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Avances en la metodología y

evaluación al Virus de la Hoja Blanca


(VHB) en el arroz

Mónica Triana Espinel


Tagosodes orizicolus
Homoptera: Delphacidae
Tagosodes orizicolus
Ciclo de vida
Hembra
Braquíptera

Machos
Hembras
Machos
aladas
(2.0 mm))
(3.3 mm)
Virus de la Hoja Blanca (VHB ó RHBV)
CICLO DE EPIDEMIAS DE VHB
Intensidad

1957 1971 1982 1995 2000


Desarrollo de resistencia varietal al
virus de la hoja blanca del arroz
Objetivos actuales

iRealizar estudios sobre mecanismos de resistencia y de la


herencia de la resistencia en una colección base de arroz
(sogata y VHB).

iComplementar la evaluación fenotípica de esta colección


base con técnicas moleculares como una aproximación en la
búsqueda de marcadores moleculares que asistan la
selección de materiales de arroz en programas de
mejoramiento (RAPD’s y microsatélites= Equipo de Virología).
Actividades
¾ Preferencia por oviposición de T. orizicolus sobre 10
variedades de arroz en pruebas de libre escogencia y
alimentación forzada
¾ Comparación de 3 colonias de T. orizicolus en condiciones
de campo
¾ Interacción entre el Virus de la Hoja Blanca, T. orizicolus
y variedades de arroz (Equipo de Virología)
¾ Determinación del nivel de daño de Tagosodes orizicolus
con diferentes niveles de virulencia sobre 4 variedades de
arroz
¾ Evaluación del efecto de VHB sobre el rendimiento de 10
variedades de arroz
Preferencia de T. orizicolus por alimentación en prueba
de libre escogencia sobre siete variedades de arroz.
25

20

15
% Sogsta

10

0
0 24 48 72 96

Horas despues infestacion


Cica 8 Oryzica 1 Fe de arroz 2000
IR 8 Oryzica Llanos 5 Colombia 1
Fede arroz 50
Preferencia de T. orizicolus por oviposicion en prueba
de libre escogencia sobre siete variedades de arroz.
300

200

100

0
Cica 8 Oryzica 1 Fedearroz IR 8 Oryzica Colombia 1 Fedearroz 50
2000 Llanos 5
Variedad
Conclusiones

• Hay mas variación en la


preferencia para posarse
comparada con la preferencia
para oviposición
• Fedearroz 50 y Colombia 1
fueron las variedades menos
preferidas para ambas
características.
• El resto de las variedades
fueron similares y no se
encontró diferencias
significativas.
Oviposición Total

0
50
100
150
200
250
Colombia 1

a
a
WC 352

O. Llanos 5
ab

WC 366
abc

Bluebonnet 50
bc

Variedad
Cica 8
bc

IR 8
bc
Alimentación Forzada

Fedearroz 2000
bc
c

Oryzica 1
d

Fedearroz 50
Oviposición Total de Sogata en Prueba de
Longevidad máxima (días)

0
10
20
30
WC 352 (a)

WC 366 (a)

O. Llanos 5 (a)

Colombia 1 (ab)

IR 8 (ab)

Variedad
Oryzica 1 (ab)
Forzada

Cica 8 (ab)

Bluebonnet 50 (bc)

Fedearroz 2000 (bc)

Fedearroz 50 (c)
Hembras
Machos
Longevidad de Sogata en Prueba de Alimentación
Conclusiones
• Colombia 1 presenta el mayor número
de huevos y la mayor longevidad de la
hembra.
• Oryzica Llanos 5, WC 352 y WC 366
muestran un comportamiento similar al
de Colombia 1.
• Fedearroz 50 es la menos preferida con
la menor oviposición y la menor
duración de la hembra (antibiosis).
• CICA 8, IR 8, Fedearroz 2000 y Oryzica
1 proporcionan una alta longevidad al
insecto sin embargo presentan un tipo
de resistencia antixenótica al no
ovipositar en la misma proporción a la
duración de la hembra.
Comparación de 3 colonias de T. orizicolus en
condiciones de campo
Materiales y Métodos
o Colonias vectoras de sogata: Ginebra, Costa (VHB de
CIAT), CIAT tradicional
o Variedades: Fedearroz 2000, Fedearroz 50, Colombia 1,
WC366
o Edad de infestación:
o 15 días después de siembra
o Presión de insectos y densidad:
o 1 insecto/planta, 200 plantas/ m2
o Evaluación:
o 25 y 45 días después de la infestación
Comparación de 3 colonias de T. orizicolus y
su habilidad parta transmitir VHB sobre
4 variedades de arroz
100 a

80

b b
% VHB

60

40
c

20

0
Variedad Fedearroz 2000 Colombia 1 Fedearroz 50 WC366

Colonia CIAT Tradicional Ginebra Costa (Fundación)


Interacción de dos colonias vectoras
y tres variedades de arroz (ELISA).
TEST DE ELISA

Indicador de
Sogata virulenta
Distribución de insectos individuales en función a la dosis de virus
determinada por valores O.D. de ELISA en dos colonias de T. orizicolus
CIAT Foundation

60
χ21 43 p < 0.001 χ21 96 p < 0.001

40
% Insects

χ21 0.0049 p < 0.9 χ21 13.1 p < 0.0003

20

0
<= 0.03 0.03 - 0.10 0.10 - 0.30 0.30 - 1.35
ELISA O.D. values
Interacción de la dosis de virus en el insecto (ELISA, O.D.),
variedades y el porcentaje de plantas afectadas con VHB
ELISA O.D. values
< 0.03 0.03-0.10 0.10-0.30 0.30-1.35

100

80
% Plants

60

40

20

0
WC366 Fedearroz 50 Fedearroz 2000
Variety
Interacción de dos colonias vectoras y tres variedades de arroz.
CIAT Foundation

80
% Plants positive for RHBV

60

40

20

0
WC366 Fedearroz 50 Fedearroz 2000
Variety
La interacción entre las colonias causó un efecto significativo en variedades
intermedias como Fedearroz 50
Determinación del nivel de daño de Tagosodes
orizicolus con diferentes niveles de virulencia sobre
4 variedades de arroz
Materiales y Métodos
Variedades:
9 Fedearroz 2000, Fedearroz 50, Oryzica 1, Oryzica Caribe 8
Tratamientos:
9 T1= testigo, T2= 6 sog/planta con 25% virulencia, T3= 6
sog/planta sin virulencia ó sanas
Edad de infestación:
9 15 días después de siembra
Densidad de siembra:
9 250 plantas de arroz/ m2
Evaluación:
9 35 y 55 días después de siembra y rendimiento
Comparación de la incidencia de VHB en 4
variedades de arroz
99
aa
88
77
Escala VHB

66 bb
bb
55
44
33 bc
bc

22
cc cc
11 cc
cc cc cc cc cc
00
Fedearroz 2000
Fedearroz 2000 Fedearroz 50
Fedearroz 50 Oryzica 11
Oryzica O. Caribe
O. Caribe 88
Variedad
No
Noinsects
insects
insectos 6 insectos/planta 6 insectos con 25% virulencia/planta
Comparación del rendimiento de 4
variedades de arroz con diferentes niveles
de incidencia de VHB
6 a
a
a a
5 a a
a
ab
Rdto (ton/ha)

4
b b b
3

1 c

0
Variedad Fedearroz 2000 Fedearroz 50 Oryzica 1 O. Caribe 8

Colonia No insects
insectos 6 insects/plant
insectos/planta 6 insectos con 25% de virulencia/planta
Reacción de Variedades al VHB y sogata
Variedad Reacción
VHB Sogata
Fedearroz 2000 AR AR
Fedearroz Victoria I AR AR
Fedearroz Victoria II R R
Fedearroz 50 R R
Fundarroz PN1 R R
Oryzica Llanos 5 I S
Colombia XXI I R
Oryzica 1 I R
IR 8 S S
Colombia 1 S R
CICA 8 S I
Evaluación del efecto de VHB sobre el
rendimiento de 10 variedades de arroz
Materiales y Métodos

• Variedades: Cica8, Oryzica Llanos 5, Colombia 1,


Oryzica 1, Fedearroz 50, IR8, Bluebonnet 50, WC352, WC 366 y Fedearroz
2000

• Edad de infestación: 7, 14,21 y 28 dds.


• Presión de insectos: 1 insecto vector/planta (70%)
• Evaluación: 30 días después de infestación con escala del IRRI (0-9)
Promedio Global de la reacción al VHB y el rendimiento de
diez variedades de arroz en cuatro edades de siembra:
7,14,21 y 28 días
Infestación con 1 insecto Testigos
vector/ planta (0 insectos / planta)
Variedades VHB t/ha VHB t/ha
WC 352 9.0 a* 0.7 g 0.8 e 6.0 d
IR 8 9.0 a 0.8 g 0.7 e 8.0 bc
WC 366 9.0 a 1.1 g 0.8 e 6.1 d
Bluebonnet 50 8.6 ab 1.4 g 0.9 e 8.1 bc
Cica 8 8.5 ab 1.6 g 0.8 e 7.6 c
O.Llanos 5 9.0 a 1.6 g 0.7 e 9.0 b
Colombia 1 8.5 ab 3.1 f 0.4 ef 9.0 b
Oryzica 1 8.3 bc 3.8 ef 0.5 ef 9.0 b
Fedearroz 50 7.9 c 4.3 e 0.4 ef 8.4 bc
Fedearroz 2000 4.2 d 7.8 c 0.0 f 10.1 a

Promedios seguidos por la misma letra dentro de la misma columna no difieren significativamente (0.05%) en
prueba de Duncan.
Marcadores Moleculares (RAPDs)
para Resistencia a Sogata
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M
Susceptible a Sogata
M 1 kilobase marcadores
1. Colombia 1
2. IR 8
3. Bluebonnet
4. WC 322
5. WC 366
Resistente a Sogata
6. CICA 8
7. Oryzica Llanos 5
8. Fedearroz 50
9. Oryzica 1
10. Fedearroz 2000
M 100 bases marcadores

Ciat Annual Report 2001


Análisis de microsatélites
para resistencia a VHB
Evaluación de líneas avanzadas por
resistencia al VHB (CIAT)
EVALUACION EN CAMPO DE VHB (CIAT)
EVALUACIÓN A: AÑO TOTAL DE LINEAS

T. orizicolus 1999 3106


2000 5658
2001 6316
2002 1589
2003 (semestre A) 1210

VHB 1999 20952


2000 13153
2001 13545
2002 20055
2003 (semestre A) 10818
EVALUACION EN CAMPO DE VHB (CIAT)

• Semestre A: • Semestre B:

9 Envío de materiales: hasta 9 Envío de materiales: hasta


Marzo 5 Septiembre 5
9 Permiso de importación de 9 Permiso de importación de
semilla (ICA) semilla (ICA)
9 Certificado sanitario + 9 Certificado sanitario +
caurentena cuarentena
9 Envío de informacion: Julio 9 Envío de informacion:
Diciembre
Materiales evaluados por resistencia al
VHB en campo
VHB (%)

100

20
40
60
80

0
Cica 8

Cimarrón

PNA2002

Inia 14

Capirona

Oryzica 1

Uquihua

Selecta 3-20
Alta

Línea 2

Fedearroz 50
Baja

P5419

CT10310

Colombia XXI
de infestación de T. orizicolus

Fundarroz
Sin Inoculación

F. Victoria 1

Fed. 2000
Evaluación de VHB con diferentes niveles
VHB (0-9)

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Cica 8

Cimarron

PNA-2002

INIA 14

Capirona

Oryzica 1

Uquihua

Selecta 3-20

Línea 2

Fedearroz 50
T. orizicolus

P5419

CT10310
VHB

Colombia XXI

Fundarroz

F. Victoria 1
Rendimiento

Fedearroz 2000
0
1
2
3
4
5
6
7

Rendimiento (t/ha)
VHB y Rendimiento en alto nivel de infestación de
Reacción de variedades de arroz con diferentes
edades a la infestación con VHB en el campo
Porcentaje de plantas con
síntomas de VHB

Variedad días después de la siembra


5 10 15 20

Fedearroz 2000 44 12 6 12
Fedearroz Victoria 1 46 12 5 9
Fundarroz PN1 71 17 27 29
Fedearroz 50 83 28 45 52
Oryzica 1 75 51 26 26
CB 9172 77 17 5 10
Capirona 75 30 48 66
Oryzica Llanos 5 75 67 64 66
Colombia 1 67 33 27 28
Bluebonnet 50 85 85 83 85
Efecto de tiempo y numero de sogata virulenta sobre
plantas afectadas con VHB

Infestación 26 días Infestación 17 días


después de la siembra después de la siembra
Alta Baja Alta Baja Sin
Variedad
dosis dosis dosis dosis Sogata

IR 8 9.0 a 5.9 ef 8.6 a 8.4 ab 1.0 jk


Cica 8 8.9 a 4.2 gh 8.9 a 8.9 a 1.0 jk
O. Llanos 5 8.6 a 5.0 fg 8.0 abc 7.3 bcd 1.2 jk
Oryzica 1 6.1 ef 2.9 i 7.2 cd 5.7 ef 0.8 jk
Colombia 1 6.3 de 1.8 j 7.9 abc 5.8 ef 0.6 jk
Fedearroz 50 3.9 hi 1.3 jk 8.2 abc 6.3 de 0.5 jk
Fedearroz 2000 1.0 jk 1.0 jk 1.1 jk 1.7 j 0.2 k
Recomendaciones
9 Fedearroz 50, Fedearroz 2000 y Fedearroz Victoria 1:
variedades de menor riesgo a VHB.
9 Renovación de colonias= detectar materiales con
resistencia intermedia
à Países de AL: Envío de materiales: F2 a F6=
evaluaciones en campo a VHB.
à Países de AL: selección de materiales avanzados para
ensayos de investigación en VHB (Campo, invernadero
y laboratorio).
Muchas Gracias!!