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1 pH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS
Nombres E-mail
Tosse Bravo Daniela Sofia danielatosse@unicauca.edu.co
Ailyn Dayanna Omen Hormiga ailyno@unicauca.edu.co
2 Laboratorio de Bioquímica General, Biología, FACNED, Universidad del Cauca
3 Fecha de realización de la práctica: 29/04/2019
4 Fecha de entrega de informe: 06/05/2019
5 RESUMEN
6 Las soluciones amortiguadoras tienen por finalidad mantener constante el pH de una solución,
7 frente a cambios bruscos por adición de ácidos o bases fuertes. En esta práctica se prepararon siete
8 soluciones de diferente pH mezclando un volumen determinado de ácido acético (0.2M) y acetato
9 de sodio (0.2M) con el propósito de comprobar la capacidad amortiguadora de las soluciones y
10 determinar su pH haciendo uso de un potenciómetro y también de la ecuación de Henderson-
11 Hasselbach. Se compararon los valores teóricos con los experimentales de la práctica y se evidencio
12 que en su mayoría arrojaban valores similares para ambos procedimientos, pero aun sí el valor
13 experimental presentaba error alcalino puesto que hacia parecer los pH un poco más ácidos.
14 Adicionalmente se comprobó que el H2O a pesar de tener un pH neutro no actúa como
15 amortiguadora ya que presenta un cambio brusco al adicionar bases o ácidos.
16 1. INTRODUCCIÓN
17 En los seres vivos se llevan a cabo muchas reacciones químicas al interior del organismo, en donde
18 están involucrados compuestos orgánicos que tienen propiedades acido-básicas; para que todo
19 funcione de manera correcta, las células del organismo deben mantenerse en ciertos parámetros
20 tales como: la temperatura, la adecuada producción de energía, los niveles de agua, sales y
21 minerales, del mismo modo el pH de los fluidos corporales. El pH es una medida de acidez o
22 alcalinidad de una sustancia, es decir determinación de la presencia de un ácido o base, en el caso
23 del ácido, este se refiere a toda sustancia que en disolución acuosa se disocia con formación de
24 iones hidrogeno, (H+); mientras que una base, es toda sustancia que en disolución acuosa se disocia
25 formando iones hidróxido, (OH-). En los medios biológicos el pH es una constante muy importante
26 para los procesos vitales, para ello existen unos sistemas reguladores de las variaciones de los pH
27 conocidos como: amortiguadores, buffer o tampones; los cuales consisten en un sistema acuoso

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1 compuesto por un ácido débil (dona protones) y una base conjugada (acepta protones), este sistema
2 tiende a resistir cambios en el pH al agregarle pequeñas cantidades de ácidos (H+) o bases (OH-).
3 2. METODOLOGÍA
4 Primero preparamos las soluciones mezclando Ácido Acético (0.2M) y Acetato de Sodio (0.2M)
5 en vasos de precipitado de 10mL para después calcular sus respectivos pH, tanto calculados como
6 determinados, estos últimos fueron obtenidos gracias al pH-metro y los otros debido a la ecuación
7 de Henderson-Hasselbach. Posteriormente se retiraron 5ml de cada una de las soluciones para luego
8 adicionarles 0.5mL de Ácido Clorhídrico (0.1M) para así determinar su pH de la misma forma que
9 en el paso anterior, de igual forma se realizó, pero en este caso con Hidróxido de Sodio (0.1M).
10 Finalmente, en dos vasos de precipitado se les añadió a cada uno 5.0mL de agua destilada, paso
11 seguido se le midió su pH; a ambos se les adiciono 0.5mL de HCl (0.1M) y al otro NaOH (0.1M)
12 como paso final se determinó con el pH-metro sus pH, además, de su pH calculado gracias a la
13 ecuación ya antes mencionada.
14 3. RESULTADOS
15 Tabla 1. pH teóricos y determinados.

Solución (mL) pH pH + HCl + HCl +NaOH +NaOH

(N°) calculado det. pH pH pH pH
Acetato Ácido calculado det. calculado det.
1 10.0 0.0 13.31 7.69 6.1 9.16
2 8.0 2.0 5.36 5.08 5.36 5.1 5.43 4.9
3 6.0 4.0 4.95 4.60 4.89 4.7 4.98 4.6
4 5.0 5.0 4.76 4.42 4.72 4.5 4.80 4.4
5 4.0 6.0 4.58 4.20 4.54 4.3 4.63 4.2
6 2.0 8.0 4.16 3.76 4.08 3.9 4.23 3.8
7 0.0 10.0 2.72 2.51 1.9 3.7
16 HCl: Ácido clorhídrico (0.1M), NaOH: Hidróxido de sodio (0.1M)
17 Tabla 2. pH teórico y determinado de H2O
Muestra + HCl + HCl pH Muestra de + NaOH + NaOH
de agua pH calculado pH Agua agua pH calculado pH
determinado det. determinado
1 2.04 6.0 7,6 2 11.96 12.04
18 Cálculos:
19 Para calcular los pH de las soluciones se va a trabajar con el pKa=4.76 además de usar la ecuación
20 de Henderson-Hasselbach:
[𝐴− ]
21 𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + 𝐿𝑜𝑔
[𝐻𝐴]

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1 Ec 1.
2 En donde A- representará a la base y el HA al ácido
3 Los complementos de los cálculos están anexados en el documento Cálculos
4  Cálculo de la solución N°1: 𝑝𝐻 = 14 − 0.69 = 13.31
5  Cálculo de la solución N°2: De esta misma forma se efectúan los cálculos hasta el N°6
8.0𝑚𝐿
6 𝑝𝐻 = 4.76 + 𝐿𝑜𝑔 = 5.36
2.0𝑚𝐿
7  Cálculo de la solución N°7: 𝑝𝐻 = −𝐿𝑜𝑔[1.89𝑥10−3 ] = 2.72
8  Con HCl, 0.1M, 0,5mL
9 Volumen: mL L = 0.0005L Ec 2.
10 Aplicamos Ec 2. para la transformación de los volúmenes del Ac-, HAc, HCl y NaOH.
11 Molaridad: 5𝑥10−5 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝐻𝐶𝑙
12 Ec 3.
13 Aplicamos Ec 3. para la transformación de los moles del Ac-, HAc, HCl y NaOH.
14  Cálculo de la solución N°2: De esta misma forma se efectúan los cálculos hasta el N°6
15 𝐴𝑐 − + 𝐻𝐶𝑙 ⇆ 𝐻𝐴𝑐 + 𝐶𝑙 −
16 Rx 1.
17 Aplicamos Ec 1: 𝑝𝐻 = 5.36
18  Con NaOH, 0.1M, 0,5mL
19  Cálculo de la solución N°2: De esta misma forma se efectúan los cálculos hasta el N°6
20 𝐻𝐴𝑐 + 𝑁𝑎𝑂𝐻 ⇆ 𝑁𝑎𝐴𝑐 + 𝐻2 𝑂
21 Rx 2.
22 Aplicamos Ec 1: 𝑝𝐻 = 5.43
23 4. ANÁLISIS DE RESULTADOS
24 Una solución amortiguadora, es aquella que está compuesta por la mezcla de un ácido débil y una
25 base conjugada, este sistema mantiene estable el pH de una sustancia ante la adición de cierta
26 cantidad de ácido o una base1. Para este laboratorio, se realizó el estudio del pH en soluciones
27 amortiguadoras con acetato de sodio y ácido acético, los cuales forman un sistema amortiguador:
28 CH3COOH CH3COO- + H+
29 CH3COONa CH3COO- + Na+
30 De las 7 muestras, 5 de ellas fueron soluciones amortiguadoras, cada una con un pH de acidez
31 menor a 6 (Tabla 1). La primera y última solución no son consideradas como amortiguadoras, dado
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1 que el pH de un sistema amortiguador depende de la proporción relativa entre la sal y el ácido, pero
2 no de las concentraciones absolutas de estos componentes2. Por otra parte, en las soluciones 2 a 6
3 si hubo la mezcla entre el ácido débil y la base conjugada, logrando determinar así cada uno de los
4 pH con ayuda del pH-metro y la ecuación de Henderson-Hasselbach; en todas se notó una
5 diferencia entre ambos valores, debido en parte a un error experimental. En las muestras 2 y 3 en
6 donde la proporción de acetato de sodio era mayor a la del ácido acético, se determinó que gracias
7 a esta característica se observa que el pH no tiende a tener un nivel de acidez muy alto. En la
8 solución 4, se identificó como la mejor solución amortiguadora, dado que su pH calculado dio un
9 valor equivalente (Tabla1) a la constante de pKa, esto quiere decir que el compuesto ionizable en
10 cuestión, la mitad está protonado y su otra mitad está desprotonado3. Las soluciones 5 y 6 en donde
11 la proporción de acetato de sodio era menor a la del ácido acético, se determinó que gracias a esta
12 característica se observa que el pH de las soluciones disminuye a medida que la cantidad de ácido
13 aumenta, con disminución se refiere a que el nivel de acidez es mal alto. Para las muestras de las
14 soluciones amortiguadoras a las que se les añadió el ácido (HCl) y la base (NaOH) también se les
15 determino el pH, en el caso del ácido, al añadir una pequeña cantidad de este, la base conjugada de
16 la solución reguladora (iones CH3COO-) consumirá los iones H3O+ procedentes del ácido4, es por
17 ello que el pH calculado de las soluciones varía entre 4 y 5.36.
18 CH3COO (ac) + H3O+ (ac) CH3COOH(ac) + H2O
19 Y al añadir la base, la reserva ácida de la solución amortiguadora (acido acético) neutraliza los
20 iones de HO- procedentes de la base4, el pH calculado varia entre 4.23 y 5.43.
21 CH3COOH(ac) + HO- (ac) CH3COO (ac) + H2O
22 Por último se tomaron muestras de agua destilada a la cuales se le adicionó al igual que a las
23 soluciones buffer ácido y base fuerte, en estas, se observa cómo con una pequeña cantidad de ácido
24 o base su pH varia, lo cual nos muestra cómo el agua con un pH neutro no logra mantenerlo al
25 sufrir modificaciones según la sustancia que se le adicione, es por esta razón que no puede actuar
26 como amortiguador así posea en solución iones OH- y H+, ya que ésta va a preferir estar en forma
27 molecular además que funciona de buena manera como soporte para las sustancias que pueden
28 actuar buffer al no afectar en prácticamente nada en el pH de la sustancia5.
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1 5. CONCLUSIONES
2 1. De la práctica se concluye que las soluciones a partir de sustancias, al resistirse a los
3 cambios en el pH demuestran ser soluciones que tienen una capacidad buffer o
4 amortiguadora.
5 2. Se aprendió que gracias a la ecuación de Henderson-Hasselbach, al arrojar los resultados
6 teóricos se puede tener una idea de que tan correctos o incorrectos son los valores
7 experimentales que arroja el pH metro en el momento de la práctica.
8 3. Se evidenció que el agua al presentar un pH neutro no actúa como solución amortiguadora
9 ya que éste cambia desproporcionalmente al adicionar mínimas cantidades de ácidos o
10 bases fuertes.
11 4. Se aprendió que, al agregar un ácido fuerte al amortiguador, los iones H+ del ácido fuerte
12 son consumidos por el anión proveniente de la sal, formando moléculas del ácido no
13 ionizado, impidiendo así que ocurran cambios en el pH.
14 6. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
15 6.1. Comparar los resultados teóricos con los obtenidos usando el pH metro. ¿A que pueden
16 deberse las posibles discrepancias para cada caso?
17 Comparando los resultados (está realizada en el punto 3 de resultados (Tabla 1)) obtenidos del pH-
18 metro con los teóricos, observamos que no coinciden por pequeñas cantidades, una de las razones
19 que pude causar esto es las falencias en la manipulación y preparación de las soluciones buffer lo
20 que produjo una alteración en su pH teórico o real, también a una mala calibración y/o mal manejo
21 del instrumento por parte de los estudiantes ya que para que exista una buena lectura de pH la
22 solución debe cubrir cuidadosamente la punta del electrode; a su vez este también tiene que estar
23 totalmente limpio cuando se vaya a realizar otra lectura porque al dejar el instrumento con residuos
24 de la anterior muestra se alteraría el resultado que arrojaría.
25 6.2. Indicar cuál de las soluciones es la que cumple mejores funciones como buffer. ¿Está de
26 acuerdo con este resultado? Explique su respuesta.
27 La solución que mejor cumple la función de amortiguadora es la numero cuatro, basándonos en los
28 datos experimentales, además la refuerza la teoría que dice que la máxima capacidad
29 amortiguadora se consigue cuando las concentraciones del ácido y su base conjugada son las
30 mismas, y a su vez son equimolares, por consiguiente el pH=pKa, entonces así se concluye que
31 ésta es la solución con mejor función buffer puesto que las concentraciones de los reactivos son las

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1 mismas, en la Tabla 1 se presenta un error experimental, ya sea por una mala calibración o un mal
2 uso del pH-metro6.
3 6.3. ¿Cuál es el objetivo de adicionar HCl y NaOH a los vasos con agua? Expresar una
4 conclusión del resultado obtenido en este caso.
5 La hidrólisis es la reacción del agua con una sustancia. Entre las sustancias que pueden sufrir esta
6 reacción se encuentran numerosas sales que, al ser disueltas en agua, sus iones constituyentes se
7 combinan con los H3O+ con los OH-, procedentes de la disociación del agua. Esto produce un
8 desplazamiento del equilibrio de disociación del agua y como consecuencia se modifica e pH
9 bruscamente.El HCl es un ácido muy fuerte, por tanto, en solución se disocia liberando un anión
10 cloruro (Cl-) y un protón (H+) que reacciona con el H2O para dar un catión hidronio
11 HCl + H2O H3O+ + Cl-. La teoría de Bronsted y Lowry también explica que el agua pueda
12 mostrar propiedades anfóteras, esto es, que puede reaccionar tanto con ácidos como con bases. De
13 este modo, ésta reacciona como base en presencia de un ácido más fuerte que ella7.
14 6.4. ¿Cuantos mL de NaH2PO4 deben agregarse a 250mL de Na2PO4 0.1M con el propósito
15 de preparar un amortiguador de fosfato 0.1M de pH 7.0?
16 No se puede realizar el buffer ya que se pide que sea un buffer de fosfato y el ion fosfato es la
17 última disociación del ácido fosfórico y el pKa es en ese punto de 12, entonces el rango seria en
18 este caso entre 11, 12, 13 y no se cumpliría la regla, para que sea un buffer de pH=7 se tendría que
19 trabajar con la primera y segunda disociación8.
20 7. Bibliografía
21 1. http://amortiguadoresbiologicos.blogspot.com/ Citado el 04/05/2019 a las 4:56pm
22 2. https://docgo.net/doc-detail.html?utm_source=ph-y-amortiguadores-y-reaccion-de
23 soluciones-amortiguadoras Citado el 04/05/2019 a las 10:49 pm.
24 3. http://www.biologia.arizona.edu/biochemistry/problem_sets/ph/10t.html Citado el
25 04/05/2019 a las 6:00pm
26 4. http://www.eis.uva.es/organica/practicas/P5-Reguladoras.pdf Citado el 04/05/2019 a las
27 9:50pm
28 5. https://es.khanacademy.org/science/biology/water-acids-and-bases/acids-bases-and-
29 ph/a/acids-bases-ph-and-bufffers Citado el 04/05/2019 a las 11:19 pm.
30 6. VOET, Donald, VOET, Judith, PRATT, Charlotte. Fundamentos De Bioquímica/
31 Fundamental of Biochemistry. 2007. Pág. 35
32 7. https://es.scribd.com/document/363475757/Hidrolisis Citado el 03/05/2019 a las 09:02 am.
33 8. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/tareamortiguadores_23714.pdf Citado el
34 03/05/2019 a las 04:38 pm.

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