FRACCIOMAMIENTO DE TEJIDOS Y CARACTERIZACION DE

CARBOHIDRATOS
Práctica No.3

TISSUE OF FRACTIONATION AND CARBOHYDRATE OF

CHARACTERIZATION
Practice No.3

Alexander Machado Santos Cod.121004323

Tatiana Jimenez Castro Cod.121004322
Ronald Hernández Vera Cod.121004320

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
BIOQUIMICA-2019
RESUMEN

En esta práctica de laboratorio se lleva a cabo el fraccionamiento de una muestra

de hígado, trabajo que se realiza en dos sesiones. En la primera sesión se busca
fraccionar el tejido del hígado, para lo cual se separa este tejido utilizando el método
de centrifugación, separando y almacenando el sobrenadante llamándolo M1, en la
segunda sesión se desea comprobar la presencia de carbohidratos, para lo cual se
lleva a cabo 4 pruebas específicas para la caracterización de carbohidratos. Al final
se puede comprobar la presencia de cada una de las biomoléculas.

ABSTRACT

In this laboratory practice is carried out the fractionation of a sample of liver, work
that is done in two sessions. In the first session, it is sought to fractionate the tissue
of the liver, for which this tissue is separated using the centrifugation method,
separating and storing the supernatant by calling it M1, in the second session you
want to check the presence of carbohydrates for which it is carried out 4 specific
tests for the characterization of carbohydrates. At the end you can check the
presence of each of the biomolecules.

TABLA DE CONTENIDO

Objetivos……………………………………………………………………PAG 3
Palabras claves…………………………………………………………....PAG 3
Marco teórico……………………………………………………………....PAG 3
Metodología………………………………………………………………..PAG 5
Resultados………………………………………………………………....PAG 6
Análisis de Resultados……………………………………………………PAG 7
Conclusiones……………………………………………………………....PAG 7
Bibliografía…………………………………………………………………PAG 8
OBJETIVOS

⚫ Emplear los métodos de soluciones

diferenciales y de centrifugación para el Consulte los diferentes métodos de ruptura de
fraccionamiento de un tejido animal en sus células.
principales constituyentes.

⚫ Comprobar la presencia de carbohidratos en

el tejido de origen animal, utilizando para ellos
reacciones características de cada uno de los
componentes anteriores.

PALABRAS CLAVES:

⚫ Biomoleculas

⚫ Carbohidratos

⚫ Caracterización Figura 2 (TIEMPO, 2013)

⚫ Centrifugación

⚫Fraccionamiento ¿Por qué se recomienda mantener los tejidos

que se fraccionan a bajas temperaturas?

MARCO TEORICO

¿Cuál es el funcionamiento de la
centrifugación? Realice una breve explicación
de sus principios.

Figura 1 (ROUSSELET ROBATEL, 2010)

Figura 3 (Sandri, 2013)

Escriba y explique cada una de las reacciones

de las diferentes pruebas.

Figura 4 (Aguilar, Carrillo, Diaz, Parreño, & Vallejo,

Reaccion de Molish, 2014) Figura 6 (Metodologias basicas de Bioquimica, 2014)

Figura 7 (Aguilar, Carrillo, Diaz, Parreño, & Vallejo,

Reaccion de Benedict, 2014)

Figura 5 (Aguilar, Carrillo, Diaz, Parreño, & Vallejo,

Prueba de Almidon, 2014)
METODOLOGIA:

Figura 8 (Carbohidratos)
 RESULTADOS:

Prueba Patrón Resultado Observaciones

Blanco Negativo No presenta coloración.
M1
Imagen 1 (Reacción de molish+H2SO4) Positivo ImagenSe2 forma unade
(Reacción fase blanca en la superficie
Lugol) y una morada
Imagen 3 (Reacción en +HCl
de Lugol el
Izquierda a derecha: Glucosa, Almidón y M1. fondo
Izquierda hay aumento
a derecha: Blanco,de temperatura
M1, Izquierda a derecha: Glucosa,
………………………………………………………….. Glucosa y Almidón. Blanco, M1 y Almidón.
MOLISH + H2SO4 Glucosa Positivo Presenta una coloración morada añil índigo muy traslucido, hay
(Ver imagen 1) aumento de temperatura.
Almidón Positivo Presenta una coloración turquí traslucido, hay aumento
de temperatura.
Blanco Negativo Toma una coloración amarilla
M1 Positivo Toma un coloración azul cobalto clara
LUGOL Glucosa Negativo Toma una coloración ocre.
(Ver imagen 2) Almidón Positivo Toma un color azul-violeta.
Blanco Negativo NO presenta coloración.
M1 Negativo Toma un color amarillo lima traslucido.

HCL + LUGOL Glucosa Negativo Toma una coloración amarilla pero muy leve.
(Ver imagen 3) Almidón Positivo Color azul- violeta traslucido.

Blanco Negativo Coloración azul celeste.

BENEDICT M1 Negativo Coloración verde arlequín.
(Ver imagen 4) Glucosa Positivo Presentó una coloración naranja.
Almidón Negativo Coloración verde Kelly.
ImagenCuadro
4 (Reacción de Benedict)
1 (Resultados)
izquierda a derecha: Blanco, Almidón
M1, Glucosa.

ANALISIS DE RESULTADOS:

Reacción de Molish:
“En primera instancia se aclarará que todas las
pruebas fueron negativas para el patrón blanco
en razón a que se trataba de agua destilada, es
decir, no contenía ningún tipo de carbohidrato.
Ahora bien, de acuerdo con (Quesada, 2007)
respecto a la prueba de Molish, ésta debía ser
positiva para M1, el patrón glucosa y el patrón
almidón, esto debido a que en esta reacción se
utiliza el ácido sulfúrico en la reacción de
deshidratación de los monosacáridos de cada
muestra para luego llevar a cabo la reacción de
condensación del furfural, obteniendo así como
resultado una coloración morada en todas las
muestras que contengan cualquier
carbohidrato. La M1 tiene presencia de
carbohidratos.” (Robles, Alzate, & Aguilera,
2013).
Reacción de Lugol:
“El Lugol es una sustancia (compuesta
principalmente por yodo) que se utiliza para
detectar el almidón de una solución, es un
líquido amarillo que al reaccionar con
polisacáridos adopta coloración azul negra o
café; la reacción del almidón con el yodo, no es
una verdadera reacción química sino una
reacción física que a su vez se forma un
compuesto de inclusión que altera las
propiedades físicas de esta molécula,
indicándonos una coloración azul negro o café”
(Herrera, Rojas, & Tarazona, 2017).
Reacción de Lugol + HCl:
La prueba se repitió, pero esta vez hidrolizando
antes cada muestra con HCl y exponiendo cada
una a un aumento de temperatura, para
descomponer cada glúcido en sus respectivos
monosacáridos, acorde a esto, todas las
pruebas debían dar negativas debido a que el
Lugol no reacciona con azúcares simples, no
obstante el almidón no se hidrolizó por completo
y al adicionar el Lugol tomó una coloración azul,
pero esta vez menos intensa en razón a que
parte de éste se hidrolizó en residuos (glucosa).
(Robles, Alzate, & Aguilera, 2013)
Reacción Benedict:
La reacción de Benedict es específica para
azúcares con su grupo carbonilo intacto. Con
los resultados obtenidos, se evidencia que la
prueba fue únicamente positiva para el patrón
glucosa, determinando así que tanto el
glucógeno presente en la M1 como el almidón
no poseen su grupo carbonilo intacto. (Perez,
2013)
“Cuando el reactivo de Benedict es calentado
con azúcares tales como la glucosa o la
maltosa, el color del reactivo cambia de azul a
verde a amarillo a naranja-rojizo, dependiendo
de la cantidad de azúcar presente. EL
anaranjado y el rojo indican la proporción más
alta de estos azúcares” (Medina & Lara, 2013)
Conclusiones
Queda por entendido que la M1 es un
carbohidrato más específicamente está
compuesta por Glucógeno, esto es posible
concluirlo gracias a que al realizar la primera
prueba (Molish) se observa la presencia de
Carbohidratos, pero esto aún no nos decía nada
así que posteriormente con la prueba reacción
de Lugol, se pudo confirmar que era Glucógeno
gracias a que nos da un valor positivo; para
finalizar se pudo corroborar que el Glucógeno
NO es un azúcar reductor (Posee su grupo
carbonilo intacto), esto se concluye ya que en la
última reacción a la que es expuesta (Benedict)
no arroja un valor Negativo.
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E-BIOMOLECULAS

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 http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/favel
a/Presentacion_Ruptura_Celular.pptx.pdf

ANEXOS

Anexo 3 (Hígado y arena en

mortero).

l
Anexo 1 ( Peso de Higado).