REQUERIMIENTOS DE CULTIVO

En la bacteriología de las lesiones del pie diabético, la especie más frecuente, fue
Staphylococcus aureus[1].

Los Staphylococcus:
● Reino: Bacteria
● Filo: Firmicutes.
● Clase: Bacilli
● Orden: Bacillales
● Familia: Staphylococcaceae
● Género: Staphylococcus

Se asocian con infecciones humanas son colonizadores principalmente de superficies

cutáneas y mucosas.

Morfología de los Staphylococcus:

Son cocos Gram positivos, se observa asociación en racimos irregulares (similar aún racimo
de uvas), carecen de flagelos, no producen esporas y rara vez pueden tener cápsula.

Morfología colonial:

En agar sangre, nutritivo chocolate, soya tripticasa, etc, se ven colonias pequeñas,
blanquecinas, de forma circular, bordes redondeados, superficie lisa y convexa. Algunas
cepas producen un pigmento carotenoide que les da un color dorado (S. aureus).

Metabolismo:

No son exigentes con sus requerimientos nutricionales, son aerobios facultativos y crecen
favorablemente a temperaturas de 30-37°C, son capaces de crecer en medios altamente
salinos (7.5-10% NaCl).

Hábitat:
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S. aureus, Flora normal de las narinas (fosas nasales), nasofaringe, región perineal(en
mujer en hombre) y piel. Puede colonizar diversas superficies epiteliales y mucosas.

Medios de cultivo comunes donde crece Staphylococcus sp:

-Agar sangre
-Agar chocolate.
-Agares nutritivos: como BHI(Brain, Heart, Infusión), AST( Agar Soya Tripticasa), Agar
nutritivo, etc.
-Agar Sales y Manitol.
-Agar Baird-Parker.
-Agar sangre con ácido nalidixico.
-Caldos nutritivos, BHI, Cassoy.
entre otros.

Staphylococcus aureus

S. aureus es la especie más virulenta del género que se conoce ya que esta bacteria tiene
un amplio espectro de factores que contribuyen para producir infecciones y enfermedad.

Algunas cepas de S. aureus pueden producir un pigmento carotenoide que les da un color
amarillo, el color es más evidente en agares nutritivos como agar sangre, agar chocolate,
Agar infusión cerebro corazón, agar nutritivo,entre otros.

Las cepas de S. aureus son productoras de coagulasa y beta-hemolisinas (algunas cepas

carecen de hemolisina).

Factores de virulencia:

Coagulasa:​ Coagula el plasma de la sangre.

Hialuronidasa:​ Degrada el tejido conectivo.
Staphylocinasa:​ Degrada coágulos de la sangre.
Lipasa:​ Degrada grasas lo cual le ayuda a colonizar la piel.
Penicilinasa:​ Inactiva la penicilina.
Hemolisinas Alfa beta:​ lisa eritrocitos.
Leucocidina:​ Lisa neutrofilos y macrofagos
Enterotoxinas: Induce nausea vomito y dearrea, para inactivarlas se necesita 100 grados
celsius 30 min.
Toxina exfoliativa A y B:​ Causan descamación de la piel.
Toxina del síndrome del shock tóxico(TSST por sus siglas en inglés)​: Induce fiebre,
vómito, rash en la piel, daño en órganos.
Proteina A:​ Funciona como anticomplemento, antifagocitica, y lesiona a las plaquetas [2].
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Infecciones causadas por​ Staphylococcus aureus​.

Abscesos. Cistitis. Celulitis.

Furunculos. Impetigo. Sinusitis.

Dermatitis exfoliativa. Síndrome de Guillain Conjuntivitis.

Barre.
 REQUERIMIENTOS DE CULTIVO

Se recomienda para una mayor obtención de resultados positivos para el cultivo de la

bacteria Staphylococcus aureus utilizar el siguiente método de agotamiento ya que
resulta ser el menos complejo y más efectivo para el cultivo de esta bacteria:

Agar Baird-parker
medio altamente nutritivo, en el cual la peptona de caseína y el extracto de carne,
constituyen la fuente de carbono y nitrógeno, el extracto de levadura aporta vitaminas del
complejo B, la glicina y el piruvato, estimulan el crecimiento de los ​Staphylococcus. E ​ l agar
es el agente solidificante. Permite el crecimiento selectivo de los ​staphylococcus, ​ya que el
telurito de potasio y el cloruro de litio, inhiben el desarrollo de la flora acompañante presente
en la muestra. Los ​stphylococcus ​coagulasa positivo, reducen el telurito a teluro y originan
colonias de color grisáceos-negro, y tienen actividad lecitinasica, por eso actúan sobre la
yema de huevo produciendo un halo claro alrededor de la colonia. Es un medio excelente
para el recuento de Staphylococcus aureus, incluso, aunque se trate de células que
sufrieron un daño subletal.

Los materiales utilizados en este experimento son los siguientes:

· “Manos sucias”
· Jabón
· Etanol 70%
· Alcohol gel
· Anteojos
· Anillo
· “Uñas mujer”
· “Uñas hombre”
· Placa Petri
· Agar Baird Parker (BP)
· Utensilios de manipulación
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· Mechero
· Cotones
· Incubadora
· Lupa

La Base de Agar Baird Parker es utilizada debido a su alta especificidad diagnóstica,

selectiva y diferencial para cuantificación de estafilococos gram positivos en distintas
superficies de importancia sanitaria. Junto a ella, también se utiliza telurito de potasio
debido a que los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro, originando
colonias de color negro. Debido a su actividad lecitinásica, también se utiliza emulsión de
yema de huevo la que actúa produciendo un halo claro alrededor de la colonia.

El procedimiento utilizado considera en primer termino un ordenamiento de todos los

materiales a utilizar y la esterilización de los utensilios de manipulación. Luego, se procede
a obtener las muestras que se llevarán a siembra directa sobre agar BP.

1. Manos sucias : se solicita a “persona 1 ” que arrastre sus dedos sobre el

agar BP.
2. Jabón : se solicita a “persona 2 ” que lave sus manos con jabón
neutro, seque y posteriormente arrastre sus dedos sobre el agar BP.
3. Etanol 70% : se solicita a “persona 3” aplicar desinfectante alcohol al 70% sobre
sus manos sin previo lavado. Posteriormente, arrastrar sus dedos en agar BP.
4. Alcohol gel : Persona 4 se aplica alcohol gel sobre la superficie de sus
manos y refriega.
5. Anteojos : se obtiene muestra mediante arrastre de un “cotón” por las
plaquetas del anteojo, el cual posteriormente es arrastrado en agar BP.
6. Anillo : se introduce el anillo al agar BP durante un tiempo inferior a 1
minuto y luego se retira.
7. Uñas mujer : se solicita a “persona 5 (femenino )” enterrar sus uñas en
agar BP.
8. Uñas hombre : se solicita a “persona 5 (masculino)” enterrar sus uñas en
agar BP.

Luego, las muestras son adecuadamente marcadas, cerradas y llevadas a incubación en

condición de aerobiosis a 30-37°C durante 48 horas.

Teniendo en cuenta que el único requerimiento de crecimiento de la bacteria es la

temperatura , la incubadora deberá tener un control de esta permitiendo que esta varie
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Referencias:

[1] Medina-Ochoa, Elda Lorena García-González, Raúl López-Ascencio, Clemente Vásquez,

E. M. Emmanuel. (2018, 12 junio). Tipos de Bacterias en Cultivos de Secreciandoacute;n de
Pie Diabandeacute;tico en Pacientes de Manzanillo, Colima, Mandeacute;xico | Insight
Medical Publishing. Recuperado 30 marzo, 2019, de
http://www.archivosdemedicina.com/medicina-de-familia/tipos-de-bacterias-en-cultivos-de-se
crecioacuten-de-pie-diabeacutetico-en-pacientes-de-manzanillo-colima-meacutexico.php?ai
d=22895

[2] Microbitos, G. M. Gil. (2018, 2 febrero). Staphylococcus aureus, S. epidermidis, y S.

saprophyticus.. Recuperado 30 marzo, 2019, de
http://microbitosblog.com/2011/08/03/staphylococcus-aureus-epidermidis-saprophyticus/

[3] Reglamento Sanitario de Alimentos. [En línea] Recuperado 30 marzo, 2019, de

http://web.minsal.cl/portal/url/item/d61a26b0e9043de4e0400101650149c0.pdf

[4]Britania. Baird Parker Agar Base. [En línea] Recuperado 30 marzo, 2019, de
http://www.britanialab.com/productos/342_hoja_tecnica_es.pdf

[5] ​Staphylococcus aureus y su identificación en los laboratorios microbiológicos. Revisión

bibliográfica Recuperado 30 marzo, 2019, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-02552005000100016

La principal función de nuestra incubadora es cultivar la bacteria Staphylococcus aureus

comúnmente encontrada en el pie diabético(infección que busca ser tratada con el
quitosano ) cuenta con las necesidades básicas para que la bacteria staphylococcus
aureus pueda reproducirse; control de temperatura de 3 ​ 0-37°C,espacio suficiente para
una cantidad máxima de 5 placas de petri (​es un recipiente redondo, de cristal o
plástico, con una cubierta de la misma forma que la placa ), pequeña ventanilla para
ver el proceso del cultivo de los agares en las placas petri.