1) fundamentos quimicos.

2) proteinas:
⚫definicion
⚫estructuras y que fuerzas las estabilizan
⚫complementaridad molecular
⚫formas de regulacion (covalentes y no covalentes.
⚫Como estudiarlas

3) ADN
⚫estructuras y que fuerzas las estabilizan
⚫definiciones
⚫compactacion
⚫como estudiar

4) replicacion, transcripcion y traduccion

⚫explicar proceso pasos etc

⚫dibujar replicosoma
⚫Explicar corte y empaleme alternativo y que producían
⚫que es un promotor, cual es su rol en la transcripción, que son los factores de elongación para
⚫que sirven y que nucleotidos utiliza para realizar su trabajo

⚫los elementos necesarios para el inicio, elongación y fin de la

traducción y explique la importancia de cada uno de ellos.. que pondría

5) Regulacion de la expresion genica

6) Tecnicas de biologia celular y microscopia

⚫ Que es la resolucion ?
Es la capidad de un sistema optico de diferenciar dos puntos entre si . Es inversamente
proporcional al limite de resolucion .

⚫ que es el límite de resolución y de qué depende?

Es la distancia minima que pueden estar 2 puntos y todavia diferenciarse entre si .

Distancia= long de onda/ (indece de refraccion x apertura numerica )
El límite de resolución (y por ende la resolución) depende de:
λ (longitud de onda): cuanto menor es la longitud de onda, menor es la D
n . sen θ (apertura numérica): cuanto mayor es la AN, menor es el D. Es la capacidad de colectar luz. El
ángulo θ está relacionado con el lente. Cuando se utilizan lentes de inmersión en aceite, el
n (índice de refracción) del aceite es más similar al del vidrio y por lo tanto la mayor parte de los rayos se
refractan. En las lentes secas, n (aire)= 1, menor AN que en lentes de inmersión.

⚫ Explique fluorescencia.
Se irradia una muestra a una determinada longitud de onda, se va a excitar un electrón va a haber una
desexcitación no radiativa y finalmente emitirá a una longitud de onda mayor.
⚫ Explique microcopia de epifluorescencia:
la luz incidente que va a excitar al fluorocromo sigue el mismo camino óptico que el haz de luz
que se emite (ambas van por el objetivo).
Se tiene una fuente de luz que emite en todas las longitudes de onda, pasa por un filtro de absorción y llega
a un espejo dicrioico que refleja la longitud de onda de absorción, atraviesa el objetivo, incide en la
muestra, se excita y emite el fluorocromo. La luz emitida pasa por el espejo dicroico (que únicamente
refleja una longitud de onda y permite el paso de todas las demás), atraviesa el filtro de emisión y llega a
nuestros ojos.
El observador nunca recibe la luz con que se excita la muestra, sólo se ve la luz emitida.

⚫Explique tecnica FRET (fluorescence resonance energy transfer).

Al excitarse un fluorocromo si hay otros fluorocromos cerca éstos pueden excitarse con la longitud de onda
de emisión del primero. Este fenómeno ocurre si las moléculas están lo suficientemente cerca (5nm).
Nos permite ver la interacción entre e inter proteínas (si los fluorocromos están en dos puntos de una
misma proteína y se acercan por un cambio conformacional).

⚫Explique tecnica FRAP (Fluorescence recovery after photobleaching).

Se irradia con luz láser de la longitud de onda apropiada la molécula en el sitio que fluoresce y se
produce un “blanqueo”( fluoróforos en esta región al recibeir una iluminación de alta intensidad que hace
que su tiempo de vida de fluorescencia caduque rápidamente).
Se evalúa cuánto tarda en recuperarse la fluorescencia (por desplazamiento de proteínas, por ejemplo). Nos
permite el estudio de la velocidad de difusión, velocidad de transporte o compartimentalización.

⚫ Definir (SIN EXPLICAR LA TECNICA) que es el cDNA. Como haria para amplificar el cDNA. Que
ventajas tiene tener una biblioteca de cDNA.

Es una hebra de ADN de doble cadena, en la que una de sus ramas constituye una secuencia
totalmente complementaria del ARN mensajero a partir del cual se ha sintetizado.
Se suele utilizar para la clonación de genes de interes.
Para amplificarlo se puede usar dos metodos
1) Vectores plasmidios:plásmidos se aislan de las bacterias y pueden ser cortados por las
enzimas de restricción junto con DNA humano, obteniendo fragmentos de restricción con
extremos cohesivos que al colocarse con DNA ligasas le permiten la formación de un plásmido
de DNA recombinante.
2) Reacción de polimerización en cadena (PCR): La reacción consiste en lo siguiente:
1º-Calentamiento para separar las hebras: se tiene el DNA, se calienta a 90ºC en un primer paso,
esto separa las hebras.
2º-Hibridación de los cebadores: para que la DNA pol replique se requieren primers, y se utilizan
primers que señalen la secuencia que se quiere amplificar (se le da un marco de lectura al proceso
de replicación)
3º-Se requieren también nucleótidos trifosfato y de la DNA pol, que en este caso se la llama Taq
polimerasa ya que es una isoforma específica que presenta resistencia a altas temperaturas.
(Este paso ocurre a 72ºC)

⚫ Que son las gotas lipidicas ? Como estudiarlas ?

⚫ Qué es una línea celular y qué diferencias tiene con cultivo primario.
⚫ Que es un Raton knockout. Para q sirve y como se obtiene. Describir y esquematizar la
obtención.
es un raton modificado por ingeniería genética para que uno o más de sus genes estén
inactivados mediante una técnica llamada bloqueo de genes.
⚫ La siguiente figura representa la estructura y el funcionamiento del operon Lac. En relación a
esto responda:
a) Que es un Operon y en que tipo de células se encuentra.
b) Complete las referencias del esquema del operon Lac que se presenta a continuación
indicando para cada condición, si el operon está activo o no, justificando brevemente su
respuesta.

⚫Quiero estudiar la localizacion celular de una proteína X: a) Clasifique las proteínas asociadas a
membrana según su interacción.
b) Qué es una línea celular y qué diferencias tiene con cultivo primario.
c) Qué tipo de vector se usa? Esquematice y explique su estructura.

⚫ los elementos necesarios para el inicio, elongación y fin de la

traducción y explique la importancia de cada uno de ellos.. que pondrían?
⚫Que es un vector de expresion para que se usa y cuales son sus componentes ?

⚫ ¿Qué es una célula transfectada y transformada?

Diga 3 métodos para reconocer que la célula fue transformada *
Célula transfectada: célula eucarionte a la cual se le insertó un DNA ajeno
Célula transformada: célula procarionte a la cual se le insertó un DNA ajeno
Las coloco en un medio con antibiótico y aquellas que incorporaron el vector sobreviven y las que
no mueren.

⚫ A) Qué son los genes master y cuál es su función?

Son los que actuan como factor clave controlando a otros genes. Su acción determina el
comportamiento de estos genes y dirige sus funciones.
EJ: gen Sxl, el gen maestro para el desarrollo sexual en Drosophila,

7) Biomembrans

⚫ Cual es la molécula principal de la bicapa lipidica ?

Fosfatidilcolina , tiene una cola hidrofoba (con 2 acidos grasos) y una cabeza polar , tiene forma
cilindrica y tiende a ordenarse en forma de bicapa en medio acuoso

⚫.Asimetría d membrana y de bicapa. B.Estructura d la asimetria d bicapa. C. Dar dos ejemplos

fisiologicos d asimetria d bicapa.

⚫ a). ¿Qué significa que la membrana sea fluida y de qué depende que las células de E.coli
conserven la fluidez de la misma.

⚫ La bomba Na+/K+ ATPasa A. ¿Que proteína transportadora es? ¿Cuál es el mecanismo de

transporte mediado por esta proteína? Y ¿Que requerimientos energéticos posee? B. ¿Por qué
decimos que es electrogenica? Justifique. C.

Definirl potencial de reposo de membrana y explicar qué pasa al inhibir a esta bomba.

⚫ sobre expresión (a través de un vector plasmidico) de una enzima que agrega dobles enlaces
en los ácidos grasos. Que sucede con:
a) la fluidez d la membrana? De que depende la fluidez?
b) Las proteínas multipaso.

⚫a) Que es el potencial de reposo de membrana? Como se da?

b) Realizar el grafico del potencial.

⚫Defnir gradiente electroquimico

⚫ Que es una balsa lipídica ? Que es la asimétrica de bícapa. Clasificación de proteínas según
interacción con membrana.

7) Compartimentos. Y 8)Transito transmembrana

⚫ Comparación de procariontes y eucariontes.

Procarionte Eucarionte
1
2
3
4

⚫ diferencias entre el transporte a mitocondria y a peroxisomas

⚫ transporte vesicular desde el RE, si estuviera fallando, que haria que una proteína no pudiera
salir del RE.

⚫de transporte a mitocondrias, explicar que consecuencias traeria una mutacion en TIM23, en
Chaperona mitocondrial y en la secuencia señal

⚫ a) Esquematice detalladamente la incorporación al núcleo de una proteína carga, mencionando

las proteínas más importantes.
b) Cómo se logra la unidireccionalidad?

⚫a) transporte de glucosa desde la luz intestinal a la sangre b) mecanismo de función de los
transportadores nombrados

⚫Tres diferencias o similitudes d transportadores d glut 1 y sglt d. Porq de elegía un detergente

no jónico para separar el glut q d eritrocitos

⚫ a) explicar detalladamente el camino que hace la hidrolasa lisosomal desde que se sintetiza
hasta que llega a los lisosomas b) via relacionada con los lisosomas

⚫cuál es la proteína transportadora que lleva H+ al interior de los lisosomas, la vía que transporta
los materiales que van a los lisosomas, cómo hacen los lisosomas para mantener los H+ en su
interior sin perder su electroneutralidad,
⚫ que pasa si se inhibe la bomba de na/k

⚫ (estructurales/funcionales) entre los transportadores GLUT1 y SGLT1? Una seria que GLUT es
un uniportador y el otro un simportador; uno transporta glucosa a la sangre y el otro desde el
extracelular al interior de la célula.

9) Transito vesicular
⚫ explicar mecanismo de endocitosis de un liposoma.

3)explica la endocitosis de ldl

⚫ para que sirve el liposoma en la celula

⚫ un cuadro comparando el trasporte a peroxisomas y mitocondrias ( co o post traduccional,

pregada/desplagada, sec. señal, peptisada señal, receptor, traslocon)

⚫ se quiere realizar estudio de vesículas que transportan de trans Golgi al cis Golgi con GFP, con
vector plasmidico y anticuerpos: anti COP I, anti COP II, anti retromero.... a) explique cómo debe
ser el vector b) que anticuerpo se debe usar, explicar la vía de transporte y que proteínas se
transportan

⚫ Una de las causas de la hipercolesterolemia familiar es la falla en la captación e internalización

de partículas de LDL debido a una disminución o ausencia de la actividad de los receptores para
LDL de la membrana plasmática.
a) Explique en detalle el proceso de endocitosis de estas lipoproteínas en condiciones normales.
(Puede realizar esquema debidamente justificado)
b) Que utilidad tiene para la célula, endocitar este tipo de partículas?

⚫ A)Realizar un esquema de los componentes de la vía endocítica. Incluír red trans-golgi y

membrana plasmática.
8B) Enumerar procesos que se llevan a cabo en la maduración de un endosoma.
8C) Endocitosis mediada por receptor (no me acuerdo lo que preguntaba)

⚫ a) Describa la estructura de la cubierta de una vesícula de Clatrina, especificando como se

disponen las diferentes proteinas que la componen (pueden hacer esquema con referencias). b)
Indique cual es la funcion de los diferentes componentes de la cubierta de clatrina. c) Indique que
vías del transito intracelular estan mediados por vesiculas de clatrina. d) Que sucedera con una
vesicula de clatrina en formacion en una celula que presenta una mutacion en la dinamina que no
le permite hidrolizar GTP. Justifique su respuesta

⚫ Una de las causas de la hipercolesterolemia familiar es la falla en la captación e internalización

de partículas de LDL debido a una disminución o ausencia de la actividad de los receptores para
LDL de la membrana plasmática.
a) Explique en detalle el proceso de endocitosis de estas lipoproteínas en condiciones normales.
(Puede realizar esquema debidamente justificado)
b) Que utilidad tiene para la célula, endocitar este tipo de partículas?
⚫ explicar mecanismo de endocitosis de un liposoma.

⚫ explica la endocitosis de ldl

10) AutoFagia
⚫ enumerar y describir brevemente los pasos de la autofagia.
⚫describir molecularmente la autofagia selectiva.
⚫ Autofagia y función. B. Mecanismo cuando hay inanición (o algo parecido)

11) Vias señalizacion

⚫En que parte se involucran la via GPCR y via RTK
En la Via IP3 con receptor GPCR y en Via con receptor RTK se activan las fosfolipasas beta y
gamma, las cuales son analogas y fosforilan fosfatidil inositol de la membrana plasmatica para
obtener DAG (diacilglicerol) y IP3 (inositol). Por lo tanto ambas aumentan la concentracion de
calcio citosolico y activan la PKC (factor de transcripsion)

⚫cómo se aumenta el calcio intracelular,

Mediante 4 vias :
Via IP3 (receptor GPCR)
Via IP3 (receptor RTK)
Via IP3 (receptor citoquina )
Via WNT

⚫Tipos de receptores de membrana. Cual es la proteína que une calcio y porqué se le llama
proteína interruptora.,por qué el calcio se mantiene a bajas concentraciones en el citosol y cómo
se mantiene a bajas concentraciones dentro de la célula.

⚫explicar que son las proteinas G, cómo se activan y cuál es su funcion, cómo se clasifican en
base a la estructura y mencionar 3 procesos celulares diferentes que involucren la participación
de proteínas G distintas. Elegir uno y explicarlo detalladamente.

⚫colera
a) que pasa si la proteina gs alfa queda activada
b) via de regulacion de la que se menciona
c) como afecta esta via a la enfermedad o algo asi

⚫ El cólera es una enfermedad causada por la bacteria Vibrio cholerae a través de una toxina con
actividad enzimática. Esta enzima cataliza la unión ADP-ribosa a la subunidad Gαs de una
proteína G trimérica; como consecuencia Gαs está siempre activa.
a) Explique que significa que la proteína Gαs este activa
b) Que via de señalización se encuentra asociada a Gαs ? Explíquela en detalle hasta la activación
del efector citosolico.
c) Que tipo de receptor activa fisiológicamente a la prot. Gαs? Explique dicha activación.

⚫ Completar cuadro vias

 Wnt Hedghog Noch delta IP3 JAK— IP3K NF-kB
STAT
Receptor Frizzled GPCR JAK
cinasasa

Ligando Wnt Acetilcolina Interferon,,ho

(glucoprotein rmona
a) crecimiento

Tipo Vias que GPCR citoquinas RTK

comrenden
proteolisis

Funcion Aumentar Proliferacion

Calcio
citosolico
Activar
PKC(factor
de
transcripcion
)

⚫ El cólera es una enfermedad causada por la bacteria Vibrio cholerae a través de una toxina con
actividad enzimática. Esta enzima cataliza la unión ADP-ribosa a la subunidad Gαs de una
proteína G trimérica; como consecuencia Gαs está siempre activa.
a) Explique que significa que la proteína Gαs este activa
b) Que via de señalización se encuentra asociada a Gαs ? Explíquela en detalle hasta la activación
del efector citosolico.
c) Que tipo de receptor activa fisiológicamente a la prot. Gαs? Explique dicha activación.
⚫la vía que activa el ciclo celular(ras mapk) y como la activaba(por rb-e2f). En base a esto me
preguntaron un poco el punto de restriccion y puntos de control del ciclo.

¿Cómo actúa el MITOGENO?

EL MITOGENO va a interactuar con su receptor especifico, activando la vía de señalización
dependiente de la proteína RAS asociadas a proteínas GEF, la traducción de esta señal produce
derivadas fosforilación que va a favorecer la activación de genes de respuesta temprana, los
cuales son transcriptos a proteínas como la Myc, Jun y Fos, que no son más que proteínas que
actúan como factores de transcripción que promueven la transcripción de genes de respuesta
tardía como las CDK/G1-S.
MITOGENO → RECEPTOR → Vía RTK-RAS → Vía MAPK → Myc Jun Fos → CDK/G1-S

⚫ q receptores acoplados a enzimas inducen el crecimiento y la supervivencia. Elegir 1 via y

explicarla
12) citoesqueleto
⚫ A) función de los filamentos intermedios
b) definición de concentración crítica ,catastrofe y rescate.
c) mencionar 2 proteínas accesorias que modifican (y como) la disposición de los microfilam de
actina (o algo así no recuerdo bien)

⚫ Laconcentracion de monomeros solubles de actina (Actina-G) en una celula se encuentra entre

50-200 veces
Que mecanismo utiliza la celula para evitar el autoensamblaje de estos monomeros en filamento.
Como modula la celula este mecanismo de regulacion, en caso de requerir la polimerizacion de los
monomeros?

⚫ Un cuadro. Comparaba filamentos intermedios, microfilamentos y microtúbulos. (monomero,

función, unión Célula-célula en la que participaban, cantidad de protofilamentos)

⚫ Nombrar las proteínas accesorias del citoesqueleto de actina, la función de los filamentos
intermedios

⚫ describirtipos de actina en quimiotaxis.

_ proteinas g involucradas y que proteinas reclutan

⚫ fagocitosis (explicar detalladamente, vías rho y rac)

⚫ a) Describa como está organizado el citoesqueleto de actina en la quimiotaxis..

b) Cuales son las proteínas G involucradas?
13) Ciclo celular

⚫Que pasa en que cada fase ?

⚫Funcion ciclinas

⚫Puntos de control .

⚫Laproteólisis es importante para la regulación del ciclo celular eucarionte.

Mencione la/s fase/s dónde se evidencia

Eventos en cada fase .

- Proteínas que regulan el ciclo celular
- Maquinaria proteica activa durante
esta fase
- Modificaciones inhibitorias de las Cdk
-check point

⚫Fase M eventos.

⚫Envoltura nuclear. En qué fase del ciclo se desensambla, qué complejos Cdk-
ciclina están involucrados en este proceso (Calabrese aclaró "con nombre y
apellido, e indicar a qué fase corresponde) y mecanismo del proceso.

⚫Formacion de huso mitotico y actividad quinasa aurora B

⚫Que es un centrosoma ? Que funcion cumplen?

⚫Dibujar componentes del huso mitotico incluyendo 2 cromosomas ,explicar por

medio de que estructura se unen los cromosomas al huso y cómo varía esto en
mitosis y meiosis .

⚫Que es la recombinacion homologa ? en que procesos se da?

⚫Comparar la estructura del cromosoma interfasico y el mitotico.

14) Fecundacion y diferenciacion

⚫el huso mitótico, esquema, diferencias de él en mitosis y meiosis, a que se une el huso en el
cromosoma (o algo así), y como se separan las cromátidas hermanas

⚫genes de respuesta temprana:

a) Menciona algunos ejemplos de genes de respuesta temprana, indicando cual es el tipo de ligando
que induce el aumento en la expresión de los mismos.
b) En qué etapa del ciclo celular eucarionte aumenta la expresión de estos genes y cuál es la
principal consecuencia de este incremento en las células.
c) Describa el mecanismo celular que permite superar el punto de restricción en las células
eucariontes.

15)apoptosis
⚫ Completar esquema de apoptosis (figura 18-12 del Alberts)

⚫la familia de las Bcl2, que via de la apoptosis regulan,

⚫ a) Mencione 2 estimulos que puedan desencadenar la via intrinseca de la apoptosis. b)

Describa la vía intrinseca de la apoptosishasta la activacion de las caspasas ejecutoras,
indicando claramente la funcion de cada uno de las principales proteinas que participan de dicha
via c) uno de los eventos bioquimicos caracteristicos de la apoptosis que ocurre una vez activada
las caspasas ejecutoras es la degradacion de proteinas que forman parte de las uniones celula-
celula (C-C) y celula-matriz (C-M). Mencione tres proteinas que formen parte de las uniones C-C y
C-M que sean sustrato de las caspasas, justificando cual es el tipo de union que se ve afectada
en c/caso

⚫explicar detalladamente dos vías en las que una señal de supervivencia inhiba la apoptosis,
16) Cancer

Definir protooncogen. Oncogen y gen supresor de tumores. Dar ejemplos

Mencione 6 características de células de cáncer.

Las condiciones de malignidad, por qué es que hacen que la célula sea maligna?

Mencione al menos 2 mecanismos para pasar de protooncogen a oncogen.

como produce cancer el HPV.