Colegio Americano de Puebla

Organización del Bachillerato

Internacional

Diseño del estudio de

cromatografía

Sebastián Inclan Mijangos

Número de candidato: 001037-011

Número del colegio: 001037

Mayo 2009
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Estudio de Cromatografía

Aspecto 1: definición del problema y selección de variables

Introducción

La cromatografía es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención

selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo
identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.

Las técnicas cromatografías son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que
consiste en un fluido que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se
trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido.

Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria y

con la fase móvil. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a
distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan pasado
por la fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que
puede depender de la concentración y del tipo de compuesto.

El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda
de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas
longitudes de onda no absorbidas.

Los cambios en el ambiente de cromóforos, como el cambio de solvente,

modifican la longitud de onda y la intensidad de la absorbancia. Los solventes, entre otras
propiedades características, poseen una constante dieléctrica es una propiedad
macroscópica. Se representa por la letra épsilon mayúscula y define la polaridad de una
sustancia, además, se relaciona estrechamente con el momento bipolar total de cada una
de las moléculas en la sustancia. En su valor influyen muchos factores, como el peso
molecular, la forma de la molécula, la geometría molecular o el tipo de interacciones que
presente.

La espectrofotometría de absorción atómica se usa para determinar alrededor de

70 metales en muestras. En esta técnica las muestras moleculars son disociadas en sus
átomos pudiéndose observar en el espectro atómico solamente. Es importante mencionar
que en absorción atómica la fuente de radiación es específica para cada elemento que se
va a observar.

La disipación de la muestra se efectúa por medio de una flama es decir, la

solución al analizar se introduce dentro de una flama en forma de aerosol, evaporándose
el disolvente dejando las partículas finas suspendidas en la flama, éstas son vaporizadas y
algunas o toas las partículas se disocian en átomos, este proceso es debido parcialmente al
efecto directo del calor generado por la flama y parcialmente a la reducción química de
las especies químicas generadas por la flama. Para escoger el combustible y el oxidante
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adecuado, tendremos en cuenta la temperatura requerida para atomizar la muestra, siendo
las flamas más usadas las de acetileno-óxido nitroso, aire propano y aire hidrógeno.

Pregunta guía: ¿Cómo se puede saber la cantidad de luz que absorbe un cuerpo?

Hipótesis: Se podrá observar el desplazamiento de partículas y la cantidad de luz

que éstas absorben si se ocupa un espectrofotómetro.

Variables

Independientes: Colores secundarios, Distancia que recorre la muestra, distancia

que recorre el eluente

Dependientes: Absorbencia de la sustancia, distancia entre cada punto

Controladas: cantidad de hexano acetona, tiempo en el agua, cantidad de cylica.

Materiales
 4 Celdas cuadradas de polietileno
 Etanol
 Metanol
 Agua destilada
 Espectrofotómetro de UV visible
 Matraces aforados
 Micro pipeta
 5 vasos de precipitados
 Solución de Cobre (Cu)
 Laminilla de cobre
 Cámara de absorción atómica

Aspecto 2: Control de las variables

Con el fin de controlar las variables las medidas deberán ser las siguientes:
 Todo el material a utilizar deberá estar completamente limpio.
 Las medidas deberán ser tomadas por la misma persona para evitar
errores.
 Las celdas cuadradas deberán ser transportadas deteniéndolas únicamente
por el borde superior para evitar dejar marcas de grasa, pues ésta también
absorbe luz.
 Se deberá calibrar el espectrofotómetro.

Aspecto 3: desarrollo de un método de obtención de datos brutos

Esta práctica se dividirá en 2 partes para su mejor comprensión.

CROMATOGRAFIA CON COLORES

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1. Contarse dos tiras de papel filtro Wathman N.1 del tamaño de la cámara que le
sea asignada
2. Dibújese una línea con lápiz a 8 mm del borde inferior
3. Sobre la línea de lápiz marcar la posición de las muestras, lo más distantes
posible, de preferencia que sean cinco
4. Las muestras en este caso son marcadores de colores solubles en agua
5. Preparar un cromato grama, utilizar todos los marcadores disponibles, respetando
la misma posición en cada papel
6. El eluente que utilizara será H2O destilada
7. Cubrir el fondo de su cámara, colocar el papel y dejar correr el cromato grama un
poco más de la mitad
8. Retirar y marcar el recorrido del eluente y ponerlo a secar

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

1 Preparación de la muestra
2 Machacar una hoja en un mortero con una mezcla de 4ml de Hexano y 2 ml de
Etanol
3 Con una pipeta Pasteur transferir el extracto a un tubo de ensayo y agitar con
mucha suavidad con una cantidad igual de agua, evitando la formación de
emulsiones
4 Retirar la fase orgánica con ayuda de una pipeta Pasteur, colocándola en otro tubo
de ensaye, y lavar con 2ml de agua para eliminar todo el etanol
5 Transferir la fase orgánica a un tubo de ensayo limpio y seco
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Colegio Americano de Puebla

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Obtención y procesamiento de
datos del estudio de
cromatografía

Sebastián Inclan Mijangos

Número de candidato: 001037-008

Número del colegio: 001037

Mayo 2009
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Datos
• Aspecto 1

Con este experimento intentamos demostrar que un objeto el utilizar la

cromatografía, además de que los datos brutos que obtuvimos fueron
únicamente uno solo el de referencia frontal que se obtiene con la operación:
distancia que recorre la muestra en el papel sobre distancia que recorre el
eluente.

• Aspecto 2

a
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Aspecto 3: Presentación de datos brutos

Grafico 1: comparación de los resultados de niveles de absorbencia
Absorbancia

0.14
Longitud de onda

0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
368 251 238 232 226 220 213 210 201
Absorbancia

Agua destilada Etanol Metanol

En esta gráfica se puede ver que el agua destilada tiene una absorbancia bastante baja
pues la más alta es 0.42 en 251nm. El etanol es el que tiene mayor absorbancia pues su
punto máximo es .118 en 251nm y el metanol tiene su valor máximo de absorbancia en
0.57 a 251nm.

Grafica 2: Ilustración de los resultados de absorción atómica

Absorción atómica

0.8
0.7
0.6
absorbancia

0.5
0.4 absorbancia
0.3
0.2
0.1
0
200 400 600 800
Concentración de cobre (microlitros)

En esta gráfica de absorción atómica se puede ver que la absorbancia aumenta conforme
aumenta la concentración de la solución. Se puede ver que efectivamente la lámpara
reconoce las moléculas de cobre.
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Internacional

Formulación de conclusiones
del estudio de cromatografía

Sebastián Inclan Mijangos

Número de candidato: 001037-008

Número del colegio: 001037

Mayo 2009
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Aspecto 1: Formulación de conclusiones

Dado que fue una práctica basada principalmente en la observación se puede llegar a la
conclusión de que el espectrofotómetro es un aparato que nos es muy útil para la
identificación de la absorbancia. Así también la cámara de absorción atómica funciona
para identificar los distintos metales. El espectrofotómetro nos permitió observar las
diferentes absorbancias de las soluciones. También se puede concluir que el metanol tiene
un grado de absorbancia mucho más alto que todas las otras sustancias medidas.
En el caso de la absorción atómica se puede concluir que se detectaron correctamente las
moléculas de cobre, lo que indica que esta cámara serviría para detectar diferentes
metales que se encontraran en el agua. Claro que se debe ocupar la lámpara correcta.

Aspecto 2: Evaluación de los procedimientos

Creo que esta práctica de laboratorio tuvo algunas fallas como las siguientes:
 No se conocía realmente de que era el laboratorio y para que servía entonces no se
puede llegar a conclusiones muy certeras.
 Dado que el grupo era un poco grande no todos pudimos ver las gráficas
detenidamente lo que causó confusión
 Se uso terminología con la que no estamos completamente familiarizados.
A pesar de estas pequeñas fallas creo que esta práctica fue exitosa e interesante.

Aspecto 3: Mejora de la investigación

Creo que en un futuro la práctica se podría mejorar si estuviéramos más

familiarizados con el tema que se va a tratar. También creo que sería importante
encontrar la manera de hacer más tiempo para aclaración de dudas. En general creo que
esta práctica tuvo la mayoría de sus aspectos controlados, ya que hubo alguien
profesional ayudándonos con ella.
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