PRACTICA N° 5

DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE LA SÍFILIS

La sífilis es una enfermedad infecciosa aguda o crónica cuyo agente causal es Treponema
pallidum perteneciente, junto con otras treponemas, borrelias y leptospiras, a la familia
Treponemataceae. Es un microorganismo móvil que, dadas sus dimensiones, 5-15 m de largo
por 0,2 m de diámetro, se encuentra en el límite de resolución óptica de los microscopios
convencionales; por ello no es posible visualizarlo mediante tinciones normales y sí por
contraste de fases o tinciones de plata que "engruesan la bacteria". Tampoco es cultivable
según el concepto tradicional. Su movilidad se debe a 10 flagelos periplásmicos. Su tiempo
de generación en los tejidos humanos es de unas 8 horas, por lo que su multiplicación es
lenta.
1.- Pruebas no treponémicas:
- RPR: Suero. Los resultados se informan de forma cuantitativa, pero cualquier valor
numérico indica positividad de esta técnica
- VDRL: LCR. Los resultados se informan de forma cuantitativa, pero cualquier valor
numérico indica positividad de esta técnica 9 Todas las pruebas no treponémicas positivas
deben confirmarse con pruebas treponémicas
2.- Pruebas treponémicas:
- TPHA: Suero. Se considera positivo si el título es ≥1/160. El título de 1/80 se considera
como reacción límite. Si el valor es de 1/160, confirmamos por FTA.
- ELISA Ig M: Suero. Se informa de forma cualitativa, como positivo, negativo o reacción
límite
- FTA: Suero. Se informa de forma cualitativa, como positivo, negativo o reacción límite 9
Con un solo tubo de suero se pueden realizar todas las determinaciones-
PRUEBA RPR
FUNDAMENTOS DEL METODO
En la prueba rápida para reaginas plasmáticas (RPR), las "reaginas" presentes en el suero de
individuos infectados con Treponema pallidum, se detectan por acción de las mismas con
antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido sobre partículas de carbón. La
reacción produce una aglutinación visible macroscópicamente, favorecida por las partículas
de carbón. Las reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente
purificado y el agregado de cloruro de colina, por lo que no es necesario inactivar la muestra.
MATERIAL REQUERIDO
- Tarjetas de reacción
- Gotero metálico para dispensar el Reactivo
- Goteros plásticos descartables para dispensar y distribuir las muestras
- Suero o plasma

Muestra o Controles 1 gota (50 ul) Con el extremo cerrado del gotero distribuir la muestra
uniformemente en todo el círculo. Con el gotero metálico provisto, en posición vertical,
agregar en el centro del círculo:
Reactivo A 1 gota (17 ul) SIN MEZCLAR, hacer rotar horizontalmente la tarjeta de reacción
en forma manual o con agitador rotativo a 100 rpm durante 8 minutos. Observar la presencia
o ausencia de aglutinación al cabo de este tiempo. Tiempos de lectura mayores pueden dar
lugar a falsos resultados.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Reactivo: presencia de aglutinación visible en forma de grumos negros sobre el fondo claro
que indica presencia de "reaginas" en la muestra.
No reactivo: aspecto gris homogéneo que indica ausencia de "reaginas" en la muestra.

Fig1. muestras de suero

La muestra de sangre que se tomaron en laboratorio fueron llevados a la centrifuga. Una vez
realizado esto para el RPR solo se necesitó muestras de suero