MÉTODO ANALÍTICO POR CROMATOGRAFÍA

LÍQUIDA PARA EL ESTUDIO DE PRODUCTOS

FARMACÉUTICOS
ANALYTICAL METHOD FOR LIQUID CHROMATOGRAPHY FOR
THE STUDY OF PHARMACEUTICAL PRODUCTS
Elaborado por: Vergara Honores Diego

Resumen:
Se presenta una revisión actualizada de los métodos analíticos
implementados para el estudio en diferentes productos farmacéuticos.
De acuerdo con el análisis de la información encontrada en la literatura,
el método de cromatografía en de líquidos de alta resolución (HPLC),
es el método analítico más adecuado. Este método tiene la ventaja de
proporcionar la distribución química del producto estudiado.
Adicionalmente, se informan relaciones matemáticas que permiten
convertir los resultados de una técnica a otra lo que nos permiten
realizar comparaciones entre los datos experimentales y los descritos
en la literatura.
Palabras clave: indometacina, loratadina, dermofural, cromatografía de
liquidos , validación .

Abstract:
An updated review of the analytical methods implemented for the
quantification of Halocarbon content in different pharmaceutical
products is presented. According to the analysis of the information
found in the literature, the high resolution liquid chromatography
(HPLC) method is the most appropriate analytical method. This method
has the advantage of providing the chemical distribution of the product
studied. Additionally, mathematical relationships are reported that
allow converting the results from one technique to another which
allows us to make comparisons between the experimental data and
those described in the literature.
Key words: indomethacin, loratadine, dermofural, liquid chromatography,
validation.
INTRODUCCION:
El proceso de validación de un
método analítico se realiza para
establecer pruebas documentales,
que demuestren científicamente,
que dicho método posee
características adecuadas para
cumplir los requerimientos de las
aplicaciones analíticas pretendidas,
siendo necesario la determinación
de las fuentes de variabilidad, de
errores del proceso analítico, no
sólo dentro de la calibración sino en
el análisis de muestras reales.
Actualmente, los laboratorios de
ensayo deben demostrar que sus
métodos analíticos proporcionan
resultados fiables y adecuados para
su finalidad. En igual medida, la
Norma UNE-EN ISO/IEC
17025:2005, establece la
necesidad de validar los métodos
analíticos por parte de los
laboratorios de ensayo. El proceso
de validación debe estar
documentado con datos de
laboratorio, siendo por tanto
necesario el uso de la estadística,
que permita el tratamiento y
análisis de los mismos. Así, la
validación de un método es la
herramienta útil para dar
cumplimiento a la exigencia de
asegurar la calidad del resultado
final. Para mostrar de forma
práctica el desarrollo de un proceso
de validación para un método
analítico se mostrara en el presente
informe tres estudios destacables
usando cromatografía liquida. Esta
técnica permite separar físicamente
los distintos componentes de una
solución por la adsorción selectiva de
los constituyentes de una mezcla. En
toda cromatografía existe un
contacto entre dos fases, una fija que
suele llamarse fase estacionaria, y
una móvil (fase móvil) que fluye
constantemente durante el análisis,
y que en este caso es un líquido o
mezcla de varios de ellos.
OBJETIVO GENERAL:
Dar a conocer las condiciones del
método cromatógrafo de líquidos y
los resultados independientemente
para cada estudio, para su
posterior aplicación ya validada en
análisis de muestras problema.
CONDICIONES DEL METODO:
1. Determinación de indometacina en
crema
Para el desarrollo del método
analítico , por Cromatografía de
Líquidos de Alta Resolución (CLAR)
con detección UV para la
determinación de indometacina en
crema al 2.5%. Se probaron
diferentes condiciones, para la
cuantificación se utilizó una
columna L, (Supelcosil LC18, 250
mm x 4.6 mm, 5 µm), una fase
móvil compuesta por metanol y
solución amortiguadora de fosfatos
pH 7.1 (70:30), una velocidad de
flujo de 1.0 mL/min y una longitud
de onda de detección de 254 nm.
(Vázquez, Hernández y Retchkiman
2011)
2. Estabilidad del jarabe de (linealidad, reproducibilidad,
Loratadina 0.1% exactitud), por lo que se concluye
que se logra obtener un método
En el ensayo se empleó un
con precisión adecuada de valores
cromatógrafo (KNAUER) con
pequeños de coeficientes de
detector UV/VIS (KNAUER)
variación y con términos
ajustado a 254 nm, un dosificador
independientes en días de análisis
(loop) de 20 µL e integrador
y a diferentes concentraciones. Las
(SHIMADZU CR6A), con una
muestras son estables al ser
sensibilidad de 0,08 AUFS. La
mantenidas en refrigeración a 4°C.
separación se realizó
El método desarrollado es
isocráticamente sobre una columna
adecuado para su uso en el
Licrospher RP 18, 250 mm x 4 mm,
laboratorio de control de calidad
10 µm. La fase móvil utilizada
para el análisis de rutina de
consistió en una mezcla filtrada y
Indometacina en crema
desgasificada de metanol:
considerando que es una
dihidrogenofosfato de potasio
formulación nanoparticulada.
0,013 mol/L, ajustada a pH 7,6-8,0
con hidróxido de potasio 0,1 mol/L (2) Se validó un método de
en proporción 8/2 (v/v), con una cromatografía líquida de alta
velocidad de flujo de 2,0 µL/min. resolución para estudiar la
Todos los reactivos utilizados estabilidad del jarabe de loratidina
fueron de calidad analítica. (Torres, al 0,1%. La curva de calibración en
García y Pardo, 2007) el rango de 13.6 a 3.36 µg / mL fue
lineal, con un coeficiente de
3. Determinación del contenido de
correlación igual a 0.99975. La
monobromado en el Dermofural
prueba estadística de intercepción
Este método para la cuantificación y pendiente no fue significativa. La
de monobromado en lotes de recuperación obtenida fue del
Dermofural se basa en la 100,2% en el rango de
separación por HPLC del G-1 de su concentración estudiado, y los
impureza, utilizando para ello una resultados de las pruebas Cochran
columna RP-18, mediante detector y Student (t) no fueron
UV-VIS de longitud de onda importantes. El coeficiente de
variable. Con una fase móvil de variación en el estudio de
acetonitrilo HPLC, flujo de 0,7
repetibilidad fue igual a 0,41% para
mL/min , una longitud de onda de
10 repeticiones analizadas,
360 nm y una columna Daisogel C-
mientras que en la
18 de 250 mm de longitud x 4,6
reproducibilidad, las pruebas de
mm de diámetro.
Fischer y Student no fueron
RESULTADOS Y CONCLUSIONES notables. El método demostró ser
específico, lineal, preciso y exacto
(1) De acuerdo a los criterios de
ICH y de las guías de validación
(3) El método de ensayo para la
utilizadas, el método cumple con
determinación del contenido de
criterios de sistema y de método
monobromado en el Dermofural
por cromatografía líquida de alta
eficacia, fase inversa, utilizado para
el control de la calidad del
Dermofural y para su estudio de
estabilidad, resultó ser específico,
lineal en el intervalo de
concentraciones de 0,7 mg/L a 2,3
mg/L, preciso y exacto, con un
límite de detección de 0,1 mg/L y
de cuantificación de 0,09 mg/L ,
por tanto se puede utilizar en el
control de la calidad del Dermofural
y para sus estudios de estabilidad.
REFERENCIAS:
1. TORRES AMARO, Leonid;
GARCIA PENA, Caridad
M. y PARDO RUIZ,
Zenia. Método analítico por
cromatografía líquida de alta
resolución para el estudio de
estabilidad del jarabe de
loratadina 0,1 %. Rev Cubana
Farm [online]. 2007, vol.41, n.1
[citado 2019-05-04]. Disponible
en:<http://scieloprueba.sld.cu/sci
elo.php?script=sci_arttext&pid=
S003475152007000100003&lng
=es&nrm=iso>.ISSN0034-7515.
2. QUIÑONES-GARCÍA, Y.A.,
CALVO-ALONSO, A.M. y
ISABEL, L., 2015. Validación de
un método analítico para la
determinación del contenido de
monobromado en el Dermofural
por Cromatografía Líquida de
Alta Eficacia ( CLAE ), fase
inversa Reverse phase High
Performance Liquid
Chromatogray ( HPLC )
determination of a monobrom.
Revista Cubana de Química, vol.
27, no. 2, pp. 163-181.
3. VÁZQUEZ, M.L.,
HERNÁNDEZ, A. y
RETCHKIMAN, B., 2011.
Desarrollo y validación de un
método analítico por
cromatografía de líquidos de alta
resolución para la determinación
de indometacina en crema.
Revista Mexicana de Ciencias
Farmaceuticas, vol. 42, no. 1, pp.
52-58. ISSN 10273956.