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GENOTIPIFICADO DE PROTEÍNAS LÁCTEAS EN

VACAS LECHERAS
Ing. Agrónomo Jennifer Curifuta H.
Ing. Agrónomo Mg. Sc. Humberto González V.
Biólogo Dr. Cs. Biomédicas Cristian Araneda T.
Departamento de Producción Animal, Universidad de Chile.

I. INTRODUCCIÓN

Hasta el año 2006, las pautas de pago de las plantas receptoras de leche se basaban
principalmente en los volúmenes producidos. A partir de ese año, sin embargo, algunas
industrias como Soprole, Surlat y Mulpulmo efectuaron modificaciones en su pauta,
rebajando el porcentaje mínimo de proteína sobre el cual se paga la bonificación, y
subiendo el monto de esta última, llegando a valores de $1.500 por kilogramo adicional de
proteína (ODEPA, 2007). En este escenario, en la Región de Los Lagos el contenido de
sólidos de la leche y particularmente la fracción proteica debiera tener prioridad dentro de
los planes de mejoramiento genético de bovinos. En países con fuerte tradición lechera
como Nueva Zelandia y Brasil, los programas de mejora genética en ganado lechero
incluyen como objetivos de mejoramiento esta tendencia, favoreciendo claramente la mayor
producción de proteína (Cuadro 1).

Cuadro 1. Valores económicos (en US$) para rasgos objetivos de mejoramiento en ganado
lechero en Nueva Zelandia y Brasil.

Rasgo
Nueva Zelandia1 Brasil2

Grasa +1,92012 +5,25


Proteína +8,68540 +3,95
Volumen -0,09415 +0,04
Peso Vivo -1,48014
Fertilidad +3,1188
Score Células Somáticas -31,4607
Longevidad +0,0486
1
(López-Villalobos, 2012), 2 (Verneque, 2012)
Es así como en Nueva Zelandia, la ponderación del contenido de proteína en el Índice de
Valor Económico (”Breeding Worth”) usado por el sistema de evaluación genética nacional
es la más alta, alcanzando un 40%, seguido del volumen (15%) y peso vivo (14%) ambos
con un valor negativo en el índice (Cuadro 1), y grasa (12%) pero con ponderación
positiva, estando los otros componentes entre el 6 al 8% (López-Villalobos, 2012). En el
caso de Brasil, con un rebaño lechero compuesto de 23 millones de vacas,
predominantemente mestizas Cebú-Europeas (Holandesa y Jersey), se paga extra por la
cantidad de proteína por sobre el 2,8% y de grasa sobre el 3,0%. A pesar de que las
pautas de pagos difieren entre las distintas regiones y sistemas de producción de este
gran país, los valores económicos promedios estimados para el consumidor final (en
reales, R$) son 0,32 para producción (volumen) de leche; 0,49 para grasa y 12,08 para
proteína.

En Chile, actualmente las pautas de pago valoran los sólidos a razón de $ 4.200/kg de
proteína y $ 1.000/kg de grasa por sobre el 3,0%. Además, se incorporan parámetros
como la ausencia de enfermedades en el predio (brucelosis, tuberculosis y leucosis),
calidad higiénica y sanitaria de la leche y otros administrativos como ser predio bajo
control oficial (PABCO), entre otros.

En este contexto la Estación Experimental Oromo, de la Universidad de Chile, a través de


un Programa de Mejoramiento Genético para producción láctea, implementó un sistema
de cruzamiento absorbente a Holstein Neozelandés con el fin de lograr una producción
lechera más eficiente. Además, con la finalidad de aumentar los porcentajes de sólidos
(grasa y proteína) se ha incorporado genética Jersey (con semen también importado de
Nueva Zelandia). La raza Holstein Friesian se caracteriza por altos volúmenes de
producción de leche, pero bajos contenidos de solidos totales si se le compara con la raza
Jersey, por lo tanto los mestizos Jersey-Holstein presentan una buena combinación entre
volumen de producción y contenido de sólidos totales.

Estos antecedentes muestran que, desde hace algún tiempo, la tendencia es a pagar
mejor la mayor concentración proteína láctea. Sin embargo, poco énfasis se ha puesto en
el tipo proteína producida por lo animales, donde es sabido que las distintas variantes
genéticas influyen la calidad proteica de la leche.
II. PROTEÍNAS LÁCTEAS Y VARIANTES ALÉLICAS
Entre la principales proteínas presentes en la leche bovina destacan las caseínas (α, β, γ,
y κ) que constituyen casi el 80% de las proteínas lácteas y las lactoglobulinas (α y β) del
suero; las que representan aproximadamente el 20% restante. Tanto para κ–caseína
como para β-lactoglobulina se han reconocido diferentes variantes alélicas, siendo las
más frecuentes las variantes A y B. Estas corresponden a variantes o alelos de estos
genes, que codifican proteínas con propiedades levemente diferentes, pues han cambiado
algunos aminoácidos en su estructura primaria (Cuadro 2). En ambas proteínas lácteas
las variantes o alelo B están relacionados con mejores rendimientos en la producción de
quesos. La variante B de κ–caseína produce leche con una cuajada más firme y menor
tiempo de coagulación, reflejándose en quesos de mayor contenido proteico y mejor
calidad que los producidos con leche de vacas que poseen la variante A (Jakob y Puhan,
1995). Por su parte la variante B de β-lactoglobulina también se ha asociado a mejores
propiedades queseras (Tsiaras et al., 2005).

Cuadro 2. Variantes alélicas para κ-caseína y β-lactoglobulina, se indica el exón afectado,


la posición y el cambio de aminoácido producido desde la variante A a la B (A → B).

Variante Cambio Posición Cambio en la


Proteína Exón
Genética en el ADN Aminoácido Proteína

κ- caseína A→B IV A→C 148 Asp → Ala


β-lactoglobulina A→B IV T→C 118 Val → Ala
Código Bases Nitrogenadas (A: Adenina, T: Timina, C: Citosina)
Código Aminoácidos (Asp: Ácido aspártico, Val: Valina, Ala: Alanina).

III. GENOTIPIFICADO EN EL REBAÑO LECHERO DE LA


ESTACIÓN EXPERIMENTAL OROMO
A partir de 186 hembras del rebaño lechero de la Estación Experimental Oromo se ha
establecido un Banco de ADN, depositado en el Laboratorio de Genética y Biotecnología
del Departamento de Producción Animal de la Universidad de Chile, y se ha desarrollado
el genotipificado de las variantes alélicas para ambas proteínas lácteas (κ–caseína y β-
lactoglobulina), por medio de la aplicación de la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR, “Polymerase Chain Reaction”) y digestión con enzimas de restricción (RFLP,
“Restriction Fragment Length Polymorphism”) de acuerdo a los protocolos desarrollados
en la Universidad de California en Davis (Medrano y Aguilar-Córdova, 1990a; Medrano y
Aguilar-Córdova, 1990b).
El ADN amplificado que codifica para ambas proteínas, es digerido con un enzima de
restricción que permite el reconocimiento de las variantes alélicas de acuerdo a los
siguientes esquemas patrones de corte, que deben ser visualizados con electroforesis en
gel de agarosa al 3% (Figuras 1 y 2).

Tamaño del Fragmento sin


AA AB BB
fragmento (pb) cortar
350

266

132/134

84

Figura 1. Patrón RFLP para los genotipos AA, AB y BB de κ-caseína (Curifuta, 2009).

Tamaño del Fragmento sin


AA AB BB
fragmento (pb) cortar

262

153

109

74 / 79

Figura 2. Patrón RFLP para los genotipos AA, AB y BB de β-lactoglobulina (Curifuta,


2009).

El rebaño genotipificado estaba constituido por 132 hembras de la raza Holstein


Neozelandés y 54 mestizas Jersey-Holstein Neozelandés. De estas últimas, 23
correspondieron a cruzas F1 (50% Holstein; 50% Jersey), 24 a cruzas F2 (75% Holstein;
25% Jersey) y 7 F3 (87,5% Holstein; 12,5% Jersey). El Cuadro 3 muestra las frecuencias
de ambos alelos (A y B) para κ-caseína de acuerdo al porcentaje de genética Jersey que
presentaba cada animal del rebaño analizado. Estas frecuencias fueron estimadas a partir
de las frecuencias genotípicas obtenidas por conteo directo, de acuerdo a las siguientes
fórmulas:
1
° °
2
°

қ-caseína

Los resultados descritos en la Cuadro 3 indican que, a medida que aumenta el aporte aditivo
de la raza Jersey, la frecuencia del alelo B de κ–caseína aumenta desde un 28,6% a un
52,2%. En análisis global, el que compara todas las mestizas con las hembras Holstein
Neozelandés, la diferencia de frecuencia del alelo B es muy significativa (29,2% v/s 40,7%, P
< 0,05). Este resultado concuerda con otras observaciones que muestran que la variante B
de κ–caseína se encuentra en una mayor frecuencia en vacas de la raza Jersey al
compararla con Holstein (Van Eenennaam y Medrano, 1991b).

Cuadro 3. Frecuencia alélicas de κ-caseína por raza y según el aporte aditivo de la raza
Jersey (%) en el rebaño lechero de la Estación Experimental Oromo, Universidad de Chile.
Mestizos*
Holstein
Alelos Total Total Población
Neozelandés 12,50% 25% 50%
Mestizos

Número 132 7 24 23 54 186

A 0,708 0,714 0,667 0,478 0,593 0,675


B 0,292 0,286 0,330 0,522 0,407 0,325

* Aporte aditivo de la raza Jersey presente en los animales mestizos.

El análisis del efecto de los distintos genotipos de қ-caseína, en rebaños Holstein, indica que
éstos influyen significativamente en el rendimiento y contenido de la proteína (el rendimiento
del genotipo AB es mayor al genotipo AA) (Tsiaras et al., 2005). Se ha reportado un efecto
favorable de la variante B de κ–caseína sobre el rendimiento de la proteína (Ng-Kwai-Hang
et al., 1984; Van Eenennaam y Medrano, 1991a) y la concentración proteica (Ng-Kwai-Hang
et al., 1990; Van Eenennaam y Medrano, 1991b).
β-lactoglobulina

Para β-lactoglobulina se observa un patrón similar de aumento del alelo B, a medida que
aumenta el aporte aditivo de la raza Jersey (Cuadro 4).

Cuadro 4. Frecuencia alélicas de β-lactoglobulina por raza y según el aporte aditivo de la


raza Jersey (%) en el rebaño lechero de la Estación experimental Oromo, Universidad de
Chile.
Mestizos*
Holstein
Alelos Total Total Población
Neozelandés
12,50% 25% 50% Mestizos

Número 131 7 24 24 55 186

A 0,450 0,429 0,375 0,292 0,345 0,419


B 0,550 0,571 0,625 0,708 0,655 0,581

* Aporte aditivo de raza Jersey presente en los animales mestizos.

Nuevamente hay un incremento de la frecuencia del alelo B, esta vez para β-lactoglobulina,
desde un 57,1% en los animales 12,5% de genética Jersey a un 78,8% en animales 50%
Jersey (Cuadro 4). La diferencia de frecuencia entre los mestizos Jersey-Holstein en relación
al Holstein Neozelandés es significativa (55,0% v/s 65,5%, P < 0,05).

Para esta proteína también se han reportado diferencias significativas en los genotipos en
rebaños Holstein para rendimiento en leche (genotipo AB mayor rendimiento que genotipo
AA), rendimiento graso (genotipos BB y AB mayores que AA), volumen graso (genotipo BB
mayor que AA y AB) y producción de lactosa (genotipo AB mayor que AA) (NG-Kwai-Hang et
al., 1984; Aleandri et al., 1990).

.
IV. CONCLUSIONES
A medida que aumenta el porcentaje de Jersey en los animales, aumenta el porcentaje
del alelo B para ambas proteínas lácteas, lo que finalmente podría traducirse en mayor
cantidad y calidad de los sólidos lácteos obtenidos en la producción de leche. Esto
permite confirmar que es posible aumentar la frecuencia del alelo B por el cruzamiento de
Holstein con razas con una orientación productiva distinta de la netamente lechera. La
inclusión de genética Jersey en el sistema, ha permitido aumentos importantes en la
producción de sólidos lácteos por unidad de superficie, al haber elevado la carga animal
junto a un mejoramiento significativo en la calidad composicional de la leche (Magofke y
González, 2004).

Actualmente en el país, existe la tecnología de genotipificado para ambas proteínas


lácteas a partir de muestras de ADN extraídas de sangre periférica en distintos centros de
investigación universitarios o estatales (Curifuta, 2009; Felmer y Butendieck, 1998), por lo
que es posible genotipificar rebaños lecheros nacionales a fin de predecir la calidad las
proteínas lácteas que estos producirán.

V. LITERATURA CITADA
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CURIFUTA, J. 2009. Estimación y comparación de las frecuencias alélicas de los genes


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FELMER, R., AND N. BUTENDIECK. 1998. Frecuencia alélica del gen de la k-caseína
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