ee eee on ee ‘Aretina do camundongo contém fotorreceptores (rx) que per ‘ebem a luz utlizando receptores acoplados a proteina Ge quatro ‘outros tipos de neur6nios marcados em amare, verde rose a2, {que conectam as élulasfotoreceptoras a0 cérabro, (Rachel Wong, Univesity of Washington, EUA) SUMARIO 15.1 Transdugio de sinal: do sinal extracelular 8 resposta celular on 15.2 Estudando receptores de superficie calulare proteinas de transdugao de sinal 683 15.3 Receptores acoplados & proteina G:estruturae ‘mecanismo 690 enhuma célula vive isoladamente. A comunicagao N celular é uma propriedade fundamental de todas, as células e dé forma ao desenvolvimento e & fan- io de cada organismo vivo. Até mesmo microrganismos cucariotos unicelulares, como as leveduras, os fungos fi amentosos e os protozodrios, se comunicam por sinais cextracelulares: secretam moléculas, denominadas feromé- nios, que coordenam a agregacio das células de vida livre para 0 cruzamento sexual ou para a diferenciagio, sob determinadas condicoes ambientais. No caso das plantas € dos animais, sio mais importantes os horménios e ou- tras moléculas de sinalizagdo extracelular que funcionam dentro de um organismo para controlar uma variedade de processos, incluindo o metabolismo de agicares, gorduras € aminoscidos; 0 erescimento e a diferenciagao de teci- dos; a sintese a secregio de proteinase a composigao dos liquidos intracelulares e extracelulares. Muitos tipos de células também respondem a sinais do ambiente externo, como liz, oxigénio, odotes e sabores em alimentos. Em qualquer sistema, para um sinal ter um efeitoem uum alvo, ele deve ser recebido. Nas células, um sinal pro- dduz uma resposta especifica apenas em células-alvo com CAPITULO 15 Transducao de sinal e receptores acoplados a proteinaG 15.4 Receptotes acoplados & proteina G que regulam canals énicos 695, 15.5 Receptores acoplados a proteina G que ativam ou inibem a adenili-ciciase 701 15.6 Receptores acoplados & proteinaG que causam elevacbes no Ca" citosélico no receptores para aquele sinal. Para alguns receptores, esse sinal é um estimalo fisico, como luz, toque ou calor. Para outros, é uma molécula quimica. Muitos tipos de molé- culas quimicas so usados como sinal: moléculas peque- nas (p. x derivados de aminoacidos ou lipideos, acct colina), gases (6xido nitrico), peptideos (p. ex., ACTH € vasopressina), proteinas soliiveis (p. ex. insulina ¢ hor ménio do crescimento) e proteinas ligadas & superficie de uma célula ou a matriz extracelular. Muitas dessas moléculas sinalizadoras extracelulares sao sintetizadas ¢ liberadas por células de sinalizagao especializadas no interior de organismos multicelulares. A maioria dos re- ceptores se liga a uma Gnica molécula ou a um geupo de molécalas estreitamente relacionadas. Algumas moléculas sinalizadoras, especialmente mo- \éculas hidrofobicas como os esteroides, 0s retinoides € a tiroxina, difundem espontaneamente por meio da mem- brana plasmatica c se ligam a receptores intracelulares. A sinalizagdo por meio desse tipo de receptor intracelular € ‘minuciosamente discutida no Capitulo 7. ‘A maioria das moléculas sinalizadoras extracelula- res, entretanto, € muito grande e muito hidrofilica para676 _Lodish, Berk, Kaiser & Cols, ® ANIMAGAO: Sinalizacao extracelular FIGURA 15-1 Visio geral da sinalizagio por receptores de su- perficie celular. Acomunicagio por sinasextracelulares geralmente nveve os seguintes etape:sintese da moiécul sinallzsdora pela cé- ‘ula sinalzadorae sua incorporacéo em pequenasvesiculasintrace- ‘ulares (etapa MI, sua lberacio no espaco exracelular por exocitose (etapa Ble transporte do sina até a célula-avo (etapa EDA ligacSo dda moléculasnaizadora a uma protena receptora de superficie ce- ular especifica leva @ uma mudanga conformacional no receptor, atvando-o (etapa BB O receptor ativado, em sequida, ative um ou ‘mals proteinas de transducio de sinal ou moléculas pequenas que ‘sho segundos mensageirs (etapa ED levendo, por fim, &ativagso de [uma ou mas proteinasefetoras (etapa BO resultado final de uma ‘ascata de sinalizac3o pode ser uma alteracao de curt prazonafun- (Go celular, metaboismo oumovimento (apaHED ouuma mudanca de longo prazo na expressto génice ou no desenvolvimento (etapa {WAD. A fraizacao ou a modulagso(ciminuigso) da resposta celular € ‘ausada por feedback negative de moiéculas sialzadorasintraceula- ‘es etapa BD ¢ porremogio do sna exvacelular etapa BD. penetrar pela membrana plasmética. Como, entio, essas ‘molkculas séo capazes de afetar 0s processos intracelu- laces? Essas moléculas sinalizadoras se ligam a recepto- res de superficie celular que sio proteinas integrais de ‘membrana incorporadas na membrana plasmatica. Re- ceptores de superficie celular geralmente consistem em dominios ou segmentos distintos: um dominio extrace- lular em contato com o liquido extracelular, um dominio abrangendo a membrana (dominio transmembrana), ¢ 0 dominio intracelular, em contato com 0 citosol. A molé- cla sinalizadora atua como ligante, que se liga a um sitio cstruturalmente complementar no dominio extracelular ‘ou no dominio transmembrana do receptor. A ligacio do ligante ao seu sitio do receptor induz. uma mudanca conformacional no receptor que é transmitida através do dominio transmembrana até 20 dominio citosblico, re- sultando em ligagdo e subsequente ativacio ou inibigio de outras proteinas citosélicas ou ligadas 4 membrana plasmatica, Em muitos casos, essas proteinas ativadas ca- talisam a sintese de algumas moléculas pequenas ou alte- rama concentragio de um fon intracelulas, como 0 Ca”. Essas proteinas intracelulares ou pequenas moléculas de- rniminadas segundos mensageiros carregam, ento, 0 sinal para uma ou mais proteinas efetoras. O processo global dda conversio de sinais extracelulares em respostas intra- celulares, assim como as etapas individuais desse proces- 0, é denominado transducio de sinal (Figura 15-1). Em eucariotos, existem cerca de uma diizia de clas- ses de receptores de superficie celular, que ativam varios tipos de vias de transdugio de sinais intracelulares. O ‘nosso conhecimento sobre transduao de sinal tem avan- ado bastante nos tiltimos anos, em grande parte devido 40 fato de que esses receptores e vias sio bastante con- servados ¢ as suas fungGes sfo essencialmente as mesmas em diversos organismos, como moscas, vermes, macacos seres humanos. Estudos genéticos combinados com anilises bioquimicas tém permitido aos pesquisadores rastrear muitas rotas completas de sinalizagio celulas, desde a ligagdo da molcul igamte até as resposas ce lulares finais. ° 3 Soo, /f nce oweitco MI Oi mn. rr ‘elularinativa| Moattagione —— _CProtine sears metaboisme, funga0 ‘emovimente caluares \ + Si 1— : Ndcteo TN. ociteastona reat gen ¢ ‘decent ‘Talvez a classe mais numerosa de receptores — en- contrada em organismos desde as leveduras até os seres hhumanos ~ seja a dos receptores acoplados & proteina G (GPCRs, do inglés G protein-coupled receptors). Como © nome sugere, os receptores acoplados a proteina G consistem em uma proteina receptora integra de mem- brana acoplada a uma proteina G intracelular que trans- mite sinais para o interior da célula. O genoma humano codifica aproximadamente 900 receprores acoplados a proteina G, incluindo receptores dos sistemas olfat6rio {cheiro), gustativo (sabor) ¢ visual, muitos receptores de neurotransmissores, além da maioria dos receptores de horménios que controla 0 metabolismo de carboidratos, de aminodcidos e de lipideos, e até mesmo 0 comporta- mento. A transdugao de sinal pelos GPCRs geralmente indwz mudangas no curto prazo na fungao celular, tais como mudangas no metabolismo ow no movimento. Em contrapartida, a ativacao de outros receptores de super- ficie celular altera 0 padrio celular de expresso génica, levando a diferenciacao ou divisao celular e outras con- sequéncias de longo prazo. Esses receptores menciona- dos por iltimo e as vias de sinalizagao intracelular que cles ativam sio explorados no Capitulo 16, Neste capitulo, primeiramente serdo revisados al- guns principios gerais da transdugio de sinal, como as bases moleculares da ligacio entre ligante e receptor e al- guns componentes evolucionariamente conservados dasvias de transdugio de sinal. A seguis, seré descrito como (0 receptores de superficie celular e as proteinas de trans- dugio de sinal sio identificadas e caracterizadas bio- uimicamente. Entdo seré iniciada uma discusséo mais aprofundada dos receptores acoplados 3 proteina G, fo- calizando primeiro a estrutura ¢10 mecanismo de acdo ¢, depois, as vias de sinalizacio ativadas por eles. £ mos- trado como essas vias afetam muitos aspectos da funcdo celular, incluindo 0 metabolismo da glicose, a contracéo muscular, a percepgao da luz ea expressdo génica. 15.1 Transdugao de sinal: do sinal extracelular Aresposta celular Como mostrado na Figura 15-1, a transducéo de sinal comesa quando moléculas sinalizadoras extracelulares se ligam aos receptores de superficie celular. A ligago de mo- léculas sinalizadoras aos seus receptores induz dois tipos principais de respostas celulares: (1) alteragdes na atividade ‘ou na fungio de enzimas especificas e de outras proteinas jd existentes no interior da célula ¢ (2) mudangas nas quan- tidades de proteinas especificas produzidas pela célula, ‘mais comumente por meio de modificagSes de fatores de transcricio que estimulam ou reprimem a expressio génica (ver Figura 15-1, etapas HA e HM). Em geral, 0 primeiro tipo de resposta ocorre mais rapidamente que o segundo. Fatores de transcrigio ativados no citosol por essas vias se ‘movem para o micleo, onde estimulam (ou ocasionalmente reprimem) a transcrigio de genes-alvo especiicos. ‘A conexio entre um receptor ativado e uma resposta celular ndo é direta; em geral, envolve muitas protefnas intermediarias ou moléculas pequenas. Coletivamente, essa cadeia de intermediérios € chamada de via de trans- dugao de sinal, pois cla transduz ou converte a infor- ‘magao de uma forma em outra por meio de um sinal «que € repassado de um receptor aos seus alvos. Algumas vias de transdugdo de sinal contém apenas dois ou trés intermedidrios; outras podem envolver muitos interme- dirios. Muitas vias contém membros de algumas classes de proteinas transdutoras de sinal que foram altamente conservadas durante a evolugao. Nesta seco, é fornecido um panorama das prin- cipais etapas da transducio de sinal, comecando pelas moléculas sinalizadoras. Também sio exploradas as ba- ses moleculares da ligacao ligante-receptor e a cadeia de eventos iniciada na célula-alvo apés a ligacao do sinal no seu receptor, com especial atengao a alguns componentes cruciais para muitas vias de transducdo de sinal. ‘As moléculas de sinalizacdo podem atuar no local oua distancia [As células respondem a muitos tipos de sinais ~ alguns originados de fora do organismo, outros gerados no seu interior Aqueles que sio gerados internamente podem ser descritos conforme alcangam seu alvo. Algumas moléculas sinalizadoras sio transportadas por longas distancias pelo sangue; outras tém efeitos locais. Em animais,a sinalizagio por moléculas extracelulares pode ser classificada em trés tipos ~ endécrina, pardcrina ¢ autéerina -, com base na Biologia Celulare Molecular 677 distincia sobre a qual o sinal atua (Figura 15-2a-c). Além disso, algumas proteinas ligadas a membrana de uma célu- Ja podem sinalizar diretamente uma eélula adjacente. Na sinalizagao end6crina, as moléculas sinalizado- ras sio sintetizadas e secretadas por células sinalizadoras (p. ex, aquelas encontradas nas gléndulas endécrinas), transportadas pelo sistema circulatorio do organismo e, finalmente, atuam em células-alvo distantes do seu local de sintese. O termo hormnio geralmente refere-se a mo- Iéculas sinalizadoras que participam na sinalizagio en- décrina. A insulina secretada pelo pancreas e a epinefri- na secretada pelas glindulas suprarrenais so exemplos de horménios que viajam pelo sangue e, ent, servem de mediadores da sinalizagio endécrina. (a) Sinaizagdo enderina Sadieetiaralys o80 sangue por landule enceerina Células: 0 distances Célula secretéela (Cleave adjsceme (6) Sinalizagdo autéccina Legend: © Sinai axrecelular [rece f Sina tigado 3S membrane Célula sinetzagors (Céluleaivo adjpcente FIGURA 15-2. Tipos de sinalizacéo extracelular. (a Sinaliza- lo calula por substincias quimicas exracellares ocorre a distin ‘as entre pouces micrdmetros na sinallzagboauticrinae perSrina até muitos metros na sinalizagSo endcrin. (4) Prteinasligadas & ‘membrana plasmética de uma célula poder interagirdietamente com receptors de superficie celuiar de etlulasadjcentes.