aspauza T. 2015. “Efecto in vitro del extracto etanólico de


hojas y flores de Tropaeolum majus “mastuerzo” sobre
Staphylococcus aureus meticilino resistente (SARM) ATCC

11
25923”. Determinaron la concentración mínima inhibitoria de
210.7 ug/mL. El cual concluyeron que el extracto etanólico
de hojas y flores de Tropaeolum majus posee actividad
inhibitoria in vitro sobre el crecimiento de cepas de SARM
ATCC 25923.

Ayala J. et al. 2018. “Efecto antimicótico in vitro de una


crema de Tropaeolum majus L.(Tropaeolaceae) sobre
Trichophyton rubrum (Arthrodermataceae). obtuvieron un
extracto estandarizado de las flores, luego determinaron la
concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración
mínima fungicida (CMF); diseñaron y elaboraron una
formulación de crema y evaluaron su efecto antifúngico in
vitro, usando como patrón la crema de isoconazol al 1%.
Donde se demostró que tiene efecto antimicótico similar a la
crema patrón de isoconazol al 1%.

Bezada S.et al. 2016, “Evaluación del extracto


hidroalcohólico de Tropaeolum majus “mastuerzo” en
formulación crema para el tratamiento de la dermatomicosis
causada por Trichophyton mentagrophytes en Cavia
porcellus “cuy”, determinaron la eficacia del extracto
hidroalcohólico de Tropaeolum majus L. “mastuerzo” en
formulación crema, para el tratamiento de la dermatomicosis
en cuyes, como alternativa de tratamiento para esta
enfermedad. Concluyeron que el extracto hidroalcohólico de
Tropaeolum majus L. “mastuerzo” en formulación crema al
1,5% tuvo la mayor acción fungicida contra Trichophyton
mentagrophytes.

Huanquis A. et. al. 2015. “Actividad antimicrobiana de los


extractos metanólicos de las hojas y flores de la especie
vegetal Mastuerzo (Tropaeolum majus L.) frente al

12
crecimiento de microorganismos (Escherichia coli y
Staphylococcus aureus.
Concluyeron que los extractos metanólicos de las hojas de
mastuerzo a concentraciones de 10 ,30 y 60 %
respectivamente tienen poca actividad antibacteriana frente
a Staphylococcus aureus, y en el caso de la Escherichia coli
en las tres concentraciones si presentaron mayor medida de
halos de inhibición, igual manera para flores en la cual se
probó mayor halo de inhibición en las concentraciones de
10, 30 y 60 % para el Staphylococcus aureus comparadas
con la Escherichia coli respectivamente.

2.1.2. Antecedentes Internacionales

Cabezas G. 2014, “Efecto cicatrizante de extractos a base


de mastuerzo (Tropaeolum majus) en ratones (Mus
musculus), Evaluaron el efecto cicatrizante del extracto
hidroalcohólico de mastuerzo (Tropaeolum majus L.) a
diferentes concentraciones, concluyeron que el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo (Tropaeolum majus L.) fue
eficaz aplicado en heridas inducidas, con mayor efecto en
concentración al 80%, presentando cicatrización en 10 días,
con una longitud de la cicatriz de 1,4 cm; por lo que
recomendaran elaborar una forma farmacéutica para
facilitar la administración del extracto de mastuerzo
(Tropaeolum majus L.).

13
2.2. BASES TEÓRICAS
2.2.1 Dermatofitosis por Trichophyton rubrum
Las dermatofitosis son micosis superficiales causadas por hongos
que tienen la capacidad de invadir tejido queratinizado como la piel,
el pelo y las uñas del hombre y algunos animales6.
Las dermatofitosis son también llamadas “tiñas”, y según la
topografía se clasifican en tiña de la cabeza, tiña del cuerpo, tiña
de la mano, tiña de los pies, tiña de la ingle, tiña del área del pañal
y tiña de las uñas6.
Trichophyton rubrum Se cultiva en los medios habituales, como
agar glucosado de Sabouraud con NaCl al 5%, y en muchos otros,
como agar Littman Oxgall, agar peptona 1%, medio de urea de
Christensen o agar-Trichophyton6.
2.2.2 Trichophyton rubrum
Es el agente causal más frecuente en tiñas del cuerpo, de la ingle,
de los pies, así como de onicomicosis7.
Se han descrito dos cepas diferentes. La cepa granular se
caracteriza por colonias planas que carecen de micelio aéreo, y
semejan polvo de azúcar. La cepa aterciopelada (downy) es la más
común, con micelio aéreo algodonoso, blanco o beige, como “colas
de conejo”. El reverso de la colonia suele tener un color rosado-
rojo, pero en ocasiones puede ser amarillo-marrón, rojo-vino o
violeta e, incluso, pueden carecer de pigmento. Si se realiza un
examen del cultivo se observan hifas largas, delgadas, abundantes
microconidias de piriformes a redondeadas de 3,0-5,5 x 2,0-3,5 µm,
rara vez hay macroconidias, en forma de puro o cigarrillo, de
tamaño variable de pared delgada y multiseptadas. El diagnóstico
diferencial se debe realizar fundamentalmente con Trichophyton
mentagrophytes; se utiliza la prueba de ureasa, que puede ser
positiva solo en la cepa granulosa, y la prueba de perforación de
pelo, que es negativa cuando se trata de T. rubrum. También se
puede distinguir por la producción de pigmento rojo en el agar
dextrosa-maíz y la formación de un halo verde en el medio de
Littman7

14
2.2.2.1 Taxonomía (según Malmsten, 1845)

Reino: Fungi
División: Ascomycota
Clase: Eurotiomycetes
Orden: Onygenales
Familia: Arthrodermataceae
Género: Trichophyton
Especie: T. rubrum

2.2.3 Diagnóstico de las infecciones micóticas superficiales8.


Para el diagnóstico de las infecciones micóticas superficlaes se
pueden emplear los siguientes métodos de ayuda diagnóstica:
 Examen con luz de Wood
 Procedimientos micológicos
 Examen microscópico directo
 Procedimientos de cultivo
2.2.3.1 Examen mediante luz de Wood
En 1925 se descubrió que pelos infectados con ciertos
dermatofitos pueden mostrar fluorescencia cuando son
expuestos a luz ultravioleta filtrada por filtros de Wood (filtro
de silicato de bario del rango 356 nm) y ayudar
ocasionalmente al diagnóstico de las tiñas. La observación
directa del cuero cabelludo con luz ultravioleta filtrada (luz de
Wood), revela tallos pilosos de color verde brillante en las
infecciones por M. audouini y M. canis, mientras que la
fluorescencia producida por T. schoenleinii es verde
grisácea; sin embargo infecciones debidas a T. tonsurans y
T. violaceum no producen fluorescencia.
2.2.3.2 Procedimientos micológicos
El diagnóstico presuntivo de las infecciones por dermatofitos
deberá ser sustentado por el examen microscópico del
material obtenido de la lesión clínica y confirmado mediante
cultivo de la muestra con medios micológicos apropiados.

15
2.2.3.3 Toma de muestra
El material para estudio micológico se obtendrá en forma
adecuada de la lesión clínica con una hoja de bisturí Nº 11,
pudiendo ser pelo, escamas de la piel o uñas, y se colocan
en un portaobjetos con solución aclarante (HOH 10% ó
20%).

2.2.3.4 Examen microscópico

La observación de la muestra obtenida y aclarada se


observa con microscopia de baja resolución, en busca de
hifas, esporas o células en gemación.

2.2.3.5 Cultivo
El diagnóstico definitivo de las infecciones por dermatofitos
se apoya sólo en las características macroscópicas,
microscópicas y fisiológicas del microorganismo. Las
muestras deben cultivarse en medios apropiados para el
crecimiento de éstos hongos. Se emplean el agar dextrosa
de Sabouraud, el más utilizado. Se disponen de variantes
del medio Sabouraud estandarizados muy utilizados. El
cultivo debe realizarse en un ambiente de temperatura de
28°c.
2.2.3.6 Epidemiología
La distribución de la dermatofitosis es universal, predominan
en las zonas tropicales con climas cálidos y húmedos,
existiendo diferencias en cuanto a la distribución geográfica
de las distintas especies de dermatofitos, afecta ambos
sexos y todas las edades. La frecuencia global de las
micosis superficiales es muy alta, según la OMS es del 20 a
25% de la población general, de ellos 5 – 10 % son por
dermatofitos. Los seres humanos pueden contraer la
enfermedad de animales infectados: perros, gatos, y otros
animales no domésticos8.

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2.2.3.7 Factores predisponentes
Diversas circunstancias pueden favorecer estas infecciones:
Uno de los factores es el clima, ya que en lugares húmedos
y tropicales se observa el mayor número de infecciones
micóticas. Otro factor importan te son los malos hábitos
higiénicos, el hacinamiento, el uso de zapatos cerrados, las
zapatillas, ropa sintética, etc. Otros factores predisponentes
implicados son el calor, la oclusión, traumatismos, diabetes,
tratamientos corticoides, prácticas deportivas infecciones
por HIV, etc8.
2.2.3.8 Patogénesis
Los dermatofitos no infectan la epidermis indemne, sólo
atacan el estrato córneo muerto o dañado más externo. La
presencia de un medio adecuado en la piel del huésped
(calor y humedad) es un factor de importancia crítica en el
desarrollo de una dermatofitosis. Una vez que la infección se
ha establecido en el estrato córneo, existen factores que
determinan el tamaño y duración de la lesión, determinados
por dos factores: el índice de desarrollo del hongo y el índice
de renovación epidérmica. El índice de desarrollo micótico
debe ser igual o exceder al índice de renovación epidérmico,
o el microorganismo será eliminado. La respuesta
inflamatoria a nivel del borde de la lesión, estimularía un
aumento del índice de renovación epidérmica, en un intento
de eliminar los microorganismos invasores, mientras que los
dermatofitos situados más lejos mantienen la infección
(configuración anular). La afinidad de los dermatofitos por la
queratina es la condición básica de su existencia, teniendo
afinidad de acuerdo a la especie por diferentes tipos de
queratina. (Trichophyton rubrum ataca piel lampiña y uñas,
raramente pelo. La producción de enzimas como las
queratinasas, elastasas y otras enzimas proteolíticas,
juegan un papel en la patogénesis de la infección clínica, así
como del papel del húesped ante la infección8.

17
2.2.4 TIÑA DE LA CARA8.
Definición La tiña de la cara (Tiña facial, tiña faciei, tiña faciale), es
una infección superficial por dermatofitos limitada a la piel glabra
de la cara. En los pacientes pediátricos y mujeres, la infección
puede aparecer en cualquier superficie de la cara, incluyendo el
labio superior y mentón.

2.2.4.1 Etiología
Los agentes causantes varían según la región geográfica. La
tiña de la cara puede deberse a Trichophyton rubrum,
Trichophyton mentagrophytes, Microsporum canis y
microsporum nanum. En general, los reservorios animales
de dermatofitos zoofílicos, especialmente Microsporum
canis son de alcance universal entre los animales
domésticos y ganado. Trichophytom mentagrophytes y
Trichophyton rubrum son comunes en Asia. En contraste
Trichophyton tonsurans es el pricipal agente en el Norte de
América.
2.2.4.2 Tratamiento
El tratamiento de la tiña de la cara se realiza principalmente
con agentes tópicos, con propiedades fungicidas o
fungistáticas. Se recomienda prolongar el tratamiento
durante algunos días más, una vez que se ha confirmado la
cura clínica. Los antimicóticos tópicos recomendados son los
imidazólicos y la terbinafina. El tratamiento antimicótico
sistémico está indicado en casos de resistencia o extensos.

2.2.4.3 TIÑA DEL CUERPO8.


Definición La tiña del cuerpo (tiña corporis, tiña circinada, herpes
circinado, tiña de la piel lampiña), es la infección superficial de la
piel lampiña (glabra, sin pelo), tórax, abdomen y miembros por
dermatofitos, excepto las ingles, palmas y plantas.

18
2.2.4.4 Etiología
Todas las especies de dermatofitos pertenecientes a los
géneros Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton son
capaces de provocar tiña corporis. Los agentes causales
más frecuentemente implicados son: M. canis, T. rubrum y
T. mentagrophytes. Menos frecuentemente M. audouinii, T.
verrucosum, T. tonsuran y E. floccosum.
2.2.4.5 Epidemiología
La tiña corporis es la variedad topográfica más frecuente de
todas las tiñas, es un padecimiento cosmopolita, aunque se
observa más en climas calurosos y húmedos. Afecta a
personas de todos los grupos de edad, siendo la prevalencia
más alta en preadolescentes. La tiña corporis adquiridos por
contacto con los animales domésticos es más común en
niños. La tiña corporis secundaria a la tiña capitis suele
ocurrir en niños porque la tiña capitis es más común en esta
población.
2.2.4.6 Clínica
La presentación clínica más frecuente consiste en placas
circulares eritematoescamosas con bordes de progresión
elevados, que crece en forma excéntrica, y un centro más
pálido, que representa la resolución de la infección. Las
lesiones pueden ser únicas o múltiples, pudiendo confluir
una con otras, puede aparecer en cualquier parte del cuerpo.
El prurito y el grado de inflamación son variables.
2.2.4.7 Tratamiento
En el caso de lesiones aisladas, la medicación tópica sola es
muy eficaz. Se emplean los agentes imidazólicos tópicos, la
terbinafina tópica o la amorolfina tópica. En caso de lesiones
más diseminadas o inflamatorias se utilizan la grisiofulvina,
terbinafina, itraconazol, fluconazol o ketoconazol vía oral.

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2.2.5 Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
2.2.5.1 Descripción botánica
Planta anual suculenta, lampiña y arbustiva según la
variedad, con tallos trepadores o rastreros que se expanden
alrededor del centro. Posee hojas orbiculares, ligeramente
lobulado o peltadas con el limbo entero, fuertemente
divididas con una notable venación, tienen de 4 a 10 cm de
diámetro; largos pecíolos, encogidos en espiral. Pétalos
enteros, unguiculados, los tres inferiores más angosto, con
las uñas laciniadas. Flores tubulares rojizas, anaranjadas o
amarillas, abiertas al final en forma de trompeta, de 3 a 4 cm
de diámetro; cáliz amarillento, prolongado hacia atrás en un
espolón de 2 a 3 cm de largo; fruto subcarnoso, de 1 - 1,5
cm de diámetro, depreso globoso, con tres ángulos
redondeados. Florece desde la primavera hasta el otoño y
se reproduce por gajos y semillas. Existen variedades
enanas, dobles, etc.9.

2.2.5.2 Clasificación taxonómica9.

Reino: PLANTAE
Filo: MAGNOLIOPHYTA
Clase: MAGNOLIOPSIDA
Orden: GERANIALES
Familia: TROPAEOLACEAE
Género: Tropaeolum
Especie: Tropaoelum majus L
Nombre común: Mastuerzo
2.2.5.3 Hábitat y distribución9.

Es nativa de la región Andina de Sudamérica, más


precisamente de Perú. Se distribuye en Colombia, Ecuador
y Perú, puede resultar invasiva, compitiendo con la flora
propia del área.

20
Esta planta ha sido cultivada desde épocas prehispánicas y
se desarrolla de manera silvestre en las vertientes
occidentales andinas, así como en jardines, campos
agrícolas y matorrales en los que ha intervenido el hombre,
aunque esta planta es susceptible de invadir áreas naturales
compitiendo con la flora propia del área.

2.2.5.4. Propagación9.
El mastuerzo es una planta fácil de cultivar debido a su
rusticidad. Se reproduce por medio de semillas, aunque
también puede hacerlo en menor medida vegetativamente,
rebrotando cada año de las raíces tuberosas. Su polinización
es entomófila, es decir, por medio de mariposas.
2.2.5.5. Partes utilizadas 9.
Se utilizan generalmente toda la planta, sus hojas, flores,
frutos; excepto sus raíces.

2.2.5.6. Composición química9, 10.


 Flavonoides como quercetina, isoquercetina, luteína,
kaempferol, zeaxantina.
 Glucotropaelósido, se trata de un heterósido sulfurado o
glucosinolato. Se descompone de glucotropaeolina o
isocianato de bencilo (tiocionato del aparato respiratorio).
 Ácido clorogénico, taninos, sales minerales, ácido oxálico,
espilantol.
 Ácidos fenólicos como el ácido p – hidroxibenzoico, ácido p
– hidroxifenilacético, ácido vanilico, ácido gentisico, ácido
cafeico, ácido protocatequico, ácido siringico, p – cumarico.
 Ácidos grasos como el ácido erúcico, ácido oleico y linoléico.
 Ácidos esenciales con heterósidos sulfurados
(glucotropeolósido), que liberan isotiocianato de bencilo.
 Antocianidinas como delfinida, cianidina, pelargonidina.
 Triterpenos tetracíclicos aislados de las hojas.
 Ácido ascórbico e isoquercitrósido presente en las hojas.
 Helenina y mirosina contenidos en las flores.

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 Pigmentos como la sorbusina, carotenoides, resinas y
pectinas.
 Presenta un alto contenido de vitamina C.
2.2.5.7 Usos terapéuticos

El mastuerzo se ha utilizado desde la antigüedad en la


medicina popular en infecciones de las vías respiratorias
como en casos de faringitis, sinusitis y especialmente en
bronquitis ya que fluidifica la expectoración. Es usado en
infecciones de las vías urinarias como cistitis y pielonefritis.
Debido a sus propiedades antibióticas, resulta un excelente
desinfectante, ideal para limpiar heridas superficiales9.

2.2.5.8 Mecanismos de Acción

Isotiocianato de benzilo: Su efecto antimicrobiano consiste


en la disrupción de la membrana celular por inhibición de
enzimas esenciales10.

Taninos: Tras una hidrólisis ácida liberan una antocianidina.


Químicamente se trata de polímeros de flavanoles su
función antimicrobiana se debe básicamente a que se priva
del medio idóneo a los microorganismos evitando así su
desarrollo y multiplicación10.

2.2.5.9 Toxicidad
Las semillas son la parte más tóxica de la planta, se
recomienda evitar su administración oral. El principio activo
tóxico principal es un aceite esencial glucósido llamado
tiocianato de bencilo o glucotropaeolina; sin embargo
ingerido en dosis terapéuticas se le atribuyen propiedades
bacteriostáticas, virustaticas y antimicóticos, aplicado
tópicamente presenta actividad hiperémica10.

22
Estudios de extractos acuosos e hidroetanólicos de hojas y
corteza de Tropaeolum majus en ratones, a dosis de: 625,
1250, 2500 y 5000 mg/kg, no mostraron signos de toxicidad,
como muerte, depresión, excitación, convulsiones,
salivación, piloerección, lacrimación, anormalidades en la
defecación o efectos sobre la respiración y la locomoción11.

Por otro lado en un estudio sobre el efecto del extracto


hidroetanólico de hojas de Tropaeolum majus L. en el
desarrollo embrionario cuando se administra dosis de 300
mg/kg a ratas gestantes, aumentó significativamente los
niveles séricos de dehidroepiandrosterona (DHEA) y de
estradiol. El aumento de la concentración de esta hormona
puede estar relacionada con la reducción de la implantación
de embriones en las primeras etapas del embarazo y por lo
tanto inhibirlo11.

23
2.3. Marco conceptual
Dermatofitos: son un grupo de hongos, estrechamente
relacionados entre sí, que poseen queratinasa y, por ello, son
capaces de causar infecciones en tejidos queratinizados (piel, pelo
y uñas) del hombre y animales, denominadas dermatofitosis.

Trichophyton rubrum: Es el agente causal más frecuente en tiñas


del cuerpo, de la ingle, de los pies, así como de onicomicosis.

Tiña de la cara: Tiña facial, tiña faciei, tiña faciale, es una infección
superficial por dermatofitos limitada a la piel glabra de la cara.

Agar Sabouraud: es un medio de cultivo que por sus


características funciona como medio de enriquecimiento para
hongos y que en caso de contener cloranfenicol u otro antibiótico,
se convierte en un medio selectivo para los mismos.

Antifúngico o antimicótico: toda sustancia que tiene la capacidad


de evitar el crecimiento de algunos tipos de hongos o incluso de
provocar su muerte.

Extractos Hidroalcohólicos: son extractos líquidos concentrados,


obtenidos de la extracción de una planta o parte de ella, utilizando
como solvente alcohol y agua.

In vitro: (latín: dentro del vidrio) se refiere a una técnica para


realizar un determinado experimento en un tubo de ensayo, o
generalmente en un ambiente controlado fuera de un organismo
vivo.

La Concentración mínima inhibitoria (MIC): en microbiología, es


la concentración más baja de un antimicrobiano que inhibe el
crecimiento de un microorganismo después de su incubación.

24
2.4. Hipótesis y Variables
2.4.1. Hipótesis general

El extracto hidroalcohólico de flores de Tropaeolum majus L.


(mastuerzo) tiene efecto antimicótico in vitro frente a
Trichophyton rubrum.

2.4.2. Hipótesis específica

Los principales constituyentes químicos del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
(mastuerzo).son: Flavonoides, Ácidos esenciales, Taninos y
glucósidos.

2.4.3. Operacionalización de variables e indicadores

Operacionalización de las variables


Variable Dimensión Indicadores
Constituyentes Flavonoides, Ácidos
esenciales, Taninos y
químicos activos.
Independiente: glucósidos.
Extracto hidroalcohólico
5%
de las flores de
Concentración del 10%
tropaeolum majus l.
extracto. 20%
(mastuerzo).
40%
80%

Dependiente: Porcentaje de crecimiento de


Medio de cultivo
Efecto antimicótico los halos de inhibición.

25
CAPÍTULO III: MÉTODODOLOGÍA

3.1. Tipo y diseño de investigación

Experimental: porque se manipularan variables con el fin de


determinar la actividad antifúngica del extracto hidroalcohólico de
las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”.

Tipo aplicativo: evaluar el efecto el efecto antimicótico, en los


cultivos de Trichophyton rubrum evaluando la concentración
mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima fungicida (CMF)
extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
procurando identificar los componentes activos responsables de la
actividad antimicótica.

Prospectivo: realizamos la investigación hacia el futuro.


Presentamos la causa y analizamos la concentración mínima
inhibitoria (CMI) y la concentración mínima fungicida (CMF)
extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.

Transversal: estudio diseñado para medir la prevalencia de una


exposición y/o resultado en una población definida y en un punto
específico de tiempo.

3.2. Descripción del método y diseño

3.2.1 recolección y preparación del extracto hidroalcohólico de


las flores de Tropaeolum majus L. (Método lock o, 2016).
Se utilizó como material de estudio 100 g de flores color rojo
de Tropaeolum majus obtenidos de la provincia de Huaral,
región Lima, Perú; cepas clínicas de Trichophyton rubrum.

26
Método Para la obtención de extracto hidroalcohólico
se trabajó con flores exclusivamente de color rojo, para tal
fin se procedió a seleccionar las flores en buen estado, luego
Se realizó la desinfección de las flores de T. majus L.
“mastuerzo”, utilizando una solución de hipoclorito de sodio
al 10% v/v. luego se dejó secar a temperatura ambiente por
30 días, protegido de la luz, después se trituro hasta obtener
partículas finas ; luego se colocó en una solución
hidroalcohólico en una botella grande de vidrio de color
ámbar se mezcló y se dejó en reposo durante 1 semana, con
agitación diaria de un lapso de 10 minutos; transcurrido el
tiempo indicado, el preparado se colocó en dos pírex de
vidrio y se secó a una temperatura no mayo de 60°c en una
estufa durante dos horas, se realizó este procedimiento
durante 5 días.
Finalmente obtuvimos el secado total del preparado,
convertido en extracto seco liofilizado.

3.2.3. Obtención de las cepas de hongos de Trichophyton


rubrum.
Las cepas de hongos de Trichophyton rubrum, fueron
proporcionadas por el Área de Laboratorio Clínico del
Hospital Sergio E. bernales-Collique.

3.2.4. Preparación del agar Sabouraud.

 Primero se homogenizó el polvo contenido en el frasco.


 Se pesó 32,5 g de medio de cultivo y se suspendió en medio
litro de agua destilada en un balón de fondo plano,
colocando en seguida un tapón de algodón en la boca del
balón.
 Con la ayuda de una cocina eléctrica, se calentó agitando
frecuentemente hasta su ebullición y completa disolución.

27
 Se llevó a esterilizar en autoclave a 121 ºC (15 Lb de
presión) durante 15 minutos.
 Transcurrido este tiempo se retiró del autoclave y se dejó
enfriar hasta una temperatura de 45 ⁰C aproximadamente.
 Una vez obtenida la temperatura adecuada se procedió a
servir en placas Petri, un volumen de 25 mL, para que forme
una capa de 4 mm de espesor (se utilizó un total de 12
placas).
 Se dejó enfriar las placas y antes que se solidifique se
procedió a la determinación de la actividad antifúngica.

3.2.5. Determinación de la actividad antifúngica

Procedimiento para determinar la actividad antifúngica del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus
L. “mastuerzo” frente a Las cepas de hongos de
Trichophyton rubrum.

 Se emplearon 6 placas preparadas con agar Sabouraud,


separándose una placa Petri, que sirvió como placa control.
 Las otras 5 placas (a las cuales se llamaron placas
problemas 1, 2, 3, 4, 5), se agregó en orden consecutivo 5,
10, 20, 40 y 80 μL/mL a una concentración de 5%, 10%,
20%, 40% y 80% del extracto hidroalcohólico de las flores
de mastuerzo.
 Posteriormente se homogeneizó y se dejaron solidificar,
luego se procedió a la siembra del inóculo antimicótico
mediante la técnica llamada piquetes.
 Se introdujo el asa de siembra previa esterilización, en el
tubo de ensayo donde estaban las cepas de Trichophyton
rubrum y se trató de aislar.
 Posteriormente se hizo tres piquetes en cada placa petri,
incluyendo a la placa control. Terminando así la respectiva
siembra de Trichophyton rubrum.

28
 Luego se llevaron a incubar a 37 °C por 48 horas, para
finalmente leer los resultados.

3.2.6 Evaluación del efecto antimicótico in vitro del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.

La evaluación del efecto in vitro en cepas de T. rubrum se


realizara en el Laboratorio de Microbiología de la Facultad
de Ciencias de la salud de la universidad interamericana.
Para la evaluación del efecto in vitro del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. sobe
cepas de Trichophyton rubrum se utilizaran tablas de
distribución de frecuencia bidimensional con sus valores
absolutos y relativos; así mismo se utilizaran indicadores
como la media y desviación estándar para obtener los
resultados de la investigación. Para determinar si existe
diferencia en cada uno de los extractos de T. majus, se
compararan los halos de inhibición obtenidos en milímetros
mediante la prueba t de Student con un nivel de significancia
estadística de 0,05. Los datos será procesados con ayuda
de una hoja de cálculo Excel y el software statistic VER 22
(Cano et al., 2008; Rodríguez et al., 1996) (1): Enero - Abril,
2018.

3.2.7 Ensayo de marcha fotoquímica


Los reactivos utilizados para identificar alcaloides son:
reactivos de Wagner, reactivo de Popott, reactivo Mayer y,
Dragendorff, para identificar flavonoides se utilizó reactivo
de Shinoda, para identificar compuestos fenólicos se utilizó
Tricloruro férrico para identificar esteroides y/o
triterpenoides se utilizó reactivo de Lieberman Bouchar, para
identificar aminoácidos libres se usó Ninhidrina, para
azucares libres Fehling a y b y para taninos se usó gelatina.

29
3.2. Población y muestra

Población
La población estuvo constituida por todas las flores de la especie
vegetal Tropaeolum majus L. “mastuerzo”.

Muestra:
a) Muestra vegetal
Extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
“mastuerzo”.
b) Muestra microbiológica
Cepas de hongos de Trichophyton rubrum, proporcionadas por el
Área de Laboratorio Clínico del Hospital Sergio E. bernales-
Collique.

Unidad de análisis
Extracto hidroalcohólico obtenido a partir de las flores de
Tropaeolum majus L. “mastuerzo”.

3.3. Técnicas e instrumentos de recolección de datos


Instrumentos:
 Programa Básico Estadístico Excel 2010.
 Programa Estadístico Sofware I.B.M. Statistical Package for
the Social Sciences (IBM - SPSS) versión 22,0.
Técnica: observacional.

30
Instrumento N°1 para la identificación de metabolitos
secundarios en el Extracto hidroalcohólico de las flores de
Tropaeolum majus L. “mastuerzo”.
N° Reactivo Metabolito Color y/o
secundario precipitación
1 Wagner Alcaloide Marrón
2 Popoff Alcaloide Cristales
(precipitado
blanco)
3 Mayer Alcaloide Precipitado
blanco
4 Dragendorff Alcaloide Precipitado rojo
naranja
5 Shinoda Flavonoides Color rojo
naranja
6 Fecl3 Compuestos Verde, azul
fenólicos
7 Lieberman Esteroides y/o Verde, azul y
bouchard triterpenoides rojo
8 Ninhidrina Aminoácidos Rosado
libres
9 Fehling a y b Azucares Precipitado rojo
reductores
10 Gelatina Taninos Precipitado
blanco

31
Procedimiento para determinar la actividad antifúngica del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

 Se emplearon 6 placas preparadas con agar Sabouraud,


separándose una placa Petri, que sirvió como placa control.
 Las otras 5 placas (a las cuales se llamaron placas
problemas 1, 2, 3, 4, 5), se agregó en orden consecutivo 5,
10, 20, 40 y 80 μL/mL a una concentración de 5%, 10%,
20%, 40% y 80% del extracto hidroalcohólico de las flores
de mastuerzo.
 Posteriormente se homogeneizó y se dejaron solidificar,
luego se procedió a la siembra del inóculo antimicótico
mediante la técnica llamada piquetes.
 Se introdujo el asa de siembra previa esterilización, en el
tubo de ensayo donde estaban las cepas de Trichophyton
rubrum y se trató de aislar.
 Posteriormente se hizo tres piquetes en cada placa petri,
incluyendo a la placa control. Terminando así la respectiva
siembra de Trichophyton rubrum.
 Luego se llevaron a incubar a 37 °C por 48 horas, para
finalmente leer los resultados.

32
3.4. Técnicas de procesamiento y análisis de datos

Para la evaluación del efecto in vitro del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. sobe
cepas de Trichophyton rubrum se utilizaran tablas de
distribución de frecuencia bidimensional con sus valores
absolutos y relativos; así mismo se utilizaran indicadores
como la media y desviación estándar para obtener los
resultados de la investigación presentados en tablas y
gráficos. Para determinar si existe diferencia en cada uno
de los extractos de T. majus y la crema antimicótica de
Isonocazol al 1%, se compararan los halos de inhibición
obtenidos en milímetros mediante la prueba t de Student con
un nivel de significancia estadística de 0,05. Los datos será
procesados con ayuda de una hoja de cálculo Excel y el
software statistic VERSION 22 (Cano et al., 2008;
Rodríguez et al., 1996) (1): Enero - Abril, 2018.

33
CAPÍTULO IV: PRESENTACIÓN Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS

4.1. Presentación de resultados

Tabla N° 1: Actividad antifúngica in vitro del extracto


hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

Cepas de Trichophyton rubrum.


PLACA CONTROL (37 °C por 48 h)
Libre del extracto hidroalcohólico
de mastuerzo (+)
Placa control: 0 μL/mL
Cepas de Trichophyton rubrum.
PLACAS PROBLEMAS (37 °C por 48 h)
N° 01: 5 μL/mL (-)
concentración: 5%
N° 02: 10 μL/mL (-)
concentración: 10%
N 03: 20 μL/mL (-)
concentración: 20%
N° 04: 40 μL/mL (-)
concentración: 40%
N° 05: 80 μL/mL (-)
concentración: 80%

Leyenda: (-) Inhibición. (+) No inhibición.

Interpretación: Se muestra la actividad antifúngica in vitro del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
“mastuerzo” frente al hongo Trichophyton rubrum, se observó una
inhibición (-) completa en las placas donde se agregó el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo a diferentes concentraciones,
mientras que en la placa control el crecimiento del hongo fue
positivo (+).

34
Grafica N° 1: Actividad antifúngica in vitro del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

Interpretación: Se muestra la actividad antifúngica in vitro del


extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
“mastuerzo” frente al hongo Trichophyton rubrum, se observó una
inhibición (-) completa en las placas donde se agregó el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo a diferentes concentraciones,
mientras que en la placa control el crecimiento del hongo fue
positivo (+).

35
Figura N° 1: Actividad antifúngica in vitro del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

Placa problema N°1 Placa problema N°2 Placa problema N°3 Placa problema N°4 Placa problema N°5
5% 10% 20% 40% 80%

A LAS 48 HORAS:
Interpretación: Se muestra la actividad antifúngica in vitro del
extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
“mastuerzo” frente al hongo Trichophyton rubrum, se observó una
inhibición (-) completa en las placas donde se agregó el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo a diferentes concentraciones,
mientras que en la placa control el crecimiento del hongo fue
positivo (+).

36
Tabla N° 2: Actividad antifúngica in vitro del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

Cepas de Trichophyton rubrum.


PLACA CONTROL (25 °C por 15 días.)
Libre del extracto hidroalcohólico
de mastuerzo (+)
Placa control: 0 μL/mL
Cepas de Trichophyton rubrum.
PLACAS PROBLEMAS (25 °C por 15 días.)
N° 01: 5 μL/mL (-)
concentración: 5%
N° 02: 10 μL/mL (-)
concentración: 10%
N 03: 20 μL/mL (-)
concentración: 20%
N° 04: 40 μL/mL (-)
concentración: 40%
N° 05: 80 μL/mL (-)
concentración: 80%
Leyenda: (-) Inhibición. (+) No inhibición.

A LOS 15 DÍAS:
Interpretación: Se muestra la actividad antifúngica in vitro del
extracto hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L.
“mastuerzo” frente al hongo Trichophyton rubrum, se observó una
inhibición (-) completa en las placas donde se agregó el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo a diferentes concentraciones,
mientras que en la placa control el crecimiento del hongo fue
positivo (+).

37
Figura N° 2: Actividad antifúngica in vitro del extracto
hidroalcohólico de las flores de Tropaeolum majus L. “mastuerzo”
frente a Trichophyton rubrum.

Placa problema N°1 Placa problema N°2 Placa problema N°5


Placa problema N°3 Placa problema N°4 80%
5% 10%
20% 40%

A LOS 15 DÍAS:
Interpretación: En el grupo control no hubo inhibición de
Trichophyton rubrum, mientras que en los grupos problemas hubo
inhibición.

38
4.2. Discusión
La dermatofitosis representa la micosis superficial causada por un
grupo heterogéneo de hongos que tienen la capacidad de invadir
tejidos queratinizados de hombres y animales, los géneros
comúnmente involucrados en estas infecciones son Trichophyton,
Microsporum y Epidermophyton12.

En el Perú la dermatomicosis más frecuente es la onicomicosis con


un 43,6% y el agente patógeno de mayor prevalencia es el
Trichophyton rubrum con un 33,2%, siendo el responsable de las
principales consultas médicas por micosis en el pie, ingle y uñas12.

Las infecciones fúngicas, se han incrementado paralelamente al


desarrollo de la medicina moderna, frente a esta problemática, se
atribuye nuevas estrategias terapéuticas que se aplican a
diferentes situaciones clínicas. Los actuales medicamentos
antifúngicos aunque efectivos, presentan problemas o desventajas
tales como el que algunos son muy tóxicos, otros producen alergias
y algunos han provocado resistencia a los microorganismos blanco.
Esto conlleva a la reducción del número de alternativas
terapéuticas existentes, lo cual impulsa a la búsqueda de nuevas
opciones terapéuticas en el campo micológico13.

Al notar la importancia clínica del hongo Trichophyton rubrum y


ante la demanda del uso de plantas medicinales por la población,
en la presente investigación el objetivo general fue determinar el
efecto antimicótico in vitro del extracto hidroalcohólico de las flores
de Tropaeolum majus L. (Mastuerzo) frente a Trichophyton rubrum.
Para lo cual se recolectó flores de mastuerzo de la provincia de
Huaral, las que a su vez fueron trasladadas al Laboratorio de la
universidad interamericana, las flores se seleccionaron de acuerdo
a los criterios de inclusión y exclusión, posteriormente se siguió la
metodología descrita, para finalmente obtener el extracto
hidroalcohólico de mastuerzo. El efecto antifúngico de mastuerzo

39
se determinó mediante el método de dilución en agar, realizado por
Trejos E (2009), quien indica que se trata de un método en el cual
se puede determinar el efecto antifúngico in vitro de una sustancia
o fármaco a diferentes concentraciones14.
Las diferentes concentraciones con las que se trabajó en esta
investigación fueron referidas del estudio titulado Evaluación del
extracto hidroalcohólico de mastuerzo (Tropaeolum majus) en
formulación crema para el tratamiento de la dermatomicosis
causada por Trichophyton mentagrophytes en el cuy (Cavia
porcellus). Realizado por Bezada, S et. Al (2016)2.
Así mismo en esta investigación también se trabajó Las diferentes
concentraciones con las que fueron referidas del estudio titulado
“Efecto inhibitorio de los aceites esenciales de las hojas de
Origanum vulgare L. (orégano) en Sporothrix schenckii in vitro”
realizado por Carrera M y Miranda R (2011), donde emplearon el
aceite esencial del orégano a concentraciones de 1, 2, 3, 4 y 5
μL/mL en agar Sabouraud15.
Las cepas de Trichophyton rubrum fueron proporcionadas por el
área de Laboratorio Clínico del Hospital Regional Sergio E.
Bernales- collique. Analizando los resultados obtenidos en tabla N°
1, gráfica N° 1 y figura N° 1, se evidenció el crecimiento del hongo
Trichophyton rubrum en la placa control, mientras que en las placas
problemas (extracto a concentraciones de 5, 10, 20, 40 y 80
μL/mL), se observó que el extracto hidroalcohólico de las flores de
mastuerzo inhiben el crecimiento de Trichophyton rubrum.
Los resultados tienen relación en cuanto a la actividad antifúngica
in vitro en el estudio de Rivera M (2007)16, “Actividad de seis
extractos de hierbas usadas medicinalmente contra Fonsecaea
padrosoi y Sporothrix schenckii”, quien demostró que el extracto de
mastuerzo tiene actividad antifúngica in vitro sobre el hongo
Sporothrix schenckii en su forma de levadura.

CAPÍTULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

40
5.1. Conclusiones
5.2. Recomendaciones
ANEXOS
Anexo 3. Instrumento 2
Anexo 4. Testimonios fotográficos
Anexo 5. Juicio de expertos
Anexo 6. Cartas de consentimiento

41
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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(Tropaeolum majus) y tomillo (Thymus vulgaris) sobre cepa certificada de
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Veterinario Zootecnista]. Ecuador: Universidad técnica de Ambato,
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14. Trejos E. Evaluación de parámetros para pruebas de susceptibilidad


antifúngica en hongos filamentosos mediante la técnica de difusión en
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15. Carrera M, Miranda R. Efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de las
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Universidad privada Antonio Guillermo Urrelo, Facultad de Ciencias de la
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contra Fonsecaea padrosoi y Sporothrix schenckii. [Tesis para optar el
Título Profesional de Químico Biólogo]. Guatemala: Universidad de San
Carlos de Guatemala, Facultad de Ciencias químicas; [Tesis en Internet];
2007. [Citado 03 de Diciembre del 2016]. Disponible en:
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_2489.pdf

44
45
Anexo 1. Matriz de consistencia

MATRIZ DE CONSISTENCIA

EFECTO ANTIMICÓTICO IN VITRO DE UNA LOCIÓN A BASE


DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE LAS FLORES DE
Tropaeolum majus L. (MASTUERZO) FRENTE A Trichophyton
rubrum.

Problema objetivo Hipótesis


General General General
1. ¿Presentará efecto 1. Determinar el efecto 1. La loción a base del
antimicótico in vitro la antimicótico in vitro de la extracto hidroalcohólico de
loción a base del extracto loción a base del extracto flores de Tropaeolum
hidroalcohólico de las hidroalcohólico de las majus L. (mastuerzo) tiene
flores de Tropaeolum flores de Tropaeolum efecto antimicótico in vitro
majus L. (Mastuerzo) majus L. (Mastuerzo) frente a Trichophyton
frente a Trichophyton frente a Trichophyton rubrum.
rubrum? rubrum.

Específicos Específicos Específicos


1. ¿Cuáles serán los 1. Determinar los 1. Los principales
principales principales constituyentes químicos del
constituyentes químicos constituyentes químicos extracto hidroalcohólico de
del extracto del extracto las flores de Tropaeolum
hidroalcohólico de las hidroalcohólico de las majus L. (mastuerzo).son:
flores de Tropaeolum flores de Tropaeolum Flavonoides, Ácidos
majus L. (mastuerzo)? majus L. (mastuerzo). esenciales, Taninos y
glucósidos.
2. ¿Cuál será la 2. Determinar la

concentración efectiva concentración efectiva


del extracto del extracto

hidroalcohólico de las hidroalcohólico de las


flores de Tropaeolum flores de Tropaeolum
majus L. (Mastuerzo) majus L. (mastuerzo)

46
frente a Trichophyton frente a Trichophyton
rubrum? rubrum.

3. ¿Cuál será la 3. Determinar la


concentración mínima concentración mínima
inhibitoria (CMI) y la inhibitoria (CMI) y la
concentración mínima concentración mínima
fungicida (CMF) del fungicida (CMF) del
extracto hidroalcohólico extracto hidroalcohólico
de las flores de de las flores de
Tropaeolum majus L. Tropaeolum majus L.
(Mastuerzo)? (mastuerzo)
Operacionalización de las variables
Variable Dimensión Indicadores
Constituyentes Flavonoides, Ácidos
Independiente: esenciales, Taninos y
químicos activos
Loción a base del glucósidos.
Concentración del 5%
extracto hidroalcohólico
extracto. 10%
de las flores de
20%
tropaeolum majus l.
40%
(mastuerzo).
80%

Dependiente: Porcentaje de crecimiento de


Medio de cultivo:
Efecto antimicótico los halos de inhibición.

METODOLOGÍA
Enfoque Tipo Nivel
Cuantitativo Aplicado Explicativo
Diseño Población Muestra
Experimental,
Prospectivo, Trichophyton rubrum 15 placas petris con cultivos de
Transversal. Trichophyton rubrum.
Técnica Instrumento
Observación Ad hoc

47
Anexo 2. Instrumento 1

Marcha fitoquímica: Determinación de metabolitos secundarios del


extracto hidroalcohólico de las flores de tropaeolum majus l. (mastuerzo).

N° Reactivo Metabolito Color y/o Resultado


secundario precipitación
1 Wagner Alcaloide Marrón +
2 Popoff Alcaloide Cristales -
(precipitado
blanco)
3 Mayer Alcaloide Precipitado blanco -
4 Dragendorff Alcaloide Precipitado rojo +
naranja
5 Shinoda Flavonoides Color rojo naranja +
6 Fecl3 Compuestos Verde, azul +
fenólicos
7 Lieberman Esteroides y/o Verde, azul y rojo -
bouchard triterpenoides
8 Ninhidrina Aminoácidos Rosado -
libres
9 Fehling a y b Azucares Precipitado rojo +
reductores
10 Gelatina Taninos Precipitado blanco -
Leyenda: (+) presencia de metabolitos secundarios. (-) No hay presencia.

Interpretación:

48
49

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