La secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y técnicas bioquímicas

cuya finalidad es la determinación del orden de los nucleótidos [adenia (A),

citosina (C), guanina (G) y timina (T)] en un oligonucleótido de ADN. La
secuencia de ADN constituye la información genética heredable del núcleo
celular, los plásmidos, la mitocondria y cloroplastos (En plantas) que forman la
base de los programas de desarrollo de los seres vivos. Así pues, determinar la
secuencia de ADN es útil en el estudio de la investigación básica de los procesos
biológicos fundamentales, así como en campos aplicados, como la investigación
forense.

El desarrollo de la secuenciación del ADN ha acelerado significativamente la

investigación y los descubrimientos en biología. Las técnicas actuales permiten
realizar esta secuenciación a gran velocidad, lo cual ha sido de gran importancia
para proyectos de secuenciación a gran escala como el Proyecto Genoma
Humano. Otros proyectos relacionados, en ocasiones fruto de la colaboración de
científicos a escala mundial, han establecido la secuencia completa de ADN de
muchos genomas de animales, plantas y microorganismos.

Hasta hace relativamente poco, el método de Sanger ha sido la técnica más

empleada para abordar este tipo de estudios, ya que permitía la obtención de lecturas
(fragmentos de ácidos nucleicos secuenciados) de alrededor de 1 kb, y de buena calidad,
con un error de menos de 1% por base. Sin embargo, no discernía en la detección de
homopolímeros, y requería de unos costes que, por entonces, muchos de los laboratorios
no se podían permitir.

En la actualidad, la secuenciación Sanger ha sido reemplazada para los grandes

proyectos por las nuevas estrategias. Sin embargo, sigue siendo utilizada a pequeña
escala como método de validación de resultados de las otras técnicas de secuenciación
más novedosas.
Conclusiones

El desarrollo de la secuenciación del ADN ha acelerado significativamente la

investigación y los descubrimientos en biología.

Secuenciación de Maxam-Gilbert [Maxam-Gilbert

sequiencing]
En 1976-1977, Allan Maxam y Walter Gilbert desarrollaron un método para
secuenciar ADN basado en la modificación química del ADN.
En resumen, el método requiere marcaje radiactivo en uno de los
extremos y la purificación del fragmento de ADN que se desea
secuenciar. El tratamiento químico genera rupturas en una pequeña
proporción de uno o dos de los cuatro nucleótidos en cada una de las
cuatro reacciones (G, A+G, C, C+T). Los fragmentos posteriormente se
separan por tamaño mediante electroforesis en gel, separando los
productos de las cuatro reacciones en cuatro carreras distintas, pero una
al lado de la otra.