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LEVADURAS

1.- MARCO TEORICO:

Las levaduras son hongos que crecen generalmente por gemación, en forma de agregados
sueltos de células independientes, que pueden ser globosas, ovoides, cilíndricas o alargadas.
En algunos casos, forman cadenas de células alargadas (pseudohifas), adheridas de modo
suelto (blastospora), semejantes a un micelio, por lo que se les denomina pseudomicelio.
Algunas especies forman breves extensiones de verdadero micelio, con frecuencia septado
(tabicado). Hay especies de levaduras esporógenas. No existe, por tanto, un límite de
separación definido entre levaduras y otros hongos que forman un micelio típico.

Algunos hongos patógenos para el hombre presentan dimorfismo, pueden existir en la


naturaleza en forma de levadura (forma parasitaria) o en forma filamentosa (forma saprófita).

Las levaduras, cuando crecen sobre medios sólidos, forman colonias de aspecto característico
que recuerdan a las colonias bacterianas. En casi todas las especies de interés industrial, el
modo habitual de reproducción vegetativa es por gemación. A diferencia de los mohos, las
levaduras no pueden identificarse solamente por sus caracteres morfológicos; se precisa la
ayuda de pruebas bioquímicas para la identificación específica.

1. Pruebas morfológicas:
- Aspecto de las colonias
- Observación microscópica de los cultivos
- Presencia de ascospora.

2. Pruebas fisiológicas
a. Temperatura máxima de crecimiento
b. Crecimiento en presencia de cicloheximida
c. Capacidad de utilizar diversos compuestos como fuente única de carbono
d. Capacidad de utilizar diversos compuestos como fuente única de nitrógeno
e. Capacidad de fermentación de diferentes azúcares
f. Capacidad de crecimiento con altas concentraciones de glucosa.
g. Actividad ureasa
2.- PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES UTILIZADOS
 Medio de cultivo PDA selectivo
 Solución de agua peptonada 0,1%
 Espátula
 Erlenmeyer
 Frascos Shott
 Gradillas
 Micropìpeta
 Pipetas
 Probetas

EQUIPOS Y UTENSILIOS UTILIZADOS


 Incubadora
 Balanza analítica
 Mechero de bunsen
 Trípode
 Malla

METODO
Se realizo la practica para análisis de Mohos y Levaduras por el método de siembra por
dilucion

OBJETIVO

Determinar Mohos y levaduras en una muestra de yogurt


PROCEDIMIENTO

Se realiza limpieza del área de trabajo y de los materiales a utilizar durante la misma practica

Se preparan 120 ml de medio de cultivo PDA, pesando 4,68 g y se diluyen en 120 ml de agua
en un Frasco shott, seguidamente se lleva a ebullición con ayuda de un mechero de bunsen,
sobre un trípode con placa.

Se prepara 108 ml de agua Peptonada, pesando 0,918 g de NaCl y 0,108 g de peptona, se


disuelven en un frasco shott. Con ayuda de una pipeta graduada se transfieren 9 ml de agua
Peptonada a 2 tubos de ensayo los cuales se deben marcar como 10-2 y 10-3, la solución de
peptona se debe identificar como 10-1.

Después de preparar el medio requerido y el juego de diluciones se esteriliza el material junto


con los tubos de ensayo, las cajas de Petri envueltas en papel Kraft y las puntas de la micro
pipeta. Se esteriliza nuevamente el área de trabajo con una solución de alcohol al 1% y se
enciende el mechero. Después de esterilizar se atempera el juego de diluciones, el medio PDA
y las cajas de Petri se identifican en la tapa de cada una con la dilución que corresponde 10-1,
10-2 ó 10-3, teniendo en cuenta que cada dilución se realiza siembra por duplicado.

Se pesan 10 g de yogurt y se disuelven muy bien y se transfieren en el frasco shott identificado


como 10-1 se tapa el frasco y se agita constantemente para que se disuelvan los
microorganismos que contenía. Luego se toma con la micro pipeta 1ml de la primera dilucion y
se transfiere al tubo identificado como 10-2, se tapa y agita hasta homogenizar totalmente la
muestra, seguidamente se toma con la micro pipeta 1 ml de la segunda dilución y se transfiere
al tubo identificado como 10-3, se tapa y agita hasta homogenizar totalmente la muestra.

Seguidamente, se toman las cajas Petri previamente marcadas con 10-1, 10-2 y 10-3 y
utilizamos las micro pipeta para agregar 1 ml de muestra de las diluciones teniendo en cuenta
que corresponda la dilución con la identificación de cada caja Petri, esta operación se realiza
junto al mechero para evitar contaminación cruzada en el ambiente en el momento de la
siembra. Después se procede a servir el medio agar PDA más o menos 20 ml cada caja, se
homogeniza suavemente para que la muestra y el medio se mezclen, se deja gelificar y se
tapan. Para finalizar se llevan a incubar a 22-25ºC durante 3 a 5 días.

BIBLIOGRAFIA

- https://ecobiouvm.files.wordpress.com/2014/02/hongosmohosylevaduras.pdf
- https://issuu.com/holmaneduardo/docs/informe_microbiologia_practica_de_m