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4,7

METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS - TEST DE GLUCOSA


Juan Sebastián Delgado1 / Andrés Felipe Murcia2/ Valentina Parra Rozo1

Resumen:
Introducción: La glucosa es un carbohidrato que funciona como principal fuente de energía
para el organismo, con ayuda de la insulina pasa del torrente sanguíneo a las células.
Dependiendo de los niveles de la glucosa en la sangre podrían derivarse problemas de salud
si no se mantiene en niveles estables ya sea por exceso (hiperglucemia) o deficiencia
(hipoglucemia) en el sistema circulatorio; para esto existen diferentes tipos de pruebas que
determinan si su concentración se encuentra dentro de los límites saludables, por lo que la
cuantificación de su concentración en la sangre es de suma importancia.Objetivo: El objetivo
de la práctica es determinar las variaciones de valores de glucosa normales en la sangre de
animales con valores experimentales. Materiales y métodos: En el desarrollo de esta
práctica fueron utilizados plasma sanguíneo al que se le adicionó 14µl de una muestra de
sangre de bovino y una muestra de suero a la que se le adicionó una cantidad desconocida
de plasma sanguíneo equino, se realizaron baños serológicos a 37°C durante 10 minutos y Commented [V1]: Esto no tiene sentido
se obtuvieron muestras que se les midió absorbancia con un espectrofotómetro con una
longitud de onda de 505 nm. Resultados: Los resultados obtenidos indican que la
concentración de glucosa fue mayor en la muestra de suero, indicando que la absorbancia es
directamente proporcional a la glucosa concentrada en la muestra. Las muestras dieron
concentraciones de 9mmol/L para el plasma equino y 10,5mmol/L para el suero bovino, lo
que indicó hiperglucemia, la que pudo ser causada por defectos enzimáticos, insulínicos o de
sintetización de glucógeno. El excedente de glucosa puede derivar en problemas de
glucogenosis, diabetes o cáncer. Conclusiones: Se concluyó que la metodología ofrece
resultados precisos, confiables y válidos. Las muestras presentaron hiperglucemia, causada
por problemas genéticos del organismo, y puede derivar en enfermedades letales.
Palabras Clave: Glucosa, peroxidasa, absorbancia, suero, plasma.

Abstract:
Introduction: Glucose is a carbohydrate that functions as the main source of energy for the
body, with the help of insulin passes from the bloodstream to the cells. Depending on blood
glucose levels, health problems may result if it is not maintained at stable levels either by
excess (hyperglycemia) or deficiency (hypoglycemia) in the circulatory system; for this there
are different types of tests that determine if its concentration is within the healthy limits, so the
quantification of its concentration in the blood is of utmost importance. Objective: The
objective of the practice is to determine the variations of values of normal glucose in the blood
of animals with experimental values. Materials and methods: In the development of this
practice blood plasma was used to which 14μl of a sample of bovine blood and a serum
sample were added, to which an unknown amount of equine blood plasma was added,
serological baths were performed at 37 ° C for 10 minutes and samples were obtained which
were measured absorbance with a spectrophotometer with a wavelength of 505 nm. Results:
The results obtained indicate that the glucose concentration was higher in the serum sample,
indicating that the absorbance is directly proportional to the glucose concentrated in the
sample. The samples gave concentrations of 9mmol / L for equine plasma and 10.5mmol / L
for bovine serum, which indicated hyperglycemia, which could be caused by enzymatic, insulin
or glycogen synthesizing defects. The excess glucose can lead to glycogenosis, diabetes or
cancer problems. Conclusions:: It was concluded that the methodology offers accurate,
reliable and valid results. The samples showed hyperglycemia, caused by genetic problems
of the organism, and can lead to lethal diseases
Key Words: Glucose, peroxidase, absorbance, serum, plasma.
en los organismo vivos (Solís, 2011).
Introducción Dentro de los monosacáridos se
Los carbohidratos son moléculas Commented [V2]: Recuerden que el formato es a una
sola columna. Cuando se envía un artículo para
orgánicas que están constituidas por encuentra la glucosa, principal fuente de publicación, este se envia en una sola columna y el
editor de la revista es quien lo pasa a dos columnas.
hidrógeno, oxígeno y carbono, las cuales energía que es almacenada en el hígado
participan como almacenamiento y fuente en forma de glucógeno y que por medio de
de energía. Conforme a la cantidad de la insulina producida por el páncreas se
moléculas que participan en la formación mantiene un nivel adecuado (Inga, 2014).
de carbohidratos, es posible distinguir a los Asimismo los niveles de glucosa en sangre
que cuentan con una sola molécula afectan de manera radical al cerebro y
llamados monosacáridos, los que otros órganos, pues cuando se presentan
presentan dos moléculas, disacáridos, de concentraciones altas o muy bajas, se
3 a 9 moléculas corresponde a los puede producir un choque insulínico
oligosacáridos y los de más de 10 (pérdida de la conciencia).
moléculas son denominados polisacáridos Finalmente, es importante señalar que la
(Ucha, 2009). El metabolismo de los práctica determina la cuantificación de las
carbohidratos logra definirse como los variaciones de la glucosa frente a la
procesos bioquímicos de formación, sobrecarga de los carbohidratos a nivel
ruptura y conversión de los carbohidratos sanguíneo en especies como bovinos y
equinos, de igual forma, se reconoce el
valor normal de glucosa en suero o plasma preciso, debido a su selectividad por la
de las especies y se presenta la glucosa, impidiendo afecciones por otros
correlación e interpretación de los compuestos presentes en las muestras de
resultados obtenidos. sangre (Vargas, et al).
El método se fundamenta en la reacción de
Marco teórico la enzima glucosa oxidasa catalizada por
La glucosa es la fuente primordial de la oxidación de glucosa a gluconato y
energía de los organismos vivos, al ser el peróxido de hidrógeno. La concentración
monosacárido más sencillo y más fácil de de glucosa es proporcional al H2O2 , y éste
degradar para las células (Asimov, 1980). último se detecta con un aceptor
Este compuesto es el que entra al citosol cromogénico de oxígeno, fenol 4-
de las células del torrente sanguíneo para aminofenazona, en presencia de
llevar a cabo las rutas metabólicas, peroxidasa. La reacción del método es
permitiendo la producción de energía que ilustrado en la figura 1:
permite a los seres vivos llevar a cabo sus
funciones vitales más importantes.
Para los organismos, mantener los niveles
de glucosa en niveles estables es de vital
importancia para no presentar problemas
de salud. La carencia de glucosa puede Figura 1: Reacción química del método enzimático para

derivar en problemas de hipoglucemia; el determinación de glucosa en sangre.


Fuente: Manual de prácticas bioquímica clínica (pág. 73-
exceso de glucosa puede derivar en 75). UNAM. 2009.
problemas de hiperglucemia, lo que puede De esta forma, la muestra puede ser
causar enfermedades como la diabetes, o analizada en un espectrofotómetro al
problemas metabólicos en el cuerpo. formar un complejo cuya coloración es
(Janssen). directamente proporcional a la cantidad de
Por estos motivos, la comunidad médica glucosa presente en la muestra, y que
internacional considera de vital puede ser determinada en unidades de
importancia realizar chequeos médicos mg/dL mediante la fórmula:
periódicamente en aras de determinar si la Ecuación 1:
cantidad de glucosa en sangre que tiene
un organismo es la adecuada.
A lo largo de la historia, diversos métodos
de cuantificación de glucosa en sangre han En los estudios clínicos, para determinar si

sido desarrollados y utilizados. Sin el organismo de la muestra presenta

embargo, hoy día el método enzimático es problemas de hiperglucemia (valor de

el más utilizado al ser el más eficiente y glucosa en sangre por encima del
considerado normal) o hipoglucemia (valor
de glucosa en sangre por debajo del
considerado normal, se compara el valor
de concentración obtenido con los valores
de glucosa en sangre considerados
normales según diferentes fuentes de
información. Para los valores de este Commented [V3]: La foto no es necesaria, de hecho
informe, se utilizaron los valores este no es el equipo que usamos. Lo mejor es anotar
la referencia y marca del equipo, que si es un dato
considerados por Husvéth, F (Husvéth, importante.

2011) y Tadich, N, et al (Tadich, et al,


1997) presentados en la figura 2:

Figura 3: Elementos de laboratorio utilizados durante la


práctica
Fuente: Elaboración propia

Para el desarrollo de la práctica, en primer


lugar, se utilizaron 2 tubos de ensayo
(rotulados como suero y plasma) a los
cuales se les agregó 1 ml de la solución de
trabajo. Posteriormente, para el primer
tubo se le adicionaron 14µl de suero
bovino y para el segundo se adicionó una
Figura 2: Valores de glucosa en sangre normales en
cantidad desconocida de plasma equino
diferentes animales.
Fuente: Physiological and reproductional aspects of como se observa en la tabla 1.
animal production. Husvéth, F. (2011).

La conversión de mmol/L a mg/dL para la


Tabla 1. Cantidades trabajadas
práctica fue ejecutada con la ecuación 2:
Ecuación 2: Tubo 1 Tubo 2

Solución de 1 1
trabajo (ml)

Suero (µl) 14
Materiales y métodos
Los materiales utilizados durante el Plasma (µl) X

desarrollo de la práctica son mostrados en


la figura 3: Posteriormente los tubos de ensayo con
las mezclas fueron llevados a un baño
serológico con una temperatura de 37°C
durante 10 minutos. Finalmente se
midieron los valores de la absorbancia Por otra parte, se denotó como la mayor
frente al blanco del reactivo mediante un absorbancia obtenida correspondió a la
espectrofotómetro con una longitud de muestra de suero, lo cual ocurrió debido a
onda de 505 nm. que era la muestra que presentó menor
turbidez de todas.
Resultados Para la determinación de la cantidad de
La figura 4 expone las muestras obtenidas glucosa en las muestras utilizadas se
en la práctica experimental: utilizó la ecuación 1, tomando en cuenta
que las cantidades utilizados en la muestra
de plasma y suero fueron de 10µl y 14µl,
respectivamente. Tras aplicar las fórmulas
se obtuvieron los siguientes resultados:
Plasma:

Suero:
Commented [V4]: El cálculo esta bien realizado

Figura 4: Muestras de plasma (izquierda) y suero


(derecha) obtenidas en la
La obtención de una concentración de
práctica experimental
Fuente: Elaboración propia glucosa mayor en la muestra de suero
concordó con la literatura, que indica que
En la tabla 2 figuran las medidas de la absorbancia de una muestra es
absorbancias obtenidas durante la directamente proporcional a la cantidad de
práctica: glucosa concentrada en esta (UNAM,
2009).
Tabla 2: Absorbancias obtenidas

Muestra Absorbancia Análisis de resultados


Con respecto a los valores de las
Blanco 0,004 absorbancias obtenidas, se apreció un
leve error experimental en la absorbancia
Patrón 0,155 del blanco, la cual debió ser cero (0), esta
desviación ocurrió por un error con el
Plasma 0,249
espectrofotómetro utilizado en la práctica,
cuya tapa permitía la filtración de la luz al
Suero 0,407
obtener las muestras, alterando los hepáticos por el excedente de glucógeno,
resultados. derivados de la glucogenosis. El
Tomando en cuenta las concentraciones excedente de insulina podría desarrollar Commented [V5]: Hay excedente de glucosa, no de
insulina.
obtenidas en las muestras, se determinó si diabetes mellitus tipo B, y si las células
estas tenían concentraciones de glucosa consumiesen más glucosa de la necesaria
normales o si presentaban hiperglucemia o podrían hacerse cancerígenas. Commented [V6]: En realidad es lo contrario, las
células cancerigenas consumen más glucosa pero la
hipoglucemia. Para esto, los valores El problema del excedente de glucosa transformación no ocurre por un exceso, de ser así
todos los diabéticos desarrollarían cancer.
obtenidos en la práctica fueron convertidos puede deberse a varios factores, el menos
a mmol/L usando la ecuación 2 y grave podría ser que el organismo
comparados con los valores hallados en consumió más glucosa de la que requería,
las figuras 2, la tabla 3 muestra los valores en una cantidad excesiva, aumentando la
obtenidos: concentración normal de esta en la sangre.
Sin embargo, es más común que este
fenómeno se presente por diversos errores
Tabla 3: Valores de sangre
experimentales y teóricos en las rutas metabólicas del animal. Un
ejemplo puede ser la ausencia de las
Experimental Teórico
(mmol/L) (mmol/L) enzimas α-amilasas y glucosidasas,
encargadas de sintetizar y degradar el
Vacas (Suero) 10,58 4,4 glucógeno, haciendo que toda la glucosa
consumida entre al torrente sanguíneo.
Caballos 9 6 Otro factor podría ser una producción más
(Plasma)
lenta de la enzima hexoquinasa, que
fomenta el inicio de la reacción de la
Tomando en cuenta los valores tomados, glicólisis, lo que implica que las células
los cuales son el máximo valor aceptable tardan más para degradar la glucosa;
de glucosa en sangre para estos animales, haciendo que esta se acumule
se determinó que las muestras utilizadas gradualmente en el torrente sanguíneo.
presentaban hiperglucemia. Considerando Esto aplicaría análogamente con retraso
que los valores de glucosa teóricos son en el desarrollo del ciclo del ácido cítrico.
suficientes para suplir las necesidades De igual manera, si hubiese baja
energéticas del organismo, se aprecia que producción de la citrato sintasa, retardando
las muestras poseen la capacidad de suplir el ciclo de Krebs, haciendo que las células
casi dos veces más la demanda requieran más tiempo para consumir
energética, lo que puede conllevar a un glucosa nuevamente. Commented [V7]: Referencia donde se leyó esta
sobredesarrollo de las células, de insulina información.
Si el problema lleva tiempo ocurriendo,
o de glucógeno, que puede llevar a pudo darse un fallo en la sintetización de
consecuencias fatales. Como problemas insulina en el páncreas, generando
diabetes y haciendo que no se pueda La hiperinsulinemia hace referencia a que
regular correctamente las necesidades la cantidad de insulina presente en la
energéticas del organismo, aumentando el sangre es mucho mayor a la que se
flujo de glucosa hacia el torrente considera normal. En humanos, las causas
sanguíneo. más frecuentes de la hiperinsulinemia son:
La ausencia de enzimas o moléculas un tumor en las células beta de los islotes
importantes para el desarrollo de las rutas del páncreas, pues son los encargados de
metabólicas en estos organismos es un la producción de insulina; que exista una
factor, generalmente, genético; causado resistencia a la insulina, o que la dosis
por mutaciones no benignas. aplicada de ésta haya sido muy alta en
personas diabéticas (Giménez, 2009). Por
Preguntas de investigación otro lado, las causas de la hiperinsulinemia
1. ¿Cuál es la relación entre el que se conocen en perros son el daño
síndrome metabólico y la diabetes pancreático y el hiperadrenocorticismo
Mellitus tipo II? (afección que surge cuando el cuerpo
El síndrome metabólico o también produce una hormona llamada cortisol en
conocido como síndrome de resistencia a abundancia, provocando debilitación el
la insulina corresponde a un grupo de sistema inmunológico, dejando al cuerpo
afecciones (exceso de grasa corporal, vulnerable a otras enfermedades e
niveles altos de azúcar en la sangre, infecciones); de igual forma, en lo gatos se
aumento de la presión arterial, entre otros) produce la hiperinsulinemia a causa de la
que al ocurrir simultáneamente influyen en extirpación o daño en los islotes
el aumento de enfermedades como pancreáticos.
problemas cardíacos, diabetes y la
probabilidad de sufrir un derrame cerebral. 3. ¿Por qué el glucógeno muscular no
En otras palabras, la relación existente es capaz de regular la glucemia?
consiste en que cuando a una persona se El glucógeno es un polisacárido que se
le diagnostica el síndrome metabólico, produce en la gluconeogénesis y es
padece de las diferentes afecciones ya liberado cuando se necesita energía,
mencionadas y por ende, si no se tratan a existen dos tipos de glucógeno, muscular y
tiempo, se aumenta de una manera hepático. El glucógeno muscular actúa
significativa el riesgo de desarrollar como combustible del músculo,
diabetes (Andrade, 2016). proporcionando energía y permitiendo la
realización de la actividad física,
2. Causas de la hiperinsulinemia generando energía anaeróbicamente,
presentada en diferentes mientras que el glucógeno hepático es la
organismos
principal fuente de glucosa sanguínea a la veces más las demandas
hora de la alimentación. energéticas del organismo.
- La hiperglucemia de las muestras
4. ¿Cómo se encuentra la actividad pudo darse por problemas
de la glucoquinasa en la diabetes y enzimáticos del organismo, que
en el ayuno? impedirían el inicio de reacciones
Cuando la glucosa entra a la célula se de glucólisis o el ciclo de krebs para
convierte en un compuesto llamado utilizar la glucosa consumida.
glucosa-6-fosfato, dentro de esta reacción, También puede darse por la
influye una enzima llamada glucoquinasa ausencia de insulina o enzimas
donde su actividad es acelerada por la para sintetizar glucógeno, lo que
insulina. Las personas que sufren de impide que haya una regulación de
diabetes no pueden producir esta hormona la cantidad de glucosa que entra al
por sí solas, es por esto que deben torrente sanguíneo.
aplicarla desde afuera para regular la - El excedente de glucosa puede
cantidad de glucosa en sangre. Por lo derivar en problemas de
tanto, la actividad de la glucoquinasa en la enfermedades de glucogenosis,
diabetes es baja, mientras que en el ayuno diabetes y otras enfermedades de
es alta. índole metabólica.
Conclusiones Referencias
- El método utilizado con glucosa ● Solís, J. (2011). SlideShare .
oxidasa es ampliamente utilizado Recuperado el 07 de 04 de 2019,
principalmente por su practicidad y de
además por ser un proceso https://es.slideshare.net/JohannaS
altamente efectivo para medir la olis1/metabolismo-de-los-
concentración de glucosa en el carbohidratos-9001451
plasma sanguíneo, lo que ofrece ● Inga, S. H. (21 de 09 de 2014).
resultados rápidos, precisos y SlideShare. Recuperado de:
válidos. https://es.slideshare.net/jhulisalove
- Los valores de las absorbancias /practica-nro-2-bioquimica-
hallados presentaban errores leves determinacion-de-glucosa el
debido a la luz filtrada por la tapa 13/04/2019.
del espectrofotómetro. ● Ucha, F. (04 de 2009). Definición
- Las muestras dadas para la ABC. Recuperado de:
práctica presentaban https://www.definicionabc.com/salu
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Unidad III-Metabolismo de
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