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“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO”

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA


ESCUELA PROFESIONAL DE ZOOTECNIA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS PECUARIAS

Determinación de proteínas de manera cualitativa

PRÁCTICA : № 04

FECHA : 03 de mayo del 2018

DOCENTE : Ing. PEREZ MENDOZA, Guder Elvira

ALUMNA : BELTRAN SHAHUANO, Teodomira

SEMESTRE : 2018 – V

TINGO MARIA- PERU


2018
I. INTRODUCCION

Las proteínas son materiales que se desempeñan el mayor número de las


funciones de las células de todos los seres vivos. Forman parte de su estructura
básica de los tejidos y desempeñan funciones metabólicas y reguladoras
también son seres vivos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la
base de la estructura del código genético ADN y de los sistemas de
reconocimiento de organismos extraños en el sistema inmunológico.

Las proteínas están formadas por aminoácidos los cuales a su vez están
formados por enlaces peptídicos para formar esfingocinas.

Las proteínas de todos los seres vivos están determinadas mayoritariamente por
su genética (con excepción de algunos péptidos antimicrobianos de síntesis no
ribosomal), es decir, la información genética determina en gran medida qué
proteínas tiene una célula, un tejido y un organismo.

Las proteínas se sintetizan dependiendo de cómo se encuentren regulados los


genes que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a señales o factores
externos. El conjunto de las proteínas expresadas en una circunstancia
determinada es denominado proteoma.

II. OBJETIVOS

 Determinar de manera cualitativa la presencia de proteína en las


diferentes muestras mediante distintos métodos (biuret y xantoproteica).
III. REVISION DE LITERATURA

3.1. CUALITATIVO.

El término cualitativo es un adjetivo que proviene del


latín qualitatīvus. Lo cualitativo es aquello que está relacionado con la
cualidad o con la calidad de algo, es decir, con el modo de ser o con
las propiedades de un objeto, un individuo, una entidad, o un estado.

El análisis cualitativo es aquel que revela cuáles son las


características o el valor de algo.

3.2. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

 Reacción de Biuret

Es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y


otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en
sustancias de composición desconocida. Está hecho de hidróxido
potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de
sodio y potasio (KNaC4O6·4H2O).
El reactivo de Biuret está formado por una disolución de sulfato en
medio alcalino, este reconoce el enlace peptídico de las proteínas
mediante la formación de un complejo de coordinación entre los
iones Cu 2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno
que forma parte de los enlaces peptídicos, lo que produce una
coloración rojo-violeta. (Dafnhe 2011)

 Reacción xantoproteica

Reconoce grupos aromáticos, es decir aquellas proteínas que


contengan tirosina o fenilalanina, con las cuales el ácido nítrico
forma compuestos nitrados amarillos.
IV. METODOS Y MATERIALES

4.1. LUGAR Y FECHA


La presente práctica se realizó el día 03 de Mayo del 2018, en el laboratorio
de bioquímica de la facultad de Zootecnia; en la Universidad Nacional Agraria
de la Selva; en la ciudad de Tingo María; en el distrito de Rupa Rupa;
provincia de Leoncio Prado; región de Huánuco.
La práctica duro aproximadamente 02 horas, dando inicio a las 11:00am y
culminando a las 1:00pm.
Geográficamente se ubica a 9° 17’ 08” de latitud sur, y 75° 59” 52’ de latitud
oeste; a 650 msnm y a una temperatura de 24° C, con una precipitación
pluvial de 3182mm y con una humedad relativa de 85% promedio.

4.2. MATERIALES

 10 tubos de ensayo  Gelatina


 Grajilla  Caseína
 Cocina eléctrica  Hidróxido de sodio (NaOH) al
 Vaso precipitado 10%
 Pipetas  Jugo de manzana
 Jugo de frijol  Jugo de naranja
 Yema de huevo  Avena
 Ovoalbúmina  Sulfato de cobre (CuSo4)

4.3. METODO UTILIZADO


El método que utilizo la Ing. PEREZ MENDOZA, Guder Elvira fueron
prácticos, utilizando los métodos de reconocimiento de proteínas como la
reacción xantoproteica que es debida a la formación de un compuesto
aromático nitrado de color amarillo, otra es la reacción de biuret.
V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

5.1. DETEMINACION CUALITATIVA DE PROTEINA CON HIDRÓXIDO DE


SODIO

5.1.1. METODO DE BIURET

- Primeramente, debemos tener una muestra como testigo; asi que a


esta muestra le agregaremos 1ml de agua (H2O) + Hidróxido de
sodio (10%)

- Luego agregar 1mL de cada muestra a cada tubo de ensayo.

- Después agregar 1mL de sulfato de Hidróxido de sodio (su reacción


lo hará tornarse de color violáceo).

- Finalmente, agregamos 10 gotas de sulfato de cobre (CuSo4)

5.2. DETEMINACION CUALITATIVA DE PROTEINA CON ÁCIDO NÍTRICO

5.2.1. MÉTODO XANTOPRITEICO

- Primeramente, debemos tener una muestra como testigo; asi que a


esta muestra le agregaremos 2ml de agua (H2O) + 0.5ml de Ácido
nítrico

- Luego agregar 2mL de cada muestra a cada tubo de ensayo como


se hizo anteriormente.

- Después agregar 0.5mL de Ácido nítrico (su reacción lo hará


tornarse de color lechoso
.
- Después introducir al baño maría hasta el punto de ebullición.

- Finalmente agregar 1.5ml (máximo) de Hidróxido de Sdodio (esto


hará que se torne de color anaranjado).
VI. RESULTADOS

6.1. Concentración de proteína con el método de biuret

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que


sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret.
Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los
aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-
NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret
lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente
alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de
color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la
concentración de proteínas. (ANONIMO, 2014).

1 2 3 4

1. Yema de huevo
2. Gelatina
3. Ovoalbúmina.
4. Caseína
6.2. Concentración de proteína con el método xantoproteico.

Esta reacción se debe a la formación de un compuesto aromático


nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido
nítrico concentrado. Generalmente, se forma primero un precipitado
blanco que cambia a amarillo al calentarlo. El color se empieza a
tornarse anaranjado cuando la solución se vuelve básica. La prueba
da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos
portadores de grupos bencénicos, tirosina, fenilalanina y triptofano,
obteniéndose nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven
anaranjados en medio fuertemente alcalino (formación del ácido
pirámico o trinitrofenol). (ANONIMO, 2014)

1 2 3 4 5

1. Jugo de manzana
2. Avena
3. Gelatina
4. Caseína (solo el precipitado.
5. Jugo de frijol
VII. DISCUSIÓN
En la reacción de Biuret, detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y
otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de
composición desconocida. Como se puede observar en las 3 últimas muestras.
La reacción es positiva es cuando el color de la solución torna de un color violeta,
la clara de huevo dio positivo debido a la albumina que es una proteína. Como
la tirosina es el único compuesto fenólico en las proteínas es por eso que su
reacción es positiva que nos indica a presencia de esta proteína en la clara de
huevo.
Por último, con el método xantoproteico, podemos observar que en las muestra
2 y 3 dio positivo, la color anaranjado es mucho más pronunciada (la avena
contiene aminoácidos aromáticos). En este caso de color anaranjado, que indica
presencia de indol en la muestra analizada.

VIII. RECOMENDACIONES

 Se recomienda que los alumnos traigan todos sus materiales de práctica


para evitar inconvenientes.

 Se recomienda llevar guardapolvos.

 Deben de trabajar más conjuntamente para que la práctica se pueda llevar


a cabo más rápidamente.
IX. CONCLUCIONES

 Logramos determinar de manera cualitativa la presencia de proteínas en


cada uno de las muestras presentes.

 Aprendimos la forma correcta de manejar los dos métodos empleados en la


práctica (buiret y xantoproteica)

X. BIBLIOGRAFIA

Anónimo. (2013). Aula 21. Recuperado el 18 de Octubre de 2013, de Proteínas

Daphne. (Septiembre de 2011). Bioquímica. Recuperado el 18 de Octubre de


2013, de Pruebas Cualitativas para Aminoácidos y Proteínas 55 pag.
(ANONIMO, 2014). ESCUELA EUROPEA DE EXAMBURGO. Sección
Española. Bioqímica,4. 48 pag.
XI. ANEXOS