Está en la página 1de 106
1
1

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA “Valores hematológicos de referencia en caninos ( Canis

“Valores hematológicos de referencia en caninos (Canis lupus familiaris) de la Ciudad de Cajamarca – 2012”

T E S I S

Para optar el Título Profesional de

MÉDICO VETERINARIO

Presentada por la bachiller:

BEATRIZ MILAGROS SÁNCHEZ RODRÍGUEZ

Asesor:

M.V. M. Sc. Fernando Alberto Oblitas Guayán

Cajamarca Perú

2013

BEATRIZ MILAGROS SÁNCHEZ RODRÍGUEZ Asesor: M.V. M. Sc. Fernando Alberto Oblitas Guayán Cajamarca – Perú 2013

Dedicatoria:

2
2

A Dios, por darme la oportunidad de cumplir la anhelada meta de ser Médico Veterinario. A la paciencia y el apoyo constante de mis padres, Santos Rodríguez y Teodoro Sánchez en todas las decisiones que he tomado. A mi hermanita, por su paciencia. A ti.

3
3

Agradecimientos

Un especial agradecimiento al Dr. Fernando Oblitas Guayán por su guía constante en la realización de esta Tesis, desde su formulación como proyecto hasta su culminación.

A todas las mascotas y sus propietarios que colaboraron para que este trabajo de investigación se realice.

A mis amigas que se permitieron un tiempo en sus laborares para ayudarme en el trabajo de laboratorio.

Milly

RESUMEN

4
4

Se realizó en la provincia y distrito de Cajamarca a 2650 msnm, entre los meses de setiembre a diciembre del año 2012; donde se muestrearon 120 canes clínicamente sanos, los cuales fueron separados en hembras y machos que a su vez se subdividieron en 4 subgrupos por edades (cachorros, jóvenes, adultos y geriátricos), obteniendo de ellos 3 ml de sangre recolectados mediante venopunción cefálica por sistema al vacio en tubos con EDTA, con el objetivo de establecer valores hematológicos referenciales. Los resultados de los valores sanguíneos son, sin distinción de sexo y sin diferenciar edad; número de eritrocitos (5,0 - 8,6 ×10 6 /µl), hematocrito (40 - 58%), dosaje de hemoglobina (14,5 - 23,5 gr/dl), índices hematimétricos: VCM (59,7 - 85,9 fl), HCM (21,4 - 34,8 pg.), CHCM (31,1 - 46,3 g/dl), leucocitos (6,4 - 11,2 ×10 3 /µl); los recuentos de las formas celulares de leucocitos en valores diferenciales de neutrófilos segmentados (62 - 71%), neutrófilos abastonados (0 - 4%), eosinófilos (1 - 5%), monocitos (0 - 3%), linfocitos (23 - 32%) y basófilos (0 - 0%); para los valores absolutos, neutrófilos segmentados (4,3 7,5 ×10 3 /µl), neutrófilos abastonados (0 - 0,3 ×10 3 /µl), eosinófilos (0 0,4 ×10 3 /µl), monocitos (0 0,3 ×10 3 /µl), linfocitos (1,6 - 3,2 ×10 3 /µl) y basófilos (0,0 - 0,0 ×10 3 /µl). Velocidad de sedimentación (0,3 - 2,7 mm/h) y plaquetas (130 - 200 ×10 5 /µl). Los resultados obtenidos en serie roja, serie blanca, velocidad de sedimentación, número de plaquetas son diferentes a los reportados por Gómez (1988).

Palabras claves: Cajamarca, eritrocitos, leucocitos.

ABSTRACT

5
5

This research was taken in Cajamarca city located on 2650 asl, between the months September to December 2012; where was take 120 clinically healthy dogs, were separated in males and females, and subdivided each one in 4 groups by age: puppies, young, adult and geriatrics, colleting 3 ml of blood from cephalic vein using vacutainer system with EDTA tubes, to establisher normal ranges and made references limits to blood values for Cajamarca city, including parameters of reference, for both sex and four ages. The results for erythrocytes (5,0 - 8,6 ×10 6 /µl), hematocrit (40 - 58%), hemoglobin (14,5 - 23,5 gr/dl), MCV (59,7 - 85,9 fl), MCH (21,4 34,8 pg), MCHC (31,146,3 g/dl), leukocytes (6,4 11,2×10 3 /µl), leukocytes shape: segmenter neutrophils (62 - 71%), band neutrophils (0 - 4%), eosinophils (1 - 5%), monocytes (0 - 3%), lymphocytes (23 - 32%) y basophils (0 - 0%); absolutes values: segmenter neutrophils (4.3 - 7.5 × 10 3 /µl), band neutrophils (0 - 0.3 ×10 3 /µl), eosinophils (0 - 0.4 ×10 3 /µl), monocytes (0 0,3 ×10 3 /µl), lymphocytes (1,6 3,2 × 10 3 /µl) y basophils (0,0 0,0 ×10 3 /µl). Erythrocyte sedimentation rate (0,3 2,7 mm/h) and platelets (130 200 ×10 3 /µl). The results obtained for erythrocytes, leukocytes, erythrocyte sedimentation rate and platelets are different to the reported by Gómez (1988).

Keywords: Cajamarca, erythrocytes, leukocytes.

DEDICATORIA

AGRADECIMIENTO

RESUMEN

ABSTRACT

CAPITULO I

ÍNDICE

Página

6
6

INTRODUCCIÓN

 

1

OBJETIVOS

3

1. Objetivo General

3

2. Objetivos específico

3

HIPÓTESIS

 

3

CAPITULO II

4

MARCO TEÓRICO

4

1. Eritrocitos

 

4

1.1 Morfología.

5

1.2 Metabolismo de los eritrocitos

7

 

1.2.1

Reticulocitos:

8

1.3 Eritropoyesis

8

1.4 Destrucción eritrocitaria

10

2. Volumen globular aglomerado o hematocrito (VGA)

10

2.1

Microhematocrito

11

3. Hemoglobina

 

12

4. Valores corpusculares medios:

13

4.1 Concentración media de hemoglobina corpuscular

13

 

(CMHC)

4.2 Hemoglobina corpuscular media (HCM)

14

4.3 Volumen corpuscular medio (VCM)

14

5. Leucocitos

 

14

5.1

Neutrófilos

16

5.1.1 Función

16

5.1.2 Morfología

17

7

 

a.

Neutrófilos en banda.

17

b.

Cantidad

18

5.2 Linfocitos

18

5.3 Monocitos

19

6.3.1 Función

20

6.3.2 Morfología

20

5.4 Eosinófilos

21

6.4.1 Función

21

6.4.2 Cantidad

21

6.4.3 Morfología

21

5.5 Basófilos

22

6.5.1 Función

23

6.5.2 Cantidad

23

6.5.3 Morfología

23

6.

Plaquetas

23

7. Velocidad de sedimentación

25

8. Cuadros de valores de referencia

27

 

8.1 Valores de Referencia para Cajamarca

27

Tabla N° 01

27

Tabla N° 02

28

Tabla N° 03

29

Tabla N° 04

30

Tabla N° 05

31

Tabla N° 06

31

8.2 Valores de Referencia de otros autores:

32

Tabla N° 07

32

Tabla N° 08

33

Tabla N° 09

34

Tabla N° 10

35

Tabla N° 11

35

CAPITULO III

 

36

MATERIALES Y MÉTODOS

36

1.

Localización

36

8

2.

Materiales

37

2.1 Material biológico

37

2.2 Material de campo

37

2.3 Material de escritorio

37

2.4 Material de laboratorio

37

2.5 Reactivos

38

3.

Metodología

38

3.1 Selección de muestras:

38

3.2 Obtención de muestras:

39

3.3 Del Número de Muestras

39

3.4 Parámetros hematológicos por analizar.

39

3.5 Análisis estadístico:

40

CAPITULO IV

RESULTADOS

41

CAPITULO V

DISCUSIÓN

68

CAPITULO VI CONCLUSIONES

78

CAPITULO VII

BIBLIOGRAFÍA

82

ANEXOS

85

1

CAPITULO I

INTRODUCCIÓN

La hematología veterinaria se ha convertido en los últimos años en una ciencia que interesa cada día más a los médicos veterinarios en nuestro país. Esto se debe por una parte al interés de los profesionales veterinarios por aprender, y poder valerse de una herramienta diagnóstica tan práctica como es la hematología y su aplicación en la patología clínica. Es el hemograma, el examen complementario más solicitado por los veterinarios como método de ayuda para resolver casos clínicos, realizar prequirúrgicos, monitorear quimioterapias, entre otros.

Gómez (1988), reporta un estudio cuyo objetivo principal era establecer los valores de referencia para caninos según el sexo (50 hembras y 50 machos) sin distinción de edad en la ciudad de Cajamarca. Esta información ha venido siendo usada por los profesionales Médicos Veterinarios durante sus prácticas clínicas y en el diagnóstico de diferentes alteraciones en los caninos de la ciudad de Cajamarca.

La presente investigación, pretende proporcionar una herramienta de ayuda actualizada a los Médicos Veterinarios dedicados a la práctica de animales de compañía, en el campo de la Hematología Veterinaria, haciéndose para este fin un nuevo estudio hematológico en los caninos de la ciudad de Cajamarca y usando métodos estudiados tradicionales, entendiéndose por análisis tradicional a los métodos manuales que usan cámaras de conteo como la Neubauer y pipetas de dilución. Donde los valores de referencia

2

hematológicos obtenidos en caninos de diferentes edades y sexo en el detallado de la siguiente investigación difieren de los obtenidos en la investigación hecha en el año 1988, los cuales presentan elevados coeficientes de variación.

3

OBJETIVOS

Objetivo General

Determinar los valores hematológicos de referencia en caninos (Canis lupus familiaris) de la ciudad de Cajamarca 2012.

Objetivos Específicos

Determinar los valores de referencia hematológicos: recuento de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, índices eritrocitarios: volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM), recuento de leucocitos, fórmula leucocitaria relativa y absoluta, velocidad de sedimentación y recuento de plaquetas, de acuerdo al sexo de los caninos.

Determinar los valores de referencia hematológicos: recuento de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, índices eritrocitarios: volumen corpuscular medio (VCM), hemoglobina corpuscular media (HCM), concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM), recuento de leucocitos, fórmula leucocitaria relativa y absoluta, velocidad de sedimentación y recuento de plaquetas, de acuerdo a la edad, tomando en cuenta la clasificación dada por De Lima (2001):

Cachorros (3 meses 1 año), jóvenes (1 año 3 años) , adultos (3 7 años) y geriátricos (7 años más).

HIPÓTESIS

Los valores de referencia hematológicos obtenidos en caninos de diferentes edades y sexo en el presente proyecto son diferentes a los obtenidos en la investigación hecha en el año 1988, los cuales presentan elevados coeficientes de variación.

4

CAPITULO II

MARCO TEÓRICO

1. Eritrocitos

Su función es transportar oxigeno, la cual está mediada por la presencia de hemoglobina dentro de ésta. Cuya membrana, citoesqueleto y proceso metabólico asegura la supervivencia de la célula, contra la presión de la circulación (Latimer, Mahaffey y Prasse, 2003).

Los eritrocitos también disponen de vías metabólicas (comunicación de la monofosfato hexosa y metahemoglobina reductasa) que protegen a la hemoglobina de la oxidación. La oxidación de la hemoglobina da lugar a la metahemoglobina y/o formación de corpúsculos de Heinz (Rebar, 2000).

A medida que la célula envejece, disminuye la actividad glucolítica y la célula se hace esférica. Los eritrocitos maduros pueden no tener completa dotación de hemoglobina y teñirse ligeramente por deficiencia de hierro o de proteínas (hipocromía) (Medway, 1973).

El eritrocito puede contener cuerpos Howell-Jolly, que son fragmentos de ADN nuclear redondos, picnóticos, intensamente basófilos y se producen en la cariorrexis de extrusión de los fragmentos. Se ven con frecuencia en caninos, cerdos y gatos (Medway, 1973).

El número de eritrocitos circulantes se ve afectado por cambios en el volumen plasmático, ritmo de eliminación o pérdida de eritrocitos,

5

contracción esplénica, secreción de eritropoyetina (EPO), y ritmo de producción de la médula ósea (Rebar, 2000).

Entre los factores que afectan al recuento eritrocitario, así como la concentración de hemoglobina y de otros constituyentes hemáticos, están:

la edad, el sexo, el ejercicio, estado nutricional, lactación, gestación, volumen sanguíneo, estadio del ciclo estral, raza (en los caninos de raza Akita los eritrocitos son siempre microcíticos), horas del día, temperatura ambiente, altitud y factores climáticos. (Kirk, 1997; García, 1995)

El método más empleado es el recuento en cámara cuenta glóbulos o de Neubauer, éste método tiene como limitación un alto porcentaje de error (±8%), producido por variaciones de pipetas, cámaras y la distribución de los eritrocitos en ella (Wittwer y Böhmwald, 1987).

1.1Morfología.

Los eritrocitos tienen forma de disco bicóncavo con una marcada zona central pálida y un tamaño de 6,07,0 µm (Latimer et al., 2003).

Los eritrocitos de los caninos sanos son de alrededor de 7µm de diámetro (ligeramente más grandes que los felinos que tienen de 5,5 a 6 µm de diámetro) (Cowell, 2009).

Los eritrocitos maduros en los mamíferos no contienen ADN ni ARN. Se compone de 65% de agua, 33% de hemoglobina y contiene enzimas, coenzimas, carbohidratos, y diversos minerales como son:

P, S, Zn, K, Sr, Mn, Al, Ag, U, Na, Ca, Mg, Co, HCO3, PO4, además de ADP, ATP, vitaminas, urea, acido úrico, creatina y creatinina. El estroma es un complejo de lipoproteínas que mantiene la forma de disco bicóncavo en la mayoría de los casos (Núñez y Bouda; 2007).

Los eritrocitos nucleados pueden ser más numerosos en cachorros, pero el número empieza a decrecer rápidamente dentro de la primera semana de vida y alcanzar los niveles adultos en aproximadamente uno a dos meses de edad (Feldman, 2006).

6

Los cambios en las características morfológicas de los eritrocitos, se llevan a cabo durante la madurac ión desde rubiblasto hasta eritrocito maduro. Las células se hacen más pequeñas. El núcleo se hace más pequeño y su cromatina es más agregada (Latimer et al., 2003).

En mamíferos, los reticulocitos y eritrocitos migran dentro del seno venoso de la medula ósea a través del tránsito en el citoplasma de las células endoteliales (Latimer et al., 2003).

Varias hormonas desempeñan un papel fisiológico en la regulación del tamaño del eritrocito. Esto se comprueba con lo siguiente: tanto en el hombre como en la rat a, se ha observado que la extirpación de las gónadas modifica el número de eritrocitos circulantes. Su número aumenta en caninos hembras después de la extirpación de los ovarios y disminuye en los machos castrados. La administración parenteral de la hormona respectiva al individuo castrado produce el regreso del número de eritrocitos a los niveles normales del sexo de que se trate (Schalm, 1964).

Durante el examen microscópico, la morfología de los eritrocitos se evalúa principalmente dentro de la monocapa, donde la distorsión por artefactos producidos durante la preparación y las diferencias en grosor influyen menos en la apariencia celular. Casi todas las anormalidades morfológicas significativas de los eritrocitos se pueden detectar con aumento de 40x o 50x, aunque algunas alteraciones pueden necesitar un examen adicional a mayor aumento. Tanto en canes como en gatos presentan una leve anisocitosis de eritrocitos y pueden mostrar ocasionalmente células inmaduras policromatófilas en las extensiones de sangre periférica (Cowell, 2009).

1.2 Metabolismo de los eritrocitos

El metabolismo es limitado después de la etapa de reticulocitos porque los eritrocitos maduros carecen de mitocondrias para la oxidación del metabolismo (Latimer et al., 2003).

7

El aumento primario en la producción de eritrocitos es raro (policitemia vera) pero en animales en gran altitud puede ocurrir una policitemia secundaria (Medway, 1973).

A grandes altitudes, cuando la cantidad de oxígeno del aire se encuentra muy reducida, y no hay suficient e transporte de oxígeno a los tejidos y los eritrocitos se producen tan rápidamente que su número en sangre aumenta. Lo cual hace evidente que no es la concentración de eritrocitos de la sangre lo que controla el ritmo de producción de éstos, sino su capacidad funcional para transportar oxígeno a los tejidos en relación con las demandas tisulares de este elemento (García, 1995).

1.2.1

Reticulocitos:

Los reticulocitos de la mayoría de las especies permanecen en la médula ósea por 2 a 3 días antes de liberarse, y por último maduran en la sangre periférica o en el bazo (Latimer et al., 2003).

Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros sin núcleo cuya malla reticular no es visible con coloración de Romanovsky. El can y el gato pueden tener normalmente un promedio de 0,5 a 1 % de células reticuladas en la sangre periférica (Medway, 1973).

Los reticulocitos se pueden contar hasta en 10% en canes durante los dos primeros meses de vida. Este número decrece en los niveles de sangre de canes adultos aproximadamente a partir de los 5 a 6 meses de edad (Feldman, 2000).

1.3Eritropoyesis:

En mamíferos, la eritropoyesis ocurre de manera extravascular en la medula ósea de los huesos; la cual tiene la capacidad de incrementar la eritropoyesis y la producción de eritrocitos hasta siete veces, lo cual es normal en humanos; se provee ésta estimulación si es necesaria y si los nutrientes están presentes. Esta capacidad para

8

incrementar la producción varía con la especie animal. Esto es mayor en aves y caninos; y menor en caballos (Latimer et al., 2003).

El principal factor que estimula la producción de eritrocitos es la eritropoyetina, una hormona glucoproteica circulante cuyo peso molecular es del orden de 34000 Daltons. En ausencia de eritropoyetina, la hipoxia o bie n no tiene efecto estimulante de la producción de eritrocitos, o bien su efecto es muy pequeño. Por otra parte, cuando funciona bien el sistema de la eritropoyetina la hipoxia induce un gran aumento de la producción de esta hormona que, a su vez, eleva la producción de eritrocitos hasta que desaparece la hipoxia. (Guyton, 1991; Langley 1973).

La hematopoyesis se inicia en el saco vitelino, en el hígado, en el bazo y e n la médula ósea; en ésta última se va incrementando gradualmente su actividad, y al nacimiento es el principal órgano hematopoyético. Durante la vida postnatal, en la mayoría de los mamíferos, la hematopoyesis se restringe a la médula ósea, mientras que el hígado y el bazo son usualmente inactivos, pero mantienen su potencial hematopoyético, el mismo que se activa al incrementarse las necesidades de las células sanguíneas. La médula ósea roja activa es reemplazada por la médula amarilla en animales adultos, pero la hematopoyesis activa continúa a lo largo de la vida en los huesos planos y en las epífisis de los huesos largos (Núñez y Bouda, 2007). En edad temprana, toda la cavidad medular es activa, pero en el adulto solamente en los extremos de los huesos largos, esternón, pelvis, costillas y cresta del ilion conservan tejido proliferante, mientras que el resto de la médula se llena con células adiposas y células reticulares en reposo (Medway, 1973).

En general los elementos sanguíneos son de mayor tamaño cuanto más jóvenes son los animales y se vuelven más pequeños cuando van envejeciendo, prueba de ello es la macrocitosis del feto y de los recién nacidos hasta el primer o segundo mes de edad (Schalm, 1964)

9

Los factores que afectan el hematocrito, la concentración de hemoglobina y el número de eritrocitos (Latimer et al., 2003):

a. El cambio en el aumento de eritrocitos en la circulación afecta a los tres parámetros:

- Bajos valores pueden ocurrir en anemia. Disminución en los tres parámetros pueden ser desproporcionados si el tamaño de la célula o contenido de hemoglobina por célula también está alterado.

- Incremento excesivo de eritrocitos (policitemia absoluta) causa altos valores.

- Falsos valores elevados del hematocrito ocurren con deshidratación y excitación inducida por contracción esplénica.

b. Cambios en el volumen del plasma afecta los tres parámetros, entonces, la interpretación debe ser siempre hecha con conocimiento de el estado de deshidratación del paciente:

- Deshidratación o transito de fluidos a los órganos viscerales pueden incrementar los valores.

- Sobrerehidratación con fluidos parenterales pueden causar una reducción en valores, simulando anemia.

1.4Destrucción eritrocitaria

El promedio de la vida del eritrocito en la circulación varía con la especie, en el caso del canino es de ciento diez días. A su vez, el envejecimiento de los eritrocitos está acompañado por los cambios en contenido enzimático y la estructura de la membrana celular que hace a las células menos capaces para sobrevivir y por ende sujetos a removerlos al bazo. Los eritrocitos viejos de un animal clínicamente sano son removidos desde la circulación por dos formas. Fagocitados por los macrófagos que es la vía principal. Y la otra

10

forma es la lisis intravascular con liberación de hemoglobina en el plasma, lo cual es de menor ocurrencia (Latimer et al., 2003).

2. Volumen globular aglomerado o hematocrito (VGA)

Los eritrocitos por tener una densidad específica más elevada, se puede determinar su volumen por el método del microhematocrito, cuyo principio de centrifugar es el de obtener la máxima aglomeración de los eritrocitos y que lo mínimo de plasma permane zca entre los ellos; con un pequeño error inherente (+1%) (Benjamin, 1990; Schalm 1964).

Observando desde la parte superior hasta el fondo el siguiente orden (Benjamín, 1990):

a) Plasma: capa amarillenta que se separa de las que contienen células.

b) Costra flogística: capa blanca o gris, en ocasiones gris rojiza, en la que están contenidos trombocitos (la capa gris más superior de color crema), leucocitos (capa gris), eritrocitos nucleados (cuando se encuentran presentes, producen un tinte rojizo en la capa flogística, donde pueden atraparse debido a su densidad específica, la cual es menor que la de los eritrocitos maduros).

c) Eritrocitos: capa de color rojo oscuro que se separa de la capa flogística por medio de una línea oscura producida por la reducción de la hemoglobina al contacto con los leucocitos.

Los animales muy jóvenes, debido al rápido crecimiento de su espacio vascular, tienen valores relativamente bajos de hematocrito. Debido a que los eritrocitos fetales son sustituidos por eritrocitos adultos, los animales en periodo de crecimiento inicial tienen mayor anisocitosis, policromasia y eritrocitos nucleados comparados con animales maduros (Cowell, 2009).

11

El valor de hematocrito varía ampliamente entre las especies y se halla también sujeto a variaciones en cuanto a la edad y sexo; también se observan variaciones del hematocrito entre las diferentes razas con el caso del rango de referencia del Greyhound es más alto que para otras razas 49 a 65 % y otros canes han sido determinados con incrementos fisiológicos del hematocrito como el Caniche, Boxer, Dachshund y Chihuahua (Kraft y Dürr, 2000).

El hematocrito en cachorros que se encuentra dentro de los intervalos de referencia o bajo es por una persistente reticulocitosis. Por esta razón, se podría respaldar que los canes jóvenes tengan menos porcentaje de hematocrito (Latimer 2003).

2.1Microhematocrito

Las ventajas del microhematocrito sobre el método de Wintrobe son:

1) Valores de volumen globular más exactos y constantes; 2) El tiempo necesario para todo el procedimiento es inferior a cinco minutos, y 3) La cantidad de sangre requerida es mínima, lo cual permite el empleo del método con sangre extraída por punción aun en la vena marginal de la oreja (Schalm, 1964).

La obtención del volumen globular aglomerado (VGA) mediante la prueba del microhematocrito constituye la prueba aislada más útil en hematología por la información que entrega, su facilidad, costo y exactitud. Con éste examen además del valor del VGA se obtiene una apreciación del número de leucocitos, considerando el grosor de la costra flogística; además se aprecia el índice ictérico o lipemia en el color del plasma (Wittwer y Böhmwald, 1987).

Además, el plasma obtenido por el método del microhematocrito puede ser usado para otros análisis rutinarios: concentración de proteína en plasma usando refractometría. Refiriendo que el plasma en caninos es claro, así como la fibrina plasmática también medida por refractometría. (Latimer et al., 2003).

12

3. Hemoglobina La hemoglobina absorbe oxígeno contenido en el aire de los pulmones con el que, forma oxihemoglobina, sustancia que con facilidad cede su oxígeno a los tejidos con los que entra en contacto. Y su mayor formación ocurre en la fase del eritrocito denominada normablasto ortocromático antes de la formación de reticulocito. (Kraft y Dürr, 2000).

La molécula de hemoglobina consta de protoporfirina, globina natural y hierro ferroso. Su contenido en hierro es de 0,335% o 3,35 mg/gr de hemoglobina. La capacidad de oxígeno es de 1,36 c.c. por gramo de hemoglobina (Schalm, 1964).

La hemoglobina del gato es más susceptible a la oxidación que la del canino ya que contiene un alto porcentaje de aminoácidos con sulfuros que se oxidan más fácilmente. Así, la formación de cuerpos de Heinz y la anemia hemolítica por cuerpos de Heinz se presenta con mayor facilidad en gatos que en canes (Rebar, 2000).

En el canino, el valor normal de hemoglobina generalmente aceptado es de 12 a 17 gr/µl de sangre (Schalm, 1964).

El dosaje de hemoglobina determina la cantidad de hemoglobina en gramos, presentes en un decilitro de sangre (g/dl), existen variaciones del dosaje de hemoglobina en relación al sexo y edad ya que en el canino estos valores comienzan a disminuir a partir del nacimiento, seguidas de un incremento gradual hasta los cuatro meses (Kraft y Dürr, 2000).

La absorción del hierro, sustancia importante para la formación de hemoglobina, se realiza desde la dieta, lo cual depende de la edad, especie, reservas de hierro, capacidad de eritropoyesis, inflamaciones y preñez, como también la cantidad y la forma química ingerida. Un pequeño porcentaje de hierro en la dieta es absorbido en animales adultos normales. La absorción del hierro ocurre a través de los enterocitos del duodeno y el yeyuno proximal. El hierro puede ser

13

tomado por los enterocitos como iones libre o como grupo heme por diferentes caminos (Harvey, 2012).

4. Valores corpusculares medios:

4.1 Concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC):

Representa la concentración media de hemoglobina en los eritrocitos (Aguiló, 2001).

Sus valores son afectados por el tamaño de los eritrocitos, de suerte que es posible hallar valores normales de HCM en los macrocitos hipocrómicos. Por eso la concentración media de hemoglobina corpuscular es una mejor medida de hipocromía (Medway, 1973).

La CMHC y la HCM, deben compararse con la morfología expuesta por un buen frotis de la misma sangre, el cual mostrará macrocitos, microcitos o hipocromía. El eritrocito no puede contener más de 36% de hemoglobina, pero puede parecer hipercrómico en un frotis si se ha convertido en esferocito y ha perdido la ordinaria palidez centra l producida por su biconcavidad (Medway, 1973).

4.2Hemoglobina corpuscular media (HCM):

Expresa el peso promedio de hemoglobina en los eritrocitos. Se obtiene dividiendo la hemoglobina por el número de eritrocitos (en millones) y se multiplica por 10 expresándose en picogramos (Aguiló, 2001).

4.3Volumen corpuscular medio (VCM):

Expresa el volumen promedio del eritrocito individual, es una forma de calcular el tamaño del eritrocito (Benjamin, 1990).

El VCM nos puede indicar la presencia de macrocitosis y microcitosis, se puede apreciar a partir del examen microscópico de una extensión en lámina porta. También se puede calcular a partir del hematocrito y el recuento de eritrocitos (Aguiló, 2001).

14

5. Leucocitos Son unidades móviles del sistema retículo endotelial, se forman en parte en la médula ósea (granulocitos), y en parte en los d iversos órganos linfógenos, incluyendo ganglios linfáticos, bazo, timo, amígdalas y diversos restos linfáticos del intestino (linfocitos y monocitos), pero después de producidos son transportados por la sangre a diferentes partes de la anatomía, donde ejercerán sus funciones. El valor fundamental de los leucocitos consiste en que, son transportados específicamente a zonas donde hay inflamación intensa, proporcionando así una defensa rápida y enérgica contra cualquier posible agente infeccioso (Guyton, 1991).

Para los caninos, suelen presentarse grandes fluctuaciones en el recuento de leucocitos, como en el caso de la edad ya que el recuento de leucocitos en el cachorro recién nacido tiene una cuenta leucocítica relativamente alta (16.5 × 10 3 /µl) que disminuye rápidamente durante los primeros días de vida y comienza a incrementarse a partir de la primera semana después del nacimiento, y hasta aproximadamente los sesenta días de vida, para después estabilizarse, siendo el incremento en base a los linfocitos, lo que se cree que está relacionado con la formación de anticuerpos. Disminuye en la segunda semana de edad, posterior presenta un incremento gradual, la cuenta leucocítica disminuye con la edad a una media de 13 ×10 3 /µl a los sesenta días hasta una media de 10 ×10 3 /µl a los cuatro años y medio de edad. En lo que respecta a la raza, en el canino se describen variaciones, como la neutropenia cíclica del Collie Gris plateado, la eosinofilia del Pastor Alemán y la basofilia en el Basenji joven. En cuanto al sexo y estado fisiológico se encuentra una eosinofilia de la perra en celo y una leucocitosis marcada durante la preñez y una gran variedad de otras condiciones. Por tanto, los recuentos totales de leucocitos para que sean significativos clínicamente, deben desviarse considerablemente de los valores normales al objeto de que un clínico pueda valorar un proceso de enfermedad (Wittwer y Böhmwald, 1987; Benjamin, 1990; Serrano, 2011).

15

Para el recuento se ha empleado el método de la cámara de Neubauer, método simple, pero que tiene un coeficiente de variación muy amplio (±12%) (Wittwer y Böhmwald, 1987).

En caninos, gatos y caballos usualmente tienen más neutrófilos que linfocitos en sangre. A diferencia que, los linfocitos son usualmente más numerosos en cerdos, cabras y ovejas, roedores. El número de neutrófilos y linfocitos cambian con la edad después del nacimiento. El número de neutrófilos a linfocitos tienen a ser más alto al nacimiento que luego, en parte por el incremento de cortisol en sangre al nacimiento. El cortisol causa en la circulación el incremento de neutrófilos y la disminución del número de linfocitos. Dentro de una semana, el número de neutrófilos disminuye y el número de linfocitos son iguales. Y a las tres semanas el número de linfocitos es superior a los neutrófilos (Harvey, 2012).

El número bajo de monocitos, eosinófilos y basófilos están presentes en mamíferos normales. El número de basófilos son especialmente bajos en caninos y gatos, incluso no son vistos en animales sanos (Harvey, 2012).

A diferencia de los eritrocitos, los leucocitos no están expuestos a un

promedio de vida en sangre, sino que responden en forma aleatoria de acuerdo a una estimulación quimiotáctica. A excepción de de los

linfocitos que recirculan, esto hizo pensar que los leucocitos no retornan

a la circulación después de la migración a los tejidos. Pero existe

evidencia que algunos eosinófilos regresan a la circulación vía linfática y que, en ausencia de inflamación, algunos monocitos pueden retornar de

la médula ósea (Harvey, 2012).

5.1Neutrófilos

Los neutrófilos son producidos en la medula ósea, se liberan a la sangre, circulan brevemente (vida media de 5 a 10 horas), y migran a los espacios tisulares o a las superficies epiteliales como las que existen en el sistema respiratorio, digestivo o urogenital. La

16

producción es continua para abastecer la constante demanda de neutrófilos en los tejidos y para mantener un compartimiento (“pool”) circulante en la sangre (Rebar, 2000; Harvey, 2012).

La medula ósea precisa aproximadamente de 4 a 6 días para la formación de nuevos neutrófilos, y es capaz de mantener en reserva el aporte de neutrófilos maduros para cinco días (Rebar, 2000).

5.1.1 Función

Los neutrófilos constituyen la principal defensa contra la invasión de los tejidos por microorganismos. Los neutrófilos eliminan bacterias pero también pueden dañar o participar en la destrucción de hongos o virus (Rebar, 2000).

Los neutrófilos se congregan en los puntos donde se produce inflamación o infección bacteriana por un proceso de migración direccional o quimiotaxis (Rebar, 2000).

5.1.2 Morfología

Los neutrófilos circulantes normales presentan las siguientes características (Rebar, 2000):

Tamaño: 12 - 15 µm en diámetro.

Núcleo lobulado o parcialmente segmentado con cromatina densa de coloración purpura oscuro. Citoplasma rosa pálido o azul claro, finamente granular, liso.

5.1.3 Variaciones de la morfología normal

Si la sangre está un tiempo excesivo en EDTA antes de realizar las extensiones se pueden producir artefactos en el citoplasma, como la presencia de algunas vacuolas pequeñas y pálidas. Los neutrófilos presentan 2 a 4 lobulaciones nucleares. La presencia de cinco o más lobulaciones indican hipersegmentación, un cambio de

17

envejecimiento, que se produce tras una exposición prolongada a EDTA, terapia con glucocorticoides, hiperadrenocorticismo, o

neutrofilias asociadas con infecciones crónicas (Rebar, 2000).

a. Neutrófilos en banda

Los Neutrófilos en banda, que se pueden ver en bajo

número de sangre periférica de caninos y gatos sanos, tienen un núcleo alargado o ligeramente retorcido con

formas en U o J y con menos condensación de cromatina que los Neutrófilos maduros. La lobulación nuclear está

5.1.4

ausente o pobremente definida (Cowell, 2009). Cantidad

El número de neutrófilos cuantificados en el hemograma depende de los cambios en la producción y liberación por la

medula ósea, el intercambio entre el compartimiento marginal y circulante, y/o el ritmo de migración tisular (Rebar, 2000).

5.2Linfocitos

Los linfocitos circulantes son muy numerosos en animales jóvenes y declinan al aumentar la edad. El linfocito de vida larga es la principal

célula de los ganglios linfáticos (Medway, 1973).

Varían de tamaño en sangre periférica de canes y gatos, con predominio de células pequeñas. Algunos linfocitos tienen unos pocos

gránulos citoplasmáticos variables en tamaño que suelen estar concentrados dentro de una única área celular perinuclear (Cowell, 2009).

A la vista microscópica se distinguen los pequeños linfocitos y los grandes linfocitos. Un núcleo de cromatina obscura en forma de

grumos que se tiñen de azul (Medway, 1973).

La designación de linfocitos pequeños, de tamaño medio y grande, carecen de significado biológico. La mayoría de los linfocitos de la

corriente sanguínea son del tipo pequeño, generalmente de unos 6 a

18

9 µm de diámetro, con un núcleo grande y denso rodeado por un ribete de citoplasma azul pálido. Frecuentemente el núcleo presenta una pequeña hendidura en uno de los lados. Los grandes linfocitos (de 12 a 15 µm de diámetro), tienen mucho más citoplasma y el núcleo es menos denso que el de los pequeños linfocitos; y pueden existir gránulos azurófilos en la hendidura nuclear (Delman, 1993).

El citoplasma forma un ribete azul alrededor del núcleo y puede estar restringido a un lado. En la sangre periférica pueden aparecer formas más jóvenes de la serie linfocítica, semejantes en tamaño a los grandes linfocitos (Medway, 1973).

El recuento de linfocitos relativamente elevados también es común en animales jóvenes y hay que sospechar de linfopenia en gatitos y cachorros menores de 6 meses de edad cuando el recuento está por debajo de 2000 células/µl. Las elevaciones transitorias de los linfocitos por encima de los rangos de referencia son normales en animales excitados o que han hecho ejercicio intenso, sobre todo si son jóvenes. Esta respuesta inducida por la adrenalina también puede resultar en un incremento temporal en sangre periférica de otros tipos de leucocitos en pacientes sanos. Al menos en una raza canina, el galgo, los valores hematológicos se salen ligeramente de los rangos de referencia usados normalmente para la especie. Aunque esto es una situación habitualmente fisiológica que hay que considerar, explica menos del 5% de los valores fuera de rango para un solo parámetro hematológico (Cowell R., 2009).

5.3Monocitos

Se originan en la medula ósea. A diferencia de los granulocitos, se liberan a la circulación periférica todavía como células inmaduras y se transportan a los tejidos en donde pueden diferenciarse en macrófagos, células epiteloides, o células inflamatorias gigantes multinucleadas (Rebar, 2000).

19

No existe un compartimento de almacenamiento medular para los monocitos. Los monocitos y sus precursores (monoblastos, promonocitos) se encuentran en un nú mero bajo y puede llegar a ser difícil identificarlos (Rebar, 2000).

5.3.1 Función

La evolución continua de monocito a macrófago representa la segunda línea de defensa del sistema fagocítico circulante (los neutrófilos constituyen la primera). Las funciones específicas del macrófago incluyen: fagocitosis, regulación de la respuesta inflamatoria por medio de la liberación de mediadores inflamatorios (factores quimiotácticos, prostaglandinas, complemento, etc.) (Rebar, 2000).

5.3.2 Morfología

Los monocitos caninos y felinos son más grandes que los neutrófilos y de tamaño similar a los eosinófilos y basófilos. El núcleo varía enormemente en morfología, adoptando desde formas alargadas en “U”, que recuerdan a los neutrófilos en banda, a formas multilobuladas irregulares. La cromatina nuclear de los monocitos es generalmente distinta tanto de granulocitos maduros como inmaduros, y tienen forma de cordón, con solo unos pocos agregados aislados de heterocromatina (Cowell, 2009).

De acuerdo a su tamaño, relativamente grande, los monocitos se pueden concentrar a lo largo del borde difuminado, y su proporción en el recuento diferencial de leucocitos en la extensión sanguínea puede ser infraestimado (Cowell, 2009).

Los monocitos circulantes presentan las siguientes características: de un tamaño de 15 - 20 µm, con núcleo en forma irregular, cromatina ligeramente reticulada, citoplasma abundante, de gris a azul grisáceo. Debido al manejo de la

20

muestra pueden producirse variaciones en la morfología normal. Los monocitos de extensiones realizadas a partir de la sangre fresca sin anticoagulante suelen ser redondos y no contienen vacuolas citoplasmáticas (Cowell, 2009).

Los monocitos, de extensiones realizadas a partir de sangre con EDTA suelen presentar los márgenes regulares con pseudópodos y contienen vacuolas citoplasmáticas (Rebar, 2000).

5.4Eosinófilos

Los eosinófilos se producen en la medula ósea de una forma similar a los neutrófilos. Son reconocibles en el estadio de mielocitos por la presencia de gránulos eosinófilos específicos (Rebar, 2000).

5.4.1 Función

Constituyen el principal componente de las reacciones de hipersensibilidad sistémicas. Cuando los antígenos de parásitos o alérgenos se unen a las IgE específicas de los mastocitos, estimulan la degranulación de éstos y se libera así histamina que atrae a los eosinófilos. Son los principales responsables en eliminar trematodos y nematodos que presenten IgG o complemento unido a su superficie. Tienen también una capacidad fagocítica o bactericida limitada y pueden desempeñar cierto papel en la destrucción de células neoplásicas (Rebar, 2000).

5.4.2 Cantidad

El nú mero de eosinófilos presentes en la circulación refleja el equilibrio existente entre producción medular y demanda o consumo tisular. Una amplia variedad de enfermedades se caracterizan por una marcada respuesta inflamatoria eosinofílica en el tejido. Existe una considerable variación de los intervalos de normalidad para eosinófilos según el área

21

geográfica. Siempre que sea posible es preferible emplear los valores de referencia generados de animales residentes en la región (Rebar, 2000).

5.4.3

Morfología

Los eosinófilos, son ligeramente más grandes con un tamaño de 12-20 µm de diámetro, parecido o ligeramente mayor que un neutrófilo, se encuentran normalmente en números muy bajo en las extensiones sanguíneas de caninos y gatos sanos. Existiendo diferencias morfológicas marcadas entre los eosinófilos de las diferentes especies (Rebar, 2000).

Su núcleo es segmentado, pero suele ser menos lobulado que el de los neutrófilos y normalmente se divide únicamente en dos lóbulos bien diferenciados. El citoplasma de los eosinófilos contiene gránulos prominentes de color naranja a rosa. Y, en ocasiones, el eosinófilo canino puede contener un único gránulo grande y redondo que recuerda en tamaño y color a un eritrocito. Aunque también los gránulos son de tamaño y número variable (Rebar, 2000, Cowell, 2009).

5.5Basófilos

Los basófilos se producen en la medula ósea y comparten con los mastocitos una célula progenitora común. Los basófilos no se desarrollan hasta formar un mastocito, pero los dos tipos celulare s presentan funciones similares (Rebar, 2000).

Los basófilos inmaduros pueden reconocerse en el estadio de mielocito por sus característicos gránulos secundarios. Éstos circulan durante unas pocas horas en la sangre y migran hacia los tejidos donde pueden permanecer durante varias semanas (Rebar, 2000).

Son las más grandes células granulocíticas maduras y son infrecuentes en la sangre periférica de caninos y gatos; raramente se encuentran en

22

frotices sanguíneos de caninos normales. Los basófilos caninos pueden carecer ocasionalmente de gránulos visibles, pero se reconocen por su tamaño, su morfología celular y su tinción citoplasmática (Feldman, 2000; Cowell, 2009).

5.5.1 Función

Los gránulos de los basófilos contienen histamina y heparina. La histamina liberada por los basófilos y los mastocitos juegan un papel primordial en la reacción de hipersensibilidad inmediata como la que ocurre en la urticaria, anafilaxis y alergia aguda. La heparina inhibe la coagulación, con una importante función en la inflamación (Rebar, 2000).

5.5.2 Cantidad

Los basófilos constituyen un porcentaje muy bajo en la población total de leucocitos circulantes. En muchos caninos y gatos, raramente se llegan a observar basófilos en un recuento diferencia manual de leucocitos (Rebar, 2000).

5.5.3 Morfología

El basófilo canino, tiene un tamaño de 12 20 µm en diámetro, similar o ligeramente mayor que un neutrófilo (Rebar, 2000).

El núcleo de los basófilos aparece en el examen microscópico menos densamente teñido y tiene menos lobulaciones y más alargadas, con apariencia de cinta. El citoplasma es moderadamente azul grisáceo a ligeramente morado y normalmente contiene gránulos. En los caninos, los gránulos basófilos son menores en número y con tinción de azul oscuro a metacromática. (Cowell, 2009)

23

6. Plaquetas

Las plaquetas se constituyen a partir del citoplasma de los megacariocitos mediante la formación de una estructura conocida com o proplaqueta, esta estructura se fragmenta en múltiples plaquetas. Las plaquetas resultantes son células pequeñas de forma discoide que no tienen núcleo y poseen citoplasma rosado con presencia ocasional de gránulos púrpura. (Nuñez y Bouda, 2007)

Las plaquetas aparecen en gatos y caninos de forma oval, redonda o con forma de bacilo en las preparaciones de sangre periférica. Su citoplasma, va de color gris claro a pálido, habitualmente ante la coloración tienen un agregado central de gránulos eosinofílicos a metacromáticos. Las plaquetas varían en tamaño desde alrededor de un cuarto a dos tercios de diámetro de un hematíe en la sangre canina y en la sangre felina, pueden ser incluso más grandes en algunas ocasiones. Las plaquetas parcialmente activadas tienen una apariencia como de araña con unos finos procesos citoplasmáticos que se extienden desde un pequeño cuerpo celular esférico. Las plaquetas también pueden aparecer agregadas o aglutinadas en una masa amorfa en las preparaciones, un hallazgo particularmente común en las extensiones de sangre felina. Las plaquetas agregadas y aglutinadas suelen ser empujadas hacia el borde difuminado, lo que puede resultar en una falsa impresión de trombocitopenia si solo se examina la monocapa de la preparación (Cowell, 2009).

Las plaquetas son totalmente funcionales desde el nacimiento y su número es similar al de los adultos (Serrano, 2001).

La reserva de trombocitos es muy limitada en los caninos. La extracción de todos los trombocitos de dos a tres volúmenes totales de sangre termina en grave trombocitopenia. Dos o tres días después de la depleción se nota aumento progresivo en los trombocitos y este continúa hasta que se alcanzan los niveles normales seis o siete días después.

24

Los trombocitos son extraídos de la circulación por las células reticuloendoteliales. Mantienen la integridad capilar ocluyendo pequeñas rupturas en las paredes vasculares (Medway, 1973).

A veces las plaquetas aparecen en masas. Si se sobreponen a un eritrocito pueden confundirse con un parásito del glóbulo rojo. Como estas partículas de citoplasma son fragmentos desprendidos por gemación del megacariocito, se presentan con gran variación en forma y tamaño (Medway, 1973).

En los extendidos sanguíneos de la mayoría de los animales domésticos normalmente tienen un promedio entre 10 a 30 plaquetas bajo el objetivo de 100X. El número de plaquetas puede estimarse multiplicando el promedio por 15,000 o 20,000 para conseguir el número aproximado de plaquetas por microlitro de sangre. (Harvey, 2012)

El recuento indirecto de plaquetas en un frotis teñido, se considera una técnica inexacta, pero más práctica y útil en clínica. Puesto que normalmente se requiere de una estimación, lo que se puede hacer al mirar el frotis cuando se realiza la fórmula diferencia l de leucocitos, apreciando si las plaquetas están normales, aumentadas y disminuidas. (Benjamin, 1990)

7. Velocidad de sedimentación eritrocitaria:

La rapidez con que los eritrocitos se precipitan y forman una masa de eritrocitos sedimentados, dejando sobre ellos un plasma transparente, depende de la especie animal estudiada (Medway, 1973).

La propensión de las células a formar agregados aumenta la velocidad de sedimentación. Esta tendencia se ve cuando hay infección aguda generalizada o considerable destrucción de tejido por la inflamación o por neoplasma. La aglomeración de las células hemáticas reduce el área superficial de la masa celular. A la vez aumenta la cantidad de fibrinógeno y de globulinas. En la hipercolesterolemia y en la preñez es

25

donde se encuentra aumentada la velocidad de sedimentación. Los eritrocitos pequeños (microcitos) tienen menor velocidad de sedimentación que los macrocitos. Se ha observado que los macrocitos son con frecuencia reticulocitos y que éstos y los eritrocitos nucleados no se aglomeran (Medway, 1973).

El índice de sedimentación debe interpretarse junto con el volumen de eritrocitos conglomerados (VGA). La sedimentación lenta es de esperar cuando es grande la masa de eritrocitos, porque el exceso de células dificulta el movimiento del plasma. Las grandes velocidades de sedimentación se ven en las anemias, que también pueden mostrar sedimentación difásica. Y la determinación de la velocidad de sedimentación no es específica y tiene aplicación clínica al caballo, al canino y al gato. Cuando la sedimentación de los eritrocitos es rápida, indica un proceso patológico y el valor de la velocidad de sedimentación es en cierto grado una medida de la gravedad de la enfermedad (Medway, 1973).

El número de eritrocitos por unidad de volumen de sangre, así también cuando el hematocrito está aumentado tienen influencia sobre la velocidad de sedimentación. Esta es inversamente proporcional al número de eritrocitos. Por lo tanto, cuanto menor sea el número de eritrocitos en condiciones de salud varían mucho, y en un mismo animal el número de células por unidad de volumen sanguíneo es diferente de un día a otro, según el estado del equilibrio hídrico, es importante comparar la velocidad de sedimentación observada con la que corresponde al volumen globular del caso correspondiente (Schalm, 1964; Benjamin, 1990).

Cuando hay numerosos reticulocitos o formas inmaduras de eritrocitos se advierte en la prueba de la sedimentación. Los reticulocitos no entran en la formación de pilas globulares y, por lo tanto, se distribuyen en la zona plasmática (Schalm, 1964).

26

8. Cuadros de valores de referencia

8.1 Valores de Referencia para Cajamarca

Tabla N° 01:

Valores hematológicos de la serie roja encontrados en 50 caninos hembras de la ciudad de Cajamarca (Gómez, 1988)

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Eritrocitos (10 6 /uL)

6,4

0,85

13,29

4,89 8,69

Hemoglobina (g/dl)

15,02

2,09

13,92

12,1 18,8

VEE. (L/L)

0,43

0,04

11,24

0,36 0,54

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN

 

(mm/30 minutos)

2,17

2,32

106,9

0 8

(mm/60 minutos)

5,58

4,68

83,94

1 18

VALORES HEMATIMÉTRICOS

 

V.C.M. (fl.)

67,81

3,85

5,69

61 75,6

H.C.M (pg.)

23,4

1,41

6,03

21,2 26,3

C.H.C.M. (g/dl. de ery.)

64,65

1,42

4,10

31,6 36,8

Donde:

VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados D.S.: Desviación estándar C.V.: Coeficiente de variabilidad V.C.M.: Volumen corpuscular medio H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media

27

Tabla N° 02: Valores hematológicos de la serie roja encontrados en

50 caninos machos de la ciudad de Cajamarca (Gómez, 1988)

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Eritrocitos (10 6 /uL)

6,7

1,01

15,18

5,2 8,6

Hemoglobina (g/dl)

15,38

2,97

19,32

11,0 18,8

VEE. (lt/lt)

0,44

0,05

12,43

0,36 0,52

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN

 

(mm/30 minutos)

1,22

1,32

108,6

0,0 4,0

(mm/60 minutos)

4,75

4,73

99,77

1,0 20,0

VALORES HEMATIMÉTRICOS

V.C.M. (fl.)

67,13

4,04

6,02

60,0 76,9

H.C.M (pg.)

23,3

1,37

5,8

20,8 26,6

C.H.C.M. (g/dl. de ery.)

34,78

1,77

5,10

30,55 36,6

Donde:

VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados D.S.: Desviación estándar C.V.: Coeficiente de variabilidad V.C.M.: Volumen corpuscular medio H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media

28

Tabla N° 03: Valores hematológicos de la serie roja encontrados en 100 caninos de ambos sexos de la ciudad de Cajamarca (Gómez, 1988)

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Eritrocitos (10 6 /uL)

6,5

0,94

14,47

4,89 8,69

Hemoglobina (g/dl)

15,29

2,15

14,12

9,65 18,8

VEE. (lt/lt)

0,44

0,05

11,78

0,36 0,54

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN

 

(mm/30 minutos)

1,69

1,94

115,23

0,36 0,54

(mm/60 minutos)

5,00

4,46

89,25

1,00 20,0

VALORES HEMATIMÉTRICOS

V.C.M. (fl.)

67,47

13,16

19,50

60,0 76,9

H.C.M (pg.)

23,3

1,38

5,97

20,8 26,6

C.H.C.M. (g/dl. De ery.)

34,71

1,37

3,95

30,55 36,6

Donde:

VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados D.S.: Desviación estándar C.V.: Coeficiente de variabilidad V.C.M.: Volumen corpuscular medio H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media

29

Tabla N° 04:

Valores de las constantes hematológicas de la serie blanca en 50 caninos hembras de la ciudad de Cajamarca. (Gómez, 1988)

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Leucocitos (mil/µl)

16,53

3,85

23,20

9,65 24,15

Neutrófilos abastonados

0,88

1,00

113,96

0,00 4,0

Neutrófilos segmentados

59,18

1,98

3,35

53,0 63,0

Eosinófilos

17,18

2,63

15,31

14.0 23,0

Basófilos

0,02

0,14

707,10

0,0 1,0

Monocitos

3,46

0,50

14,45

2,0 4,0

Linfocitos

19,26

2,10

10,24

16,0 23,0

Donde:

D.S.: Desviación estándar C.V.: Coeficiente de variabilidad

30

Tabla N° 05: Valores de las constantes hematológicas de la serie blanca en 50 caninos machos de la ciudad de Cajamarca. (Gómez, 1988)

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Leucocitos (mil/µl)

16,15

3,89

24,09

8,7 23,45

Neutrófilos abastonados

0,96

0,75

78,63

0,00 3,0

Neutrófilos segmentados

59,34

1,67

2,82

36,0 62,0

Eosinófilos

17,4

2,11

12,17

14.0 21,0

Basófilos

0,0

0,0

0,0

0,0 0,0

Monocitos

3,38

0,48

14,36

3,0 4,0

Linfocitos

18,88

1,59

8,46

16,0 22,0

Tabla N° 06:

Valores de las constantes hematológicas de la serie blanca de

los caninos muestreados en la ciudad de Cajamarca (Gómez,

1988).

CONSTANTES

VALORES

HEMATOLÓGICAS

PROMEDIO

D.S.

C.V. %

EXTREMOS

Leucocitos (mil/µl)

16,34

3,84

23,52

8,7 24,15

Neutrófilos abastonados

0,92

0,89

97,31

0,0 4,0

Neutrófilos segmentados

59,25

Donde:

D.S.: Desviación estándar C.V.: Coeficiente de variabilidad

31

8.2 Valores de Referencia de otros autores:

Tabla N° 07: Valores hematológicos promedio y valores de referencia

de la población total del perro sin pelo del Perú y según

sexo, tamaño y edad en las provincias de Piura, Sullana

Y Talara (Choquehuanca, 2008)

PARÁMETRO Eritrocitos Hematocrito Hemoglobina Leucocitos Plaquetas 10 6 /µl % g/dl 10 3 /µl 10
PARÁMETRO
Eritrocitos
Hematocrito
Hemoglobina
Leucocitos
Plaquetas
10 6 /µl
%
g/dl
10 3 /µl
10 3 /µl
POBLACIÓN

POBLACIÓN

 

(4.22 7.74)

(30.1 56.2)

(10.1 19.6)

(7 20.1)

(103 353)

 

TOTAL

[5.98]

[43.2]

[14.9]

[13.5]

[228]

   

(3.91 - 8.16)

(27.5-60.1)

(9.1-20.6)

(7,1-19,8)

(86-355)

 

Macho

[6.04]

[43.8]

[14.8]

13,5

[220]

SEGÚN

Hembra

(4.41-7.43

(31.7-53.4)

(10.7-19.1)

(7.5-19.7)

(131-339)

SEXO

[5.92]

[42.6]

[14.9]

[13.6]

[235]

Significancia

0.540

0.403

0.911

0.821

0.582

(p

< 0.05)

   

(4.05-8.31)

(30.1 61.3)

(10.8 20.5)

(7.9 23.3)

(91 344)

Pequeño

[6.18]

[45.7]

[15.6]

[13.1]

[217]

Mediano

(4.41 7.71)

(30.3-56.2)

(10.0-20.0)

(7.7-18.6)

(92-347)

SEGÚN

[6.06]

[43.3]

[15]

13.1

[220]

TAMAÑO

 

(4.30-7.20)

(30.7-53.4)

(10.5-18.0)

(7.3-21.9)

(99-400)

Grande

[5.75]

[42]

[14.3]

[14.6]

[249]

Significancia

0.269

0.373

0.247

0.139

0.134

(p

< 0.05)

   

(4.04-7.27)

(28.7-54.8)

(8.6-20.0)

(8.5-18.0)

(112-361)

< 1 año

[5.66]

[41.8]

[14.3]

[13.2]

[237]

1-7 años

(4.24-7.82)

(29.5-57.5)

(9.9-20.0)

(6.7-21.0)

(93-356)

SEGÚN

[6.03]

[43.5]

[14.9]

[13.9]

[224]

EDAD

 

(4.48-8.47)

(27.6-61.2)

(10.1-22.6)

(8.4-15.1)

(95-357)

> 7 años

[6.48]

[44.4]

[16.4]

[11.7]

[226]

Significancia

0.115

0.569

0.211

0.238

0.726

(p

< 0.05)

( ): Límites [ ]: Promedio

32

Tabla N° 08: Valores relativos de referencia y promedio de la formula leucocitaria diferencial de la población total del perro sin pelo del Perú y según sexo, tamaño y edad en las provincias de Piura, Sullana Y Talara (Choquehuanca, 2008)

 

PARÁMETRO

Neutrófilos

Neutrófilos

       

POBLACIÓN

 

segmentados

%

abastonados

%

Linfocitos

%

Monocitos

%

Eosinófilos

%

Basófilos

%

POBLACIÓN TOTAL

(54 87.2)

(0.3 4.6)

(10.4 32.4)

(0.8 8.1)

(0 6)

0

[70.6]

[2.4]

[21.4]

[4.4]

[3]

0

   

Macho

(53.3-88.3)

(0-4)

(9.3-33.3)

(0.2-8.9)

(2-6.7)

0

 

[70.8]

[2]

[21.3]

[4.5]

[3.2]

0

SEGÚN

 

Hembra

(52.1-88.8)

(0.7-5.3)

(9.9-32.1)

(1.5-7.2)

(0-6)

0

SEXO

 

[70.5]

[3]

[21]

[4.4]

[2.9]

0

Significancia

0.865

0.149

0.605

0.707

0.435

 
 

(p<0.05)

-

   

Pequeño

(66.6-82.2)

(0.5-7.5)

(12.2-23.9)

(1.9-6.5)

(0-6.2)

0

[74.4]

[4]

[18.1]

[4.2]

[2.5]

0

 

Mediano

(53.2-89.3)

(0.6-4.1)

(9.4-33.1)

(0.8-8.2)

(0-6.7)

0

SEGÚN

 

[71.2]

[2.4]

[21.2]

[4.5]

[3.1]

0

TAMAÑO

 

Grande

(53.4-82.8)

(0-4.3)

(9.9-34.3)

(0-8.8)

(0.5-6)

0

 

[68.1]

[2.1]

[22.1]

[4.3]

[3.2]

0

Significancia

0.795

0.258

0.313

0.862

0.587

-

 

(p

< 0.05)

   

<1 año

(49.6-93.5)

(0-5.2)

(9.8-32.5)

(0.5-8-8)

(0-6.25)

0

 

[71.5]

[2.3]

[21.1]

[4.6]

[3]

0

 

1 a 7 años

(53.5-86.9)

(0-4.6)

(10.8-32.8)

(0.6-8.2)

(0-6)

0

SEGÚN

 

[70.2]

[2.3]

[21.8]

[4.4]

[3]

0

EDAD

 

>7 años

(58.0-85.0)

(0.1-7.2)

(9.3-26.3)

(0-8.8)

(1.5-5)

0

 

[71.5]

[3.7]

[17.8]

[3.8]

[3.3]

0

Significancia

0.807

0.459

0.688

0.718

0.969

-

 

(p

< 0.05)

33

Tabla N° 09: Valores absolutos de referencia y promedio de la formula leucocitaria diferencial de la población total del perro sin pelo del Perú y según sexo, tamaño y edad en las provincias de Piura, Sullana Y Talara (Choquehuanca, 2008)

POBLACIÓN

PARÁMETRO

Neutrófilos segmentados 10 3 /µl

Neutrófilos abastonados 10 3 /µl

Linfocitos 10 3 /µl

Monocitos 10 3 /µl

Eosinófilos 10 3 /µl

Basófilos 10 3 /µl

 

(2 12.5)

(0 0.6)

(0 5.7)

(0 1.3)

(0 0.9)

0

POBLACIÓN TOTAL

 

[7.3]

[0.3]

[2.8]

[0.6]

[0.4]

0

 
 

Macho

(1.5-13.7)

(0.0-0.5)

(0-6.1)

(0-1.5)

(0-1.1)

0

[7.6]

[0.2]

[2.9]

[0.7]

[0.5]

0

SEGÚN

Hembra

(2.4-11.5)

(0-0.7)

(0-5.4)

(0.1-1.1)

(0-0.9)

0

SEXO

[7]

[0.3]

[2.7]

[0.6]

[0.4]

0

Significancia

0.296

0.248

0.372

0.333

0.182

-

(p

< 0.05)

 

Pequeño

(2.8-12.5)

(0.1-0.6)

(0-5.4)

(0.1-1.1)

(0-0.9)

0

[7.6]

[0.3]

[2.7]

[0.6]

[0.4]

0

Mediano

(2.6-11.8)

(0-0.5)

(0-5.6)

(0-1.3)

(0-1.0)

0

[7.2]

[0.3]

[2.6]

[0.6]

[0.4]

0

SEGÚN

 

TAMAÑO

           
 

Grande

(1.4-13.2)

(0-0.6)

(0.3-6.1)

(0-1.4)

(0-1.0)

0

[7.3]

[0.2]

[3.2]

[0.7]

[0.5]

0

Significancia

           

(p<0.05)

0.887

0.806

0.232

0.839

0.707

-

 

<1 año

(2.5-11.8)

(0-0.6)

(0.1-5.0)

(0-1.3)

(0-1.0)

0

[7.1]

[0.3]

[2.6]

[0.6]

[0.4]

0

1-7 años

(1.9-12.9)

(0-0.6)

(0-6)

(0-1.4)

(0-1.1)

0

[7.4]

[0.2]

[3]

[0.7]

[0.5]

0

SEGÚN

 

EDAD

           
 

>7 años

(1.8-10.5)

(0-0.8)

(0.8-3.1)

(0-0.8)

(0.2-0.4)

0

[6.2]

[0.4]

[2]

[0.4]

[0.3]

0

Significancia

0.570

0.749

0.192

0.310

0.731

-

(p

< 0.05)

34

Tabla N° 10:

Promedio de los valores hematológicos referenciales para la serie roja para caninos de la ciudad de Trujillo 2009.

 

Valores

Serie roja

Promedio del total

referenciales

Eritrocitos x 10 12 /L

6.6 +/- 1.0

4.7 8.5

Hematocrito L/L

0.4 +/- 0.1

0.3 0.5

Hemoglobina g/L

132.0 +/- 19.3

94.0 170.0

VCM (fL)

60.2 +/- 1.3

57.7 62.7

CHCM g/L

334.0 +/- 15.0

305.0 364.0

Tabla N° 11:

Promedio de los valores hematológicos referenciales para la serie blanca de caninos de la ciudad de Trujillo.

 

Promedio del

Valores

Serie blanca

Unidad

total

referenciales

Leucocitos

10 9 /L

9.6 +/- 2.5

7.1 14.5

 

%

1.9 +/- 1.5

0.0 4.8

Abastonados

10 9 /L

0.0 +/- 0.2

0.0 0.5

Segmentados

%

77.7 +/- 6.4

65.2 90.2

10 9 /L

7.4 +/- 2.1

3.3 11.5

Eosinófilos

%

2.1 +/- 2.1

0.0 0.2

10 9 /L

0.2 +/- 0.2

0.0 0.7

Basófilos

%

0.0 +/- 0.0

0.0 0.0

10 9 /L

0.0 +/- 0.0

0.0 0.0

Monocitos

%

2.3 +/- 1.7

0.0 5.6

10 9 /L

0.2 +/- 0.2

0.0 0.6

Linfocitos

%

16.0 +/- 5.9

4.5 27.5

10 9 /L

1.6 +/- 0.7

0.1 3.0

35

CAPITULO III

MATERIALES Y MÉTODOS

1. Localización

El presente Proyecto de investigación se realizará en el distrito, provincia y región de Cajamarca, ciudad de Cajamarca ubicada en la sierra norte del Perú; y será ejecutado en el laboratorio de Fisiología Veterinaria de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de Cajamarca.

1.1Datos Meteorológicos.

La ciudad de Cajamarca en donde se realizará el muestreo para el trabajo de investigación, tiene dos épocas bien diferenciadas; una época de lluvias y una seca. Teniendo las siguientes características climatológicas 1 :

Altitud

:

2650 msnm

Latitud

:

7° 10’ 03”

Longitud

:

78° 29’ 35”

Clima

:

Templado seco

Precipitación pluvial

:

801 mm 3 (Promedio anual)

Humedad relativa

:

68.92% (Promedio anual)

Temperatura promedio

:

14,5 °C

Humedad relativa promedio :

66,7%

1 Servicio Nacional de Meteorología e Hidrología (SENAMHI Cajamarca 2012).

36

2. Materiales 2.1Material biológico

El presente estudio se realizará en ciento veinte (120) muestras de sangre entera (EDTA + sangre), las que serán obtenidas de caninos clínicamente sanos y de crianza doméstica.

2.2 Material de campo

Hoja de identificación del canino.

Etiqueta para la identificación de las muestras.

Guantes.

Lapicero.

Plumón (para rotular las muestras).

Libreta (para anotaciones).

Caja térmica

2.3 Material de escritorio

Papel bond A4.

Fólderes

Lapiceros.

Lápices.

CDs.

Impresora.

Computadora

2.4 Material de laboratorio

Los materiales utilizados para la obtención de cada uno de los parámetros hematológicos se describen en sus respectivos anexos.

Tubos de ensayo de 10 ml.

Tubos de ensayo para recolectar sangre con EDTA

Láminas porta y cubre objetos.

Tubos capilares

37

Gradilla portatubos

Centrífuga para hematocrito TRIAC Centrifuge.

Microscopio (YUJIE Optics).

Espectrofotómetro

Pipetas de 10 µl a 100 µl.,

Pipeta de Thoma

Colorante Wright

Tubo de goma y boquilla de caucho

Cámara de Neubauer Merenfield

Plastilina

Escala de lectura para microhematocrito

2.5Reactivos

Solución de Gower

Diluyente original

Kit de tinción Hemacolor 2

Solución Drabkin 3

Solución Buffer 6.5

3. Metodología 3.1 Selección de muestras:

Se seleccionaran caninos que no pertenezcan a ninguna raza, clínicamente sanos definidos por inspección clínica, sin ningún tipo de signo o síntoma que indique que el animal padecía de alguna enfermedad, libre de antecedentes recientes de enfermedad, temperatura normal y hembras en anestro. No se incluirán hembras

2 Merck. Hemacolor ® Rapid staining of blood smear staining set for microscopy. 3 VALTEK ® Diagnosis. Chile

38

preñadas o en lactancia, ni caninos bajo tratamiento médico o recibiendo suplementación mineral. (Pedrozo, 2010)

3.2 Obtención de muestras:

De cada uno de los caninos se obtendrán 3 ml de sangre con anticoagulante EDTA, mediante venopunción cefálica, empleado el sistema de tubos al vacío 4 . Las muestras serán mantenidas a 4°C y transportadas de inmediato al Laboratorio de Fisiología Veterinaria de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de Cajamarca, para los respectivos análisis.

3.3 Del Número de Muestras

a) Muestra:

120 muestras de sangre con anticoagulante.

b) Número:

120 muestras tomadas del mismo número de caninos los que serán clasificados de la siguiente manera:

De acuerdo al sexo: machos = 60 y hembras = 60

De acuerdo a la edad:

Cachorros (3 meses1 año)

Jóvenes (13 años)

Adultos (3 7 años)

Geriátricos (7 16 años)

= 15 hembras y 15 machos.

= 15 hembras y 15 machos

= 15 hembras y 15 machos

= 15 hembras y 15 machos

3.4Parámetros hematológicos por analizar.

Los parámetros a analizar serán los siguientes:

Recuento de eritrocitos: Método de la cámara de cuentaglóbulos.

4 Vacutainer ®

39

Recuento de leucocitos: Método de la cámara de cuentaglóbulos.

Dosaje de Hemoglobina: Método de la Cianometahemoglobina y hemacolor.

Volumen

globular

Microhematocrito.

aglomerado

(VGA):

Método

del

Recuento Leucocitario Diferencial Relativo y Absoluto: Método

de coloración Wright y por cálculo.

Cálculo

de

los

establecidas.

Índices

Hematimétricos:

Mediante

fórmulas

Características Morfológicas de Eritrocitos: Frotis sanguíneo

coloreado.

Plaquetas: Método directo.

Velocidad de sedimentación eritrocítica: Método Wintrobe.

3.5Análisis estadístico:

Los valores referenciales de cada variable hematológica, se estableció la normalidad de la distribución de los datos y se determinó su promedio y desviación estándar, luego se calculó los valores de referencia de cada parámetro según el método de los promedios (X + 1.96 D.E.).

Los valores que se obtuvieron fueron también sometidos a la prueba de significación de Tukey (P=0,05) para establecer el nivel de diferencia significativa existente entre ellos.

40

CAPITULO IV

RESULTADOS

Muestra los valores promedio y de referencia, obtenidos mediante el promedio ± 1,96 D.E. de eritrocitos, hematocrito, hemoglobina, VCM, CHCM, HCM de una población total de 120 caninos mestizos de la ciudad de Cajamarca.

Cuadro N° 01:

Valores hematológicos de referencia (X+1,96 DE) para la serie roja de caninos de la ciudad de Cajamarca.

VARIABLES

 

VALORES DE

HEMATOLÓGICAS

UNID.

X+/-DE

REFERENCIA

Eritrocitos

10 6 /µl

6,8 +/- 0,9

5,0 - 8,6

Hematocrito

%

49,1 +/- 4,5

40 - 58

Hemoglobina

gr/dl

19 +/- 2,3

14,5 - 23,5

VCM

fl

72,8 +/- 6,7

59,7 - 85,9

CHCM

g/dl

38,7 +/- 3,9

31,1 - 46,3

HCM

pg.

28,1 +/- 3,4

21,4 - 34,8

41

Muestra los valores hematológicos promedio y los valores de referencia, obtenido mediante el promedio ± 1,96 D.E. de leucocitos, divididos en las formas celulares de neutrófilos segmentados, neutrófilos en banda, eosinófilos, linfocitos, monocitos y basófilos de una población total de 120 caninos mestizos de la ciudad de Cajamarca.

Cuadro N° 02:

Valores Hematológicos De Referencia (X+1,96 DE) para

la serie blanca de caninos de la ciudad de Cajamarca.

VARIABLES

 

VALORES DE

HEMATOLÓGICAS

UNID.

X +/- DE

REFERENCIA

Leucocitos

10 3 /µl

8,8 +/- 1,2

6,4 - 11,2

Neutrófilos

%

66,7 +/- 2,4

62 - 71

segmentados

10 3 /µl

5,9 +/- 0,8

4,3 - 7,5

Neutrófilos

%

1,7 +/- 1

0 - 4

abastonados

10 3 /µl

0,1 +/- 0,1

0 - 0,3

 

%

2,7 +/- 1,1

1 - 5

Eosinófilos

10 3 /µl

0,2 +/- 0,1

0,0 - 0,4

 

%

1,4 +/- 0,9

0 - 3

Monocitos

10 3 /µl

0,1 +/- 0,1

0 - 0,3

 

%

27,6 +/- 2,2

23 - 32

Linfocitos

10 3 /µl

2,4 +/- 0,4

1,6 - 3,2

 

%

0 +/- 0

0 - 0

Basófilos

10 3 /µl

0 +/- 0

0,00 - 0,00

42

Muestra los valores hematológicos promedio y los valores de referencia, obtenidos mediante el promedio ± 1,96 D.E. de velocidad de sedimentación y plaquetas, de una población total de 120 caninos mestizos de la ciudad de Cajamarca.

Cuadro N° 03:

Valores

velocidad de sedimentación y plaquetas de caninos de la ciudad de Cajamarca

en

hematológicos

de

referencia

(x+1,96

DE)

VARIABLES

 

VALORES DE

HEMATOLÓGICAS

UNID.

X +/- DE

REFERENCIA