Reacción de Molisch Fundamento En la prueba de Molisch, se utiliza el acido sulfúrico en la reacción de deshidratación (del monosacárido) y el alfa- naftol en la reacción de condensación del furfural , al aplicar esta prueba cualitativa , todos los carbohidratos o glúcidos producen un complejo color morado Desarrollo de la practica Procedimiento Resultado la presencia de un anillo violeta superficial nos indica prueba positiva por lo tanto hay presencia de glúcidos en la muestra problema Prueba de fehling Utilidad • Poner de manifiesto la presencia de azúcares reductores en un medio, mediante una reacción de color tipo redox • Fundamento Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores (aldosas: glucosa, ribosa etc.). Se trata de una reacción redox en la que el grupo aldehído (reductor) de los azúcares es oxidado a grupo ácido por el Cu2+ que se reduce a Cu+ . Tanto los monosacáridos como los disacáridos reductores reaccionan con el Cu2+ dando un precipitado rojo de oxido cuproso. La reacción tiene lugar en medio básico por lo que es necesario introducir en la reacción tartrato sódico-potásico para evitar la precipitación del hidróxido cúprico. La prueba de Fehling no es específica; otras sustancias que dan reacción positiva son los fenoles, aminofenoles, benzoína, ácido úrico, entre otras. Procedimiento • Se mezclan 1ml de las soluciones fehling A y fehling B en un tubo de ensayo • Se adiciona en el mismo tubo 1 ml de la solución problema • La mezcla formada se agita y se lleva a calentamiento fuerte en un baño térmico Resultados
En la glucosa el grupo aldehído se encuentra libre y actúa como
reductor , algo semejante ocurre con la lactosa un disacárido formado por glucosa y galactosa. Aquí el enlace se establece entre el carbono 1 (el C del grupo aldehído) y el carbono cuatro de la glucosa, de modo que la galactosa no tiene efecto reductor , pero si la glucosa pues su grupo aldehído no esta implicado en el enlace. Reacción de seliwanoff Utilidad • Esta es una prueba cualitativa ( el medio pasa de incoloro a rojo) de reconocimiento especifica para las hexosas (cetohexosas y aldohexosas) • Fundamento En la prueba de seliwanoff, se utiliza acido clorhídrico en la reacción de deshidratación (del monosacárido) y el resorcinol (1,3- dihidroxibenceno) en la reacción de condensación del derivado del furfural (hidroximetilfurfural). El hidroximetilfurfural (producto de la deshidratación) se forma rápidamente a partir de cetohexosas, y mas lentamente a partir de aldohexosas. El tratamiento prolongado- de mas de 15 minutos de duración-, provoca la isomerización de la glucosa (aldohexosa) en fructosa (cetohexosa), por lo que también la glucosa puede dar prueba positiva. la sacarosa da una reacción positiva debido a la hidrolisis acida de su enlace glicosidico, cuyos productos son la D-glucosa y la D-fructosa Procedimiento • Se añaden 5 ml del reactivo de seliwanoff a 2ml de la solución problema en un tubo de ensayo
• Se calienta la mezcal en un baño térmico
Resultados
Mediante la reacción de Seliwanoff se identificó los diferentes
azúcares dándonos una reacción positiva la fructosa ya que es una cetosa y la sacarosa, esta ultima esta formada por un monosacárido fructuosa que es una cetosa, mientras que obtuvimos una reacción negativa en la glucosa y lactosa lo que nos da a identificar que estos azúcares son aldosas Reacción de Bial Fundamento • El HCL del reactivo de Bial convierte a la pentosa en furfural, la cual reacciona con orcinol para formar un complejo verde Procedimiento • Se mezclan 5 ml del reactivo con 2 ml de la solución problema
• Se calienta lentamente hasta ebullición en un baño
térmico Resultado
Dependiendo el tipo de reactivo; la prueba dará positiva en
el caso del orcinol mediante una coloración verde y en el caso de utilizar como reactivo floroglucinol mediante la formación de una complejo color rojo o rosado Prueba de almidón (hidrolisis de almidón) Utilidad Fundamento Desarrollo de la practica