Está en la página 1de 12

Impronta genómica

Genomic Imprinting

Dra. Elisa Dyce Gordon

Hospital Pediátrico Provincial Docente Dr. Eduardo Agramonte Piña. Camagüey,


Cuba.

RESUMEN

La impronta genómica es un proceso por medio del cual las células germinales
masculinas y femeninas le confieren una marca o huella específica a ciertas
regiones cromosómicas. Es un importante proceso del desarrollo de los mamíferos,
incluyendo los seres humanos que pone de manifiesto la necesidad de la presencia
de ambos genomas, materno y paterno, para un desarrollo embrionario normal.
Este fenómeno tiene importantes implicaciones para enfermedades cromosómicas,
cánceres en el niño y otras enfermedades asociadas con retraso mental. Hasta el
momento la impronta genómica no es bien reconocida entre los médicos. Con el
objetivo de actualizar en este tema, se presenta esta revisión.

DeCS: EXPRESIÓN GÉNICA, NEOPLASMAS, NIÑO, SÍNDROME DE FRAGILIDAD DEL


CROMOSOMA X.

ABSTRACT

Genomic impronting is a process by which the male and the famele germline confer
a sexspecific mark (imprint) on certain chromosomal regions. It is an important
mammalian developmental process, incluiding humans, hat expose the necessity of
both, maternal and paternal genomes for a normal embrionic development. This
phenomena has important implications for chromosomal diseases, childood cancers
and other disorders associated with mental retardation. So far, genomic imprinting
is not well recognized by doctors. With the aim of bringing up todatein this theme,
this review is presented.

DeCS:GENE EXPRESSION; NEOPLASMS; CHILD; FRAGILE X SYNDROME.


INTRODUCCIÓN

Según los principios Mendelianos, en la herencia autosómica dominante (AD) un


gen mutante es trasmitido por un progenitor afectado al 50% de su descendencia,
tanto a hembras como a varones, y esta afección es expresada de la misma forma
sea cual sea el progenitor trasmisor.

Además, con cierta frecuencia pueden observarse saltos generacionales en los


arboles genealógicos, los cuales han sido explicados como casos de penetrancia
incompleta o expresividad variable.1 Sin embargo, actualmente se sabe que en un
número considerable de trastyornos genéticos , la expresión del fenotipo de la
enfermedad, depende del progenitor trasmisor, hecho muy relacionado con un
fenómeno modificador de la expresión génica , que recibe el nombre de Impronta
Genómica.

DESARROLLO

Impronta Genómica. Concepto:

La impronta genómica (IG) es un proceso que resulta en una expresión diferente


del material genético , en dependencia del trasmisor del mismo, es decir, se refiere
al hecho de que ciertos genes están marcados o tienen huella, de forma tal que
ellos se expresan de forma diferente cuando han sido heredados de la madre, de
cuando han sido heredados del padre.2-6

Un alelo está marcado o improntado cuando es capaz de ser suprimido por su


expresión por factores maternos o paternos, o posiblemente por otro gen o genes. 7

Este fenómeno fue descrito por primera vez por Helen Crouse en 1960 en la Mosca
Sciara8 y posteriormente múltiples experimentos entre los que se destacan los
trasplantes pronúlceos2,4,5,9 y la construcción de quimeras4,6 ambos ratones,
indicaron que este fenómeno verdaderamente existe y ocurre en diferentes
especies, incluyendo los mamíferos .

Evidencias en el Humano

La mola hidatiforme completa (tumor placentario diploide cuyo complemento


cromósico es únicamente derivado del padre) y el tetaroma ovárico, que contiene
múltiples tipos de tejidos pero difiere del embrión normal y cuyo complemento
cromosómico diploide proviene de la madre4,10 así como los triploides humanos (
embriones con tres copias de cromosomas haploides, 3n, constituyen una fuerte
demostración diferencial del material genético materno y paterno10 por lo que se
requiere siempre de la presencia de ambos genomas para el desarrollo embrionario
normal.

Otras evidencias muy interesantes, con importantes implicaciones son:

I. Síndromes por Deleción Cromosómica


En el humano hay evidencias de que el origen parenteral del cromosoma que porta
una deleción o translocación determina o modifica las manifestaciones clínicas de
varios síndromes.4 Dos ejemplos típicos con el Síndrome de Prader Willi (SPW) y el
Síndrome de Angelman (SA). Cursan ambos con retraso mental, pero son
marcadamente diferentes. El SPW está caracterizado por hipotonía, obesidad,
hipogonadismo, manos y pies pequeños4 mientras que los pacientes con el SA
tienden a ser hiperactivos , con alegre disposición y risa frecuente e inusual , facies
característica denominada marioneta feliz o happy puppet, movimientos atáxicos
repetitivos , simétricos, así como convulsiones.

En la mayoría de los casos, ambos síndromes están asociados a la deleción del


brazo largo del cromosoma 15 (zona crítica 15q11q13) y citogenéticamente se ha
determinado que cuando la deleción es paterna se produce el SPW y cuando es
materna se origina el SA.4

Resultan en diferentes fenotipos dependiendo del origen parental del cromosoma


delecionado , lo que indica que esa región del cromosoma 15 tiene impronta y que
posiblemente un gen o grupo de genes son expresados solo por el cromosoma
paterno resultando en el SPW cuando no está presente, mientras que en un
segundo gen o grupo de genes en esta región expresada solo en el cromosoma
materno resulte en el SA cuando está delecionado4,11,12

II. Disomía Uniparental (DUP)

Se define como la presencia de dos miembros de un par cromosómico heredados de


un solo progenitor2,4

Esta puede presentarse en un niño afectado por una enfermedad con herencia
autosómica recesiva cuando solo uno de los padres es portador4

La DUP ha sido reportada para el cromosoma 7 en casos de Fibrosis Quística (FQ) y


baja talla5 así como para el cromosoma 11 paterno asociada al Síndrome de
Beckwith Wiedemann , caracterizado por onfalocele, macroglosia, gigantismo,
hipoglicemia neonatal y está predispuesto a tumores embrionarios, incluyendo el
tumor de Wilms.

También ha sido reportada para los SPW y SA en algunos casos que no tienen
deleciones. En el SPW la disomía del cromosoma 15 es materna y en el SA la
disomía es paterna.4

Disomías cromosómicas humanas han sido reportadas por varios cromosomas, así
como para los cromosomas sexuales.

En todos estos casos hay ausencia de un cromosoma de uno de los padres, y la


ausencia total o más probablemente la ausencia de una región crítica del mismo, o
sea, responsable del efecto fenotípico resultante. Se ha considerado la IG como la
causa fenómeno. Queda claro que la contribución de ambos progenitores es
necesaria y complementaria para elnorma crecimiento y desarrollo.

II.Otras enfermedades

Otras muchas enfermedades difieren en fenotipos, edad de aparición y severidad en


dependencia del sexo del progenitor que trasmite el gen. 10 Entre ellos, la forma
juvenil de la enfermedad Huntington (EH) y la ataxia espinocerebelosa se inician
más temprano cuando se hereda del gen padre, incluso la EH tiende a ser mucho
más severa, mientras la distrofia muscular miotónica o enfermedad de Steiner es
más severa cuando la trasmisión es materna.4,10 La neurofibromatosis tipo 1,
aunque no invariablemente. Estas diferencias también han sido observadas en la
neuroframatosis 2, el SBW y la ataxia cerebelar, entre otras. 4,10

IV. Cáncer

Una fuerte evidencia de un efecto del origen del gameto le ha proporcionado el


tumor glomus familiar.4 Se hereda de modo AD, pero exclusivamente por vía
paterna, hallazgo inconsciente con este modo de herencia, pero que puede se
explicado por la IG.

Otros tumores se producen por mutaciones de genes supresores del tumor,


observándose dos eventos:

1er evento: Inactivación por mutación génica


2do evento: Pérdida del cromosa con el alelo normal

Si el locus supresor del tumor es sometido a inactivación por impronta , esta


inactivación puede servir como el primer evento. En tumores en los cuales el
segundo evento es la pérdida de todo o parte de un cromosoma por falta de
regulación. Estos datos se han obtenido de tumores como el de Wilms, el
osteosarcoma, el retinoblastoma bilateral y el rabdomiosarcoma embrionario,
donde casi todo el cromosoma retenido es el paterno y se pierde el cromosoma
materno.4

V. Inactivación del Cromosoma X

El cromosoma X al igual que los cromosomas autósomicos está impuesto al


fenómeno de la impronta.4 Un ejemplo muy especial en el humano lo constituye el
Síndrome de Fragil X, entidad que presenta resgos faciales carasterísticos
(macrocefalia, cara alargada y estrecha, orejas grandes y prominentes, mentón
grande)? macroorquidismo pospuberaly retraso mental.

El gen causante del Síndrome de Fragil X, denominado FMR1 se trasmite de forma


recesiva ligada al sexo, pero de forma inusual. Según los estudios de Sherman
(paradoja de Sherman) , el 20 % de los hombres del árbol genealógico portan el
gen y son fenotípicamente normales.3

En esta enfermedad hay hombres y mujeres muy portadores, sin embargo solo las
mujeres tienen descendencia afectada, ya que el gen adquiere un sello distintivo
cuando proviene de la madre.

Herencia De Los Genes Improntados

El alelo improntado se trasmite según la herencia Mendeliana, pero la expresión del


mismo estará determinada por el sexo del progenitor que trasmite el gen.2,4,7 En la
impronta materna, la expresión fenotípica de un gen normal o anormal no ocurre
cuando es trasmitido por su padre, ya que está inactivado. Sin embargo, cuando el
mismo gen trasmitido por su padre, por sus hermanos o por sus hijos , así será
expresado, y en caso de ser defectuoso puede causar el fenotipo, trasmiten el gen,
sus descendientes que heredan el gen expresarán el mismo y manifestarán el
fenotipo, pero los descendientes de sus hijas portadoras no manifestantes no lo
expresaran.2,4 Lo contrario ocurre en la impronta paterna.
Un pedigree de un gen puede semejar una herencia AD ( consaltos
generacionales),7 una herencia multifactorial? pero difiere de la herencia recesiva
ligada al xexo mitocondrial, por lo que los árboles genealógicos deben
confeccionarse los más grandes y detallados posibles para garantizar una adecuada
interpretación de los mismos.

Mecanismo de Impronta

La marca o huella parece ser que se produce durante la gametogénesis,


probablemente durante la meiosis, etapa en que los cromosas se aparean
permitiendo que ocurra algún cambio físico4 que provoca la inactivación génica .
Varias evidencias en ratones transgénicos indican que el factor de impresión de
mamiferos es la metilación y esta a su vez está relacionada con regulación
transcripcional de la actividad génica. La presencia de metilación puede inactivar o
mantener activados los genes por lo cual queda abolida la transcricipción del gen y
este no es expresado. Si están hipometilados, están hipometilados , están
activados y se expresan.

Por último, la variabilidad genética en el fenotipo improntado puede ocurrir no solo


por el alelo improntado o modificado sino también por la influencia de genes
modificadores y el ambiente.

Papel de la Impronta

La IG tiene un papel importante en el desarrollo embrionario? es responsable de


patrones de herencia irregulares y expresiones variables de un número de
enfermedades en el humano, así como muy importante en el establecimiento de
eventos predisponentes a ciertas formas esporádicas de cáncer, y aunque la
mayoría de las observaciones y experimentos que demuestran la IG están
asociados a situaciones anormales, este proceso normal involucrado en varios
aspectos del desarrollo de los mamíferos.3

CONCLUSIÓN

El fenómeno de IG es muy importante y debe ser apreciado por los médicos con
vistas a profundizar en los conocimientos acerca del desarrollo humano y de varias
enfermedades, sobre todo aquellas relacionadas con el crecimiento, conducta y
desarrollo de células anormales.

La IG no contradice las leyes Mendel, al contrario, ayuda a entender la variablidad


de expresión de determinados genes, casos de penetrancia y anticipación . Estos
conocimientos le permitirán al médico hacer una reevaluación y ayudará también a
perfeccionar el asesoramiento genético.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Thompson JS, Thompson MW. Genética Médica. Patrones de trasmisión de los


rasgos monogénicos. 3 ed. La Habana : Editorial Científico técnica, 1985: 60108.
2. Austin KD, Hall JG. Non traditional intheritance. Pediat Clin Norteam Genetics II.
1992;39(2):35548.

3. Wilson GN, Hall JG. Genomic imprinting : summary of the NICHD conference. Am
J Med Genet 1993;46:67580.

4. Sapienza C, Hall IG. Genetic imprinting in human disease. In: Scriver CR. The
metabolic and molecular bases of in inherited disease. 7 th ed. USA: Editorial New
York. 1995: 43758.

5. Kalousek DK, Barrett Y. Genomic imprinting related to prenatal diagnosis.


Prenatdiagn 1994;14:11911201.

6. Hall JG. Genomic imprinting: nature and clinical relevance. Am Rev Med
1997;48:3544.

7. Toomey KE. Medical genetics for the practitioner. Pediatrics 1996;17(5):163 74.

8. Barlow DP. Imprintin: a gamete s point of view. Perspectives 1994;10(6):194


99.

9. Uranga JA, Arechaga J. Cell proliferation is reduced in parthogenetic mouse


embryosat the balstocyst stage: cuantitative study. Anat Rec 1997;247(2):2437.

10. Cattanach BM. Chromosome imprinting and its significative for mammalian
development. Genome analysis 1991;2:4147.

11. Glenn CC, Driscoll DJ, Nicholls RD. Genomic imprinting? potential function and
mechanisms revealed by the Prader Willi and Angelmann syndromes. Mol Hum
Reprod 1997;3(4):32132.

12. Jay P, Roogeulle C, Malzac P. Willi syndrome chromosomal region. Nat genet
1997;17(3):35761.

La impronta genética o "imprinting" es un fenómeno genético por el que ciertos genes


son expresados de un modo específico que depende del sexo del progenitor. Es un
proceso biológico por el cual un gen o dominio genómico se encuentra marcado
bioquímicamente, indicando su origen parental. Las improntas pueden deberse a
uniones covalentes (metilación de ADN) o no covalentes (interacciones ADN-ARN). El
proceso de impronta requiere una maquinaria enzimática nuclear. Diferentes formas de
impronta genética se han descrito en hongos, plantas y animales.1 No obstante, la
impronta genética es un fenómeno mucho más raro en mamíferos, en los que la mayoría
de los genes no son improntados.

En los organismos diploides las células somáticas tienen dos copias del genoma. Por lo
tanto, cada gen autosómico está representado por dos copias o alelos, cada una de ellas
heredada de un progenitor en la fertilización. En la gran mayoría de los genes de los
autosomas, se expresan las 2 copias, tanto la procedente del padre, como la proveniente
de la madre. Sin embargo en una pequeña proporción de los genes (<1%), su expresión
depende de solo uno de los alelos, pues el otro está silenciado debido a la impronta
genética. La expresión del alelo depende, por tanto, de su origen parental. Por ejemplo,
el gen codificante para el factor de crecimiento insulínico tipo 2 (IGF2/Igf2), se expresa
solo en el alelo heredado del padre, por lo que se tendría un caso de impronta materna.
La impronta genómica parental se establece en la gametogénesis, en la que un
cromosoma de cada pareja de homólogos es segregado al gameto.

Un gen impreso, es decir, cuando tiene uno de los dos alelos silenciado,es
funcionalmente haploide, lo que elimina la protección que confiere ser diploide contra
mutaciones recesivas, además, su expresión puede ser desregulada epigenéticamente.
Por tanto, estos genes representan locus susceptibles de ser alterados funcionalmente
tanto genética como epigenéticamente. Actualmente, existen métodos para predecir el
estado de impresión del genoma, diferenciando entre genes expresados
monoalélicamente y bialélicamente.

La impronta genómica supone una de las excepciones a las leyes de Mendel por lo que
está fuera de la llamada genética clásica.

Índice
 1 Introducción
 2 Genes improntados en mamíferos
o 2.1 Mapeado genético de genes improntados
o 2.2 Mecanismos de impronta
 3 Enfermedades relacionadas
o 3.1 Síndrome de Prader-Willi/Angelman
o 3.2 Otras enfermedades
 4 Mecanismos de control
o 4.1 Estudios citogenéticos
 4.1.1 Cariotipaje convencional
 4.1.2 FISH
o 4.2 Estudios moleculares
 4.2.1 Southern Blot
 4.2.2 PCR
 4.2.3 Polimorfismos en microsatélites
 5 Véase también
 6 Referencias

Introducción
La impronta genómica puede definirse como la expresión selectiva de un gen según el
origen parental del alelo (paterno o materno).

El término "impronta" fue introducido originalmente para describir un fenómeno


observado en el insecto Pseudococcus nipae.2 En los pseudocóccidos (cochinillas de la
harina) tanto el macho como la hembra se desarrollan a partir de un huevo fertilizado.
En las hembras, todos los cromosomas permanecen en forma de eucromatina y
funcionales. En los embriones destinados a convertirse en macho, un set haploide de
cromosomas pasa a estar en forma de heterocromatina después de la sexta división
celular y permanece como tal en la mayoría de los tejidos, de tal forma que los macho
son funcionalmente haploides.345 En insectos en general, la impronta afecta a
cromosomas completos. En algunos insectos el genoma paterno completo es
"silenciado" en la descendencia masculina, lo cual está implicado en la determinación
del sexo. Los procedimientos de impronta producen efectos similares a los mecanismos
en otros insectos que eliminan los cromosomas paternos heredados en la descendencia
masculina, incluyendo la arrenotoquia.6

En mamíferos, la impronta genética describe los procesos involucrados en la


introducción de desigualdades funcionales entre dos alelos parentales de un gen.7

La impronta genética puede también asegurar que los transposones permanezcan


epigenéticamente silenciados por medio de la reprogramación gametogénica para
mantener la integridad genómica.

Genes improntados en mamíferos


Que la impronta genética pudiera ser un rasgo del desarrollo en mamíferos fue sugerido
por primera vez en los años 70 por medio de experimentos de cruzamiento con ratones
portadores de translocaciones cromosómicas.8Experimentos de trasplante de núcleos en
cigotos de ratón a principios de los 80 confirmaron que el desarrollo normal requiere la
contribución de ambos genomas, el materno y el paterno. La mayor parte de los
partenotes/ginogenotes (con dos genomas maternos o procedentes de un óvulo) o
androgenotes (con dos genomas paternos o procedentes de un espermatozoide) mueren
durante o antes de la fase de blastocisto o de implantación. En los pocos casos en los
que se desarrollan hasta la fase de postimplantación, los embriones ginogenéticos
muestran un mejor desarrollo embrionario en relación al desarrollo placentario, mientras
que para los androgenotes ocurre a la inversa. De cualquier forma, estos últimos casos
fueron apenas descritos en varios artículos científicos del año 1984.91011

Casos de partenogénesis espontánea no ocurren en mamíferos debido a la impronta de


genes. Sin embargo, en 2004, un grupo japonés consiguió, por medio de la
manipulación experimental de la impronta por metilación paternal del gen del factor de
crecimiento insulínico tipo 2 (Igf2), el nacimiento de un ratón llamado Kaguya con dos
sets de cromosomas maternos (aunque no se trató de una verdadera partenogénesis, ya
que se usaron células de dos hembras distintas). Los investigadores fueron capaces de
tener éxito usando un óvulo de un progenitor inmaduro (reduciendo de esta manera la
impronta materna) y modificándolo para expresar el gen Igf2, que es normalmente
expresado en la copia paterna.

Los embriones partenogenéticos/ginogenéticos tienen el doble de la expresión normal


de los genes maternos derivados y carecen de la expresión de los genes expresados
paternalmente, lo contrario ocurre para los embriones androgenéticos. Se sabe que hay
al menos 80 genes improntados en humanos y ratones, muchos de los cuales están
implicados en el crecimiento y el desarrollo embrionario y placentario.12131415 La
descendencia híbrida de dos especies distintas puede exhibir un crecimiento inusual
debida a la nueva combinación de genes improntados.16

Se han usado diferentes métodos para identificar genes improntados. En cerdos,


Birchoff et al. en 2009 compararon perfiles transcripcionales usando microarrays de
oligonucleótidos cortos (Affymetrix Porcine GeneChip) para estudiar los genes
expresados diferencialmente entre partenotes (con dos genomas maternos y fetos control
(con un genoma materno y el otro paterno)17 Un intrigante estudio sobre el
transcriptoma de tejidos cerebrales de rató reveló más de 1300 [[locus|loci improntados
(aproximadamente 10 veces más de los conocidos hasta ese momento) por medio de la
secuenciación de RNA (RNA-Seq) con secuenciadores Illumina a partir de híbridos F1
resultantes de cruces recíprocos.18 Estos resultados han sido, no obstante, puestos en
duda por otros estudios que alegan que esto es una sobrestimación de alrededor de un
orden de magnitud debida a un análisis estadístico erróneo.1920 En esta dirección y
empleando técnicas de estudio de perfiles de metilación en todo el genoma por
combinación de WGBS (Whole Genome Bisulfite Sequencing, secuenciación del
genoma completo con bisulfito) y arrays Infinium HumanMethylation450 BeadChip, un
reciente estudio de Court et al.21 ha podido identificar un número muy superior a lo
esperado de DMRs (regiones diferencialmente metiladas) improntadas en muestras de
diferentes tejidos humanos, muchas de las cuales no aparecen además improntadas en
otros mamíferos, como los ratones.

Mapeado genético de genes improntados

Mecanismos de impronta

La impronta genética es un proceso dinámico. Debe ser posible borrar y restablecer las
improntas en cada generación de tal manera que los genes improntados en un adulto
puedan expresarse en su descendencia (un ejemplo de ello son los genes maternos que
controlan la producción de insulina, los cuales se improntan en un espécimen masculino
pero pueden volver a ser expresados en cualquiera de sus descendientes que expresen
esos genes). La naturaleza de la impronta es, por tanto, más epigenética que dependiente
de la secuencia de ADN. En las células germinales, la impronta es borrada y a
continuación restablecida de acuerdo al sexo del individuo: así por ejemplo, een los
espermatozoides en desarrollo durante la espermatogénesis se establece una impronta
paterna mientras que en los ovocitos que darán lugar a los futuros óvulos (durante la
ovogénesis) se establece una impronta materna. Este proceso de borrado y
reprogramación22 es necesario hasta el punto de que el estado de impronta de las células
para el sexo del individuo. Tanto en plantas como en mamíferos existen 2 mecanismos
principales que están implicados en establecer la impronta, la metilación del DNA y las
modificaciones de histonas:

 La metilación del DNA tiene lugar preferentemente en las llamadas islas CpG,
localizadas en las regiones promotoras de múltiples genes.
 Entre las modificaciones postraduccionales de histonas destacan la
acetilación/desacetilación de residuos de lisina y la metilación.

En un reciente estudio publicado en 201421 se ha propuesto un nuevo mecanismo


heredable de impronta en tejido placentario, independiente de la metilación del ADN y
para el que se barajan dos hipótesis diferentes: una modificación de histonas que
confiera la impronta en estos loci específicos de placenta o bien que DNMTs
(metiltransferasas de DNA) puedan ser reclutadas a estos loci por un factor de
transcripción aún desconocido durante la diferenciación trofoblástica.
Enfermedades relacionadas
La impronta genética puede causar problemas en la clonación, dando lugar a células hija
(clones) que tienen ADN que no está metilado en las posiciones correctas. Esto puede
deberse a una falta de tiempo para que la reprogramación se lleve a cabo correctamente.

Síndrome de Prader-Willi/Angelman

Algunas enfermedades genéticas humanas están relacionadas con la impronta, entre


ellas el síndrome de Angelman y el síndrome de Prader-Willi, ambos ligados a la misma
región del cromosoma 15 (se hereda recíprocamente). Ambas enfermedades fueron las
primeras relacionadas con la impronta genética que se descubrieron en humanos. Lo que
provoca estas enfermedades es la pérdida de la región 15q11-13 del cromosoma 15, que
contiene los genes SNRPN y NDN del padre y el gen UBE3A de la madre.

 La herencia paterna en la deleción de esta región está asociada con el síndrome


de Prader-Willi.
 La herencia materna de la misma deleción está asociada con el síndrome de
Angelman.

Otras enfermedades

Otra enfermedad llamativa de este tipo es el síndrome de Beckwith-Wiedemann el cual


afecta al cromosoma 11. Los seres vivos y especialmente aquéllos con reproducción
sexuada, heredamos dos copias de cada gen autosómico, una copia que proviene de la
madre y otra copia que proviene del padre. Ambas copias son funcionales para la
mayoría de los genes pero en algunos, una copia es silenciada, mientras la otra es
funcional.

Además, diferentes estudios han observado23 que en niños nacidos a través de técnicas
de reproducción asistida existe un mayor riesgo sufrir enfermedades epigenéticas
(incluidos los llamados “desórdenes de impronta”, como los trastornos antes
mencionados). Esto puede deberse a que, en un contexto clínico, los "loci" improntados
específicos de tejido placentario puedan ser propensos a la inestabilidad epigenética
durante el uso de las técnicas de reproducción asistida, ya que el primer paso de
diferenciación que da lugar a trofectodermo ocurre cuando los blastocistos en desarrollo
están en cultivo.

Asimismo, hay una teoría "imprinted brain theory" que dice que una impronta
desequilibrada puede ser la causa autismo y psicosis.

Mecanismos de control
Cuando queremos determinar si el imprinting genómico ha sido el mecanismo
responsable de una patología, primero se tiene que buscar el árbol genealógico del
afectado y comprobar que la enfermedad se da por igual en los dos sexos y en todas las
generaciones. Se puede sospechar del imprinting como causante de una enfermedad
cuando la misma patología se expresa diferente entre los miembros de una misma
familia. Una vez determinado esto, tenemos diferentes métodos de estudio para
diagnosticar:

Estudios citogenéticos

Cariotipaje convencional

Haciendo un cariotipaje convencional podemos observar diferentes aberraciones


cromosómicas como translocaciones o duplicaciones. Cuando observamos en un
paciente estas anomalías, tenemos que cariotipar también a los progenitores para
determinar si se trata de una mutación de novo o de una mutación hereditaria
(imprinting o no).

FISH

Mediante esta técnica podemos determinar si la región que creemos que ha estado
sometida a imprinting ha sido deleccionada, translocada o duplicada. Este método solo
nos permite observar imprinting originado por delecciones u otras anomalías
cromosómicas, pero no los que tienen como origen las disomias uniparentales o las
mutaciones en el centro del imprinting.

Estudios moleculares

Consisten en el uso de pruebas moleculares para observar la implicación del imprinting


en determinadas enfermedades.

Southern Blot

Mediante esta técnica se pueden estudiar las metilaciones del DNA. Se usan sondas
específicas para el loci propensos a sufrir imprinting genómico (por ejemplo, el brazo
largo del cromosoma 15, donde hay varios loci que son importantes en enfermedades
como Prader-Willis o de Angelmann). Se trata de una técnica muy sensible y específica
que permite detectar las metilaciones pero no los mecanismos por los cuales se han
formado. Para este método se requiere una gran muestra del paciente, pero podemos
prescindir totalmente de analizar a sus progenitores.

PCR

Mediante una PCR tratada con bisulfato sódico podemos observar también los
patrones de metilación. Este tratamiento con bisulfato sódico desamina las citosinas y
las transforma en uracilos. Cuando las citosinas de la muestra se encuentran metiladas,
el bisulfato sódico no tinene efecto y la citosina continúa siendo una citosina. Grácias a
estas caracterísitcas, la PCR permite hacer una distinción entre la información genética
que proviene del padre y la que proviene de la madre dependiendo de los patrones de
metilación.

Polimorfismos en microsatélites

Son pruebas en las que se presuponen conocimientos previos referentes a que en el


genoma de los individuos hay zonas que son polimórficas (diferentes), haciendo que
cada individuo sea diferente de otro. Mediante el uso de microsalitélites se puede
analizar las zonas críticas del imprinting (como el ejemplo antes mencionado del
cromosoma 15). Con esta técnica podemos detectar cualquier vía de formación de
imprinting (deleciones/translocaciones; disomias uniparentales; mutaciones en el centro
de imprinting).