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I. INTRODUCCIÓN
El conocimiento del desarrollo del embrión de pollo nos ayudará a tener una
perspectiva dinámica de la anatomía al mostrar una visión histórica de la génesis de los
distintos tejidos y órganos del animal, lo que a su vez nos permite comprender con más
facilidad la morfología del ave adulta. De esta manera podremos elegir el momento concreto
del desarrollo en que queremos actuar en nuestra experimentación. Por otro lado,
conociendo la embriología del ave podemos analizar las diferencias con los mamíferos, lo
que será de utilidad a la hora de plantear nuestra investigación, decantándonos por el
modelo animal más apropiado para el experimento concreto a realizar.
La fertilización tiene lugar en el infundíbulo del oviducto de la gallina, que es la
primera porción del mismo. Conforme el huevo progresa por el oviducto, como ya hemos
visto, el embrión sufre en primer lugar los procesos de SEGMENTACIÓN o división ovular.
Esta división será condicionada por el vitelo, y será incompleta o meroblástica, con cuatro o
cinco divisiones con carioquinesis o división del núcleo completas, pero con citoquinesis o
división del citoplasma incompletas. Estas “células abiertas” estarán abiertas a la masa
vitelina. En este momento el disco germinal pasa a denominarse blastodermo o blastodisco.
Alrededor de la segmentación en estadio de 64-células tendremos células como tal,
llamadas blastómeras. Pronto se limitan los elementos celulares y se separan del vitelo
subyacente, apareciendo entre ambos un espacio o cavidad subgerminal. Las blastómeras
que cubren directamente la cavidad son las blastómeras centrales, que al igual que el nudo
embrionario de mamíferos formará las estructuras embrionarias. Las células más periféricas,
las blastómeras marginales, formarán algunas de las membranas extraembrionarias. En este
momento tendremos un blastodermo que presenta externamente dos regiones: el área
pelúcida, o central que se sitúa encima de la cavidad subgerminal, y el área opaca, o
periférica. En el transcurso de la segmentación se establecen los ejes de polaridad del
embrión: primero el eje dorso-ventral y después el craneo-caudal.
Aproximadamente en el momento de la puesta se desprenden células del
blastodermo por un proceso de delaminación, que comienza en el polo caudal,
obteniéndose una BLÁSTULA con células en la superficie, o epiblasto, y células en
profundidad, o hipoblasto. Entre ambas poblaciones tendremos una cavidad o blastocele.
El proceso de GASTRULACIÓN se inicia con un engrosamiento en el polo posterior del
blastodisco, en la zona marginal posterior, por una expansión en esta zona del epiblasto. Se
inicia así un desplazamiento hacia la línea media de las células del epiblasto en una
secuencia caudorrostral, acumulándose células en la línea media caudal. Esta convergencia
progresiva de células en la línea media es la línea primitiva, que marca la situación del futuro
eje longitudinal del embrión. El extremo craneal de ésta línea primitiva se ensancha y
conforma el denominado nudo primitivo o nudo de Hensen.
Durante la fase de la neurulación tiene lugar la formación del tubo neural, y además
el comienzo del desarrollo del tubo digestivo, del corazón y de la delimitación del cuerpo
embrionario a partir de las tres hojas embrionarias.
Existen muchas y variadas técnicas de estudio que utilizan el embrión de pollo como
modelo experimental. A continuación pasaremos a comentar algunos aspectos prácticos de
su uso en una experimentación, aportando ejemplos concretos que muestren las ventajas
que proporciona dicha utilización.
A. Incubación
Comenzaremos hablando sobre cómo obtener embriones de pollo, primer paso a la hora
de plantear cualquier estudio en embrión de ave. Normalmente se trabaja con huevos
fertilizados o embrionados proporcionados por granjas productoras de los mismos o de
pollos de un día, que son los que se venden habitualmente a las granjas para su engorde.
Estos huevos deben mantenerse a una temperatura ideal de 10-12ºC antes de incubar,
tiempo que debe ser el menor posible pues darán mejor resultado los huevos “frescos”.
Huevos conservados por debajo de 4ºC reducen su viabilidad para incubar. Por encima de
27ºC comienza el desarrollo aunque de forma alterada. Utilizaremos un incubador comercial
que consta de una cámara con termostato ajustado a la temperatura idónea, que será de 37-
38ºC, la cual debe mantenerse constante. Debe también evitarse la deshidratación del
embrión, para lo que se dispondrá de un recipiente con agua en la base del incubador, que
asegura una humedad alta. Además, si se realizan experiencias que sobrepasen la semana de
incubación, deberá contar el incubador con un sistema de volteo del huevo que favorecerá
el desarrollo del animal y evitará que éste se pegue a las membranas testáceas o de la
cáscara.
C. Técnicas in ovo
Se pueden realizar muchos experimentos permitiendo que el desarrollo del animal
continúe tras nuestra manipulación, pudiendo comprobar el resultado de nuestra
intervención en el tiempo. En este tipo de experimentos el embrión de pollo es muy
interesante, y la existencia del huevo facilita mucho el manejo y las manipulaciones a
realizar en el embrión.
En esta línea están todas las experiencias de
quimeras, que tantos resultados han
prestado y prestan en la actualidad a la
embriología experimental. Por medio de las
quimeras podemos realizar transplantes de
grupos de células o tejidos en otra especie
que permita una diferenciación del
hospedador y el injerto. Esto es posible con
la codorniz y el pollo. Las células de la
codorniz presentan un gran nucleolo, con
una heterocromatina densa, mientras que
en el pollo normalmente hay dos o más
nucleolos (le Douarin, 1969). De esta forma
se pueden diferenciar los tejidos mediante
la técnica de Feulgen (que marca ADN) o
una modificación del método de
hematoxilina de Harris.
codorniz pollo
Realizaremos el estudio del desarrollo de las primeras fases del embrión de pollo con el
fin de comprender como tienen lugar algunos de los procesos fundamentales en embriología,
así como la utilidad de este modelo en experimentación animal y la importancia de conocer los
distintos fenómenos ontogénicos.
Realizamos la apertura del huevo como si quisiéramos realizar alguna técnica in ovo.
Tenemos que exponer el embrión a nuestra manipulación pero de manera que el animal
pueda proseguir su desarrollo y obtener un porcentaje de supervivencia aceptable. Para
exponer el embrión se realizan dos orificios en los polos del huevo y a continuación se
levanta la cáscara con cuidado, y ayudados por la punta de una tijera, se rasgan las
membranas testáceas y se añade suero o un tampón, que separa el embrión y vitelo de la
cáscara. Ahora se extrae albúmina (“clara”) para conseguir reducir un poco el volumen del
contenido del huevo, y que el embrión “descienda”, quedando un espacio entre las
membranas testáceas y el contenido del huevo. Ahora disecamos las membranas testáceas y
añadimos una solución del colorante rojo neutro al disco embrionario o al embrión, que nos
permitirá visualizar mejor el embrión in toto y el resto de las estructuras. Procederemos a la
datación (clasificación Hamburger y Hamilton, 1951) y estudio de embriones de ave de distintos
estadios HH, que corresponderán a 24, 48, 72, 96 horas de incubación.
También procederemos a aislar el embrión y observarlo detenidamente tras una
sección en “U” de las envueltas del mismo, lo recogeremos con unas pinzas finas sin tocarle.
Posteriormente lo depositaremos en una placa de Petri con una solución tampón o agua, y
bajo lupa realizaremos una disección consistente en eliminar todas las envueltas que
acompañan al embrión (restos de vitelo, membrana vitelina, amnios...) para una mejor
visualización de las distintas estructuras y regiones de interés embrionario.
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