UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE ZACATECAS

“Francisco García Salinas”

Área de Ciencias Químicas
Programa Académico de Químico Farmacéutico Biólogo
Área de Ciencias de la Salud

BACTERIOLOGIA MEDICA

BACILOS GRAMNEGATIVOS
INTEGRANTES: Elvia Estrella Cabrera Castro, Cecilia Fernanda Cueto Villalobos, Rubén Gutiérrez Acevedo, Martha
Victoria Herrera Ornelas, Isaac Medina Cárdenas

SEXTO B

M. en C. Rubén Octavio Méndez Márquez

 INTRODUCCIÓN
• Se multiplican en medios con peptona o
extracto de carne sin que se añada cloruro de
sodio u otros suplementos.
• Se multiplican bien en agar de MacConkey.
• Proliferan en medios aerobios y anaerobios
(son anaerobios facultativos).
• Fermentan en vez de oxidar glucosa, a
menudo produciendo gas; catalasa positiva,
oxidasa negativa y reducen nitrato a nitrito.
• Las enterobacterias poseen fimbrias que las
ayudan a adherirse a superficies o mucosas y
pilis sexuales que permiten el intercambio de
la información y participan en la resistencia a
los antibióticos.
ESCHERICHIA
 GENERALIDADES
E. blattae
E. coli es la de mayor importancia para el
humano, debido no sólo a que forma parte de E. fergusonnii
la flora habitual del intestino sino porque,

Escherichia
además, agrupa a diversas cepas que causan E. coli
padecimientos extraintestinales y a otras
que destacan entre los principales agentes
etiológicos del síndrome diarreico. E. vulneris

E. hermannii
Su presencia en el agua o en los alimentos es una
indicación de contaminación fecal.
E. coli no suele ser un microorganismo patógeno,
pero puede causar infecciones urinarias y ciertas
cepas segregan enterotoxinas que producen la
diarrea del viajero y en ocasiones enfermedades
muy graves transmitidas por los alimentos.
Síndromes clínicos Escherichia coli patógenas
Enteritis/ enfermedad diarreica E. coli enteropatogénica - EPEC
E. coli enterohemorrágica - EHEC
E. coli enterotoxigénica, ETEC
E. coli enteroagregativa - EAEC
E. coli enteroinvasiva - EIEC
Infecciones del tracto urinario E. coli uropatogénica - UPEC

Sepsis/meningitis MNEC
 ENFERMEDADES
• Es una enfermedad intestinal generalmente infecciosa y auto limitada, se caracteriza por presentar
evacuaciones líquidas o de consistencia disminuida, en número mayor a tres en 24 horas y con evolución
menor de dos semanas. Diarrea persistente se define como el paso de evacuaciones semilíquidas por
Diarrea aguda más de dos semanas, en tanto que la diarrea crónica se establece a las cuatro semanas.

• E. coli es la causa más frecuente de infección de las vías urinarias y contribuye a casi 90% de las
primeras infecciones urinarias en mujeres jóvenes.
Infección del sistema
urinario
 •Cuando las defensas normales del hospedador son inadecuadas, E. coli puede llegar al torrente sanguíneo y producir
septicemia. Los recién nacidos son muy susceptibles a septicemia con E. coli porque carecen de anticuerpos IgM. La
septicemia puede presentarse como consecuencia de la infección del sistema urinario.
Septicemia

• E. coli son los principales causantes de meningitis en los lactantes.

•Casi 75% de las E. coli de casos de meningitis tienen el antígeno K1.
Meningitis
 METODOS DE IDENTIFICACIÓN
E. coli suele producir pruebas con positividad para
indol, lisina descarboxilasa y fermentación de
manitol y produce gas a partir de glucosa.
Una cepa de la orina se puede identificar
rápidamente como E. coli por su hemólisis en agar
sangre, su morfología de colonia característica con
un lustre “iridiscente” en medios diferenciadores
como agar EMB y una prueba de indol de mancha
positiva.
 TRATAMIENTO
Para enfermedades causadas por E. coli, no hay tratamientos
actuales que curen la infección, alivien los síntomas o eviten
complicaciones. Para la mayoría de las personas, el tratamiento
consiste en:
• Descanso
• Líquidos para ayudar a prevenir la deshidratación y la fatiga.
KLEBSIELLA
 GENERALIDADES
Los miembros del género Klebsiella se encuentran
con frecuencia en el suelo o el agua. Varios K. pneumoniae
aislamientos pueden fijar el nitrógeno de la
atmósfera, lo que ha sido propuesto como una ventaja
nutricional en poblaciones aisladas con escasa Klebsiella K. granulomatis
cantidad de nitrógeno proteico en su dieta.
Las bacterias del género Klebsiella figuran entre las
10 principales bacterias patógenas que ocasionan K. oxytoca
infecciones hospitalarias.
La principal especie de este género es Klebsiella pneumoniae, muy expandida en la naturaleza.
Se la aísla frecuentemente de materias fecales del hombre y los animales, pero también de aguas,
vegetales y alimentos.
Son bacilos Gram negativos inmóviles, a menudo capsulados.
La cápsula es de naturaleza polisacarídica. Esta especie puede producir una forma grave de neumonía en
los seres humanos.
 ENFERMEDADES

• La Klebsiella pneumoniae, está implicada principalmente en

infecciones nosocomiales.
• Es el agente causal de infecciones del tracto urinario,
neumonías, sepsis, infecciones de tejidos blandos, e
infecciones de herida quirúrgica.
• En ocasiones provoca infección del aparato urinario y
bacteriemia a partir de lesiones focales en pacientes
debilitados que puede terminar con la vida del paciente.
 METODOS DE IDENTIFICACIÓN
La identificación de Klebsiella, empieza cuando se observa una gran
colonia de consistencia mucoide en un medio de aislamiento primario,
Agar MacConkey
Agar Sangre
Muchas cepas de Klebsiella, pueden degradar lentamente la urea,
produciendo un cambio de color al rosa claro en el pico de agar
urea de Christensen.

La asimilación y la fermentación de la lactosa se puede observar en el

medio Kligler, donde son positivos y desprenden gas; y en la fermentación
acetónica o prueba de Voges Proskauer son positivos.
 TRATAMIENTO
El tratamiento de elección consiste en la asociación de una
cefalosporina de tercera generación (cefotaxima, ceftriaxona)
y un aminoglucósido (gentamicina).
Enterobacter
 GENERALIDADES
Antes se denominada anterobacter aerogenes debido a la gran
cantidad de gas que producían

Género formado por bacilos móviles de tipo gram

negativos formado por cerca de 16 especies, coloniza al
aparato gastrointestinal de animales y humanos, además
puede encontrarse de manera universal en agua, plantas,
insectos o productos alimenticios.
ENFERMEDADES Manos del
personal

Dispositivos
médicos
• Antes del uso generalizado de los antibióticos eran Exógenas
Soluciones
raramente encontradas como patógenos. salinas
Fuentes de
• En los últimos tiempos ha surgido como patógeno infección
soluciones de
nutrición

nosocomial oportunistas parenteral

Endógenas Microbiota
Bacteriemia, infecciones del tracto respiratorio inferior,
E. cloacae de piel y tejidos blandos y de heridas especialmente
traumáticas; del tracto urinario, intraabdominales,
endocarditis, artritis séptica, osteomielitis, infecciones
oftálmicas e infecciones posquirúrgicas
E. aerogenes
ENFERMEDADES: virulencia
Entre los factores de virulencia identificados en distintas
especies se encuentran la presencia de polisacárido
capsular y la producción de hemaglutininas manosa
sensibles asociadas a fimbrias tipos 1 o tipo 3.

También poseen una endotoxina implicada en la

fisiopatología de la sepsis y otras complicaciones
Algunas especies también producen quelantes del hierro (aerobactina y enterochelin).

Resulta en la competición del hospedador y

de la bacterias por el hierro, ya que ambos
lo requieren para sus procesos vitales.
 MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN
De acuerdo a sus características bioquímicas reaccionan como fermentadores de la
glucosa, reductores de nitratos y nitritos, son citocromooxidasa negativos y catalasa
positivos, son móviles, (excepto E. asburiae) la mayoría descarboxilan la ornitina (excepto
E. cowanii).
Prueba Resultado
TSI (agar con hierro y triple azúcar) Ácido/ácido con producción de gas
ONPG (o-nitrofenilgalactopiranósido) Positivo
SIM (sulfhídrico, indol, movilidada) Negativo, negativo, positivo
Citrato de Simmons Positivo
Urea de Cristensen Variable
Rojo de metilo Negativo
Voges Proskauer Positivo
Lisina descarboxilasa 85-90% de las cepas negativas
Ornitina descarboxilasab Positiva
Arginina dihidrolasa Variable
Pruebas para diferenciar entre especies de Enterobacter
 TRATAMIENTO
Tratamiento antibiótico
Recomendado No recomendado
Ciprofloxacino Ampicilina
Carbapenem Amoxicilina
Cefepima Cefalosporinas de primera generación
Aminoglucósido Inhibidores de ß-lactamasas (ácido
clavulánico, sulbactama y tazobactama)
Shigella
 GENERALIDADES
El género Shigella pertenece a las enterobacterias,
incluyen muchos microorganismos intestinales. Presentan
una estructura bacilar con reacción Gram (-), no presenta
movilidad ni capsula.
Solo se encuentra en humanos

Variantes
4 43
del
subgrupos serotipos
antígeno O
 ENFERMEDADES
Estas bacterias por lo general causan una enfermedad llamada shigelosis la cual se
provoca con solo 200 bacterias aisladas en el cuerpo y es trasmitida con vía fecal-oral, los
síntomas relacionados con esta enfermedad suelen ser leves y en algunos casos se
presenta como un padecimiento asintomático.
Las manifestaciones clínicas oscilan desde una infección asintomática o una diarrea leve
hasta cuadros diarrea acuosa con fiebre, dolor abdominal tipo cólico, tenesmo y
evacuaciones con sangre, moco y pus (disentería bacilar), náusea con /sin vómito.
 ENFERMEDADES: virulencia
El efecto patógeno de las distintas especies del género Shigella se debe a
muchos factores, tales como la producción de sustancias tóxicas, factores
antigénicos (antígeno O y K), plásmidos que facilitan la adherencia de células.

Subunidad A
Exotoxina
Subunidad B
 MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN
• Las especies de Shigella pueden diferenciarse en un
cultivo por que no son fermentadoras de lactosa y tienden
a ser bioquímicamente inertes ya que no producen gas a
partir de hidratos de carbono, a excepción de ciertos
biogrupos que son aerogenos, y se consideran inmóviles.
Esta característica ayuda a su diferenciación con las
especies de Salmonella.
• Crece en 24 h, a 35°C, condiciones aerobias, formando
colonias blanquecinas o grisáceas de 1 - 2 mm de
diámetro, convexas, de bordes regulares, consistencia
butirácea y aspecto húmedo.
• Dentro del género se pueden identificar distintas especies a partir de patrones de
pruebas bioquímicas como los que se presentan a continuación.
 TRATAMIENTO

• El uso de antibióticos se reserva para la disentería

por Shigella moderada a grave.
• Entre los antibióticos recomendados por la
Organización Mundial de la Salud se encuentran:
ciprofloxacina (quinolona) o uno de tres de segunda
línea - pivmecilinam, azitromicina y ceftriaxona. Se
han identificado altos niveles de resistencia ante
antibióticos como la ampicilina y trimetroprim-
sulfametoxazol y aún a las quinolonas.
Pseudomonas
 GENERALIDADES
El género Pseudomonas incluye casi 200 especies

Se encuentran principalmente
diferentes. Suelo
La mayoría de las infecciones causadas por
Pseudomonas son oportunistas donde la especie que Compuestos orgánicos
más se encuentra en los aislados clínicos es en descomposición
Pseudomonas aeruginosa.
Vegetación

Agua
 Bacterias mesófilas Sobreviven a una
42°C temperatura de 4°c

Como fuente de
carbono
Utilizan mas de 100
componentes Siempre compuestos
Pseudomonas
orgánicos de bajo
Carecen de enzimas peso molecular
hidrolíticas
Toxinas
Factores
estructurales
Enzimas
 Virulencia
Virulencia

Enzimas y
Adhesinas LPS Pilis Flagelo toxinas que
secreta

Exotoxinas S y
Exotoxina A Piocianina pioverdina LasA y LasB Fosfolipasa C
T
 ENFERMEDADES QUE CAUSAN
El género Pseudomonas es causante de diversas manifestaciones clínicas de la infección al
poder colonizar prácticamente cualquier tejido u órgano.

Pseudomonas aeruginosa :
Infecciones urinarias nosocomiales, septicemia,
bacteriemia, ectima gangrenosa, enterocolitis
infecciones en heridas y quemaduras, neumonía
necrotizante y primaria, infecciones pulmonares
crónicas, osteomielitis, otitis externa y media,
endocarditis, infecciones oculares e infecciones
de piel y tejidos blandos.
Pseudomonas putida :
Las enfermedades han sido menos
frecuentes y se pueden presentar cómo
bacteriemia, infecciones urinarias, de
heridas y de vías respiratorias y en
caso de ser aisladas se debe cuestionar
su importancia clínica.
FACTORES DE RIESGO DE NEUMONÍA NOSOCOMIAL CAUSADA POR PSEUDOMONAS
Anestesia
inhalatoria

Soporte
ventilatorio por Neumonía nebulización
contaminación
cruzada nosocomial

humidificación
Los factores virulencia facilitan la colonización del epitelio respiratorio y la apoptosis de las
células del hospedador con destrucción del parénquima pulmonar, además de reclutar
células inflamatorias y mediadores inflamatorios que potencian el daño.
 IDENTIFICACIÓN
Identificación de Pseudomonas sólo puede ser realizada en laboratorios con bioseguridad
nivel 2.
Las muestras aceptadas para identificación son orina, exudado, raspados de superficie de
tejidos infectados.
El aislamiento y posterior identificación será sembrando la muestra en medios simples
durante 24 a 48 horas a 35 grados centígrados (qué es temperatura puede variar según la
especie de la que se sospecha) en condiciones de aerobiosis.
Tinción de Gram (-)
Su desarrollo se evidencia por colonias translúcidas con bordes ondulados (aunque la
forma de los bordes varía según la especie).
la mayoría de las cepas produce piocianina que aparece de color azul verdoso facilitando su
identificación.
Los cultivos presentan un olor característico comparado con uvas. Casi todas crecen en
agar MacConkey con colonias lactosa negativas, y translucidas.
Las características mínimas con las cuales pueden
ser identificadas:
• Son el metabolismo oxidativo que presentan, la
movilidad, oxidasa casi siempre positiva, en medio
OF con glucosa produce acido (color amarillo) y no
genera gas, son indol negativas, beta hemolisis (en
agar sangre), reducción de nitritos (v)
Los pigmentos producidos por algunas especies
dentro del género de Pseudomonas permite su
Pigmento Color

identificación en medios diferenciales. Piocianina Azul

Por ejemplo, el agar P aumenta la producción de Pioverdina Amarillo verdoso a café

piocianina. Algunas no presentan pigmentos y son Piorubina Rojo

mucoides, estas pueden presentar características Piomelanina Café obscuro

bioquímicas atípicas que dificultan su identificación.

Agar cetrimida; medio de cultivo solido selectivo para pseudomonas
 TRATAMIENTO
Al ser bacterias Gram negativas, son naturalmente resistentes algunos antibióticos, así
como capaces de formar nuevas resistencias por varios mecanismos.
Se recomienda la realización de un antibiograma siempre que se sospecha de que el agente
causal de la enfermedad sea del género Pseudomonas.
 El uso de:

• Gentamicina
• amikacina
• Tobramicina
Es el tratamiento empírico inicial
• Carbenicilina hasta conocer el antibiograma
• Ticarcilina específico a tratar.
• ceftazidima(cefalosporina
antipseudomona, fármaco de
tercera generación)
• ciprofloxacino.
Género Salmonella
 GENERALIDADES
El Género Salmonella corresponde a enterobacterias móviles con flagelación perítrica
no pertenecientes al grupo de los coliformes, ya que no fermenta la lactosa, no
producen desaminasas y tienen un carácter mas o menos patógeno según especies

Forma parte de la división Bacteria, phylum Proteobacteria, clase Gamma-

proteobacteria, orden Enterobacteriales, familia Enterobacteriaceae.

La salmonelosis es una de las infecciones trasmitidas por alimentos más frecuentes en

todo el mundo, habiéndose reportado una incidencia de 1,3 billones de casos de
salmonelosis humana por año en todo el mundo, con tres millones de muertes.
MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN
 ENFERMEDADES
FIEBRE TIFOIDEA Y GASTROENTERITIS Y
PARATIFOIDEA ENTEROCOLITIS
FIEBRE TIFOIDEA por S. typhi, tiene un . El agente etiológico corresponde a
periodo de incubación de 8 a 15 dias, S.enteritidis , tienen un periodo de
puede provocar bacteremia además de incubación de entre 12 a 36 horas, se
los cuadros febriles, tiene produce por consumir alimentos
complicaciones a nivel sistemico, si se contaminados con una concentración
descuida forma ulceras y hemorragias . de salmonelas por mililitro de 106 a 109

Estas bacterias, colonizan íleon y ciego,

FIEBRE PARATIFOIDEA por S.paratyphi
penetrarán por fagocitosis al epitelio,
es una infección mas leve que la
se multiplicarán generando inflamación
anterior que no invade otros tejidos por
llevando a una pérdida de electrolitos y
lo tanto no hay riesgo de bacteremia,
agua ocasionando cuadros diarreicos
son característicos fiebres altas,
con dolor abdominal, fiebres más o
anorexia, abstemia.
menos altas, náuseas y vómitos.
 TRATAMIENTO
• Los antibióticos utilizados para el tratamiento de la fiebre
tifoidea han sido: cloranfenicol, ampicilina, cotrimoxazol,
quinolonas y cefalosporinas de tercera generación
• Las vacunas principales contra la fiebre tifoidea son la
oral Ty21a y la parenteral del polisacárido Vi. Ambas
proveen una protección hasta del 65-70%, con una
inmunidad de 3 a 7 años
• La gastroenteritis aguda por salmonella es un cuadro
autolimitado que no precisa de tratamiento antibiótico,
sólo de medidas de sostén con reposición de líquidos y
electrolitos
• No se recomienda el uso de inhibidores de la motilidad
intestinal, ya que predisponen a la aparición de
bacteriemia
 CONCLUSIÓN
Conocer morfología microscópica bacteriana en conjunto con la reacción a la tinción de Gram
permite seleccionar el tipo de técnicas bacteriológicas adecuadas para la determinación del
agente causal de una enfermedad. En este caso la tinción de Gram (Gam negativa) permite la
selección de medios de cultivo para aislar a bacterias. Los principales géneros bacterianos Gram
negativos que causan patologías en el ser humano son: Klebsiella, Escherichia, Salmonella,
Shigella, Pseudomonas y Enterobacter.
La mayoría de las bacterias pertenecientes a los géneros bacterianos anteriormente mencionados
tienen la característica de ser polifarmacoresistentes, debido a que poseen pilis sexuales los
cuales además de contribuir al proceso de virulencia, son responsables de la transferencia de
plasmados de una bacteria a otra.
 REFERENCIAS
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