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“Universidad Nacional Mayor de San

Marcos”
Universidad del Perú , Decana de Ame rica.

“Facultad de Ingeniería Geológica, Metalúrgica,


Minera y Geográfica”
Escuela de Ingeniería Ambiental

MICROBIOLOGÍA
RECUENTO DE MICROORGANISMOS
EN PLACA Y NMP

 Profesor:
Mg. Tito Libio Sánchez Rojas
 Guías de Laboratorio:
Bach. Isabel Condori Quispe
Bach. Lee Kent Arrieta Aquise
 Estudiantes:
Piero Roa Changana
Leonardo Batalla Urquizo
Carlos Lazo Oscanoa

 Ciclo: 2018-II
“Sin laboratorios los hombres de ciencia
son como soldados sin armas.”

Louis Pasteur

Ciudad Universitaria, octubre del 2018


UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Decana de América, Universidad del Perú
Facultad de Ingeniería Geológica, Minera, Metalúrgica y Geográfica
Escuela de Ingeniería Ambiental

Informe de Microbiología
RECUENTO DE MICROORGANISMOS EN PLACA Y NMP

1. Introducción

2. Fundamento Teórico

3. Detalles experimentales
3.1. Procedimiento
1. Traer muestras de especias frescas (culantro).

Ilustración 1 Muestra de
culantro

2. Pesar 1.2 gramos de muestra de culantro sobre un pedazo de papel aluminio.

Ilustración 2 Pesado de la
muestra, 1.2g

Informe de Microbiología – Practica N°9


3. Preparar cuatro tubos de ensayo con 9 ml de solución salina y rotularlos para
cuatro diluciones.

Ilustración 3 Tubos de
ensayo con 9ml de
solución salina

4. Cerca de un mechero encendido verter los 1.2g de muestra sobre el tubo de


dilución 10−1 y homogenizar, con la ayuda de una pipeta tomar 1 ml de la
dilución 10−1 y verterla en el siguiente tubo, continuar con estos pasos hasta
la dilución 10−4.

Ilustración 4 Vertimiento de la muestra al


primer tubo
Ilustración 5 Homogenización en el primer
tubo

Ilustración 6 Proceso de diluciones


seriadas Ilustración 7 Obtención de 4 diluciones

5. Tomar 0.1 ml de las diluciones (-2,-3,-4) y diseminarlas cada una en dos placas
con Agar PCA (Plate Count Agar) cerca de un mechero.

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Ilustración 8 Diseminación de 0.1ml de cada
dilución

6. Dejar incubar las placas a 30°C por 48 horas, pasado ese tiempo observar
como a progresado el desarrollo de colonias.

Ilustración 9 Colonias, Ilustración 10 Colonias, Ilustración 11 Colonias,


dilución (-4) dilución (-3) dilución (-2)

7. Después de comprobar el desarrollo de colonias en las tres placas,


procederemos a aplicar el método del número más probable (NMP),
iniciaremos con repartirnos las 6 placas entre todos los miembros de la mesa y
comenzar a contar todas las colonias que se puedan ver dentro de la placa
tanto de hongos como de bacterias incluso las más pequeñas colonias, si la
densidad de colinas dentro de la placa es muy grande se pude dividir la placa
en dos o cuatro segmentos iguales y luego multiplicar el número de colonias
del segmento por el número de segmentos. Anotar los resultados de las seis
placas y comenzar con el análisis de resultados.

4. Resultados
4.1. Culantro Molido
4.2. Carne Molida
Luego de realizarse un procedimiento similar al realizado con el
culantro molido (con la diferencia que en la primera dilución se
usaron 25g de carne y 225 ml de agua), se llevó a incubar por 48
horas a 37 C.
Se realizó el respectivo conteo a las colonias en las placas y se
obtuvo los siguientes resultados:
Dilución -3 -4

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109 15
Conteo
60 7

84.5
Se usaron los datos de la dilución – 3 por estar dentro del rango
establecido para el análisis (30-300).
Se realizaron las operaciones necesarias:
84.5 𝑥 103 𝑥 10 ≅ 85 𝑥 104 𝑈𝐹𝐶/𝑔

4.3. Ají Amarillo molido

Cultivo de los microorganismos provenientes del Ají amarillo


molido en Agar McConkey

5. Discusión
5.1. Culantro
5.2. Carne Molida

Criterios Microbiológicos de Calidad Sanitaria para Carnes crudas


picadas y molidas (DIGESA, 2003)
Al comparar nuestro resultado obtenido con el criterio dado por la
Digesa, podemos observar que se excede en gran magnitud el límite de
calidad establecido. Por lo que podeos afirmar que nuestra muestra de
carne molida no cumple con las condiciones microbiológicas garanticen
seguridad sanitaria.

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Tabla de lectura para NMP series de 5 tubos

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Criterios Microbiológicos de Calidad Sanitaria para Especias y condimentos
deshidratados (DIGESA, 2003)

6. Conclusiones
- Se pudo observar en la primera placa, actividad enzimática amilolitica debido a
que la degradación del almidón es de mayor facilidad.
- El almidón y la celulosa a pesar de ser polímeros de la misma molécula (glucosa),
sus estructuras tridimensionales y sus enlaces de unión provocan una diferencia
muy notoria en sus naturalezas, una de estas diferencias se plasma en el tiempo
de degradación de cada una por ambos grupos de microorganismos, siendo la
degradación de la celulosa realizada por los microorganismos celuloliticos, la de
mayor tiempo de degradación.

7. Recomendaciones
- Para asegurar la correcta realización de la práctica, es necesario comprobar
antes de la práctica si hay cantidad necesaria de materiales e insumos.
- Se recomienda tener un mejor control en la distancia y tiempo en el proceso de
fijación de nuestra muestra.

8. Bibliografía:
- Gómez A., Silvia F. 1 , Sarmiento G., Leonardo F. 1 y Delgado C, Diana C (2014).
Caracterización de microorganismos celulolíticos y amilolíticos de residuos
sólidos orgánicos dispuestos en la planta Ecosangil del municipio de San Gil,
Santander.
- Llacza, H., & Castellanos, P. (2012). Evaluación de la actividad celulolítica del
complejo enzimático celulasa en cepas fúngicas de los departamentos de
Cajamarca, Lima, Junín, Huánuco. Universidad Nacional Mayor de San Marcos,
Lima, Perú.

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