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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS


INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
INGENIERÍA BIOQUÍMICA

DATOS INFORMATIVOS:
Asignatura: Bioquímica II Nivel: 6to “A” Bioquímica
Integrante: Profesor: Ing. Alberto Aguirre
 Moreno Karla Ayudante: Pamela Salva
 Sánchez Alex Práctica de Laboratorio N°: 1
 Torres Vanessa Fecha de Presentación: 12/04/2019

TEMA:

Aislamiento e Identificación de Glucógeno

1. OBJETIVOS

General
Identificar la presencia de forma cualitativa de glucógeno en hígado y músculo procedente de un
ave.
Específicos
Determinar cualitativamente la concentración de glucógeno.
Establecer diferencias de concentración de glucógeno entre hígado y músculo.

2. DATOS Y RESULTADOSOBTENIDOS
Tabla #1. Resultados de la Obtención del Hidrolizado de Glucógeno en la muestra de Hígado y
Musculo

MUESTRA GRÁFICO OBSERVACIÓN

Solución más turbia del hidrolizado de


glucógeno en glucosa debido a la insolubilidad
del Cu2O, evidenciándose que existe mayor
presencia de glucógeno en el hígado.

HIGADO

Solución un poco transparente o traslucida del


hidrolizado de glucógeno en glucosa debido a la
solubilidad del Cu2O, evidenciándose que existe
menor presencia de glucógeno en el músculo

MÚSCULO

Obtención de soluciones coloreadas después de un hidrolisis acida para la identificación de


glucógeno en órganos de aves. A mayor coloración y turbidez mayor presencia del compuesto
químico.
3. DISCUSIÓN

El glucógeno, es reserva de la glucosa en los animales y se encuentra principalmente en el hígado


y en los músculos. La misión del glucógeno es la de promover la fuente para que la célula sintetice
ATP necesario para llevar a cabo diferentes acciones como: la contracción muscular, la regulación
de glucosa en sangre entre otras funciones químicas del sistema biológico del organismo. Se
puede almacenar fundamentalmente en el hígado (10%) y en el músculo (1 a 2%). (González,
2013).

La muestra de glucógeno se tomó de un pollo que fue sacrificado el mismo día para conservar
sus propiedades. Posteriormente tanto hígado como también una muestra de músculo fueron
tomados para proceder con la homogenización y posterior hidrolisis ácida del glucógeno
contenido en las muestras. El precipitado de glucógeno se sometió a una hidrólisis ácida, con la
finalidad de romper los enlaces glicosídicos que liberaron glucosa. (Castell, 2016)

La valoración cualitativa de la cantidad de glucosa presente en cada hidrolizado se realizó con


sulfato de cobre en medio alcalino denominado también como (Reactivo de Nelson),
aprovechando el carácter reductor que tienen todos los monosacáridos. La reacción se evidencio
en la muestra con una coloración del precipitado de color lila, que posteriormente se sometió a
hidrolisis en donde es muy importante la medición del pH y que esté presente un valor igual o
mayor a 8.

La identificación del contenido de glucosa en el hidrolizado del glucógeno se realizó mediante el


adicionamiento de sulfato de cobre que posteriormente la muestra un cambio de color y la
aparición de turbidez. Estos dos factores permiten la apreciación visual de glucógeno en muestras
de aves. La mayor concentración del compuesto estudiado entre hígado y musculo fue en el
órgano hepático debido a que es de vital importancia porque cumple funciones de eliminación
de toxinas, almacenar energía y mantiene los niveles de glucosa en la sangre. Mientras que el
glucógeno almacenado en el músculo sirve para el consumo propio, es decir el glucógeno que se
almacena en el musculo no volverá a salir, ya que se consume al realizar una actividad física.
(Rene Quinton Fundacion, 2017).

Sin embargo, estos resultados encontrados se cotejaron con la apreciación visual de las muestras
posterior a un hidrolisis acida. Para la muestra donde existe mayor concentración de glucógeno
el viraje a color verde azulado con presencia de turbidez, en cambio para la muestra de musculo
se evidencio una muestra fluida y de tonalidad azul tenue. Se dice que a mayor coloración y
turbidez mayor concentración de glucógeno.
4. CONCLUSIONES

La presencia de glucógeno tanto en el hígado y musculo fue identificada favorablemente,


evidenciado en la coloración y turbidez final de la muestra una tonalidad verdosa y turbidez
elevada.

La concentración determinada cualitativamente evidenció que para el hígado existió una mayor
concentración de glucógeno en base a su coloración más saturada que en la muestra de musculo,
mientras que para la turbidez la muestra de hígado fue de igual forma mayor a la del musculo
que se presentó moderadamente transparente.

Se confirmó que la mayor diferencia de la concentración de glucógeno se debe a la ausencia de


(glucosa-6-fosfatasa) en los músculos, y no desfosforila la glucosa, por lo que el hígado al
tener mayor demanda de glucosa para órganos y tejidos descompondrá el glucógeno en
glucosa para cubrir los requerimientos metabólicos de todo el organismo.

5. RECOMENDACIONES

 Usar los elementos de protección para la manipulación de reactivos ya que se puede sufrir
quemaduras que pueden afectar a la integración personal.
 Evitar en lo posible contaminar los reactivos a usarse ya que afectará a los resultados que
se desee obtener, y usarlos correctamente.
 Respetar la temperatura y tiempo de cada proceso que se lleve a cabo durante la práctica,
siguiendo cada uno de los pasos.
 En el desarrollo de la práctica es necesario tener presente la información relacionada a la
práctica, revisar conceptos que serán usados, a fin de evitar confusiones con los
resultados de los ensayos en cada una de las pruebas.
 Se recomienda en la parte de determinación cualitativa agregar poco a poco el NaOH en
una cantidad considerable para lograr observar el cambio de coloración.
6. CUESTIONARIO

Elabore un diagrama de la glucogenólisis y como se regula esta vía.

Grafico #1. Ruta de la Glucogenólisis

a) Regulación alostérica por metabolitos: EN MUSCULO el AMP y EN HIGADO la glucosa.

1) Efecto de AMP en músculo El AMP es un efector alostérico positivo o activador de la fosforilasa


b de músculo, se une a la fosforilasa b y provoca un cambio de confirmación que la activa,
actuando así cuando el estado energético del músculo es bajo. El ATP puede revertir este efecto
activador sobre la glucogenólisis.

2) Efecto de la glucosa en hígado. La elevada concentración de glucosa en sangre desconecta o


desactiva la glucogenólisis en hígado. La glucosa se une a la fosforilasa a, provocando un cambio
de conformación que conlleva la liberación de la fosfatasa; ésta hidroliza los restos fosfato de la
fosforilasa a transformándola en fosforilasa b.
b) Modificación covalente reversible, por fosforilación-defosforilación, como respuesta a la
acción hormonal
Mediante una cascada de fosforilaciones en respuesta a la acción hormonal: (adrenalina en
músculo y glucagón en hígado). La glucógeno fosforilasa (hígado y músculo) existe bajo dos
formas:
Existen dos formas de la enzima que degrada el glucógeno, glucógeno fosforilasa “a” (R,
fosforilada y catalíticamente muy activa) y fosforilasa “b” (T, defosforilada y normalmente
inactiva).
(Lehninger, N. & Nelson, 2006).

¿Cuáles son las funciones del glucógeno hepático y glucógeno muscular?

Función del glucógeno hepático

La función principal es la de mantener la concentración de glucosa en sangre. Por lo tanto, ante


una demanda de glucosa para órganos o tejidos, el hígado descompondrá el glucógeno en glucosa
para cubrir los requerimientos metabólicos. El hígado tiene unos 150 gramos de glucógeno y hay
depleción completa de los depósitos en menos de 24 horas de ayuno. La síntesis de glucógeno,
en particular el glucógeno hepático está regulado por mecanismos hormonales; la adrenalina y
el glucagón estimulan la glucogenólisis y la insulina estimula la glocogenogénesis.

Glucógeno muscular

Es la forma de almacenamiento de los carbohidratos en las células musculares. Es el combustible


del músculo y esencial para poder realizar cualquier tipo de activad física. Hay que prestarle
especial atención cuando realizas deporte ya que aquí es muy importante mantener los niveles
de glucógeno muscular. Su papel en el músculo es proporcionar la fuente primaria de energía al
músculo, permitiendo que se contraiga. (Delgado, 2015)

¿Qué cantidad de glucógeno se encuentra en el hígado y en el músculo en el hombre?

Se calcula que la capacidad de almacenamiento de glucógeno que tiene un hombre a nivel


muscular es de 500 gramos, es decir aproximadamente el 1 al 2% del peso húmedo del musculo
(pero debido a que tenemos mucha masa muscular, hay el doble de glucógeno que en el hígado)
Mientras que el hígado su capacidad de almacenamiento es mucho más limitada, alrededor de
50 gramos por día para el individuo promedio, entre el 6 y 8 % de su peso húmedo, pero en
algunas enfermedades del almacenamiento de glucosa, la cantidad en hígado y músculo puede
ser significativamente mayor (Contreras, 2003)
7. BIBLIOGRAFÍA

Castell, J. (2016). Glucogenolisis. Recuperado el 10 de abril de 2019, de


https://www.uv.es/jcastell/2_Glucogeno_degradacion.pdf?fbclid=IwAR17diKEHccoRpd9
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Contreras, E. (2003). Panorama general del Metabolismo del glucógeno. Obtenido el 11 de Abril
del 2019, en:
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/generalidades%20glucogeno.html

Delgado, D. (2015). Metabolismo del glucógeno. Bioquimica 1. Medicina. Obtenido el 12 de Abril


del 2019, en: https://ocw.unican.es/pluginfile.php/1327/course/section/1638/Tema17-
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González, C. (2013). Bioquímica Humana. Obtenido de Ciencias : http://gsdl.bvs.sld.cu/cgi-


bin/library?e=d-00000-00---off-0prelicin--00-0----0-10-0---0---0direct-10---4-------0-1l--
11-es-50---20-help---00-0-1-00-0-0-11-1-0utfZz-8-
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Lehninger, N. & Nelson. (2006). “Principios de Bioquímica", 4ª ed. Nelson. Omega.

Rene Quinton Fundacion. (2017). El glucógeno hepático como fuente de reservas energéticas.
Recuperado el 11 de abril de 2019, de
https://www.fundacionrenequinton.org/blog/glucogeno-hepatico-fuente-reservas-
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ybal1szm5f5UwPsRO5BAE5B5GvXqOV0RegH5l_gXWSDfY