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Tema 13 PDF
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Tema 13
Por otra parte, cada vez es más frecuente la incorporación de algún sistema
automático para llevar a cabo alguna operación específica dentro de los métodos
instrumentales, automatizando parcialmente la operación. Así, por ejemplo, el sistema
de muestreo automático es casi imprescindible en absorción atómica cuando se utiliza
el horno de grafito para la atomización de la muestra, pues solo así se consigue buena
reproducibilidad.
* La velocidad con que se realizan los análisis suele ser significativamente más
alta que cuando se utilizan dispositivos manuales.
tiempo que se consigue con los instrumentos automatizados y a que las máquinas
no se fatigan.
.
PROCESO
variable manipulada variable controlada
Mecanismo Instrumento
(p.ej. válvula) de medida
señal Comparación
de salida .
CLASIFICACION
Discontinuos
Métodos Flujo segmentado
automáticos Continuos
Flujo no segmentado (FIA)
Robotizados
* M. Valcarcel y M.D. Luque de Castro. "Análisis por Inyección en Flujo". Universidad de Córdoba (1984).
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Muestreador
R1 R2
Detector
mezcla, etc. tra. etc.
Registro
Transporte mecánico
Desecho
Figura 13.2. Esquema de analizador automático discontinuo.
* La abreviatura FIA corresponde a las siglas de la versión anglosajona "Flow Injection Analysis".
Métodos automáticos de análisis 6
INSTRUMENTACION
Tubo
de reacción
reactivo Sistema
Sistema Detector
o carrier de propulsión de
inyección
(Ej. Hg(SCN) 2 +Fe 3+ ) (Ej. FeSCN 2+ , rojo)
Desecho
Sistemas de propulsión
. Gas
inerte
.
Reactivo
a b
Sistemas de inyección
Este componente del sistema FIA tiene como misión situar una cantidad
perfectamente definida de muestra en la corriente del carrier. Es importante que el
volumen de muestra insertada sea exacto, perfectamente reproducible y variable
dentro de un margen amplio.
Los primitivos sistemas FIA utilizaban para insertar la muestra jeringas, sin o
con aguja. En la figura 13.5.a. se muestra esquemáticamente uno de los dispositivos de
inyección consistente en dos bloques que comprimen un disco de silicona que actúa de
“septum”. Este puede recambiarse fácilmente cuando se deteriore, si bien, es posible
efectuar varios cientos de inyecciones antes de que eso suceda.
Actualmente, casi todos los sistemas FIA utilizan válvulas rotatorias para
insertar la muestra en el flujo. En la figura 13.5.b. se ha representado una válvula
rotatoria sencilla. La muestra, contenida en un tubo de volumen conocido, se introduce
en la corriente de fluido portador mediante un giro de 90º. Generalmente, la muestra
está contenida en un bucle de volumen variable. Con este sistema, se consigue una
buena reproducibilidad de los volúmenes suministrados, rapidez y facilidad de manejo,
así como una aceptable capacidad de automatización.
muestra
extremo de la aguja
septum
a tubo de plástico b
Figura 13.5. Sistemas de inyección de la muestra.
Sistemas de detección
Un detector, para que resulte adecuado en FIA, deberá poseer las siguientes
características: pequeño volumen, bajo nivel de ruido, señal independiente del caudal,
respuesta rápida y lineal en un amplio margen de concentración y alta sensibilidad.
Claudio González Pérez 9
flujo
electrodo
de trabajo
electrodo
de referencia
electrodo
de referencia
Ag
(electrodo de trabajo)
tubo de acero
flujo (electrodo auxiliar)
Detectores ópticos. Los detectores basados en métodos ópticos son, con gran
diferencia, los sistemas más utilizados en FIA. Dentro de ellos, los detectores
espectrofotométricos pueden considerarse como los de mayor importancia, debido a
la gran cantidad de especies capaces de absorber radiación de forma selectiva en las
regiones ultravioleta y visible.
Las típicas células de flujo comerciales suelen aplicarse con buenos resultados a
la detección fotométrica en FIA, si bien, también se utilizan células en forma de Z
(figura 13.8.) y otras construidas con alguna finalidad concreta.
paredes de cuarzo
radiación radiación
flujo
Por analogía con los términos, polarograma, cromatograma, etc., la señal analítica
obtenida en un sistema FIA se denomina por algunos autores, fiagrama. Se trata de
una representación de la señal medida (absorbancia, fluorescencia, diferencia de
potencial, etc.) frente al tiempo (figura 13.9.)
.
.
h
ta ∆t
T T'
inyección
señal máxima hasta que vuelve de nuevo a la base, tiempo de arranque o de aparición,
ta, (el transcurrido entre la inyección y el inicio del fiagrama) y tiempo durante el cual
aparece la señal, ∆t.
Para que un fiagrama quede definido, hay que conocer el tiempo de arranque, las
coordenadas del máximo (T, h) y ∆t.
SEPARACIONES EN FIA
membrana detector
reactivo
muestra desecho
.
Los iones y las moléculas pequeñas pasan a través de la membrana, mientras que
las moléculas grandes no lo hacen.
muestra reactor
fase 1
fase 1 Separador
Segmentador
fase 2 Detector
fase 2
1
1
2 2
Figura 13.11. Extracción líquido-líquido en FIA.
Los fundamentos teóricos del FIA están relacionados con la dispersión, que
puede definirse como la dilución que sufre un volumen de muestra inyectada en el
flujo en un sistema determinado. Se caracteriza por el perfil de concentraciones que
en un momento dado adquiere el "trozo" o "bolo" intercalado en un lugar determinado
sin interrumpir el flujo.
FACTORES FISICOS
C C C C
t t t t
a b c d
Por otra parte, el perfil de la muestra insertada depende del tiempo transcurrido
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Co
D=
C
s
colorante
portador Detector h
a t
colorante Detector ho
b t
Por lo que respecta al caudal, al aumentar éste, disminuye la dispersión, así como
también el tiempo de arranque y la anchura de pico, como se muestra en la figura
13.15.b.
.
V4 D
s 1
V3 s Q
1
V2 Q Q > Q >Q3
2 1 2
V 4>V 3>V >V
2 1
V1
2 Q3
.
4
t t
a b
Figura 13.15. Influencia del volumen de muestra y del caudal sobre la dispersión.
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.
20 cm
s 2
50 cm D
100 cm 4
200 cm
8
t
Figura 13.16. Influencia de la longitud del tubo.
Hay que mencionar que, además de la longitud del tubo, influyen su forma (recto,
serpentín, etc.) y, por supuesto, el relleno que eventualmente pueda contener.
FACTORES QUIMICOS
Las principales características diferenciales del FIA con respecto a los métodos
analíticos, en orden a la sensibilidad, selectividad, precisión, rapidez, coste y
versatilidad pueden resumirse en los siguientes:
Sensibilidad. Los métodos FIA son menos sensibles que los manuales, debido a la
existencia de la dispersión o dilución del analito en el portador, y a que, cuando tiene
lugar algún proceso químico, se obtienen rendimientos parciales, como consecuencia de
tiempos de reacción pequeños.
Una forma de aumentar la sensibilidad consiste en utilizar la técnica de parada
de flujo. En esta modalidad, el flujo se detiene, con lo que la dispersión cesa casi por
completo y se permite que la reacción transcurra hasta completarse. Para utilizar esta
técnica es necesario un dispositivo de control del tiempo que detenga la bomba en
momentos precisos.
Coste. La técnica FIA se caracteriza por ser más barata que cualquier otra
técnica automática que permita obtener resultados análogos. El bajo coste, no solo se
refiere a la instrumentación, sino al consumo de reactivos. En este último aspecto
supera claramente a las técnicas manuales.
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APLICACIONES
Muestra
NaOH 2M
Detector
NaOH 2M
λ = 410 nm
R. Nessler
Bomba Muestra
Calibrado
aniónicos en aguas
Tabla 13.1.
Determinación de contaminantes en aguas por FIA.
rojo de pirogalol y
Al3+ fotométrica 0–0.3 p.p.m. 20
n-tetradecil-
trimetilamonio
NO3– — electr. selectivo 10–5–10–2 M 90
NO2– Griess fotométrica 80–800 mg/mL 70
SO42– precipitación turbidimétrica 5–200 g/mL 60
PO43– molibdato fotométrica 3x10–7 M
Tabla 13.2.
Aplicaciones del FIA en Química Clínica