Protocolos de Laboratorio

LABORATORIO
CLINICO
PROTOCOLOS DE
PROCEDIMIENTOS
ROVIRA
Elaborado por JUAN PABLO MENESES BEDOYA.
Bacteriólogo.
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO 2
HOSPITAL "SAN VICENTE"
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD .....................................................................................................................12

LAVADO DE MATERIAL ......................................................................................................................15
Lavado del Material en Hematología ........................................................................................................15
Tubo y Frascos ......................................................................................................................................16
Láminas Nuevas ....................................................................................................................................16
Láminas Usadas .....................................................................................................................................16
Lavado del Material en Química Clínica ...................................................................................................16
Tubos y Pipetas......................................................................................................................................16
Lavado del Material en Parasitología ........................................................................................................17
Láminas .................................................................................................................................................17
Laminillas ..............................................................................................................................................17
Lavado del Material de Orinas ..................................................................................................................17
Láminas y Láminillas ................................................................................................................................17
Tubos .........................................................................................................................................................18
Otro Material Contaminado .......................................................................................................................18
Lavado del Material en Bacteriología........................................................................................................18
Control de la Limpieza del Material de Vidrio ..........................................................................................18
Interpretación.............................................................................................................................................18
Preparación de la Mezcla Sulfocrómica ....................................................................................................19
Esterilización .............................................................................................................................................19
Propósito de la Esterilización ....................................................................................................................19
Tipo de Esterilización ................................................................................................................................19
Autoclave...................................................................................................................................................19
Esterilización por Calor Seco ....................................................................................................................20
Horno .........................................................................................................................................................20
Desinfectantes más Usados en Bacteriología ............................................................................................20
Microbicida: ..............................................................................................................................................20
Agentes Reductores: ..................................................................................................................................21
Agentes Oxidantes: ....................................................................................................................................21
Agentes Halógenos: ...................................................................................................................................21
Fenoles y Cresoles: ....................................................................................................................................21
Alcoholes y Éter: .......................................................................................................................................21
Detergente: ................................................................................................................................................21
TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE........................................................................................................22
Instrucciones al Usuario: ...........................................................................................................................22
EN AYUNO ..............................................................................................................................................22
Química Clínica:........................................................................................................................................22
Hematología: .............................................................................................................................................22
Serología: ..................................................................................................................................................22
NO AYUNO ..............................................................................................................................................22
Hematología: .............................................................................................................................................22
Inmunoserología: .......................................................................................................................................22
RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS ............................................................................................................22
TOMA DE MUESTRAS EN HEMATOLOGÍA ..........................................................................................23
Método de Extracción de Sangre Capilar ..................................................................................................23
Materiales ..................................................................................................................................................23
Procedimiento ............................................................................................................................................23
Recomendaciones ......................................................................................................................................23
Complicaciones de la Punción Cutánea .....................................................................................................23
Método de Extracción de Sangre Venosa ..................................................................................................24
Materiales ..................................................................................................................................................24
Procedimiento ............................................................................................................................................24
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Complicaciones de la Venipuntura ............................................................................................................25

1. Local Inmediata .............................................................................................................................25
2. Local Diferida ................................................................................................................................25
3. General Tardía ...............................................................................................................................25
Toma de Muestras para Pruebas Bioquímicas ...............................................................................................26
Pasos a Seguir para la Separación de la Sangre en Fracciones. .................................................................26
Sangre Completa .......................................................................................................................................26
Plasma .......................................................................................................................................................26
Suero..........................................................................................................................................................26
Informe, Entrega de Resultados.................................................................................................................26
Archivo de Resultados ...............................................................................................................................27
HEMATOLOGÍA .............................................................................................................................................28
Conservación de la Muestra: .....................................................................................................................28
CUADRO HEMÁTICO ............................................................................................................................28
Procedimiento de Toma de Muestras ........................................................................................................28
RECUERDE!.............................................................................................................................................28
HEMATOCRITO ..........................................................................................................................................29
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................29
MICROMETODO .....................................................................................................................................29
Equipo ...................................................................................................................................................29
Materiales ..............................................................................................................................................29
Procedimiento de Toma de Muestras ....................................................................................................29
VALORES NORMALES:.........................................................................................................................30
HEMOGLOBINA .........................................................................................................................................30
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................30
PRINCIPIO ...............................................................................................................................................30
MUESTRA ............................................................................................................................................30
REACTIVO ...........................................................................................................................................31
PREPARACION DE LA SOLUCION DE TRABAJO.........................................................................31
MATERIALES Y EQUIPOS ................................................................................................................31
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................31
VALORES NORMALES ......................................................................................................................32
ERITROSEDIMENTACION ........................................................................................................................32
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................32
RECUERDE !............................................................................................................................................33
1. MÉTODO DE WINTROBE ..................................................................................................................33
EQUIPO ................................................................................................................................................33
MATERIALES ......................................................................................................................................33
REACTIVO ...........................................................................................................................................33
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................33
2. METODO CON HEMATOCRITOS ....................................................................................................34
MATERIALES Y EQUIPOS ................................................................................................................34
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................34
RECUENTO DE LEUCOCITOS ......................................................................................................................34
REACTIVOS Y MATERIALES...........................................................................................................34
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................35
CALCULO ............................................................................................................................................35
EXTENDIDO PERIFÉRICO Y DIFERENCIAL LEUCOCITARIO ..........................................................35
Preparación del Extendido .........................................................................................................................36
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
MATERIALES ......................................................................................................................................36
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................36
COLORACIÓN DE WRIGHT ..................................................................................................................37
MATERIALES ......................................................................................................................................37
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................37
CAUSAS DE UNA MALA COLORACIÓN............................................................................................38
A. EXTENDIDO AZUL........................................................................................................................38
B. EXTENDIDO ROJO ........................................................................................................................38
C. EXTENDIDO CON PRECIPITADO ...............................................................................................38
Para realizar un buen proceso de coloración tenga en cuenta: ..............................................................39
LECTURA.................................................................................................................................................39
VALORES NORMALES DIFERENCIAL LEUCOCITARIO. ...............................................................39
RECUENTO DE RETICULOCITOS ...........................................................................................................40
EQUIPOS Y MATERIALES ................................................................................................................40
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................41
CALCULO ............................................................................................................................................41
PRUEBAS DEL SISTEMA DE COAGULACIÓN. ........................................................................................41
TIEMPO DE PROTROMBINA ( PT ) Y TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA ( PTT ). .........41
Equipo Material Reactivos ................................................................................................................42
Procesamiento de la Muestra .....................................................................................................................43
MATERIALES Y EQUIPOS: ...................................................................................................................44
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TP ..........................................................................................44
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR PTT ........................................................................................45
OTROS EXÁMENES HEMATOLOGICOS ................................................................................................45
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA .........................................................................................46
RECUENTO DE PLAQUETAS ...................................................................................................................46
RECUENTO DIRECTO ...........................................................................................................................46
MUESTRA ............................................................................................................................................46
MATERIALES Y REACTIVOS...........................................................................................................46
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................47
RECUENTO INDIRECTO .......................................................................................................................47
MUESTRA ............................................................................................................................................47
MATERIALES Y REACTIVOS...........................................................................................................47
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................47
RECUENTO DE EOSINOFILOS .................................................................................................................48
DREPANOCITOS.........................................................................................................................................48
DIAGNOSTICO DE HEMOPARASITOS ...................................................................................................49
Entrevista al Usuario .................................................................................................................................49
Método de la Gota Gruesa .........................................................................................................................49
Materiales y Reactivos ..............................................................................................................................49
Toma de la Muestra ...................................................................................................................................50
Coloración de Field ...................................................................................................................................50
Equipo, Materiales y Reactivos .............................................................................................................50
Procedimiento ........................................................................................................................................51
LECTURA E INFORME: .....................................................................................................................51
QUÍMICA CLÍNICA ........................................................................................................................................52
Instrucciones al Usuario: ...............................................................................................................................52
Procedimiento de Toma de Muestras ............................................................................................................52
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Condiciones de la Muestra ............................................................................................................................53

Hemólisis .......................................................................................................................................................53
Causas de Hemólisis en la Punción Venosa ..................................................................................................53
Causas de Hemólisis en la Punción Capilar ..................................................................................................54
Turbidez ........................................................................................................................................................54
Contaminación...............................................................................................................................................54
Conservación de la Muestra ..........................................................................................................................55
Cuidados especiales .......................................................................................................................................56
GLICEMIA. ..................................................................................................................................................58
MUESTRA: ...............................................................................................................................................58
MATERIALES:.........................................................................................................................................58
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................58
TEMPERATURA DE REACCION ..........................................................................................................58
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................58
VALORES NORMALES ..........................................................................................................................59
COLESTEROL. ............................................................................................................................................59
MUESTRA: ...............................................................................................................................................59
MATERIALES:.........................................................................................................................................59
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................59
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................59
TRIGLICERIDOS .........................................................................................................................................60
MUESTRA: ...............................................................................................................................................60
MATERIALES:.........................................................................................................................................60
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................60
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................60
ACIDO ÚRICO .............................................................................................................................................61
MUESTRA: ...............................................................................................................................................61
MATERIALES:.........................................................................................................................................61
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................61
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................61
UREA O NITROGENO UREICO ................................................................................................................62
MUESTRA: ...............................................................................................................................................62
MATERIALES:.........................................................................................................................................62
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................62
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................63
COLESTEROL HDL ....................................................................................................................................63
MUESTRA ................................................................................................................................................63
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................63
TEMPERATURA .....................................................................................................................................64
MATERIALES:.........................................................................................................................................64
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................64
COLESTEROL LDL .....................................................................................................................................64
CREATININA...............................................................................................................................................64
MUESTRA ................................................................................................................................................65
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
MATERIALES:.........................................................................................................................................65
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................65
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................65
BILIRRUBINA TOTAL ...............................................................................................................................66
MUESTRA ................................................................................................................................................66
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................66
TEMPERATURA .....................................................................................................................................66
MATERIALES:.........................................................................................................................................66
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO ................................................................................66
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................67
BILIRRUBINA DIRECTA. ..........................................................................................................................67
MUESTRA ................................................................................................................................................67
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................67
TEMPERATURA .....................................................................................................................................67
MATERIALES:.........................................................................................................................................67
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO ................................................................................68
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................68
CURVA DE GLICEMIA ..............................................................................................................................69
No debe realizar la curva de glicemia a: ....................................................................................................69
GLICEMIA POST - CARGA A LAS DOS HORAS ....................................................................................70
Condiciones del Usuario ............................................................................................................................70
GLICEMIA POST - PRANDIAL .................................................................................................................71
DETECCIÓN DE LA DIABETES GESTACIONAL ...................................................................................72
Test de Sullivan .........................................................................................................................................72
Condiciones de la Usuaria .........................................................................................................................72
CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA PARA LA DETECCIÓN DE DIABETES
GESTACIONAL ...........................................................................................................................................72
Condiciones de la Usuaria .........................................................................................................................72
Procedimiento de toma de Muestras ..........................................................................................................72
Tome muestras de sangre venosa así: ........................................................................................................73
UROANALISIS ................................................................................................................................................74
EXAMEN DE ORINA ..................................................................................................................................74
Recolección de la Muestra.........................................................................................................................74
Recepción de la Muestra ...........................................................................................................................75
Procesamiento de la muestra .....................................................................................................................75
Equipo .......................................................................................................................................................75
Materiales ..................................................................................................................................................75
Examen Organoléptico ..............................................................................................................................75
Aspecto ......................................................................................................................................................76
Color ..........................................................................................................................................................76
Olor............................................................................................................................................................76
Examen Físico-Químico ............................................................................................................................76
Tira Reactiva .............................................................................................................................................76
Procedimiento ............................................................................................................................................78
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas ..........................................................................................79

Examen Microscópico del Sedimento Urinario .........................................................................................79
OTRAS PRUEBAS REALIZADAS EN ORINA. ........................................................................................79
DEPURACION DE LA CREATININA: ......................................................................................................79
PROCEDIMIENTO: .................................................................................................................................79
INFORME: ................................................................................................................................................80
VALORES NORMALES: HOMBRES: 98-156ml/min. ........................................................................80
EXAMEN DE MATERIAL FECAL ................................................................................................................81
COPROLOGICO DIRECTO ........................................................................................................................82
ADVIÉRTALE QUE: ...............................................................................................................................82
Recepción de la Muestra ...........................................................................................................................82
Procesamiento de la Muestra .....................................................................................................................83
Materiales y Reactivos ..............................................................................................................................83
Examen Microscópico ...............................................................................................................................83
Consistencia Color .............................................................................................................................83
Examen Microscópico ...............................................................................................................................84
EXAMEN DE MATERIA FECAL POR MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN .........................................85
Técnica de Flotación del Sulfato de Zinc ..................................................................................................85
Equipo .......................................................................................................................................................85
Materiales ..................................................................................................................................................85
Reactivos ...................................................................................................................................................85
DIAGNOSTICO DE OXIUROS ...................................................................................................................87
Técnica de Graham ....................................................................................................................................87
Materiales ..................................................................................................................................................87
SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL. ..............................................................................................89
Equipo, Materiales y Reactivos .................................................................................................................89
OTROS ANÁLISIS EN MATERIA FECAL ................................................................................................90
Ph:..............................................................................................................................................................90
Instrucciones al Usuario: .......................................................................................................................90
Procedimiento ........................................................................................................................................90
Azúcares Reductores .................................................................................................................................90
Materiales y Reactivos ..........................................................................................................................91
Procedimiento ........................................................................................................................................91
Leucocitos .................................................................................................................................................91
Materiales y Reactivos ..........................................................................................................................91
Procedimiento ........................................................................................................................................91
COLORACIÓN DE ZIEHL NEELSEN MODIFICADA PARA CRYPTOSPORIDIUM ...........................92
SEROLOGIA ....................................................................................................................................................93
TECNICA - VDRL......................................................................................................................................93
Equipo, Materiales.....................................................................................................................................93
Procedimiento ............................................................................................................................................94
TECNICA - RPR .........................................................................................................................................94
TÉCNICA..................................................................................................................................................95
LECTURA DE RESULTADOS ...............................................................................................................95
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Reacción Negativa: ................................................................................................................................95

Reacción Positiva Débil: .......................................................................................................................95
Reacción Positiva: .................................................................................................................................96
DIAGNOSTICO DE EMBARAZO ..................................................................................................................97
Instrucciones al Usuario: ...............................................................................................................................99
Equipo, Materiales...................................................................................................................................100
Procedimiento ..........................................................................................................................................101
Recomendaciones ....................................................................................................................................101
SECRECIÓN OCULAR .................................................................................................................................102
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS .....................................................................................102
Instrucciones al Usuario: .........................................................................................................................102
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................102
Materiales Reactivos ...................................................................................................................102
Procedimiento ..........................................................................................................................................102
SECRECIÓN OTICA......................................................................................................................................104
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS .....................................................................................104
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................104
Procedimiento ..........................................................................................................................................104
SECRECIÓN DE HERIDAS Y LESIONES ...................................................................................................105
Instrucciones al Usuario: .............................................................................................................................105
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................105
Procedimiento de Toma de Muestras ......................................................................................................106
SECRECIÓN VAGINAL ................................................................................................................................107
Instrucciones a la Usuaria para el Examen Directo y el Cultivo. ................................................................107
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................107
Equipo Materiales Reactivos ...........................................................................................................107
SECRECIÓN VAGINAL EN NIÑAS ........................................................................................................108
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................108
Examen en Fresco ...................................................................................................................................109
Frotis........................................................................................................................................................109
SECRECIÓN URETRAL ...........................................................................................................................109
Instrucciones al Usuario para el Examen del Frotis y el Cultivo. ................................................................109
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................109
Materiales Reactivos ....................................................................................................................109
OROFARINGEO ........................................................................................................................................110
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................110
GARGANTA...............................................................................................................................................112
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................112
FOSA NASAL. MICOBACTERIUM LEPRAE .......................................................................................113
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................113
a. Procedimiento para la toma de muestras ............................................................................................114
Forma práctica de hacer los frotis............................................................................................................115
b. Coloración ..........................................................................................................................................115
c. Lectura de la baciloscopia...................................................................................................................116
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
1. Índice Bacilar (IB) ...........................................................................................................................117

DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS .........................................................................................................118
BACILOSCOPIA ........................................................................................................................................118
Recepción de la Muestra .........................................................................................................................119
Conservación de la Muestra ....................................................................................................................119
Remisión de las Muestras ........................................................................................................................119
Procesamiento de la muestra ...................................................................................................................120
Preparación del Extendido .......................................................................................................................120
Materiales y Reactivos ........................................................................................................................120
Procedimiento ......................................................................................................................................120
Recomendaciones ................................................................................................................................121
Coloración de Ziehl Neelsen ...................................................................................................................121
Materiales ............................................................................................................................................122
Reactivos .............................................................................................................................................122
Procedimiento ......................................................................................................................................122
Normas de Seguridad al Terminar el Trabajo..........................................................................................123
GUÍA PARA EL ENVIÓ DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE LA DIRECCIÓN GENERAL DE
MEDICINA LEGAL - BAGUE ......................................................................................................................124
BURUNDANGA: .......................................................................................................................................124
LÍQUIDOS: .................................................................................................................................................124
ALIMENTOS: .............................................................................................................................................124
PLANTAS: ..................................................................................................................................................124
ESPERMATOZOIDES: ..............................................................................................................................125
PARA MANCHAS QUE CONTENGAN SEMEN: ...................................................................................125
CONTAMINACIÓN VENÉREA: ..............................................................................................................125
SUERO PARA SEROLOGIA DE: VDRL: ................................................................................................125
HIV: .............................................................................................................................................................125
PRUEBA DE EMBARAZO:.......................................................................................................................125
PELOS:........................................................................................................................................................126
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS TRANSPORTABLES: .....................................................126
MANCHAS DE SANGRE TOMADAS DIRECTAMENTE DEL INDIVIDUO: .....................................126
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS NO TRANSPORTABLES: ..............................................126
ALCOHOLEMIA: .......................................................................................................................................126
OJO: ............................................................................................................................................................127
ROTULACION: ..........................................................................................................................................127
NOTA: En el caso de alcoholemia debe tomarse muestra tanto a la víctima como al victimario. ..............128
COLORACIÓN DE ALBERT ....................................................................................................................129
Equipo Materiales Reactivos ...........................................................................................................129
NOTA: .....................................................................................................................................................129
COLORACIÓN DE GRAM ........................................................................................................................130
Equipo Materiales Reactivos .....................................................................................................130
Procedimiento ..........................................................................................................................................130
CAUSAS DE ERROR EN LA COLORACIÓN GRAM ............................................................................131
REMISIÓN DE MUESTRAS PARA MICOLOGIA ..................................................................................132
BIBLIOGRAFIA .........................................................................................................................................133
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
DEFINICIÓN.
Es el conjunto de procedimientos técnicos administrativos que le permiten al

usuario acceder a la realización de estudios complementarios de diagnostico
mediante la toma, procesamiento y análisis de fluidos líquidos corporales e
histológicos en el laboratorio clínico y bacteriológico del Hospital San Vicente de
Rovira.
OBJETIVO.
Garantizar la oportunidad acceso, continuidad y seguridad a los usuarios del
hospital la realización y obtención de reportes de laboratorio de calidad y seguridad
al usuario y al médico tratante.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS.
Identificar las personas involucradas en cada proceso del área.
Determinar las labores que se deben desarrollar así como los documentos a
diligenciar y el suministro de elementos.
Reducir al máximo los trámites en cada proceso.
Definir un manual de bioseguridad para implantar controles en el área que

garantice la seguridad, eficacia y calidad en la prestación del servicio.
Establecer un protocolo de limpieza y desinfección, un manual de toma de

muestras y unos instructivos, que faciliten la tarea de la bacterióloga para
aclarar y unificar conceptos en el momento de llevar a cabo su trabajo.
Contar con un protocolo de control de calidad tanto interno como externo en

el laboratorio clínico con el fin de garantizar la veracidad de los resultados
del laboratorio.
CARACTERÍSTICAS DEL SERVICIO.

El laboratorio clínico del hospital san Vicente, garantiza la oportunidad en la
realización de estudios complementarios de diagnostico, las 24 horas del día, en
jornada de ocho horas diarias y las restantes horas de acuerdo a la solicitud medica
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
de emergencias, los instructivos que se realizan son los correspondientes al nivel de

complejidad y capacidad resolutiva del hospital San Vicente de Rovira E.S.E.
Cada examen de laboratorio clínico debe ser realizado a los pacientes de forma
individual y existe una gran cantidad de factores que pueden afectar un resultado de
laboratorio. Factores propios del laboratorio clínico, factores endógenos de paciente,
factores genéticos, factores exógenos, entre otros.
El trabajo en el laboratorio clínico se clasifica en tres grandes grupos temáticos.
Toma de muestras.
Análisis de muestras.
Entrega de resultados.
En cada uno de estos temas, se requiere de numerosas medidas de atención y

cuidado con el fin de minimizar al máximo los errores factibles de ser cometidos en
la práctica diaria.
Debemos enfatizar que el trabajo en el laboratorio clínico, como cualquier tipo de

trabajo, es realizado por seres humanos y no estamos extensos de cometer
equivocaciones, pero estos errores pueden ser erradicados de nuestro laboratorio
clínico, si se mantienen eficientes actitudes éticas, profesionales y de
procedimientos.
PRINCIPALES RAZONES PARA UTILIZAR SERVICIOS DEL

LABORATORIO CLINICO.
Descubrir en etapas subclínicas.
Ratificar un diagnostico sospechado clínicamente.
Obtener información sobre el pronóstico de una enfermedad.
Establecer un dialogo basado en una sospecha bien definida.
Vigilar un tratamiento o conocer una determinada respuesta terapéutica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
El trabajador de la salud está permanentemente expuesto al riesgo de infectarse con los

microorganismos presentes en los pacientes, en las muestras o en los objetos con los cuales
se instrumentan los pacientes, pero este riesgo puede reducirse si se conocen y respetan las
normas de bioseguridad existentes.
El principal riesgo es la contaminación de las manos y de las mucosas ocular, nasal y bucal
por sangre y otros humores orgánicos infectados. Esa contaminación se produce como
consecuencia de cortes y pinchazos, provocados por objetos afilados, así como por el
derrame y las salpicaduras de material de muestras.
Todas las muestras que se reciben en el laboratorio deben ser manejadas como
potencialmente infectantes, observando todas las normas de bioseguridad establecidas, para
así, garantizar la salud del trabajador.
Las siguientes normas deben observarse:
Use siempre la bata de laboratorio mientras trabaja y quítesela antes de salir, así no llevará
agentes infecciosos afuera del laboratorio.
La manipulación de sangre o líquidos contaminados con ella debe hacerse siempre con
guantes; así mismo la limpieza de mesas, materiales, instrumentos y objetos contaminados
con sangre o líquidos de precaución universal.
1. Deseche los guantes siempre que piense que se ha contaminado; lávese las manos y
póngase un par de guantes nuevos.
2. No se toque con las manos enguantadas los ojos, la nariz, otras mucosas expuestas ni la
piel descubierta.
3. No abandone el lugar de trabajo ni se pasee por el laboratorio con los guantes puestos.
- La materia fecal no se considera una sustancia de “Precaución Universal”, excepto
cuando esta contaminada con sangre, sinembargo es ideal manipular estas muestras
con guantes.
Desarrolle el hábito de mantener sus manos lejos de la cara; no lleve sus dedos a la boca,
a los ojos o la nariz.
- Prepare diariamente una solución desinfectante para la limpieza de áreas de trabajo y
para descartar muestras y objetos contaminados. Puede utilizar Hipoclorito de Sodio el
cual se consigue como límpido, Clorox, Decol, etc.; prepare una dilución al 0.5% en un
recipiente no metálico, de pared dura, de color oscuro para protegerlo de la luz.
Asegúrese de preparar una dilución correcta porque tanto el exceso como la falta de
cloro libre hacen que el hipoclorito pierda su poder microbicida. En general se utiliza
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
una dilución 1:10 dado que el producto que se consigue en el país viene al 5%.
Disponga varios recipientes con la solución cerca de las áreas de manejo de muestras, así
facilitará el adecuado descarte de material contaminado o sucio, como placas, tubos,
agujas, jeringas, etc.
- Nunca pipitee con la boca ningún tipo de material biológico o químico. Use siempre
pipeteadores.
- No coma ni fume dentro del laboratorio; evite conversar mientras trabaja, así estará mas
concentrado y tendrá menos riesgos de un accidente de trabajo
- Rotule adecuadamente todas las muestras y los reactivos, colóquelas en un lugar seguro,
evitando que se derramen o se rompa el envase.
- Designe y marque las áreas dedicadas al manejo de muestras.
- No coloque objetos personales (gafas, bolsos, libros) sobre la mesa de trabajo.
- Cuando tenga alguna herida o escoración la piel, no trabaje con ella descubierta; cúbrala
con gasa o micropore y emplee guantes para la manipulación de muestras.
- Lávese las manos con abundante agua y jabón inmediatamente después de ensuciarse o
manipular alguna muestra.
Nunca los guantes son un sustituto del lavado de manos.
- Cuando se derrame una muestra cubra la superficie sucia con Hipoclorito al 0.5%,
déjelo actuar entre 5-10 minutos y limpie el área, luego agregue mas Hipoclorito y
proceda normalmente a la limpieza. La persona que realiza esta actividad debe usar
guantes de caucho.
4. Al terminar la jornada de trabajo limpie el área con la solución de hipoclorito de sodio.
Descarte el material contaminado en bolsas plásticas, bien cerradas y marcadas
“material contaminado”; asegúrese que el personal de servicios generales no va a
correr riesgos de infección por manipular basura descartada en forma insegura. Todo el
material de desecho debe ser desinfectado antes de descartarlo en la basura. La
bioseguridad sobrepasa los límites del laboratorio.
5. Mantenga el laboratorio limpio y ordenado, evitando la presencia de equipo y material

que no tenga relación con el trabajo.
6. Siempre que sea posible, evite usar agujas y otros instrumentos afiliados. Coloque las
agujas, jeringas y otros instrumentos y objetos afilados usados en un recipiente
imperforable.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
7. Las agujas destruyalas en el equipo disponible (incinerador) en el laboratorio y

descartelas en los recipientes respectivos(guardianes).
No vuelva a tapar las agujas usadas ni las desacople de las jeringas.

8. Asegúrese de que exista un programa eficaz de lucha contra insectos y roedores.
- Lave muy bien sus manos con agua y jabón antes de salir del laboratorio.
- En caso de tener un accidente laboral por trauma percutáneo o de mucosas con un líquido
de precaución universal, lave inmediatamente el área expuesta e informe a su jefe
inmediato y acate las recomendaciones de manejo y seguimiento.
10. Manipulación y Evacuación de Material y Desechos Contaminados.
- El material reutilizable, como pipetas, cánulas y tubos para muestras, debe colocarse en
un recipiente metálico o de plástico imperforable en el puesto de trabajo. Después es
preciso desinfectarlo por métodos químicos antes de limpiarlo e introducirlo en el
autoclave. Durante las tareas de desinfección y limpieza deben llevarse guantes.
- Las batas y otras prendas protectoras contaminadas se depositarán en un recipiente

distinto dentro del laboratorio. Antes de volver a usarlas es preciso esterilizarlas y
lavarlas.
- El material contaminado desechable con sangre, materia fecal y otros instrumentos u

objetos y lo que el personal considere, se colocan en una bolsa roja, la cual debe ser
recogida una (1) vez al día por el personal de aseo, quien la lleva al área de
mantenimiento, donde existe un recipiente adecuado para su almacenamiento y posterior
entrega para su incineración.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
LAVADO DE MATERIAL
El material de vidrio es el de más uso en el laboratorio y por ello su inadecuado lavado y

limpieza incide directamente sobre los resultados, introduciendo errores significativos.
Tenga en cuenta las siguientes recomendaciones en la limpieza del material:
- Antes de empezar el proceso asegúrese de disponer de los siguientes elementos:
desinfectantes, detergentes corrientes y biodegradables, agua destilada, mezcla crómica,
soda caústica entre otros.
- Use equipo personal de protección: delantal, guantes.
- Seleccione el material para ser lavado.
- Derrame los residuos de las muestras y los reactivos antes de lavar.
- Deje el material en remojo.
- Vierta abundante agua.
- Lleve el material a un recipiente con agua jabonosa preparada previamente con jabón
líquido y una solución bactericida.
- Enjuague con abundante agua y proceda al lavado con jabón corriente diluido, jabón
líquido o detergente biodegradable.
- Elimine el exceso de grasa del material utilizando un solvente orgánico como la mezcla
crómica.
- Enjuague el material cuatro veces con agua corriente y dos veces con agua destilada, así
elimina los restos de cromatos que producen interferencia en la lectura de las
determinaciones, especialmente las enzimas.
- Lave el fregadero con cepillo y jabón, luego desinféctelo con una solución bactericida.
Lavado del Material en Hematología
La cristalería no debe estar contaminada con detergentes. Su presencia así sea en

pequeñas cantidades provoca hemólisis.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Tubo y Frascos
- Lave con agua corriente y con un cepillo suave.
- Colóquelos en mezcla crómica durante 24 horas.
- Enjuáguelos con agua corriente, luego con agua destilada.
- Colóquelos en una gradilla a escurrir.
Láminas Nuevas
- Colóquelas en mezcla cromática durante 12 horas.
- Lávelas cuidadosamente con agua corriente.
- Déjelas en alcohol etílico comercial.
- Séquelas con un paño limpio.
Láminas Usadas
- Lávelas con agua jabonosa caliente para remoción del colorante, por 30 minutos.
- Enjuáguelas con agua corriente.
- Sumérjelas en alcohol etílico comercial.
- Séquelas con un paño limpio y suave.
Lavado del Material en Química Clínica
La cristalería para bioquímica no solamente debe estar limpia, sino que debe estar libre de
sustancias contaminadas y constituyentes potenciales orgánicos que puedan alterar el
resultado de un análisis químico.
Tubos y Pipetas
- Coloque los tubos y las pipetas separadamente en un recipiente que contenga agua
corriente para que el suero, la sangre y las soluciones químicas no se sequen.
- Enjuague con agua del chorro.
- Páselo por hipoclorito de sodio al 5.25% para desinfectar.
- Lave con detergente biodegradable al 2% ( Extran.Tween ) o con un detergente nacional
líquido al 5%.
- Enjuague con agua corriente y por último con agua destilada.
- Coloque el material en una gradilla y seque los tubos en el horno a 180 grados
centígrados por 30 minutos, y las pipetas a una temperatura de 37 GC.
- El material que se usa en la determinación de sodio, potasio, calcio, hierro, colóquelo en
ácido nítrico al 20% durante 12 horas. Enjuague con agua desionizada.
- El material engrasado y manchado páselo por mezcla crómica media hora si se necesita
con urgencia o déjelo durante 12 horas.
- Enjuague con agua corriente y luego con agua destilada.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Las puntas plásticas de las pipetas automáticas para eliminarle los residuos adheridos,
enjuáguelas con ácido clorhídrico al 1% y luego con hidróxido de sodio al 1%.
- Para eliminar de las cubetas contaminantes persistentes lavarlas con la siguiente
solución: Ácido sulfúrico al 50%, agua oxigenada al 10%, mezclar en partes iguales y
llenar la cubeta después de dos horas, enjuagar con agua bidestilada.
Lavado del Material en Parasitología
Láminas
1. Descártelas en un frasco con solución desinfectante.
2. Déjelas en remojo en solución jabonosa con hipoclorito por 24 horas.
3. Lávelas al día siguiente con agua jabonosa y luego con agua corriente.
4. Colóquelas a secar al aire.
Laminillas
1. Colóquelas en un vaso grande de precipitado con una solución débil de detergente
y con un desinfectante preparado como se indica a continuación:
200 ml. de agua.

3 ml. de detergente
15 ml. de desinfectante
deje actuar durante 1 hora.
2. Enjuague cuatro veces con agua de grifo.
3. Lávelas con agua desmineralizada.
4. Escurra y colóquelas en una pieza de gasa doblada y llévelas al horno a 60 GC y
consérvelas en caja de petri.
Lavado del Material de Orinas
Frasco para la recolección de muestras:

1. Enjuague estos recipientes con abundante agua corriente y agrégueles solución
desinfectante hipoclorito de sodio al 5%.
2. Lávelos con agua jabonosa.
3. Enjuáguelos con agua corriente.
4. Póngalos a secar en el horno a 170 GC, durante 30 minutos o esterilice en autoclave si
son para cultivo.
Láminas y Láminillas
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Proceda como en el lavado de material para parasitología.
Tubos
- Enjuague con agua corriente.
- Lave con solución jabonosa con desinfectante.
- Enjuague con agua corriente varias veces.
- Seque en el horno.
Otro Material Contaminado
El material contaminado de líquidos y secreciones corporales que se utilicen en los análisis

de las muestras, deben colocarse en autoclave para prevenir enfermedades.
Lavado del Material en Bacteriología

- Coloque en el autoclave el material que se utilizó para el análisis de las muestras y
esterilice a 15 libras de presión durante 30 minutos.
- Descarte el contenido ya estéril (medios de cultivo, escobillones, bajalenguas, gasa o
algodones), en una bolsa plástica para su incineración.
- El material colóquelo en una solución jabonosa y utilice escobillones en el proceso de
lavado.
- Enjuague con agua corriente.
- Seque el material de vidrio en el horno a 80 GC y el material de plástico a 50 GC.
- Coloque al material de vidrio limpio y seco tapones de algodón, material plástico
adherente ( parafilm ) o pequeñas tapas hechas en papel y guárdelo en una vitrina para
protegerlo del polvo.
Control de la Limpieza del Material de Vidrio
Realice el siguiente procedimiento para comprobar si el detergente ha sido eliminado de la

vidriería.
1. Escoja al azar una pieza de la cristalería.
2. Agregue a la pieza a probar 20 ml. de agua desionizada y agite dentro del frasco.
3. Agregue dos gotas de bromosulfaleina (BSP) al agua, mezcle.
4. Haga un control positivo con otra pieza de vidrio a la cual se le ha adicionado 1 ml. de
detergente.
Interpretación
POSITIVO, color púrpura. Indica presencia de detergente.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Preparación de la Mezcla Sulfocrómica

- Agregar lentamente y con agitación constante a 500 ml. de agua destilada, 250 ml. de
ácido sulfúrico concentrado, efectuar este procedimiento en baño de hielo.
- Agregar 100 gr. de dicromato de potasio mezcle hasta disolver. Complete a 1000 ml.
con agua destilada.
Esterilización
Esterilizar es eliminar de un objeto o una sustancia todas las formas de vida.

El equipo de laboratorio que se esteriliza queda libre de microorganismos vivos.
Los propósitos de esterilización son:
a. Preparar el material para la recolección de muestras.
b. Desinfectar los materiales contaminados.
c. Preparar el material que se utiliza en los cultivos.
La esterilización se logra por medio de:

a. Calor húmedo, autoclave, ebullición.
b. Calor seco, horno de aire caliente, flameado.
c. Filtración.
d. Agentes químicos.
Propósito de la Esterilización
1. Recipientes de recolección de muestra.
2. Desinfección de materiales contaminados.
3. Desinfección de utensilios empleados en microbiología.
Tipo de Esterilización
a. Calor húmedo ( autoclave y ebullición ).
b. Color seco ( horno de aire caliente y flameado ).
Autoclave
El aumento de la presión y la temperatura producida por el calentamiento del agua en un
recipiente cerrado, elimina toda clase de gérmenes. La esterilización se logra a 121 GC y a
15 libras de presión durante 20 minutos. Esterilice el material contaminado durante 30
minutos.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Procedimiento
a. Llene con agua el fondo del autoclave ( hasta el soporte de la canasta ).
b. Introduzca en el autoclave la canasta con los materiales que se van a esterilizar.
c. Cierre la tapa del autoclave, atornillando a niveles iguales los sujetadores de la tapa con
firmeza pero sin apretar demasiado.
d. Abra la válvula de salida de aire.
e. Inicie el calentamiento del autoclave.
f. Vigile la válvula de salida del aire hasta que aparezca un chorro de vapor. Durante 3-4
minutos hasta que el chorro de vapor sea uniforme y continuo.
g. Cierre a continuación la válvula de salida de aire.
h. Cuando se observa la temperatura deseada: 120 grados centígrados ( 15 libras ) regular
el calor para esterilizar, con el botón Y.
i. Dejarlo durante 15 minutos.
j. Pasado este tiempo apagarlo.
k. Cuando halla salido todo el vapor, se puede abrir la olla y sacar el material esterilizado.
Preparación del Material

Envuelva todo el material a esterilizar en papel Kraft, amarre con una piola los tubos y
frascos para toma de muestras. Las pipetas Pasteur colóquelas en tubos grandes y amplios
y tapones con algodón.
Esterilización por Calor Seco
Horno
Esterilice en el horno el material de vidrio y de metal a una temperatura de 170 Grados

Centígrados durante una hora.
Esterilice el material voluminoso o pesado a 170 grados centígrados durante 2 horas.
Desinfectantes más Usados en Bacteriología
Microbicida:
Cualquier agente químico que destruye más de un tipo de microorganismos, por ejemplo
bacterias, virus, protozoos, algas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Agentes Reductores:
Solución de formaldehído al 5% ( formol ).
Agentes Oxidantes:
Ácido nítrico, agua oxigenada, hipoclorito, permanganato de potasio.
Agentes Halógenos:
Cloro, bromo, yodo. Los hipocloritos son muy usados, eficaces en superficies limpias y en
concentración adecuada. Los hipocloritos son provistos ya sea como líquidos o sólidos y
en general contienen del 2% al 10% de cloro disponible en líquido y hasta el 70%
disponible en polvo.
Los desinfectantes con yodo, tienen acción bactericida, fungicida, viricida y acción
detergente.
Fenoles y Cresoles:
Son germicidas y fungicidas muy eficaces.
Alcoholes y Éter:
Alcohol al 77%.
Detergente:
Jabones comerciales con sustancias germicidas.

El detergente es un producto destinado a combatir la suciedad visible, en presentaciones
líquidas y sólidas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE
El laboratorio tiene un compromiso de calidad en la recolección de las muestras de los

pacientes. La realización correcta de este proceso requiere de una formación adecuada del
personal en las técnicas, unos procedimientos estandarizados, y un interés y preocupación
por el bienestar del paciente.
Instrucciones al Usuario:
Explíquele en que condiciones debe presentarse para la toma de muestras de sangre.
EN AYUNO
Química Clínica:
Glicemia pre, glicemia pre y post, curva de tolerancia a la glucosa, creatinina, colesterol,
triglicéridos, ácido úrico, nitrógeno uréico, perfil lipídico.
Hematología:
Tiempo de protrombina (PT), PTT.
Serología:
VDRL. RPR, PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE SEROLOGIAS
Inmumologica:
Pruebas de embarazo, VIH PRUEBA RAPIDA.
NO AYUNO
Hematología:
Hb, Hto, sedimentación, leucograma, hemoparásitos, drepanocitos, fenómeno L.E.,
reticulocitos, recuento de plaquetas, tiempo de coagulación.
Inmunoserología:
Seroaglutinaciones, prueba de coombs directa e indirecta, hemoclasificación, variante Du,
toxoplasma .
Explíquele en que condiciones se recolecta, que cantidad y como se maneja la muestra.
RECEPCIÓN DE LAS MUESTRAS

- Sea cordial en la atención al usuario.
- Solicite la orden médica de los exámenes y el respectivo recibo de pago.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Revise que estén completos los datos: fecha, nombre, edad. Haga las correcciones en
caso necesario.
- Anote si el examen es de carácter urgente o regular, si es control, si es diagnóstico.
- Anote en el registro de laboratorio la muestra e identifíquela.
TOMA DE MUESTRAS EN HEMATOLOGÍA
Método de Extracción de Sangre Capilar
Materiales
- Torundas de algodón.
- Alcohol de 70 grados.
- Lancetas.
- Láminas limpias.
- Microhematocritos con anticoagulante.
Procedimiento
- Colóquese los guantes.
- Frote fuertemente el sitio a puncionar, el talón o la yema del dedo.
- La punción del talón se realiza en niños menores de un año en la parte más interna o
más externa de la superficie plantar, por dentro de la línea trazada desde la línea media
del dedo gordo hasta el talón; o por fuera de una línea desde el espacio del cuarto o
quinto dedo del pie hasta el talón .
- La punción en los dedos de la mano se realiza en el centro de la superficie palmar de la
falange distal.
- Limpie con la torunda de algodón humedecida en alcohol, deje secar.
- Pinche con la punta de la lanceta el talón a una profundidad no mayor de 2.4 mm.
- El dedo de la mano a una profundidad no mayor de 3.1 mm.
- Llene los microhematocritos e inviértalos varias veces para evitar la coagulación de la
muestra.
- Procese inmediatamente.
Recomendaciones
- No pinche en la curvatura posterior del talón.
- No pinche en los sitios donde se hayan hecho punciones anteriores que puedan estar
infectadas.
- No puncione en los lados o en la punta de los dedos.
- No puncione en el sitio seleccionado, si éste está hinchado; ahí se ha acumulado líquido
tisular o sangre en la piel y se pueden producir resultados erróneos.
Complicaciones de la Punción Cutánea

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Las complicaciones de la extracción de sangre por punción cutánea en el talón de los niños
pequeños son la osteocondritis del hueso del talón (calcaneo) y los microabcesos de la piel.
Otra complicación son los focos de calcificación de la piel del talón, en recién nacidos que
han recibido numerosas punciones en esta zona.
Las complicaciones que se han descrito en las punciones cutáneas de la falange de los
dedos de los recién nacidos son la infección en el lugar de la punción y la gangrena.
Método de Extracción de Sangre Venosa
Materiales
- Torunda de algodón.
- Alcohol de 70 grados.
- Jeringa desechable o tubo al vacío con EDTA
- Torniquete elástico de cinta.
- Láminas limpias.
- Frascos y tubos con anticoagulante.
Procedimiento
- Lea atentamente la solicitud del examen.
- Marque el tubo con el número consecutivo del día que le corresponde al paciente.
- Colóquese los guantes.
- Indique al paciente que se siente en posición cómoda con el antebrazo extendido,
colocado en el apoyabrazos inclinado de manera que forme una línea recta desde el
hombro a la muñeca.
- Palpe y elija la vena apropiada. La mayoría de los procedimientos de punción venosa
en los adultos, se utiliza las venas situadas en el brazo, la vena cubital media o mediana
del codo es la más utilizada, porque es grande, esta cercana a la piel y es menos
doloroso para el paciente.
- Si no puede extraerle de esta vena, puede hacerlo de la vena cefálica o la basílica.
- Limpie el área con el algodón empapado de solución de alcohol al 70% con movimiento
circular desde el centro de la zona hacia afuera. Deje secar la piel para evitar la
hemólisis.
- Coloque el torniquete y puncione inmediatamente. Si las circunstancias no lo exigen lo
ideal es omitir su uso.
- Coja la jeringa con la mano derecha y hale el émbolo con la izquierda colocando el
bisel hacia arriba.
- O coloque la aguja en el soporte del tubo de vacío y enrósquelo hasta que este apretado
con ayuda de su funda, no lo quite hasta que no este listo para realizar el proceso de
extracción.
- Extraiga la aguja de su funda y examine la punta.
- Introduzca el tubo para recoger la muestra en el soporte, no lo empuje contra la aguja.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Mantenga el tubo de vacío con una mano y con la otra empújelo hacia el interior del
soporte el extremo posterior de la aguja pincha entonces el tapón y activa el vacío para
extraer la sangre.
- Afloje el torniquete.
- Llene el tubo hasta que agote el vacío y cese el flujo de sangre, asegurando de esta
manera una relación correcta entre anticoagulante y sangre.
- Saque el tubo del soporte.
- Si al paciente se le toma la muestra acostado, indíquele que descanse confortablemente
su espalda en la camilla, puede colocarse una almohada bajo el brazo, y lo extienda en
la misma forma que para la posición anterior.
- Retire la aguja de la jeringa o del tubo de vacío, coloque una torunda de algodón en el
lugar de la punción, durante tres minutos con el brazo extendido.
- Destruya la aguja incinerandola o utilizando un guardian para eliminarla.
Recomendaciones
El alcohol es la solución antiséptica que se utiliza con más frecuencia, pero pueden
utilizarse antisépticos del tipo del yodoformo, evite utilizar esta solución para realizar
determinación de electrolitos y en personas alérgicas a los compuestos de yodo.
Complicaciones de la Venipuntura
1. Local Inmediata
• No deje el torniquete por largo tiempo, esto produce hemoconcentración, hemólisis y
hematoma.
• Si al succionar no entra sangre en la jeringa puede haberse contraído la vena,
entonces hay que mover la aguja adelante y atrás.
• Si al puncionar llega hasta la pared de la vena o la atraviesa y no llega sangre a la
jeringa, hay que sacar un poco la aguja y succionar de nuevo.
• Cuando se produce hematoma en el momento de puncionar, se extrae la aguja y se
punciona en otro sitio.
• Cuando se punciona dos o tres veces sin éxito, es mejor esperar un poco y pedir a otra
persona que lo haga.
2. Local Diferida
Puede producirse trombosis de una vena por punciones repetidas en el mismo sitio. Siga
los pasos de las recomendaciones ya anotadas.
3. General Tardía
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
La hepatitis y el SIDA pueden ser causadas por transmisión del virus con la jeringa o con
la aguja contaminada. EVÍTELO USANDO MATERIAL DESECHABLE.
Toma de Muestras para Pruebas Bioquímicas
1. Se necesita ayuno de por lo menos 8 a 12 horas para colesterol, ácido úrico, triglicéridos,
glicemia, creatinina, nitrógeno uréico, fósforo, calcio.
2. Utilice jeringas desechables con agujas de buen calibre, o sistema al vacío. La aguja
más utilizada es la de calibre 22 y 1.5 pulgadas, en los niños utilice agujas más
pequeñas.
3. Para pruebas de calcio no use torniquete.
4. Quite la aguja del tubo de vacío o de la jeringa y vierta en esta última por las paredes del
tubo la sangre, muy lentamente para evitar la hemólisis.
Pasos a Seguir para la Separación de la Sangre en Fracciones.
Sangre Completa
- Guarde la sangre tapada hasta su proceso por un tiempo no superior de una hora.
- Si no es procesada inmediatamente guárdela en la nevera de 4 GC a 8 GC.
- Mezcle suavemente por inversión varias veces antes de procesarlas.
Plasma
- Centrifugue la muestra inmediatamente después de tomarla.
- Si no es procesada guárdela en la nevera de 4 GC a 8 GC.
Suero
- Deje coagular la sangre como mínimo 20 minutos a temperatura ambiente o de 5 a 10

minutos a 37 GC.
- Remueva el coagulo en los bordes del tubo, y centrifugue por 10 minutos a 1500 r.p.m.
Informe, Entrega de Resultados
- Entregue a la persona interesada para que lleve al médico el informe del resultado.
- Revise que estén completos los resultados y los exámenes solicitados.
Recomendaciones
Evite solicitar nueva muestra por:
- Omitir datos en la identificación de la muestra.

- Por ruptura del tubo en la centrífuga.
- Por muestra coagulada.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Por muestra mal tomada.
“ABSTÉNGASE DE INFORMAR AL PACIENTE ACERCA DE SU ESTADO DE

SALUD, ESTO ES COMPETENCIA DEL MEDICO”.
Archivo de Resultados
- Archive los exámenes por orden alfabético de acuerdo al apellido.

- Los resultados de los exámenes deben guardarse un año como archivo vivo y dos años
como archivo muerto.
- Los formularios de registro diario y mensual guárdelos por un año.
- Guarde igualmente las hojas de trabajo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
HEMATOLOGÍA
Hematología es el estudio de la sangre.

La sangre está formada por las células sanguíneas suspendidas en un líquido llamado
plasma.
Las técnicas hematológicas permiten evaluar algunos trastornos funcionales, y determinan
la concentración y distribución relativa de los componentes celulares.
Conservación de la Muestra:
Recuerde que las muestras deben conservarse adecuadamente hasta el momento en que se
procesen.
CUADRO HEMÁTICO
Es el examen de laboratorio que aporta más datos generales del estado de salud de un
paciente, orientando al médico en el diagnóstico y evolución de algunas enfermedades.
- Infórmele que no es necesario presentarse en ayunas.
Procedimiento de Toma de Muestras

- Lea la solicitud del examen.
- Inscriba el examen en el libro de registro diario del laboratorio.
- Rotule el tubo con anticoagulante EDTA, con el número correspondiente del día del
usuario y marque la lámina para el extendido.
- Extraiga 3.0 ml. de sangre venosa en el tubo al vacío. Dispense con la punta de la
aguja una gota de sangre en la lámina marcada y proceda a realizar el extendido para el
recuento diferencial..
- Retire con cuidado la aguja.
- Mezcle suavemente, la sangre con el coagulante varias veces, por inversión para
garantizar la homogenización de la sangre con el anticuagualante y evitar la formación
de coagulos.
RECUERDE!
- La muestra puede permanecer a temperatura ambiente ( 20 a 25 grados centígrados )

hasta por seis horas después de su obtención, a excepción de la velocidad de
sedimentación que es solo dos horas.
- Si no se procesa en este tiempo, consérvela en refrigeración de ( 4 a 8 grados
centígrados) por un período máximo de 24 horas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
HEMATOCRITO
FUNDAMENTO
El hematocrito es el examen que mide el volumen de eritrocitos, se expresa como un
porcentaje del volumen de sangre total existente en una muestra y depende de la
concentración de la hemoglobina.
La relación del hematocrito y la concentración de la hemoglobina lo hacen un método
practico para el diagnóstico de anemia. Así el hematocrito disminuye siempre que lo hace la
concentración de la hemoglobina, aumenta cuando la concentración de la masa eritrocitaria
es superior al valor norma; también depende del tamaño globular.
El hematocrito en ciertas condiciones patológicas debe tenerse siempre en cuenta, no
obstante que independiente de la concentración de la hemoglobina, su valor puede variar
también y a veces de manera importante con el valor del volumen plasmático. Un descenso
del volumen plasmático dará lugar a un falso aumento del hematocrito debido a la
hemoconcentración y un aumento del volumen plasmático dará lugar a una falsa anemia
por hemodilución.
El hematocrito de sangre venosa es menor que el de sangre capilar debido a la
concentración plasmática.
Existen dos métodos para su determinación: El micrométodo y el macrométodo, siendo el
más utilizado el micrométodo.
MICROMETODO
Equipo
Microcentrífuga
Materiales
- Tubos capilares “circulo azul “ sin heparina: se utilizan para sangre con
anticoagulantes.
- Tubos capilares “circulo rojo “ con heparina: se utilizan para tomar las muestras de
sangre capilar.
- Plastilina.
- Escala de medición.

- Coloque su extremo más delgado marcado con el círculo directamente en el punto de
punción o tome la muestra directamente del frasco mezclándola suavemente por
inversión.
- Llene con sangre las ¾ partes del capilar sosteniéndolo en posición horizontal.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Limpie la sangre que haya quedando en el extremo del capilar.

- Tapone el capilar por el extremo que no ha estado en contacto con la sangre, con la
plastilina, asegurándose que halla quedado bien sellado
- Coloque el capilar con el extremo taponado hacia afuera, en la ranura de la
microcentrífuga de acuerdo al número de la muestra que le corresponda.
- Centrifugue la sangre por el tiempo necesario(aproximadamente 4 minutos), hasta que
el volumen de los eritrocitos permanezca invariable.
- El Bacteriólogo determina previamente en cada microcentrífuga el tiempo, de acuerdo a
las revoluciones que alcance entre 12.000 y 15.000 r.p.m., puede oscilar entre tres y
diez minutos.
- Coloque los capilares verticalmente en la plastilina conservando la numeración y realice
la lectura y anote los resultados.
La calibración del tiempo de centrifugado se hace de la siguiente manera:

Se utilizan 8 capilares llenos de sangre de una misma muestra, se centrifugan dos capilares
por 2 munutos y se anota el resultado; luego otros 2 por tres minutos y se anota el resultado;
otros 2 por 4 minutos y se anota el resultado y por último los otros 2 capilares por 5
minutos y se anota el resultado. Se escoge el tiempo donde halla la máxima aglutinación de
eritrocitos, es decir, el resultado del hematocrito más bajo que se halla obtenido.
VALORES NORMALES:
HOMBRES: 39-51%
MUJERES: 35-45%
HEMOGLOBINA
FUNDAMENTO
La determinación de la concentración de la hemoglobina es el criterio fundamental para el
diagnóstico de una anemia.
PRINCIPIO
La hemoglobina es oxidada en metahemoglobina por el ferricianuro potásico, el cual es
convertido en cianmetahemoglobina por el cianuro potásico.
MUESTRA
Sangre anticuagulada con EDTA.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
REACTIVO
- Cianmetahemoglobina
PREPARACION DE LA SOLUCION DE TRABAJO
Se disuelve 90ml de agua destilada con 10ml del reactivo cianmetahemoglobina, se coloca
en un recipiente que quede bien cerrado y rotulado como “ALTAMENTE TOXICO”.
MATERIALES Y EQUIPOS
- Pipeta automatica de 5 a 50 lambdas.

- Tubos de vidrio.
- Gradillas.
- Puntas amarillas para la pipeta.
- Equipo de quimica RA50.
- Cronometro.
- Agua destilada.
PROCEDIMIENTO
- Tomamos un tubo de vidrio y le adicionamos 2.5ml de la solución de trabajo.

Homogenizamos bien la muestra de sangre total.
- Calibramos la pipeta en 10 lambdas y tomamos esa cantidad de sangre.
- Dispensamos la sangre en el tubo con el reactivo y enjuagamos varias veces la punta
amarilla dentro de la solución de trabajo.
- Mezclamos invirtiendo el tubo varias veces y lo dejamos por lo menos tres minutos.
- Prendemos el equipo RA50 y esperamos que haga su rutina de chequeo de memoria,
filtros y luz.
- En el menú de botones azules del lado izquierdo encontramos la tecla Hb la cual
hundimos y seguimos las instrucciones que da el equipo.
- Utilizamos el sistema de flujo para leer la reacción
- Tomamos agua destilada y la pasamos como blanco de reacción.
- Luego pasamos la muestra hundiendo el botón amarillo que queda por debajo del tubo
plástico del sistema de flujo. (ver manual de uso del equipo RA50).
- Hacemos lo mismo con las otras muestras y anotamos los resultados que arroje el
equipo.
- Limpiamos el sistema de flujo con agua destilada hundiendo la tecla rinse y colocando
un tubo con agua destilada en el tubo plástico del sistema de flujo.
- Luego hundimos la tecla abort para salirnos de la técnica de hemoglobina.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
VALORES NORMALES
- Recien nacidos: 19±4 (g/dl).

- Niños de 1 a 5 años: 12±2 (g/dl)
- Mujeres en edad fertil: 13±2 (g/dl)
- Mujeres embarazadas: 11±2 (g/dl)
- Hombres adultos: 14±2 (g/dl).
ERITROSEDIMENTACION
FUNDAMENTO
La eritrosedimentación o VSG constituye una medida de agregabilidad de los hematies y
depende fundamentalmente de los siguientes factores:
1. Tamaño de los hematies
2. Diferencia de los hematies y el plasma.
3. Viscosidad plasmática (concentración de fibrinogeno y/o globulinas).
4. Temperatura ambiental.
La sediemtación se realiza en tres etapas:

1. Hemglutinación o tendencia de los hematies a formar agregados en pilas de monedas.
2. Sediementación o desplazamiento de los hematies hacia el fondo del recipiente a
velocidad constante.
3. Acumulo de hematies en el fondo del recipiente.
De estas etapas la más importante es la primera, ya que de ella depende la velocidad de
todo el proceso. Así cuando más pequeños sean los agregados, más lentamente se
producirá la sedimentación y viceversa.
Aunque se trate de una prueba inespecífica, la determinación de la VSG es de gran utilidad
en clínica ya que fuera de las posibles variaciones fisiológicas (embarazo, deshidratación,
ejercicio, sobrehidratación, fiebre, etc.), constituye un signo de enfermedad.
Asimismo y debido a la frecuente correlación que suele observarse entre el valor de la VSG
y el grado de actividad de la enfermedad, su determinación resulta útil para seguir el curso
evolutivo de ciertas afecciones, entre las que se destacan los procesos inflamatorios
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
crónicos (artritis, pilimialgias y tuberculosis), o para evaluar la respuesta a determinados

tratamientos cititostáticos (enfermedad de Hodkin, linfomas, mielomas multiples).
RECUERDE !
Realice el procedimiento de eritrosedimentación en las dos primeras horas de recolectada la
muestra.
1. MÉTODO DE WINTROBE
EQUIPO
- Reloj.
MATERIALES
- Tubos de wintrobe.
- Soporte para tubos de wintrobe.
- Jeringa con cánula.
REACTIVO
- Solución Salina al 0.9 %.
PROCEDIMIENTO
- Marque los tubos de wintrobe con el número de la muestra correspondiente.
- Mezcle la sangre suavemente por inversión.
- Proceda a llenar el tubo de wintrobe de la siguiente manera:
1. Aspire con la jeringa aproximadamente 2 cc. de sangre.
2. Tome el tubo de wintrobe, inclínelo un poco e introduzca la cánula hasta el fondo
del tubo; vierta lentamente la sangre, conservándolo siempre inclinado.
3. Retire lentamente la cánula a medida que va llenando el tubo, conserve la punta
sumergida en la sangre, así evita la formación de espuma y burbujas de aire.
4. Llene hasta la marca 100 sin dejar burbujas.
5. Coloque el tubo en el soporte y asegúrese que se encuentre en posición
completamente vertical y cronometre una hora.
6. Enjuague varias veces la jeringa con solución salina al 0.9 %.
7. Prosiga con las demás muestras en la misma forma.
Al cabo de una hora lea desde el punto 100 hacia el punto cero y anote la cantidad de
milimetros que recorrrio la sangre en este tiempo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
2. METODO CON HEMATOCRITOS
MATERIALES Y EQUIPOS
- Tubos capilares de vidrio sin heparinizar.
- Sangre total, anticuagulada con EDTA o citrato de sodio al 3.8%
- Plastilina.
- Lector de hematocritos
- Cronometro.
PROCEDIMIENTO
- Homogenizar bien la sangre anticuagulada.
- Llenar el hematocrito las tres treceras partes con la sangre.
- Sellar una de sus puntas con la plastilina.
- Colocar en forma vertical en la plastilina por una hora.
- Al cabo de la hora leerlo en sentido contrario a la lectura del hematocrito.
VALORES NORMALES
- Niños: 0 a 13 mm/hora.
- Mujeres: 0 a 20 mm/hora.
- Hombres: 0 a 9 mm/hora.
RECUENTO DE LEUCOCITOS
Se determina el número de globulos blancos que se encuentran en un litro de sangre.

La sangre se diluye con un liquido que realiza la lisis de todas las celulas anucleadas.
REACTIVOS Y MATERIALES
- Pipeta autoamtica de 100 a 1000 y de 5 a 50 lambdas.
- Tubos de ensayo de vidrio.
- Reactivo de Turk.
- Puntas amarillas y azules.
- Microscopio
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Camara cuentaglobulos (camara de neubauer).

- Sangre anticuagulada o sangre capilar.
PROCEDIMIENTO
- Mezclar la sangre anticuagulada por un minuto aproximadamente.
- Medir 380 lambdas de reactivo de turk y pasarlos al tubo de vidrio.
- Medir 20 lambdas de sangre homogenizadas y agregarlas al tubo donde esta el reactivo
de turk enjuagando varias veces hasta que la punta quede limpia.
- Limpiar bien la cámara cuentaglobulos verificando que no queden pelusas.
- Colocar la lamina de cuarzo o laminilla en el rayado de la camara.
- Con la pipeta de 5 a 50 lambdas tomamos la muestra y llenamos la camara, teniendo la
precaución de que no queden burbujas ni muy llenas.
- Dejamos en reposo por un minuto y leemos en el microscopio con el objetivo de 10x y
el diafragma medio cerrado.
- Se cuentan los puntos oscuros dentro de las cuadriculas laterales grandes de la cámara.
Es necesario que los leucocitos se hallen repartidos en forma uniforme con una
diferencia no mayor de 10 células entre cada cuadrante.
CALCULO
Leucocitos/mm = No. De células contadas en los 4 cuadrantes x 50.
VALORES NORMALES
De 4.500 a 11.000 celulas/mm.
EXTENDIDO PERIFÉRICO Y DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
El extendido periférico estudia la morfología de las células sanguíneas y el porcentaje de

distribución de los distintos tipos de leucocitos, morfología y cantidad de plaquetas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Preparación del Extendido
MATERIALES
• Láminas limpias y desengrasadas.

• Lápiz marcador.
PROCEDIMIENTO
• Realice los extendidos con sangre sin anticoagulante.
• Seleccione una lámina nueva que tenga los bordes completamente lisos para hacer los
extendidos, marcada especialmente para realizar este proceso.
• Tome la lámina que marcó en el momento de la toma de muestras y colóquela sobre la
superficie lisa y firme.
• Dispense con la punta de la aguja una gota de sangre aproximadamente a 2 cc. del
extremo marcado.
• Sostenga la lámina entre el índice y el pulgar de la mano izquierda, y con la mano tome
la lámina escogida para hacer el extendido y colóquela sobre la superficie de la lámina
que contiene la gota de sangre, formando un ángulo de 30 grados a 40 grados.
• Llévela hacia atrás hasta que toque la gota y deje que la sangre se extienda por su borde.
• Desplace la lámina hacia adelante en forma rápida y suave.
• Revise que la extensión haya quedado bien hecha, en caso contrario vuélvala a hacer.
• Déjela secar a temperatura ambiente.
Un Extendido esta bien hecho cuando:
- La parte inicial es gruesa y disminuye gradualmente su grosor, hasta terminar en una

parte muy delgada.
- Su aspecto es liso y sin ondulaciones ni poros, el extremo termina suave y gradualmente
sin desgarros ni vetas
- No es ni demasiado largo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Ni demasiado corto.
- Ni demasiado grueso.
COLORACIÓN DE WRIGHT
MATERIALES
• Bandeja de coloración.
• Reloj.
• Gradilla.
• Algodón.
REACTIVOS
• Colorante de wright.
• Solución buffer con ph 6.7 + 2 ó H2O destilada igual ph.
• Alcohol.
PROCEDIMIENTO
• Coloque las placas con el extendido arriba sobre las varillas de la bandeja de coloración.
• Cubra el extendido con el colorante de wright durante tres minutos.
• Agregue el extendido agua destilada o solución Buffer.
• Sople suavemente para que haya una distribución uniforme de la mezcla: colorante y
agua destilada, sin que se derrame. Deje reposar la mezcla durante tres minutos.
• Lave la placa manteniéndola en posición horizontal, agregándole agua destilada hasta
que no quede colorante.
• Escurra la placa colocándola verticalmente sobre un papel secante.
• Limpie el colorante que haya quedado en el dorso de la placa con un algodón
humedecido en alcohol.
• Coloque las placas en una gradilla, déjelas secar a temperatura ambiente.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
• Llévelas luego al sitio indicado para su observación microscópica.
“Un extendido bien coloreado es de color rosado “.
CAUSAS DE UNA MALA COLORACIÓN
A. EXTENDIDO AZUL
Puede tener como causas las siguientes:

1. Extendido muy grueso.
2. Lavado insuficiente.
3. Tiempo prolongado de la coloración.
4. Alcalinidad del agua.
5. Alcalinidad del colorante.
B. EXTENDIDO ROJO
Puede deberse a:
1. Exceso de acidez del agua.
2. Exceso de acidez del colorante.
3. Exposición del colorante a vapores ácidos.
C. EXTENDIDO CON PRECIPITADO
Puede deberse :
1. Placa mal lavada.
2. Colorante que se ha secado.
3. Colorear las placas en posición oblicua.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
4. Partículas de polvo sobre el extendido.
Para realizar un buen proceso de coloración tenga en cuenta:

• Que las áreas destinadas a la preparación y coloración de los extendidos permanezcan
libres del polvo Que el material utilizado este limpio, desengrasado y en buenas
condiciones.
• Que el extendido esté bien hecho.
• Que el colorante esté filtrado.
• Que la coloración de las láminas, los tiempos de coloración y el lavado sean correctos.
LECTURA
- Colocar la lamina en el microscopio y leer con el objetivo de inmersión (110x).
- Contar 100 celulas leucocotarias que se observen como neutrofilos, eosinofilos,
linfocitos, basofilos, cayados, etc.
VALORES NORMALES DIFERENCIAL LEUCOCITARIO.

- Neutrofilos: 65 a 70%
- Linfocitos: 30 a 40%
- Eosinofilos: 0 a 5%
- Basofilos: 0 a 2%
- Monocitos: 0 a 4%
En el extendido de sangre periferico se determina:
1. Hipocromia: Es la palidez central del eritrocito.
2. Anisocitosis: Alteración en el tamaño. Normocitos (normal), macrocitos (grandes),
microcitos (pequeños).
3. Policromacia: Inmadurez de los globulos rojos.
4. Poiquilocitosis: Alteraciòn en la forma del globulo rojo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
RECUENTO DE RETICULOCITOS
Los eritrocitos atraviesan 6 etapas hasta completar su total desarrollo y maduración:

pronormoblasto, normoblasto basofilo, normoblasto policromatico, normoblasto
ortocromatico, reticulocito y eritrocito maduro.
Los elementos de las cuatro primeras etapas se encuentran normalmente en medula osea,
sin embargo el reticulocito se puede hallar en medula ósea o en sangre periférica.
El recuento de reticulocitos es un instrumento diagnóstico muy importante, ya que su
número refleja la cantidad de eritrocitos producidos por la medula ósea.
Los reticulocitos son hematies que contienen restos de ARN (ribosomas), que es un
compuesto que se precipita en presencia de ciertos colorantes llamados vitales como el azul
de cresil brillante y da imágenes a formas filamentosas visibles mediante el microscopio
óptico.
EQUIPOS Y MATERIALES
- Sangre anticuagulada con EDTA.
- Colorante azul de cresil brillante.
- Pipeta pasteur o goteros.
- Laminas porta objetos
- Tubos de ensayo.
- Microscopio
- Baño de maria
- Cronometro
- Aceite de inmersión.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PROCEDIMIENTO
- Con una pipeta de pasteur o gotero añadir 3 gotas del colorante azul de cresil brillante a
un tubo de ensayo.
- Agregar 3 gotas de sangre bien homogenizadas al mismo tubo con el colorante.
- Agitar suavemente y colocarlo en el baño de maria por 15 minutos a 37 GC para que los
reticulocitos absorban el colorante.
- Centrifugar por 5 minutos, desechar el sobrenadante y mezclar.
- Depositar con un gotero limpio una gota del sobrenadante en un lamina porta objetos y
hacer un extendido.
- Dejar secar y leer en el microscopio con objetivo de inmersión (100x).
- Se ceuntan 500 eritrocitos y los reticulocitos que se encuentren en medio de los 500
eritrocitos.
CALCULO
Reticulocitos (%)= No. Reticulocitos contados x 100
No. Eritrocitos contados
VALORES NORMALES
Recién nacidos 2 - 6 %
Niños adultos 0.2 - 2 %
PRUEBAS DEL SISTEMA DE COAGULACIÓN.
TIEMPO DE PROTROMBINA ( PT ) Y TIEMPO PARCIAL DE

TROMBOPLASTINA ( PTT ).
Son de gran ayuda para el diagnóstico de los trastornos hemostáticos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Algunas de las pruebas de coagulación más utilizadas son el tiempo de protrombina, con al
cual medimos la concentración de la protrombina y los factores del sistema extrinseco de la
coagulación como los factores II, V,VII y X.
El tiempo parcial de tromboplastina, valora los factores del proceso intrinseco de la
coagulación como el PK, KAPM, XII, XI, IX, VIII, V, II y I. Sirve para el control de
pacientes con tratamiento de Heparina y para detectar la presencia de inhibidores
adquiridos.
- Informe al usuario que debe presentarse en ayunas.
Equipo Material Reactivos

Centrífuga Tubos de ensayo Anticoagulante: citrato
12 x 75 mm. de sodio al 3.8%
Gradilla
Pipeta 1 ml y de 5ml o
Tubos tapa azul al vacio.
- Preparar con anticipación los tubos de ensayo con 0.5 ml. de anticoagulante (citrato de
sodio al 3.8%) o tubo al vacío Vacutainer con citrato de sodio al 3.8% (tapa azul).
- Lea la solicitud del examen.
- Inscriba el examen en el libro de registro diario del laboratorio.
- Interrogue al usuario si está tomando alguna droga, en caso afirmativo anótela en la
solicitud del examen.
- Rotule el tubo con el número que le corresponde al paciente.
- Seleccione una buena vena.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Realice una punción limpia sin utilizar torniquete, o utilice un torniquete plano, por un
tiempo no mayor a 30 segundos.
- Utilice el tubo vacutainer.
- Extraiga 4.5 ml. de sangre venosa o llene totalmente el tubo al vacio.
- Retire con cuidado la aguja de la jeringa o tubo al vacío.
- Mezcle suavemente varias veces por inversión para garantizar la homogenización de la
sangre con el anticuagulante y así evitar la formación de coagulos.
Procesamiento de la Muestra
- Centrifugue la muestra inmediatamente a 3.500 r.p.m. durante 15 minutos.
- Separe el plasma con una pipeta sin mezclarlo.
- Realice las pruebas inmediatamente.
- Si no es posible, refrigérela a una temperatura de 4 grados centígrados a 8 grados
centígrados durante un período máximo de dos horas.
- Si el tiempo de conservación es de más de dos horas, llévelo a congelación.
RECUERDE !
- Las cantidades de anticoagulante 0.5 ml. y de sangre 4.5 ml. deben ser exactas.
- El anticoagulante debe conservarse en refrigeración de cuatro grados centígrados a 8
grados centígrados.
- Una técnica deficiente de punción venosa contribuye a que se obtengan resultados
erróneos en estudios de coagulación.
- Si tiene dificultad para extraer la sangre seleccione otra vena y repita la punción
utilizando un nuevo equipo.
EVITE:
- Escarbar con la aguja.
- Aspirar burbujas de aire.
- Formar hematomas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Contaminar la muestra con líquidos tisulares.

- El éxtasis venoso prolongado (torniquete).
- El material de vidrio debe ser exclusivo para las pruebas de coagulación, muy limpio,
sin rayones ni opacidades y sometido a un lavado especial.
- Tiempo de sangría
- Retracción del coagulo.
- Tiempo coagulación
- Fibrinogeno
MATERIALES Y EQUIPOS:
- Cubeta desechable para coagulación.
- Pipeta automatica de 100 a 1000 lambdas.
- Baño de maria a 37 GC
- Equipo RA50
- Vial de simplastin y PTT atemperados a 37 GC.
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TP

- Prender el equipo RA50 y colocarlo en modo de cubetas desechables (ver manejo
RA50).
- Hundir la tecla TP y seguir las instrucciones del equipo.
- Pipetear 200 lambdas de simplastin en una cubeta desechable para coagulación,
colocarla en el equipo y hundir la tecla analyze.
- Cuando el tiempo de incubación del equipo llegue a cero y empiece a pitar pipetear 100
lambdas de plasma del paciente.
- El tiempo que indique el equipo es el tiempo real de la prueba.
VALORES NORMALES:
De 10 a 14 segundos.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR PTT

- Prender el equipo RA50 y colocarlo en modo de cubetas desechables (ver manejo
RA50).
- Hundir la tecla PTT y seguir las instrucciones del equipo.
- Pipetear 100 lambdas del reactivo PTT en una cubeta desechable para coagulación y
100 lambdas de plasma del paciente, colocarla en el equipo y hundir la tecla analyze.
- Cuando el tiempo de incubación del equipo llegue a cero y empiece a pitar pipetear 100
lambdas de calcio preincubado a 37 GC.
- El tiempo que indique el equipo es el tiempo real de la prueba.
VALORES NORMALES:
De 25 a 38 segundos.
Existen sustancias que pueden prolongar el tiempo de reacción del PT como los corticoides,
anticonceptivos orales, eritromicina, tetraciclina, heparina, Wuarfarina y tambien
encontramos sustancias que nos acortan los resultados como antihistaminicos, la cafeina y
la vitamina K; en las pruebas de PTT las sustancias que pueden prolongarlo son los
anticuagulantes orales, estrogenos, cumarin.
OTROS EXÁMENES HEMATOLOGICOS
Además del hemograma existen otros exámenes hematológicos que ayudan al diagnóstico y
controlan la evolución de algunas enfermedades. Entre ellos están:
- Recuento de plaquetas.
- Recuento de eosinófilos.
- Drepanocitos.
- Fenómeno L.E.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA
Puede utilizarse sangre capilar o venosa.

La obtención de sangre venosa se hace en igual forma que para un hemograma.
RECUENTO DE PLAQUETAS
Las plaquetas o trombocitos son células de tamaño pequeño que cumplen un papel
primordial en los procesos de coagulación.
Es de vital importancia para el diagnóstico de trastornos hemorrágicos. El aumento de las
cifras de de plaquetas se denomina trombocitosis y puede hallarse en la trombocitemia
idiopatica, leucemia granulocitica crónica y después de esplenectomias.
La disminución de las plaquetas se llama trombocitopenia y se da en la purpura
trombocitopenica, anemias aplasticas, leucemia aguda, anemia perniciosa, virosis (dengue)
y a veces después de una quimioterapia.
RECUENTO DIRECTO
MUESTRA
Sangre anticuagulada con citrato de sodio al 3.8%
MATERIALES Y REACTIVOS
- Solución salina al 0.85%
- Tubos de ensayo pequeños.
- Pipeta pasteur o goteros.
- Camara de neubauer.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PROCEDIMIENTO
- En un tubo medir 21 gotas de solución salina al 0.85%
- Agregar al tubo tres gotas de plasma citratado.
- Mezclar bien y montar en la cámara de neubauer.
- Se lee cinco cuadrantes, donde se leen los globulos rojos y se multiplica x 500, siendo
este el resultado.
RECUENTO INDIRECTO
MUESTRA
Sangre sin anticuagualnte o capilar.
MATERIALES Y REACTIVOS
- Lanceta.
- Lamina porta objeto.
- Reactivo para coloración de wrigth
- Microscopio.
- Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO
- Limpiar bien el área del dedo del cual se va a tomar la muestra.
- Con la lanceta hacer la punción, descartar la primera gota de sangre y colocar la
segunda en la lamina porta objetos.
- Dejar secar y colorear con el reactivo de wrigth como se hace para los extendidos de
sangre periférica.
- Montamos en el microscopio y leer con objetivo de inmersión (100x).
- Se cuentan las plaquetas de 10 campos se divide por el mismo número de campos y se
multiplica por 21.000, siendo este el resultado.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
VALORES NORMALES
De 150.000 a 400.000mm.
RECUENTO DE EOSINOFILOS
Los eosinófilos son una clase de glóbulos blancos y como tales hacen parte del sistema de
defensa del organismo.
El aumento de eosinófilos o eosinofília se relaciona con diferentes formas de alergia y con
algunas parasitosis.
Técnica: Extendido periférico, coloración de wright . Luego realizamos el conteo de 100
células e informamos el % de eosinófilos encontrados.
DREPANOCITOS
Son glóbulos rojos que tienen forma de media luna. Se encuentran en una clase de anemia
denominada Anemia Drepanocítica.
Se informan cuando se encuentran en el extendido de sangre periférica.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
DIAGNOSTICO DE HEMOPARASITOS
El paludismo o malaria es una enfermedad producida por un parásito transmitido al hombre

en condiciones naturales por la picadura de un mosquito del género Anopheles. Existen
otros mecanismos menos frecuentes como la transmisión congénita, las transfusiones
sanguíneas, jeringas contaminadas y los trasplantes de órganos.
Una parte de la evolución de este parásito ocurre en el interior del glóbulo rojo, y su
presencia se detecta en extensiones de sangre por el método de la gota gruesa.
Entrevista al Usuario
Antes de proceder a tomar la muestra de sangre interróguelo formulando las siguientes

preguntas:
- Donde vive ? Dirección.
- Ha viajado últimamente ? A donde ? Cuando ? .
- Ha presentado fiebre ? Dolor de cabeza? Escalofrío?
- Cuando le comenzaron estos síntomas ?.
- Ha recibido transfusión en el último mes ? Dónde ?.
- Qué droga está tomando ?.
Método de la Gota Gruesa

Es un método de concentración que permite descubrir infecciones poco intensas.
Materiales y Reactivos
- Algodón.
- Alcohol.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Láminas limpias.
- Lanceta estéril.
- Lápiz marcador.
Toma de la Muestra
- Determine el sitio a puncionar. Este puede ser:
1. El lado externo del dedo cordial o anular de la mano izquierda, donde la sensibilidad
es menor .
2. El talón o el dedo gordo del pié en niños menores de seis meses.
3. Desinfecte con algodón humedecido en alcohol. Deje secar.
4. Puncione con firmeza y rapidez.
5. Limpie la primera gota de sangre con un algodón seco estéril.
6. Presione suavemente el dedo, obtenga otra gota de sangre cuidando de no apretar el
sitio de punción.
7. Tome una lámina, acérquela al dedo y sin rozarla deposite dos gotas de sangre. La
primera a 1.5 cm. del borde de la lámina y la segunda a 3 cm. del mismo.
8. Con el borde de otra lámina extienda cada gota de sangre haciendo solamente tres
movimientos: de derecha izquierda, el centro y levante formando un rectángulo de 1
cm. de ancho.
9. Coloque la lámina en azul de metileno por 30 segundos para obtener su
deshemoglobinización.
10. Deje secar la preparación en posición horizontal.
11. Cuando la gota gruesa no brille, esta lista para la coloración.
Coloración de Field
Equipo, Materiales y Reactivos

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Reloj.
- Bandeja curva para coloración.
- Gradilla.
- Tubos de ensayo.
- Colorante de Field: Solución A
Solución B.
Sales amortiguadoras 4/5.
Procedimiento
Teniendo como base la proporción siguiente por cada lámina a colorear. Mezcle en un tubo
de ensayo:
3 ml. de sales amortiguadoras
1 gota de solución A.
1 gota de solución B.
Coloque el extendido hacia abajo sobre la placa curva para coloración.
- Deje deslizar la solución Field, recién preparada, por debajo de la lámina hasta llenar la
depresión, evitando que se formen burbujas.
- Deje actuar el colorante durante 9 minutos.
- Levante la lamina y deje secar a temperatura ambiente en posición vertical.
- Si la placa no se colorea en un lapso de 24 horas, sumérjela en azul de metileno
fosfatado durante 3 a 5 segundos, para preservar los elementos celulares de la sangre.
LECTURA E INFORME:
Se debe informar el tipo de parásito y el grado de infestación en cruces o número de
parásitos por milímetro cúbico.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
QUÍMICA CLÍNICA
- Solicite al usuario que se presente al laboratorio en las primeras horas de la mañana

entre las 7:00 y las 9:00 a.m., para la toma de la muestra.
- Infórmele que debe ingerir la última comida a las 9:00 de la noche del día anterior.
- Recomiéndele, si los exámenes solicitados son sólo los del perfil lipídico: Colesterol,
HDL, triglicéridos, debe ingerir la última comida a las 6:00 de la tarde del día anterior.
- Si el médico solicita hipercolesterolemia al azar no es necesario el requisito de ayuno.
- Adviértale que el día anterior al examen debe evitar:
* Tomar bebidas alcohólicas.

* Realizar ejercicios violentos.
* Ingerir carnes rojas, mariscos, frijoles, si el examen solicitado es ÁCIDO URICO.
* Ingerir carne de cerdo, si el examen solicitado es TRIGLICERIDOS.
- Recomiéndele que no tome medicamentos durante los tres días anteriores al examen.
En caso que no pueda suspenderlos, solicítele que informe cuales está tomando y
anótelos en la solicitud del examen.
- Lea la orden e interrogue al paciente para cerciorarse si cumplió las instrucciones.

- Inscriba la orden en el libro de registro diario de laboratorio.
- Rotule el tubo de ensayo con el número que le corresponde de usuario.
- Proceda a tomar la muestra.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Recuerde que el uso del torniquete no debe exceder de los 30 segundos. De

preferencia tipo cinta y colocado en forma laxa.
- Deje coagular la muestra mínimo 20 minutos a temperatura ambiente o de 5 a 10
minutos a 37 GC.
- Separe el suero antes de una hora centrifugando la muestra durante diez minutos a 1599
r.p.m.
Condiciones de la Muestra
Cerciórese que el suero no presente:

- Ni hemólisis.
- Ni turbidez.
- Ni contaminación.
Hemólisis
La hemólisis es la liberación de la hemoglobina después de la ruptura de los eritrocitos.

Cuando se produce hemólisis, el suero adquiere un color entre rosa y rojo.
Evite la hemólisis en la muestra porque causa interferencia en las determinaciones químicas
o alteración en la concentración de los componentes sanguíneos.
Causas de Hemólisis en la Punción Venosa
Tenga en cuenta que la hemólisis puede producirse:

- Si se vierte la sangre al tubo sin quitar la aguja.
- Si no vierte la sangre por las paredes del tubo.
- Si se extrae sangre cuando se ha formado un hematoma.
- Si se hala con demasiada fuerza el émbolo de la jeringa.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Si se centrifuga la muestra de sangre antes de estar completamente coagulada.

- Si utiliza una aguja de calibre no adecuado.
RECUERDE !
Si el usuario tiene unas venas delgadas debe utilizar agujas calibre 21; y si tiene unas venas
normales debe utilizar agujas calibre 20.
Causas de Hemólisis en la Punción Capilar
Tenga en cuenta que la hemólisis puede producirse:

- Si se deja residuos de alcohol sobre la piel, y se mezclan con la sangre de la muestra.
- Se aplica demasiado fuerte el talón o el dedo, que puede ocasionar la ruptura de los
eritrocitos.
Turbidez
La causa más común de la turbidez del suero en la mayoría de los casos es la lipemia,
causada en algunos casos por el no ayuno. Aunque no todos los análisis en química
sanguínea requieren un estricto ayuno, si se recomienda, porque la lipemia causa
interferencia en las mediciones fotométricas.
Contaminación
El material de vidrio que se utiliza debe estar químicamente puro es decir que no deben
existir constituyentes potenciales orgánicos que puedan alterar el resultado de un análisis
químico, es por esto de suma importancia tener en cuenta las normas para el lavado del
material.
Evite la contaminación bacteriana:
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Manejando la sangre en forma estéril.

- Separando el suero de las células a los 30 minutos como tiempo máximo.
- Almacenando las muestras de 4 a 8°C. hasta análisis.
Conservación de la Muestra
Recuerde que las muestras deben conservarse adecuadamente hasta el momento en que se
procesen.
Conserve los sueros en refrigeración entre: (4.- 8°C ) para los análisis de :
- Colesterol HDL.
- Creatinina.
- Fosfatasa alcalina.
- Glucosa.
- Triglicéridos.
- Transaminasas.
Los sueros pueden permanecer a temperatura ambiente entre ( 20°C y 25°C ) hasta por
ocho horas para los análisis de :
- Ácido úrico.
- Albúmina.
- Amilasa.
- Calcio.
- Colesterol total.
- Fósforo inorgánico.
- Nitrógeno uréico.
- Proteínas.
Las muestras pueden conservarse en refrigeración entre ( 4°C y 8°C) hasta por cinco días
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
para los análisis de :

- Ácido úrico.
- Albúmina.
- Amilanas.
- Calcio.
- Colesterol total.
- Fosfatasa alcalina.
- Fósforo inorgánico.
- Proteínas totales.
Cuidados especiales
1. Si no se procesan las muestras el mismo día para realizar las determinaciones de

glucosa, colesterol, HDL, transaminasas, creatinina, nitrógeno uréico y triglicéridos.
Debe congelar los sueros inmediatamente a ( - 20°C. ), así podrá conservarlos hasta por
diez días.
2. Para la determinación de “Fosfatasa Ácida” lleve la muestra de sangre al refrigerador
mientras se coagula, separe el suero a los 30 minutos y procese inmediatamente.
3. Para la determinación de bilirrubinas conserve el suero todo el tiempo en la oscuridad y
a temperatura ambiente. Este suero debe procesarse el mismo día que se tomó la
muestra.
4. Para determinación de calcio guarde en tubo plástico cerrado para impedir la absorción
de monóxido de carbono del aire. En casos especiales guarde en el refrigerados el
suero, el plasma y la sangre, hasta que el médico disponga de los resultados y no haya
solicitado la repetición del análisis.
5. Evite la hemólisis en las muestras. Esta produce resultados falsamente elevados
especialmente en las siguientes determinaciones:
- Deshidrogenasa láctica.
- Fosfatasa ácida prostática.
- Transaminasas oxalacetica y pirúvica (GOT, GPT).
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Creatinina.
- En todas las técnicas en las que su lectura se realice en el rango de 300 a 500 nm.
Para la conservación de los sueros a temperatura de congelación (-20°C) se requiere un

congelador especial graduado a esta temperatura. El congelador de una nevera sólo alcanza
una temperatura de (-8°C).
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
GLICEMIA.
MUESTRA:
Suero o plasma sin hemólisis.
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 5 a 10 y de 100 a 1000 lambdas.
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
- Equipo de química clínica RA 50.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
TEMPERATURA DE REACCION
De 20 a 25 GC ó 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 10 microlitros de suero de cada muestra en el respectivo tubo marcado.
- Pipetear 10 microlitros de suero control o estandar cuando se necesite montar.
- Pipetear 1000 microlitros del reactivo de glicemia en cada tubo.
- Mezclar y dejar durante 30 minutos a temperatura de 20 a 25 GC o 5 minutos a 37 GC.
- Prender el equipo de química clínica RA50 cuando falten 5 minutos de reacción.
- Hundir la tecla quer dice GLUC en el panel de color azul del equipo.
- Seguir los procedimientos que indique el equipo.
- Cuando se va a pasar el suero control se hunde la tecla QC y dentro del menú el equipo
pregunta si el control que se esta utilizando es normal o anormal.
- El resultado que da el equipo es la concentración buscada.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
VALORES NORMALES
De 65 a 110 mg/dl.
COLESTEROL.
MUESTRA:
MATERIALES:
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC ó 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 1000 microlitros del reactivo de colesterol en cada tubo.
- Hundir la tecla quer dice CHOL en el panel de color azul del equipo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
VALORES NORMALES
Menor de 200mg/dl.
TRIGLICERIDOS
MUESTRA:
MATERIALES:
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC ó 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 1000 microlitros del reactivo de trigliceridos en cada tubo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4

- Hundir la tecla quer dice TRIG en el panel de color azul del equipo.
VALORES NORMALES
Menor de 170mg/dl
ACIDO ÚRICO
MUESTRA:
MATERIALES:
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC ó 37 GC.
PROCEDIMIENTO
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4

- Pipetear 1000 microlitros del reactivo de ácido úrico en cada tubo.
- Hundir la tecla quer dice URIC en el panel de color azul del equipo.
VALORES NORMALES
HOMBRES : De 3.4mg/dl a 7.0mg/dl
MUJERES: De 2.4mg/dl a 5.7mg/dl.
UREA O NITROGENO UREICO
MUESTRA:
Suero o plasma sin hemólisis y orina.
MATERIALES:
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 340 nm.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
De 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 1000 microlitros del reactivo de urea en cada tubo.
- Hundir la tecla quer dice GLUC en el panel de color azul del equipo.
- El resultado que da el equipo es la concentración buscada para la urea.
- El valor del nitrógeno ureico se da de multiplicar el resultado de la urea x 0.467 y se da
en mg/dl.
VALORES NORMALES
UREA EN SUERO: 10 a 50mg/dl UREA EN ORINA: 20 a 35mg/dl
NITROGENO UREICO: 4 a 23 mg/dl.
COLESTEROL HDL
MUESTRA
Suero o plasma sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 510nm (500-530nm)
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC ó 37 GC
MATERIALES:
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
- Gradillas.
- Centrifuga.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 500 microlitros de suero o plasma en un tubo de ensayo.
- Pipetear 500 microlitros del reactivo colesterol HDL en cada muestra.
- Mezclar y centrifugar de 3.500 a 4000 RPM durante 10 minutos.
- Tomar el sobrenadante y procesarlo siguiendo la técnica del colesterol total.
VALORES NORMALES
HOMBRES Mayor de 45mg/dl
MUJERES Mayor de 35mg/dl.
COLESTEROL LDL
El colesterol LDL se saca mediante la siguiente formula.

Colesterol LDL = Colesterol total – Trigliceridos – colesterol HDL
5
CREATININA.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
MUESTRA
Suero o plasma sin hemolisis, orina de 24 horas diluida 1:50 con agua destilada.
MATERIALES:
- Cubetas desechables para equipo RA 50.
LONGITUD DE ONDA.
De 510 nm ( 500 a 520nm) .
De 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 500 microlitros del reactivo 1 en cada cubeta desechable.
- Pipetear 500 microlitros del reactivo 2 en cada cubeta desechable.
- Colocar el equipo a trabajar por el método de cubeta desechable hundiendo la tecla
select, luego el numero 1 y escoger cubeta desechable.
- Salir de la opción select.
- El equipo por este método siempre pide calibrador ya que lee contra vacio.
- Hundir la tecla que dice CREA del panel de color azul en el equipo.
- Seguir las instrucciones del equipo.
- Introducir la cubeta desechable dentro del compartimiento para leer.
- Pipetear primero 100 microlitros de calibrador dentro de la cubeta desechable y hundir
la tecla CALIBRATE de color amarillo en el panel del equipo.
- Este mismo procedimiento se realiza con cada muestra que se valla a procesar y se
hunde la tecla ANALYZE en vez de la de calibrate.
- Cuando se va realizar el control de calidad se procesa como una muestra y se hunde la
tecla QC y el equipo le pregunta si es una muestra anormal o normal.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
VALORES NORMALES
SUERO HOMBRES: De 0.7 a 1.3mg/dl
MUJERES : De 0.5 a 1.1mg/dl
ORINA HOMBRES : De 21 a 26 mg/Kg 24hr.
MUJERES : De 16 a 22 mg/Kg 24hr.
BILIRRUBINA TOTAL
MUESTRA
Suero sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 540nm
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC ó 37 GC
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 100 a 1000 lambdas.
- Tubos de vidrio.
- Gradillas.
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO

Se puede hacer de dos formas:
1. Vaciar el contenido de un vial de reactivo B en un frasco de reactivo AT, se agita
suavemente. Es estable por 20 días a 2 –8 GC.
2. Mezclar en la proporción de 1ml del reactivo B + 24ml del reactivo AT. Es estable por 20
días a 2-8 GC.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PROCEDIMIENTO
- Pipetar 100 microlitros de agua destilada en el tubo de blanco reacción.
- Pipetear 100 microlitros de suero en el tubo de muestra.
- Pipetear 1000 microlitros en los tubos de blanco reacción y muestra.
- Agito y dejo durante 2 minutos a temperatura ambiente y leo.
- Debo tener prendido el equipo con anterioridad.
- Hundo la tecla que dice TOTAL BILI del panel azul del equipo y sigo las instrucciones
del equipo.
- Es de aclarar que por cada muestra hay que montar un blanco de reacción.
- El resultado que de el equipo es la concentración buscada.
VALORES NORMALES
Hasta 1mg/dl.
BILIRRUBINA DIRECTA.
MUESTRA
Suero sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 540nm
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC ó 37 GC
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 100 a 1000 lambdas.
- Tubos de vidrio.
- Baño de maría.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Gradillas.
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO

Se puede hacer de dos formas:
1. Vaciar el contenido de un vial de reactivo B en un frasco de reactivo AD, se agita
suavemente. Es estable por 20 días a 2 –8 GC.
2. Mezclar en la proporción de 1ml del reactivo B + 24ml del reactivo AD. Es estable por
20 días a 2-8 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetar 100 microlitros de agua destilada en el tubo de blanco reacción.
- Pipetear 100 microlitros de suero en el tubo de muestra.
- Pipetear 1000 microlitros en los tubos de blanco reacción y muestra.
- Agito y dejo durante 5 minutos a 37 GC y leo.
- Debo tener prendido el equipo con anterioridad.
- Hundo la tecla que dice DIREC BILI del panel azul del equipo y sigo las instrucciones
del equipo.
- Es de aclarar que por cada muestra hay que montar un blanco de reacción.
- El resultado que de el equipo es la concentración buscada.
VALORES NORMALES
Hasta 0.25mg/dl.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
CURVA DE GLICEMIA
- Infórmele al usuario que se presente al laboratorio en las primeras horas de la mañana

recomiéndele que no haga ejercicios físicos violentos.
- No fume, no ingiera café, ni alcohol por lo menos ocho horas antes del examen.
- Que realice una dieta normal.
- No ingiera drogas ( hormonas, anticonceptivos orales, hipoglicemiantes ) tres días
antes del examen.
- Si padece alguna enfermedad solicítele que posponga el examen hasta que se encuentre
restablecido.
No debe realizar la curva de glicemia a:

- Personas que se encuentren agudamente enfermas.
- Personas con glicemias en ayunas superiores a 140 mg/dl.
- Niños, salvo casos excepcionales; para efectuarla se requiere supervisión del
especialista.
- Efectúe la curva de tolerancia a la glucosa entre las 7:00 y las 12:00 AM.
- Interrogue al usuario para cerciorarse que cumple con las condiciones requeridas.
- Si las cumple, entonces extráigale 5 ml. de sangre venosa.
- Deje coagular la sangre mínimo 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
- Proceda a realizar la primera determinación de glicemia.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Si el resultado en ayunas es inferior a 140 mg/dl puede proceder a administrar la dosis

de glucosa. Para adultos 75 gr. diluidos en 300 ml. de agua (puede agregarle el zumo de
un limón para evitar las náuseas. Para niños 1.75 gr. por kg. de su peso.
Esta mezcla debe ser tomada lentamente en un lapso de 5 minutos ésta se contará como la
hora “0 “ (cero).
Tome luego muestras de sangre venosa así:
A los 60 minutos de ( 1 hora).
A los 120 minutos ( 2 horas).
A los 180 minutos ( 3 horas).
Si el médico indica curva de tolerancia a la glucosa en 5 horas, prosiga y tome muestra a

los 240 minutos de la hora 0 ( 4 horas) y a los 300 minutos de la hora 0 ( 5 horas).
Recuerde !
Durante la prueba el paciente debe permanecer sentado, tranquilo sin correr, beber o fumar.
GLICEMIA POST - CARGA A LAS DOS HORAS
Condiciones del Usuario
- Ayuno mínimo de 8 horas, máximo de 12 horas.

- No hacer ejercicio físico violento, ni fumar, ni ingerir café, ni alcohol por lo menos 8
horas antes del examen.
- No ingerir drogas ( hormonas, anticonceptivos orales, hipoglicemiantes ) tres días antes
del examen.
- Si ha padecido alguna enfermedad posponer el examen hasta que esté bien restablecido.
- Solicítele el resultado de una glicemia en ayunas realizada en la última semana.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
No se debe realizar en :
- Personas que se encuentren agudamente enfermas.
- Personas con glicemia en ayunas superior a 140 mg/dl.
- Niños salvo casos excepcionales. Para efectuarla se requiere supervisión del
especialista.
- Interrogue al usuario para cerciorarse de que cumple con las condiciones requeridas.
- Si las cumple, entonces extraiga 5 ml. de sangre venosa.
- Deje coagular la sangre mínimo de 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
- Informe al Bacteriólogo para que proceda a realizar la glicemia.
- Si la glicemia en ayunas es inferior a 140 mg/dl. proceda a administrarle la dosis de
glucosa así:
Adultos 75 gr. diluidos en 375 ml. de agua, puede agregarse el zumo de un limón para
evitar las náuseas. Esta mezcla debe ser ingerida en un lapso no mayor de 5 minutos.
- Esta es la hora “0 “.
Tome la siguiente muestra de sangre venosa a las dos horas de ingerir la glucosa.
Durante el lapso de tiempo que transcurra antes de la segunda muestra, el paciente

debepermanecer sentado, tranquilo, sin comer, beber o fumar.
GLICEMIA POST - PRANDIAL
Se utiliza únicamente como control del paciente diabético.

Después del desayuno habitual de usuario se realiza la determinación de glicemia a los 120
minutos.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
DETECCIÓN DE LA DIABETES GESTACIONAL
Test de Sullivan
Se realiza entre las semanas 24 ( 6 meses) y 28 semanas ( 7 meses ) de gestación.
Condiciones de la Usuaria

- Adminístrele 50 gr. de glucosa diluidos en 200 ml. de agua fría. Puede agregarse el
zumo de un limón para evitar náuseas y el vómito.
- Esta mezcla debe ser bebida lentamente en un lapso de 5 minutos.
- A la hora de ser ingerida la glucosa, extraiga 5 ml. de sangre venosa.
- Deje coagular la sangre mínimo 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA PARA LA DETECCIÓN DE

DIABETES GESTACIONAL
Condiciones de la Usuaria
- Ingerir una dieta normal.
Procedimiento de toma de Muestras

- Interrogue a la paciente para cerciorarse de que cumple con las condiciones requeridas.
- Si las cumple, entonces extraiga 5 ml. de sangre venosa.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Adminístrele 100 gr. de glucosa diluida en 400 ml. de agua fría; puede agregarse el
zumo de un limón para evitar las náuseas y vómitos.
- Esta mezcla debe ser bebida lentamente en un lapso de 5 minutos.
- Esta es la hora “0 “ (cero).
Tome muestras de sangre venosa así:

- A los 60 minutos “una hora “ de la hora “0 “ de la ingestión de la carga de glucosa.
- A los 120 minutos “dos horas “ de la hora “0 “ ó ingestión de la carga de glucosa.
- A los 180 minutos “tres horas “ de la hora “0 “.
- La embarazada debe permanecer sentada, tranquila, sin comer ni beber, durante la
prueba.
NOTA: “ Todas las diferentes curvas de glicemia se realizan con la técnicas de glucosa
antes relacionada para cada muestra”.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
UROANALISIS
El examen de la orina constituye un indicador importante del estado de salud. Es una

ayuda valiosa en el diagnóstico y tratamiento de las enfermedades renales, del aparato
urinario y en la detección de enfermedades metabólicas o sistémicas que no están
directamente relacionadas con el riñón.
EXAMEN DE ORINA
Es uno de los análisis más solicitado en el laboratorio en incluye el examen organoléptico,

el físico-químico y el microscópico del sedimento urinario.
- Solicítele que realice un lavado de la región genital con abundante agua y jabón.
- Si es mujer, adviértale que no recolecte la muestra durante el período menstrual.
Recolección de la Muestra
- Utilice un frasco de boca ancha con tapa, limpio y seco. En los bebés, emplee un
colector pediátrico de polietileno transparente y plegable. Si es posible suminístrele
estos recipientes.
- Recolecte la primer orina de la mañana teniendo en cuenta las siguientes instrucciones:
1. Deje salir un poco de la orina y luego recoja la muestra en el recipiente
aproximadamente hasta la mitad, evitando el contacto con la piel.
2. Cierre el recipiente y márquelo con su nombre completo.
3. Lleve la orina al laboratorio antes de una hora.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Recepción de la Muestra
- Reciba únicamente las muestras que estén en el recipiente y en la cantidad adecuada.
- Verifique que el nombre en la orden médica coincida con el de la muestra.
- Inscriba la muestra en el libro de registro diario.
- Si no se procesa en un lapso de 1 hora, guarde la muestra en la nevera.
Procesamiento de la muestra
Equipo
- Cliniteck 50
- Centrífuga.
- Reloj.
- Microscopio.
Materiales
- Tiras reactivas.
- Tubos de ensayo.
- Láminas.
- Laminillas.
- Lápiz marcador.
Lleve las muestras al área de preparación y organícelas de acuerdo a la numeración.

- Mezcle bien la orina.
- Envásela en un tubo de ensayo debidamente marcado, proceda a realizar los exámenes
organoléptico y físico-químico de la orina.
Examen Organoléptico
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Las características organolépticas de una muestra de orina suministran una información

diagnóstica útil, razón por la cual no deberán ser pasadas por alto.
- Mezcle bien la orina y describa su aspecto y color.
Aspecto
Puede ser transparente, ligeramente turbio o turbio.
Color
Puede presentar una amplia gama de colores, blanco, amarillo, anaranjado, rosado, rojo,
castaño, púrpura, negro, azul e inclusive verde, dependiendo de sus constituyentes y su
concentración.
Olor
La orina recién emitida tiene un olor ligeramente aromático. El olor es importante para
reconocer muestras que por haber sido recolectadas con mucha anterioridad expiden un
olor amoniacal, fétido, que las hace inadecuadas para el examen de laboratorio.
Examen Físico-Químico
Las pruebas que anteriormente requerían análisis químico más complejos, hoy se han hecho
más fáciles con la introducción de técnicas sencillas en que se utilizan tiras impregnadas de
reactivos.
Tira Reactiva
Es una banda angosta de plástico con pequeños tacos adheridos, cada uno de los cuales
contiene reactivos para diferentes pruebas que permiten la determinación simultánea de:
1. PH: Mide una unidad de rango entre 5 y 8.5. Si no se sigue el procedimiento correcto
de escurrir la tira, permanece un exceso de orina en la tira produciendo un fenómeno
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
llamado runover, en el cual el buffer ácido del reactivo de proteinas se desplaza al área
del ph dando un resultado bajamente bajo.
2. LEUCOCITOS: las muestras normales en general dan resultados negativos. Los
positivos son de significado clínico. En ocasiones se pueden encontrar en mujeres
resultados positivos por descargas vaginales. Drogas como cefalexina, cefalotina o
altas concentraciones de ácido oxalico pueden disminuir los resultados de la prueba. La
nitrofurantoina da un color pardo a la orina y puede enmascarar el color de la reacción.
3. NITRITOS: Esta prueba se basa en la conversión de los nitratos en nitritos por acción
de las bacterias presentes en la orina, generalmente gram negativas. Es especifica para
nitritos y no reacciona con otras sustancias presentes en la orina. Concentraciones altas
de ácido ascorbico pueden producir falsos positivos.
4. PROTEINAS: El reactivo del área es más sensible a la albumina que a las globulinas.
Cualquier color por enzima de trazas es significativo de proteinuria. En orinas con
densidad alta suelen aparecer resultados cercanos a trazas aunque los niveles sean
normales. Orinas contaminadas con amonio cuaternario presentes en algunos
detergentes pueden dar lugar a falsos positivos.
5. GLUCOSA: Es especifica para esta sustancia ya que no se han encontrado otras
sustancias en la orina que reaccionen con esta área. Elevadas concentraciones de
cetonas pueden dar falsos negativos en concentraciones de glucosas bajas. La prueba
de glucosa puede variar con la temperatura y decrece con el aumento de la densidad.
6. CETONA: El área reacciona con el ácido cetoacetico de la orina. Ciertas orinas de
densidad alta y ph bajos pueden dar falsos positivos. Niveles detectables se
puedenencontrar en pacientes con dietas, embarazo, o con ejercicios fuertes. En
cetoacidosis o ayunos prolongados aparecen en grandes cantidades en la orina antes
que aumente en sangre.
7. UROBILINOGENO: Detecta concentraciones bajas como 0.2mg/dl. El rango normal
es de 0.2 a 1.0mg/dl. La reactividad de la tira aumenta con la temperatura. Sustancias
que colorean la orina pueden enmascarar el desarrollo del color de reacción.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
8. BILIRRUBINAS: Normalmente esta no es detectable en orina, por eso las trazas son
suficientes para la investigación clínica. Concentraciones altas de ácido ascorbico
pueden causar falsos negativos metabolitos fenolicos pueden dar falsos positivos.
9. SANGRE: La interpretación de trazas puede ser causa de investigación clínica. La
presencia de puntos verdes o color verde indica presencia de hemoglobina (mioglobina
libre), por lo que la investigación clínica debe ser más profunda. El captopril puede
disminuir la sensibilidad oxidante; el hipoclorito puede dar falsos positivos.
Procedimiento
- Extraiga solamente la tira reactiva que va a ser usada inmediatamente y tape de nuevo
el frasco.
- Observe que los colores de las áreas reactivas de la tira correspondan a los de las cartas
de colores. En caso de observarse un cambio de color se deben descartar.
- Tenga cuidado de no tocar las áreas reactivas.
- No saque el desecador que posee el frasco, sin que se hayan usado todas las tiras.
- Consérvelas a una temperatura inferior a 30 grados centígrados, en un lugar seco y
fresco pero no refrigerado.
- Prenda el equipo Clinitek 50 y espere que este listo.
- Oprima el boton verde que queda a los extremos del panel de botones.
- Sumerja completamente las áreas reactivas de la tira, en la orina fresca, bien mezclada y
sin centrifugar rapidamente.
- Retírela inmediatamente y elimine el exceso de orina rozando su borde con el tubo.
- Coloque la tira en la bandeja, dentro del canal, teniendo la precaución que quede bien
colocada y sin espacio al principio de la tira y la bandeja.
- Anote los resultados que emita el equipo en el cuaderno de registro diario.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas

- Si se sospecha contaminación de las tiras, coja una de ellas y introdúzcala en agua
destilada y léala como una muestra, si le da leucocitos, nitrito o cuerpos cetónicos las
tiras están contaminadas y hay que descártalas.
Examen Microscópico del Sedimento Urinario

- Mezcle la orina y envase en un tubo de ensayo 10 ml.
- Centrifugue durante 5 minutos a 2000 r.p.m. (revoluciones por minuto).
- Descarte 9.0 cc del sobrante por inversión completa del tubo.
- Marque la lámina con el número correspondiente a la muestra.
- Agite suavemente el sedimento y coloque 50 ul sobre la lámina.
- Cúbrala con la laminilla y colóquela en el sitio indicado para realizar su examen
microscópico.
- Una vez examinadas las muestras, archive la copia de los resultados o anótelos en el
libro de registro correspondiente.
Recomendaciones
- Coloque frente al microscopio dos frascos con solución desinfectante para descartar
láminas y laminillas respectivamente.
- Si el sedimento urinario no se va a examinar inmediatamente, refrigérelo.
OTRAS PRUEBAS REALIZADAS EN ORINA.
DEPURACION DE LA CREATININA:
PROCEDIMIENTO:
- Tomar un tubo con sangre para realizar una creatinina.
- Recolectar orina de 12 o 24 horas.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Medir el volumen de la orina.

- Filtrar o centrifugar la orina.
- Hacer una dilución de 1:50 con agua destilada.
- Prender el equipo RA50 para trabajar en cubeta desechable, hundiendo la tecla select,
luego el número 1 y trabajar con cubeta desechable.
- Colocar el equipo en la técnica de creatinina.
- Pipetear 500 ml del reactivo 1 en cada cubeta desechable.
- Pipetear 500 ml del reactivo 2 en cada cubeta desechable.
- Introducir la cubeta desechable en el equipo y pipetear 100 lambdas del patrón y hundir
la tecla calibrate y esperar el tiempo estipulado por el equipo.
- Luego introducir otra cubeta y pipetear 100 lambdas de la dilución y esperar el tiempo
estipulado por el equipo, el resultado que arroja el equipo es el valor buscado.
INFORME:
- Volumen total en 12 o 24 horas (ml)
- Creatinina en sangre (mg%).
- Creatinina en orina (mg%).
- Creatinina en 12 o 24 horas (mg712 o 24 horas).
- Volumen orinario por minuto (ml/min).
- Depuración urinaria en 12 o 24 horas (ml/min).
VALORES NORMALES: HOMBRES: 98-156ml/min.

MUJERES: 95-160ml/min.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
EXAMEN DE MATERIAL FECAL
Es el examen más sencillo y menos costoso y bien realizado tiene una adecuada
sensibilidad y especialidad.
La eliminación de los productos de desecho de la digestión es indispensable para la salud.
Dichos productos excretados se conocen como excrementos o heces. El examen de éstas se
realizan con frecuencia en la evacuación de trastornos gastrointestinales y sus resultados
ayudan a descubrir sangrados, obstrucción intestinal, ictericia obstructiva, enfermedades
parasitarias, disenterias, colitis ulcerosa y aumento de la excreción de grasas.
Un adulto excreta de 100 a 300gr de materia fecal por día, de los cuales el 70% puede ser
agua, las heces es lo que queda de los 8 o 10 litros de liquido que entran al intestino
diariamente.
Los líquidos y sólidos ingeridos por vía bucal, saliva, secreciones gástricas, jugo
pancreático y bilis constituye a la formación de las heces.
Las heces se componen de:
- Residuos de material indigerible como la celulosa de los alimentos ingeridos de cautro
días anteriores.
- Bilis(pigmento y sales); el clor se debe normalmente a los pigmentos biliares, algo
altera por acción de las bacterias.
- Secreción intestinal, incluyendo el moco.
- Leucocitos que migran del torrente circulatorio.
- Celulas epiteliales desprendidas.
- Gran cantidad de bacterias que contribuyen hasta una tercera parte de los sólidos
totales.
- Material inorganico del 10 al 20% principalmente calcio y fosforo.
- Alimentos no digeridos o no absorbidos ( existen en cantidades muy pequeñas).
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
COPROLOGICO DIRECTO
Es un método sencillo y rápido que permite confirmar el diagnóstico de parasitosis

intestinal.
- Indique al usuario que no debe ingerir laxantes y explíquele que recolecte una pequeña
porción de la deposición:
- Directamente en un recipiente plástico, de tamaño mediano, de boca ancha, con
tapa de rosca, seco y limpio, ó en una bacinilla, cuidadosamente limpia y seca,
luego traslade con un bajalenguas o algo similar una pequeña porción de la deposición al
recipiente plástico. En los menores de un año, los cuales no controlan los esfínteres se
les coloca el pañal desechable al revés para que no se absorba el líquido en el caso de ser
una diarrea.
ADVIÉRTALE QUE:
- No contamine la muestra con la orina.
- No contamine la parte exterior del recipiente, ni lo llene demasiado.
- Nunca recoja la muestra directamente de la taza del sanitario.
- Una vez recolecte la muestra, cierre el recipiente y márquelo con su nombre completo.
- Lleve la muestra al laboratorio antes de una hora.
- Reciba únicamente las muestras que estén en el recipiente adecuado.
- Verifique que el nombre en la orden médica coincida con el de la muestra.
- Enumere y matricule la muestra en el libro de registro diario.
- Se debe pedir mínimo tres muestras en días alternos, no consecutivos y antes de iniciar el
tratamiento.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Llévela al área destinada a su proceso.
Procesamiento de la Muestra
- Láminas.
- Laminillas.
- Aplicadores.
- Lápiz marcador.
- Solución Salina al 0.85%
- Lugol.
Examen Microscópico
Observe la consistencia y el color de la muestra.
Normalmente la materia fecal presenta una consistencia firme y formada o blanda y
formada, y un color café carmelito; pero factores fisiológicos, patológicos y alimenticios
modifican estas características presentando variaciones así:
Consistencia Color
Dura y seca. Amarilla.
Blanda no formada Gris
Semilíquida Rojo
Líquida o acuosa Verde, negro incluso blanco.
- Observe e informe si existen parásitos adultos.

- Inicie la preparación de las muestras por las heces líquidas y las que contienen moco y
sangre, que deben ser las primeras en examinarse.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Examen Microscópico
Proceda a la preparación de las muestras de la siguiente manera:
- Marque las láminas con el número de la muestra correspondiente.
- Coloque sobre la lámina una gota de solución salina y aproximadamente a dos centímetros
una gota de lugol.
- Tome con el aplicador una pequeña porción de la parte profunda y de la superficie de la
muestra, si las heces están formadas.
- Si son líquidas o semilíquidas tómela del moco sanguinolento y del líquido que las rodea.
- Homogenice la muestra primero en la gota de solución salina y con el mismo aplicador
tome otra porción y homogenícela en la gota de lugol.
- Coloque una laminilla sobre cada gota, evitando se formen burbujas.
- Lleve las láminas al sitio indicado para realizar el examen microscópico conservando el
orden de numeración.
- Archive la copia de los resultados o anótelos en el libro de registro correspondiente, una
vez examinadas las muestras.
- Al terminar ele trabajo, descarte las muestras en una bolsa plástica, viértales solución
desinfectante, selle la bolsa e incinere.
Recomendaciones
- No coloque el recipiente sobre la solución del examen.
- Conserve siempre las muestras tapadas.
- Recuerde: Las muestras de materia fecal deben ser examinadas en la hora siguiente
después de su recolección.
- Proteja de la luz directa el reactivo de lugol.
Los trofozoitos se inmovilizan en solución de yodo y el núcleo se tiñe claramente.

La solución salina permite observar los quistes y trofozoitos de las amibas mientras que el
lugol nos permite detectar más facilmente los huevos de helmintos.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Se deben reportar los trofozoitos y quistes haciendo una estimativa de cantidad que se
observe por campo el caul se puede reportar por cruces o por cantidad, los huevos se deben
informar por cantidad teniendo en cuenta el tipo de huevo y la cantidad de materia fecal.
EXAMEN DE MATERIA FECAL POR MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN
Los métodos de concentración en el examen de materia fecal aumentan la posibilidad de

encontrar parásitos en las heces, cuando éstos se hallan en número reducidos.
Por consiguiente, debe realizarse alguno de los métodos de concentración a todas las
muestras con examen coprológico directo negativo.
Técnica de Flotación del Sulfato de Zinc
Equipo
- Centrífuga.
- Reloj.
Materiales
- Láminas.
- Laminillas.
- Aplicadores de madera.
- Lápiz marcador.
- Tubos de ensayo.
- Asa bacteriológica.
- Mechero.
Reactivos
- Solución de sulfato de zinc D: 1.080.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Solución salina 0.85%.

- Lugol.
- Diluya aproximadamente un gramo de materia fecal en 10 ml. de agua.
- Trasvase la mezcla a un tubo de ensayo debidamente marcado.
- Centrifugue a 2500 r.p.m. durante un minuto.
- Decante el sobrenadante.
- Agregue 2 ó 3 ml. de agua, agite el sedimento, golpeando suavemente con el dedo, la base
del tubo, termine de llenar con agua y centrifugue.
- Repita dos o tres veces el lavado hasta que el sobrenadante quede claro.
- Decante el sobrenadante.
- Agregue 3 ó 4 ml. de solución de Sulfato de Zinc; mezcle el sedimento y termine de llenar
el tubo con la solución hasta un centímetro de su borde.
- Centrifuga a 2500 r.p.m. durante un minuto. No frene la centrífuga.
- Coloque cuidadosamente el tubo en la gradilla.
- Tome con asa estéril la película que se formó en la superficie teniendo cuidado de no
romperla y deposítela en la lámina.
- Coloque una gota de solución salina, sin tocar la película, y al lado opuesto una gota de
lugol.
- Cubra con una laminilla evitando que se mezcle la solución salina con el lugol.
- Llévela al sitio indicado para observación microscópica.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
DIAGNOSTICO DE OXIUROS
El nemátodo “Enterobius Vermiculares “, comúnmente denominado oxiuro, es el agente

causal de una enfermedad parasitaria llamada Oxiuriasis. Su ciclo de vida tiene
características diferentes. La hembra grávida migra al ano y en los pliegues perianales
deposita sus huevos, ocasionando prurito.
Es por esto que la técnica para su diagnóstico es diferente a la de otras parasitosis
intestinales.
Técnica de Graham
Es el método más utilizado para el diagnóstico de oxiuros. Permite por una técnica sencilla
observar los huevos adheridos a una cinta engomada transparente.
- Recomiende al usuario que se presente al laboratorio sin bañarse y sin hacer la deposición.
Materiales
- Cinta engomada transparente.
- Bajalenguas.
- Láminas.
- Gasa.
Toma de la Muestra
- Corte aproximadamente 12 cm. de cinta engomada transparente de 1 cm. de ancho y
péguela sobre una lámina, dejando que sobresalga la cinta por los extremos de ésta.
- Doble uno de los extremos de la cinta sobre sí mismo para usarlo de “cogedera “y el otro
extremo péguelo a la lámina.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- En el momento de tomar la muestra, coloque un bajalenguas debajo de la lámina haciendo

que sobresalga del extremo contrario a la “cogedera “, aproximadamente 2.5 cm.
- Separe la cinta de la lámina tomándola por la “cogedera “y dóblela por detrás del
bajalenguas, dejando expuesta la superficie gomosa.
- Sujete firmemente la cinta y la lámina contra el bajalenguas.
- Solicite al usuario se despoje de su ropa interior y se coloque sobre la camilla en posición
de gateo.
- Sepárele los glúteos y presione el extremo del bajalenguas, sin insertarlo, en varios sitios
de la piel que rodea el ano.
- Adhiera de nuevo la cinta a la lámina y alísela suavemente con una gasa.
- Deseche el bajalenguas y lleve la lámina para su observación microscópica.
- Descarte la lámina, una vez examinada la muestra.
- Archive la copia del resultado o anótelo en el libro de registro correspondiente.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL.
La hemorragia en el aparato gastrointestinal puede ser aguda o crónica, oculta o evidente, y

puede originarse en cualquier punto del aparato digestivo desde la boca hasta el recto.
Aunque con frecuencia es el resultado de una patología menor, como en el caso de las
hemorroides y las fisuras anales, nunca debe ignorarse la presencia de sangre en las heces.
- Recomiéndele se abstenga de ingerir carne durante los tres días anteriores a la recolección
de la muestra:
- Solicítele recolecte la muestra en la misma forma que para el examen coprológico.
Equipo, Materiales y Reactivos

- Reloj.
- Papel filtro.
- Palillos de madera.
- Láminas.
- Reactivo en tabletas.
- Agua destilada.
Recomendaciones
Si el resultado es positivo y el usuario no se abstuvo de ingerir carne los tres días anteriores
a la recolección de la muestra, aconséjele que repita el examen atendiendo esta
recomendación.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
OTROS ANÁLISIS EN MATERIA FECAL
Algunas pruebas bioquímicas son útiles como complemento en el estudio de diversas

enfermedades.
Ph:
Esta prueba y el estudio de azucares reductores que se describen a continuación tiene mayor
valor en la Enfermedad Diarreica Aguda en niños menores de 5 años.
En diarreas por bacterias invasivas generalmente el Ph es ácido, en las de origen tóxico es
neutro y en las vírales siempre es ácido.
- Indique que recolecte la muestra en un recipiente adecuado.
- Marque la muestra con el nombre y apellidos.
Procedimiento
- Recorte 3 cm. de tira de papel indicadora de ph.
- Tome con un aplicador una porción de la muestra y colóquela sobre el papel indicador.
- Espere unos segundos y compare con la carta de colores.
Azúcares Reductores
Se ha encontrado que siempre hay presencia de glucosa y ausencia de lactosa, en diarrea de
origen bacteriano-tóxico, mientras que lo contrario se encuentra en las diarreas vírales. La
prueba de lactosa positiva en materia fecal es también útil en el diagnóstico de diarrea, por
deficiencia de disacaridos, que se presenta en niños alimentados al pecho que no desdoblan
la lactosa, abundante en la leche materna.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Tubos grandes.
- Solución salina estéril.
- Tabletas de clinitest.
- Pipetas.
Procedimiento
- Tome en un tubo grande 15 gotas de materia fecal si es líquida, si es consistente haga
dilución en partes iguales con solución salina.
- Añádale una pasta de clinitest.
- Espere 30 segundos y compare con la carta de colores.
Leucocitos
Estas células en materia fecal se encuentran asociadas a moco y se observan en diferentes
enfermedades intestinales.
- Láminas porta-objetos.
- Palillos.
-Colorante de Wright.
-Buffer.
Procedimiento
- Tome con el palillo la parte mucosa y haga un extendido delgado y homogéneo.
- Deje secar a temperatura ambiente.
- Coloreé con coloración de Wright.
- Deje secar a temperatura ambiente y lleve al microscopio para ser observada.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
COLORACIÓN DE ZIEHL NEELSEN MODIFICADA PARA CRYPTOSPORIDIUM
La muestra de materia fecal o esputo se extiende en el porta-objetos con una gota de

solución salina, en un área de aproximadamente uno y medio centímetro de diámetro.
Después de seca la preparación se fija 10 minutos con metanol. La coloración se hace con
carbol-fucsina concentrada ( Fuscina básica: 1 gramo; etanol: 10 ml y Fenol al 5%: 90 ml.
), con este colorante se deja 20 minutos, luego lavar 2 minutos con agua corriente. Se
decolora con ácido sulfúrico al 7%, para luego lavar durante 2 minutos con agua corriente.
El colorante de contraste es verde de malaquita al 5% (Verde de malaquita: 5 gr. y etanol al
10%: 100 ml), dejar 2 minutos. Este colorante puede reemplazarse por azul de metileno.
Finalmente se lava con agua corriente durante un minuto y se deja secar a temperatura
ambiente, antes de observar la preparación al microscopio. Los ooquistes se observan
teñidos de rojo brillante sobre fondo verde. Son redondeados u ovalados de 3-5 micras de
diámetro, en algunos se logran ver los corpúsculos internos teñidos más oscuros que
corresponden a los esporozoitos.
Se puede también utilizar la coloración del Z.N sin flamear por 20’.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
SEROLOGIA
La Sífilis es una enfermedad infecto-contagiosa producida por una espiroqueta, que se

transmite sexualmente, por vía placentaria y por transfusiones sanguíneas.
TECNICA - VDRL
Tiene buena sensibilidad y especificidad y hace de él una prueba útil en el manejo de la
Sífilis. Su utilidad radica en que sirve para establecer un diagnóstico, permite el control
del tratamiento y descubre los casos de Sífilis latente.
Equipo, Materiales
- Centrífuga.
- Baño maría.
- Agitador.
- Reloj.
- Láminas con anillos de 14 mm. de fondo plano.
- Portaláminas.
- Pipetas.
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Agujas hipodérmicas recortadas No. 18, 19, 23.
- Jeringas de vidrio 1-2 ml.
- Frasco de 30 ml. fondo plano, boca angosta, tapa de vidrio esmeril.
Toma de la Muestra
- Cerciórese que el usuario esté en ayunas.
- Marque el tubos con el nombre del usuario y el número de la muestra.
- Extraiga 5 ml. de sangre.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Retire la aguja del tubo al vacío o de la jeringa y vierta en esta última la sangre por la
pared del tubo.
Procedimiento
- Coloque los tubos en una gradilla y deje que la sangre se coagule a temperatura ambiente
mínimo por 20 minutos.
- Coloque los tubos en la centrífuga a 2.500 r.p.m. durante 10 minutos.
- Separe el suero del coágulo por inversión y centrifugue nuevamente por 5 minutos, si el
suero presenta turbidéz o contaminación con glóbulos rojos.
- Inactive los sueros, colocándolos en el baño maría durante 30 minutos a una temperatura
de 56 grados centígrados. La temperatura no debe exceder ni disminuir de 0.5 grados
centígrados.
- Retire la gradilla.
- Examine los sueros y centrifugue aquellos que presentan partículas o turbidéz.
- Deje los sueros a temperatura ambiente durante 10 minutos, en el sitio indicado para
realizar la prueba.
- Si la muestra no se procesa antes de 4 horas, inactívela nuevamente a 56 grados
centígrados durante 10 minutos.
Recomendaciones
- Cerciórese que el suero no presente ni turbidéz, ni hemólisis, ni contaminación.
- Las muestras inactivadas el día anterior y no procesadas guárdelas en nevera a 4°C. Al
día siguiente llévelas al baño maría 10 minutos a 56°C.
- Escriba en el formulario de resultados el número de la cédula del usuario.
TECNICA - RPR
- Puede utilizarse suero o plasma. No contaminado ni hemolisado. No requiere
inactivación.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- La suspensión del Antígeno viene lista para el uso, agitarlo suavemente. Para utilizarla
quitar el tapón de la botella de plástico con dispensador y colocar la aguja para dispensar
a través del tapón de cierre. A continuación, dispensar la Suspensión de Antígeno en la
botella con dispensador apretando la botella de plástico e insertando la punta de la aguja
en la suspensión del Antígeno.
TÉCNICA
1. Pipetear con la pipeta y un gotero la cantidad suficiente de muestra y dispensar UNA sola
gota en un circulo del porta objeto prueba. Utilizar una pipeta nueva para cada muestra
(vienen con el estuche). Mantener la pipeta en posición vertical para un pipeteado
preciso.
2. Utilizando el palillo, esparcir la muestra por toda el área del circulo.
3. Agregar el Antígeno con previa homogenización suave de la botella de plástico con
dispensador y la aguja situarla en posición vertical y dispensar una sola gota en el
circulo. No agitar.
4. Situar inmediatamente el portaobjetos en un agitador automático durante 8 minutos a 100
r.p.m.
LECTURA DE RESULTADOS
Reacción Negativa:
Acumulación de partículas de carbono uniforme en el centro del circulo. O suspensión de
una coloración uniforme gris por todo el circulo.
Reacción Positiva Débil:

Acumulo de finos agregados negros circundados por un área difusa de finos agregados
negros.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Reacción Positiva:
Se observa la producción de agregados negros normalmente por todo el circulo prueba.
PRUEBA CONFIRMATORIA DE TREPONEMA PALLIDUM.
PRUEBA RAPIDA.
La prueba es una prueba rápida diseñada para la detección cualitativa de anticuerpos

Treponemicos IgG, IgA e IgM en suero humano, plasma o sangre total como soporte en el
diagnóstico de sífilis.
MATERIALES:
1. Sangre total, suero o plasma.

2. Dispositivos de la prueba.
3. Diluyente.
TECNICA:
1. Llevar los dispositivos de la prueba a temperatura ambiente.
2. Sacar el test de su envoltura y rotularlo con la identificación del paciente.
3. Dispensar 10 microlitros de suero o plasma o 20 microlitros de sangre total en la
ventana de muestra.
4. Añadir tres gotas del diluyente que viene en el kit.
5. Leer los resultados entre 5 y 10 minutos después de comenzada la prueba.
RESULTADOS.
Los resultados se reportan:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
POSITIVO: Cuando hay presencia de doble linea, una en la franja T y otra linea en la
franja C. Si hay una linea tenue en la franja T se toma la prueba como positiva.
NEGATIVO: Cuando solo se observa una linea en la franja C.
Si la prueba no muestra ninguna linea se toma como la tecnica erronea y se debe repetir.
PRUEBA RAPIDA DE VIH 1 Y 2.
La prueba es una prueba rápida diseñada para la detección cualitativa de anticuerpos IgG,
IgA e IgM en suero humano, plasma o sangre total contra el virus VIH 1 y VIH 2 como
soporte en el diagnóstico del virus de la inmunodeficiencia humana.
MATERIALES:
1. Sangre total, suero o plasma.

2. Dispositivos de la prueba.
3. Diluyente.
TECNICA:
1. Llevar los dispositivos de la prueba a temperatura ambiente.
2. Sacar el test de su envoltura y rotularlo con la identificación del paciente.
3. Dispensar 10 microlitros de suero o plasma o 20 microlitros de sangre total en la
ventana de muestra.
4. Añadir tres gotas del diluyente que viene en el kit.
5. Leer los resultados entre 5 y 20 minutos después de comenzada la prueba.
RESULTADOS.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Los resultados se reportan:
POSITIVO: Cuando hay presencia de doble línea, una en la franja 1 o franja 2 y otra línea
en la franja C. También se puede presentar línea en la franja 1, franja 2 y en la franja C.
NEGATIVO: Cuando solo se observa una línea en la franja C.
Si la prueba no muestra ninguna línea se toma como la técnica errónea y se debe repetir.
PRUEBA RAPIDA DE AGLUTINACION EN LATEX PARA LA

DETERMINACION CUALITATIVA Y SEMICUANTITATIVA DE LA
PROTEINA C REACTIVA PCR.
Es un aprueba basada en la reacción por aglutinación de los anticuerpos anti PCR contra la
proteina C reactiva del paciente.
MATERIALES:
1. Suero.
2. Reactivo de latex PCR.
3. Lamina oscura para la reacción.
4. Palillos mezcladores.
TECNICA:
1. Llevar el reactivo a temperatura ambiente.
2. Dispensar 40 microlitros de sureo en la lamina de reacción..
3. Dispensar una gota del reactivo PCR sobre el suero.
4. Mezclar con el palillo y agitar suavemente por 2 minutos de tal forma que la muestra
rote dentro del área de la lamina.
5. Leer bajo la luz artificial.
Cualquier aglutinación indica un contenido de PCR de 6mg/dl en la muestra sin diluir.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Las muestras con resultados positivos en la prueba de tamizaje se le debe realizar la prueba
semicuantitativa.
Se debe realizar una dilución de 1 en 1 y se considera positivo hasta la última dilución que
presente aglutinación.
A esta dilución se debe multiplicar el valor de la dilución por 6 y su resultado se informa en

mg/dl
DIAGNOSTICO DE EMBARAZO
El embarazo es un estado fisiológico , con alteraciones hormonales, metabólicas,

sanguíneas y mecánicas que repercuten en la fisiología de la mujer, con cambios
detectables por el laboratorio, que desempeña un papel importantísimo para ella y el
producto de la concepción.
El diagnóstico precoz se realiza con la determinación cualitativa de la hormona

gonadotropina coriónica (HCG) presente en el suero o en la orina de la mujer embarazada.
Esta hormona se empieza a producir en la primera semana, cuando se implanta el óvulo
fecundado.
Los métodos más sensibles detectan la hormona entre el 7 y el 10 día después de la

concepción.
- Para la determinación de la hormona, infórmele que el día anterior restrinja la ingesta de
líquidos 12 horas antes y no ingiera analgésicos y sedantes por lo menos en las 48 horas
anteriores al examen.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Es necesario que se presente en ayunas si la determinación es en sangre; si la

determinación se realiza en la orina, solicítele se presente al laboratorio para recolectar la
primera muestra de la mañana, que presenta mayor concentración de la hormona HCG.
Equipo, Materiales
- Centrífuga.
- Tubos.
- Gradilla.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Procedimiento
- Centrifugue la sangre o la orina en tubos debidamente marcados.
- Coloque en la gradilla las muestras de orina o de suero y llévela al sitio indicado para
realizar la prueba.
- La técnica es de acuerdo al inserto de cada casa comercial que se este utilizando, el cual
debe ser leido cuidadosamente antes de montar las pruebas.
Recomendaciones
- Procese rápidamente las muestras, porque la hormona se altera si permanece a
temperatura ambiente por 8 horas o más. O en refrigeración por más de 24 horas antes de
su análisis.
- Refrigere los reactivos una vez realice la prueba si así lo requiere.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
SECRECIÓN OCULAR
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS
- Indique al usuario que el día anterior al examen no utilice gotas, ni cremas oftálmicas.
- Recomiéndele que si tiene poca secreción se presente al laboratorio sin hacerse limpieza
previa del ojo infectado.
- En caso de tener abundante secreción indíquele que haga una limpieza superficial, con un
algodón humedecido con agua.
EXAMEN DIRECTO
Materiales Reactivos
Algodón. Solución salina estéril al 0.9%.
escobillones estériles. Hipoclorito de sodio al 5.25%.
Gradilla. Hidróxido de potasio (K0H).
Tubos de ensayo. Colorante de Gram.
Mechero.
Gradilla para láminas.
Laminillas.
Procedimiento
- Limpie el área alrededor de la lesión con un algodón humedecido en solución salina
estéril.
- Descarte el algodón en Hipoclorito de Sodio.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Tome con un escobillón estéril la primera muestra y haga un frotis.

- Descarte el escobillón en Hipoclorito de sodio.
- Tome con escobillón otra muestra y suspéndala en Hidróxido de Potasio cuando el
médico solicite KOH.
- Prepare la muestra, así:
* Coloque sobre una lámina una gota de la muestra y cúbrala con una laminilla.
* Lleve la preparación al sitio indicado para su observación.
* Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fíjelo pasándolo a tres veces por
la llama y coloréelo.
* Deje secar la lámina en el sitio indicado para su observación microscópica.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
SECRECIÓN OTICA
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS
- Indique al usuario que el día anterior al examen no utilice gotas, ni cremas ópticas.
- Recomiéndele que el día del examen se haga una limpieza externa con un algodón
humedecido con agua.
EXAMEN DIRECTO
Algodón. Isodine.
Escobillones estériles. Solución salina estéril al
Láminas limpias y desengrasadas. 0.9%.
Gradilla. Hidróxido de Potasio (KOH).
Tubos de ensayo. Hipoclorito de Sodio al 5.25%.
Laminillas. Colorante de Gram.
Mechero.
Procedimiento
- Limpie el conducto externo con un algodón humedecido con isodine y déjelo actuar
durante cinco minutos.
- Descarte el algodón en hipoclorito de Sodio.
- Tome con un escobillón estéril la primera muestra y haga un frotis.
- Tome con otros dos escobillones, otras dos muestras y suspéndalas:
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Una en solución salina estéril y la otra en Hidróxido de Potasio (KOH).

- Proceda a montar el examen fresco y KOH, así:
* Coloque sobre una lámina una gota de la muestra suspendida en solución salina y
separada de esta una gota de la muestra suspendida en Hidróxido de Potasio
(KOH).
* Cubra ambas preparaciones con laminillas.
* Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fíjelo pasándolo tres veces por
la llama y coloréelo.
* Deje secar la lámina en el sitio indicado para su observación microscópica.
SECRECIÓN DE HERIDAS Y LESIONES
- Informe al usuario que el día del examen haga una limpieza de la herida con agua y jabón,
y que no se aplique ningún vendaje ni medicamento (cremas, sulfatiazol, etc.).
EXAMEN DIRECTO
Algodón. Isodine.
Escobillones estériles. Solución salina estéril al 0.9%.
Láminas limpias y desengrasadas. Hidróxido de Potasio (KOH).
Gradilla. Hipoclorito de Sodio al 5.25%.
Tubos de ensayo. Colorante de Gram.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Laminillas.
Mechero.

- Limpie el área alrededor de la lesión con un algodón humedecido con solución salina
estéril o isodine.
- Deje secar.
- Descarte el algodón en Hipoclorito de Sodio.
- Proceda a tomar la muestra con un escobillón estéril, del fondo de la herida o de la lesión,
y haga un frotis.
- Deje secar a temperatura ambiente.
- Descarte el escobillón en Hipoclorito de Sodio.
- Tome otra muestra utilizando otro escobillón y suspéndala en solución de Hidróxido de
Potasio.
- Prepare el examen de KOH, así:
* Lleve la preparación al sitio indicado para su observación.
* Si no se procesa inmediatamente colóquelo en cámara húmeda, fije el frotis
pasándolo tres veces por la llama y coloréelo.
* Deje las láminas en el sitio indicado para su observación microscópica.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
SECRECIÓN VAGINAL
Instrucciones a la Usuaria para el Examen Directo y el Cultivo.

- Recomiéndele: que el día anterior a la toma del examen no se coloque óvulos, ni cremas,
ni tenga relaciones sexuales.
- Que este examen no se puede realizar durante el período menstrual.
- Que se presente al examen con un vestido cómodo (falda) para facilitar la toma de
la muestra.
- Que el día del examen realice un lavado de la región genital y adviértale que no
utilice las duchas internas.
EXAMEN DIRECTO
Equipo Materiales Reactivos

Camilla ginecológica con Sábana o papel Kraft. Hipoclorito de Sodio
sus estribos. Espéculos. al 5.25%.
Lámpara cuello de cisne. Escobillones Solución salina
estériles. estéril al 0.9%.
Láminas limpias y Colorante de Gram.
desengrasadas.
Gradilla para tubos.
Tubos de ensayo.
Laminillas.
Mechero.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4

- Cubra la camilla ginecológica con una sabana o con un papel Kraft.
- Solicite a la usuaria que se despoje de su ropa interior y se coloque en la camilla en
posición ginecológica.
- Separe los labios genitales e introduzca el especulo por el canal vaginal, sin utilizar
aditivos, visualice el cuello uterino y asegure el especulo.
- Introduzca el escobillón estéril en el canal endocervical y rótelo suavemente permitiendo
que permanezca allí por espacio de 10 a 30 segundos.
- Haga un frotis de esta muestra.
- Proceda a tomar otra muestra del fondo del saco vaginal con el escobillón, y suspenda el
material en solución salina estéril al 0.9%.
- Retire el especulo con cuidado y colóquelo en Hipoclorito de Sodio.
- Cambie la sábana o deseche el papel Kraft, una vez haya tomado la muestra.
SECRECIÓN VAGINAL EN NIÑAS
EXAMEN DIRECTO
- Cubra la camilla ginecológica con una sábana o con papel Kraft.

- Solicite a la niña que se despoje de la ropa interior y se acueste en la camilla.
- Indíquele que flexione las piernas sobre su abdomen de tal manera que quede
descubierta la parte genital.
- Proceda a la toma de la muestra separándole los labios genitales e introduzca por el
canal vaginal un escobillón estéril y rótelo suavemente.
- Retire con cuidado el escobillón y haga el frotis.
- Deje el escobillón en solución salina estéril al 0.9%.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Retire la sábana o deseche el papel Kraft, una vez haya tomado la muestra.
Examen en Fresco
- Prepare el examen fresco, así:

* Lleve la preparación al sitio indicado para su observación microscópica.
Frotis
- Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fíjelo pasándolo tres veces por la llama
y coloréelo.
- Deje las láminas en el sitio indicado para su observación microscópica.
“RECUERDE”
Las tomas de secreciones vaginales como uretrales en menores de edad siempres deben
realizarse en presencia de los padres o un adulto acompañante y una persona que trabaje
con usted.
SECRECIÓN URETRAL
Instrucciones al Usuario para el Examen del Frotis y el Cultivo.
- Indique que se presente al laboratorio sin haber orinado.
EXAMEN DIRECTO
Algodón. Solución salida estéril al 0.9%.
Escobillones o asa estéril. Hipoclorito de Sodio al 5.25%.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Láminas limpias y desengrasadas. Colorante de Gram.

Mechero.
Tubos de ensayo.

- Indique al usuario que descubra su parte genital.
- Limpie el meato con un algodón humedecido en solución salina estéril.
- Pidale al paciente que presione el pene de manera que salga una gota de pus por el
meato.
- Tome la muestra directamente en una lámina y haga el frotis.
- Tome otra muestra con el escobillón y suspéndala en solución salina estéril al 0.9%.
- Si al presionar no sale la gota de pus, suministre al usuario un recipiente estéril o un
tubo de ensayo y solicítele que recolecte las tres primeras gotas de orina.
- Proceda a realizar el frotis.
- Descarte el escobillón en Hipoclorito de Sodio.
- Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fíjelo pasándolo tres veces por la
llama y coloréelo.
OROFARINGEO
EXAMEN DIRECTO
La cavidad bucal posee numerosos microorganismos que conforman su flora normal, pero
además de estos puede ocurrir colonización por otros microorganismos que se establecen
para originar el estado de “ PORTADOR SANO” o por el contrario ser responsables de
entidades como: Amigdalitis, Faringitis, Laringitis,, Faringoamigdalitis, Epiglotitis,
Diftería, entre otras.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Debido a que tanto los microorganismos que conforman la flora normal como los que
causan enfermedad tienen una morfología similar resulta imposible diferenciarlos en un
frotis, por esto se considera que el Examen directo no tiene ningún valor diagnóstico,
requiriéndose siempre un cultivo.
Solamente se considera la posibilidad de una coloración de GRAM en el caso que se

sospeche Angina de Vincent.
Cuando se sospecha Difteria, el médico debe hacer su diagnóstico basado en el cuadro

Clínico; el examen directo o coloración de Albert lo orientará pero su confirmación debe
hacerse con el cultivo y la prueba de toxigenicidad.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
GARGANTA
EXAMEN DIRECTO
Se realiza una coloración de GRAM de un frotis de garganta cuando se sospecha Angina de

Vincent. Y la coloración de Albert cuando se sospecha Difteria.
Escobillones estériles. Solución salina estéril al 0.9%.
Bajalenguas. Hipoclorito de sodio al 5.25%.
Láminas limpias y desengrasadas. Coloración de GRAM.
Mechero. Coloración de Albert.

- Humedezca el escobillón en solución salina.
- Tome con la mano izquierda un bajalenguas.
- Solicite al paciente que abra la boca y presiónele la lengua hacia abajo con el
bajalenguas.
- Proceda a tomar la muestra tocando con el escobillón las amígdalas y la parte posterior
de la faringe. En caso de sospecha de Difteria se toma la muestra de las amígdalas y
pseudomembranas.
- Haga un frotis.
- Descarte el bajalenguas y el escobillón en Hipoclorito de Sodio.
- Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fíjelo pasándolo tres veces por la
llama y coloréelo con GRAM o con ALBERT.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
FOSA NASAL. MICOBACTERIUM LEPRAE
EXAMEN DIRECTO
Escobillón estéril. Colorantes de Ziel Neelsen.
Láminas limpias y desengrasadas. Solución salina estéril.
Mechero. Hipoclorito de sodio al 5.25%.
Bolsa plástica.
Lancetas.
Pinza

La Baciloscopia es un examen bacteriológico que busca la presencia de bacilos ácido
alcohol resistentes (baar) y que sirve como ayuda para la clasificación de la enfermedad de
lepra. Es necesaria porque confirma y aclara el diagnóstico.
1.- Baciloscopia: se realiza en cinco o más partes del cuerpo:
- Lóbulos auriculares
- Moco nasal que se hace recoger al paciente en una bolsa plástica o de celofán.
- Dos lesiones cutáneas activas (si el paciente presenta lesiones)
- Una de codo o de rodilla
La baciloscopia debe hacerse por lo menos cada seis meses con los siguientes materiales:
- Pinzas atraumáticas
- Bisturí No.15 (cuchilla desechable) o lancetas (2)
- Alcohol antiséptico
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Algodón
- Láminas porta-objetos nuevas
- Aplicadores de madera (para hacer el extendido del moco)
- Mechero y marcadores
a. Procedimiento para la toma de muestras
Los procedimientos para la toma de cada una de las muestras (linfa de oreja, moco, lesión y
leproma) son muy sencillos si se siguen los pasos correspondientes.
1. Toma de linfa de oreja

Se limpia muy cuidadosamente el lóbulo de la oreja con alcohol. Una vez desinfectada el
área se toma el lóbulo entre los dedos índice y pulgar y se hace isquemia con una pinza
atraumática.
Se realiza una incisión en la dermis de aproximadamente 5 mm. de largo x 3 mm. de
profundidad, con un bisturí No.15 y cuchilla desechable.
Si se presenta hemorragia se debe limpiar con un algodón seco.
Es necesario utilizar para el frotis la linfa clara y el raspado de la incisión obtenida al girar
el bisturí dentro de la pequeña herida.
La linfa se extiende suavemente en una lámina transversal en forma de zig-zag, en líneas
muy seguidas, con el borde romo de la cuchilla. La Lámina se marca y se deja secar a
temperatura ambiente.
La muestra también se puede tomar haciendo varios pinchazos con una lanceta y tomando
la linfa sin sangre para el frotis.
Inmediatamente se limpia el lóbulo con alcohol y algodón y, si es necesario se le pone una
banda adhesiva, o hemostasis por presión.
2. Toma de moco
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Se hace sonar al paciente en una bolsa de celofán o plástico y del moco allí recogido se hará
un frotis. Si el paciente no produce moco, con un aplicador de algodón se friccionan suave
pero firmemente, los lados del septo nasal.
Si la mucosa está muy seca, se humedece con un aplicador empapado en solución salina.
Se extiende el moco en lámina, en la misma forma en que se hace con la linfa de oreja y se
deja secar a temperatura ambiente.
3. Toma de linfa de lesión

Esta prueba es similar a la toma de linfa de oreja, teniendo en cuenta que se toma el borde
de la lesión con las pinzas atraumáticas para la isquemia.
4. Leproma
Se toma de cualquier parte del leproma y se extiende en la lámina de la manera ya descrita.
Forma práctica de hacer los frotis
Una vez que se sequen las láminas de todas las muestras, a temperatura ambiente, se fijan
suavemente al calor de un mechero del lado opuesto a aquel en el que se encuentra la
muestra. Después de esto, las láminas se pueden colorear.
b. Coloración
La coloración de las muestras se realiza para visualizar los bacilos.
Existen dos técnicas para realizar la coloración: En frío o en caliente.
Nuestras experiencias indican que no existe diferencia entre la coloración en frío y la
coloración en caliente si ésta se realiza según el procedimiento utilizado en nuestro país
para el diagnóstico de tuberculosis y si se tiene en cuenta que se debe prolongar en 10
minutos la producción de vapores con la fucsina.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
c. Lectura de la baciloscopia
Esta lectura se realiza en el microscopio con un objeto de inmersión 90x ó 100x, ocular 10x
y una buena fuente de luz.
El estudio se realizará en las zonas en donde los bacilos están disgregados y por lo menos
en 100 campos microscópicos.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
La determinación del grado de positividad de cada frotis se realiza de esta manera:
1. Índice Bacilar (IB)

Este nos proporciona un número aproximado de bacilos en la baciloscopia y se lee de la
siguiente manera:
0 (-) No se encuentran bacilos ácido-alcohol resistentes ((baar) en 100 campos.
+ Menos de un baar por campo en 100 campos observados.
++ 1 a 10 baar por campo en 50 campos observados.
+++ Más de 10 baar por campo en 20 campos observados.
Si se encuentran globias se anotarán: G
El IB se calcula totalizando el número de cruces por cada frotis dividiendo el número de

muestras tomadas, de acuerdo a la fórmula:
Sumatoria Nùmero de cruces = IB

Zonas examinadas
Un ejemplo más concreto para explicar cómo se aplica esta fórmula es:
1 Oreja derecha +++ (3)
1 Oreja izquierda +++ (3) 14 + = 2.8 IB
1 Frótis nasal +++ (3) 5 Zonas examinadas
1 Lesión cutánea ++ (2) examinadas
1 Codo +++ (3)
--- ------
5 14
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS
La Tuberculosis es una enfermedad infecto contagiosa crónica producida por el

Micobacterium Tuberculoso. Afecta más los pulmones, pero puede lesionar los riñones, los
huesos, los ganglios linfáticos, el aparato digestivo, el sistema nervioso central, los órganos
genitales, o puede diseminarse a todo el organismo.
La transmisión ocurre principalmente al inhalar partículas de esputo que exhala el enfermo
al toser, hablar o estornudar.
Por esto el paciente con baciloscopia positiva, es la fuente más importante de contagio para
la comunidad; y requiere la mayor y mejor atención del personal de salud.
BACILOSCOPIA
Es el método más sencillo y rápido para confirmar el diagnóstico de la Tuberculosis y

evaluar la evolución de la enfermedad durante el tratamiento.
Consiste en la búsqueda microscópica de bacilos ácido alcohol resistentes a partir de
muestras de cualquier espécimen clínico.
- Solicítele que recolecte, en recipientes plásticos, de tamaño adecuado, de boca ancha,
con tapa, seco y limpio, como mínimo tres muestras de esputo así:
- La primera muestra en el momento de la consulta.
- La segunda muestra al día siguiente, el primer esputo de la mañana, previo
enjuague de la boca.
- La tercera muestra el mismo día, después de entregar la segunda muestra.
- Aclárele que si tiene dificultad para llevar las tres muestras en dos días diferentes, las
recolecte en el transcurso del mismo día.
- Indíquele que obtenga la muestra de esputo de la siguiente forma:
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Inspire profundamente y después de un esfuerzo de tos, obtenga en esputo que no sea

saliva, ni moco.
- Si el paciente manifiesta que no logra expectorar después de varios esfuerzos de tos,
explíquele que proceda así:
- Acuéstese en la cama boca abajo con la cabeza fuera de su borde y una almohada
debajo del tórax .
- Coloque previamente en el piso un papel periódico para protegerlo.
- Tome el recipiente con una mano e inspire profundamente y con una sola aspiración
tosa tan fuerte como pueda y deposite en él el material expectorado.
- Cierre y marque en el cuerpo del recipiente con su nombre completo y llévelo al
laboratorio.
- Verifique que la muestra esté identificada correctamente.
- Si la muestra se ha derramado un poco, desinfecte la parte exterior del recipiente con
fenol al 5% o con hipoclorito de sodio al 5.0%.
- Esterilice o incinere si el derrame es masivo.
- Informe al usuario o a la institución remitente, cuando las muestras presenten
deficiencia en la calidad, cantidad, conservación y transporte.
Conservación de la Muestra
- Si no se procesa inmediatamente, consérvela en el refrigerador hasta por una semana, o
a temperatura ambiente por 24 horas o adicionando fosfato trisódico o ácido bórico al
1%, en cantidad igual a la de la muestra.
Remisión de las Muestras

- Si otras instituciones envían muestras de esputo para procesarlas recomiéndeles que
tomen las siguientes precauciones:
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Proteja las muestras del calor excesivo y de la luz solar.

- Márquelas y envíe una lista de todas ellas.
- Selle herméticamente los recipientes con esparadrapo o cinta adhesiva.
- Acondiciónelas en una caja de madera o metálica con tabiques para que no se derrame y
así se evita el riesgo de contaminación a las personas que la transportan.
Procesamiento de la muestra
Area
- El área de trabajo del laboratorio donde se realiza el montaje de la baciloscopia debe
cumplir las siguientes condiciones mínimas:
- Buena iluminación ventilación.
- Mesón y pozuelo de acero inoxidable u otro material de fácil desinfección.
Preparación del Extendido
- Hipoclorito de sodio al 5.0%.
- Láminas nuevas desengrasadas, conservadas en alcohol.
- Aplicadores de madera o baja lenguas.
- Mechero.
- Lápiz marcador (que no sea rojo).
- Papel Kraft o periódico.
- Tarro metálico con bolsa plástica.
- Gradilla.
Procedimiento
- Lávese las manos y colóquese la blusa de protección antes de empezar el trabajo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Cubra la mesa de trabajo con papel Kraft o periódico.

- Enumere y ordene las muestras en línea horizontal.
- Tome cada lámina y trace una línea por la cara inferior que divida un tercio para la
numeración y los dos tercios restantes para el extendido.
- Márquela con el número de la muestra correspondiente y déjela al frente de ella.
- Divida en dos un aplicador de madera y astíllelo.
- Coloque el mechero entre la muestra y usted. Enciéndalo y destape solamente la
muestra a procesar.
- Tome la porción purulenta de la muestra, utilizando la parte astillada del aplicador.
- Extiéndalo uniformemente, sosteniendo la lámina por el tercio numerado con los dedos
índice y pulgar.
- Deseche el aplicador en hipoclorito de sodio.
- Flamee los bordes de la lámina.
- Coloque las láminas sobre una gradilla previamente forrada, hasta que se sequen los
extendidos.
- una vez secos, fíjelos pasándolos rápidamente tres veces sobre la llama.
- Coloque las placas en la gradilla y llévelas al área de coloración.
- Deseche el papel y el material contaminado en el recipiente de basura.
Recomendaciones
- Recuerde el uso obligatorio de la blusa y los guantes.
- No descarte las muestras sino hasta después de su observación microscópica.
- No deje extendidos sin colorear.
- Desinfecte el área de trabajo con fenol o hipoclorito al 5%.
- Incinere el material contaminado.
Coloración de Ziehl Neelsen

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Materiales
- Varillas para coloración.
- Mechero.
Reactivos
- Fucsina fenicada.
- Alcohol ácido al 3%.
- Azul de metileno.
Procedimiento
- Coloque las láminas sobre las varillas para la coloración, con el número hacia el
operador.
- Cubra totalmente el extendido con fucsina previamente filtrada.
- Caliente las láminas pasando el mechero por debajo, hasta que se produzcan vapores.
- Suspenda el calentamiento cuando estos se hagan visibles.
- Caliente nuevamente una vez cesen los vapores y repita este procesamiento durante un
tiempo no inferior a 10 minutos.
- Evite que la fucsina hierva, y si disminuye por evaporación o derrame repóngala.
- Deje reposar por un tiempo no menor de 5 minutos.
- Derrame la fucsina tomando la lámina por el extremo numerado e inclinándola hacia
adelante. Lave dejando caer agua corriente a baja presión donde no hay extendido.
- Cubra el extendido con alcohol ácido al 3% y sosteniendo la lámina por el extremo
numerado, efectúe el movimiento de vaivén hasta decolorarla.
- Cuando el alcohol ácido adquiera color rojizo derrámelo.
- Decolore nuevamente si las partes más densas del extendido presentan un tinte rosado.
- Enjuague con agua corriente a baja presión.
- Cubra el extendido con azul de metileno durante 1 a 1 y ½ minutos.
- Lave con agua a baja presión.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
- Coloque las láminas en la gradilla, revise su numeración y déjelas secar a temperatura

ambiente.
- Una vez procesadas las muestras, archive la copia de los resultados y anótelos en el
libro de registro correspondiente.
Normas de Seguridad al Terminar el Trabajo

- Descarte las muestras cuando el bacteriólogo realice la lectura e informe el resultado.
- Recoja todo el material utilizado, el material desechable y contaminado se lleva a
incinerar o al autoclave.
- El material no desechable esterilícelo inmediatamente.
- Limpie la mesa de trabajo con una gasa o algodón humedecido con desinfectante.
- Lávese cuidadosamente los antebrazos y manos con agua y jabón, cepillando
especialmente las uñas y la parte inferior del dorso de la mano.
- Haga uso de pequeños recortes de papel para abrir y cerrar la llave del agua, para no
contaminarla.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
GUÍA PARA EL ENVIÓ DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE LA

DIRECCIÓN GENERAL DE MEDICINA LEGAL - BAGUE
BURUNDANGA:
Muestra orina. 50 ml de orina con fluoruro de Sodio al 1%, como preservativo. 0.2 ml de
fluoruro de Sodio por 4.5. ml orina. Post Morten igual. Mantener la muestra refrigerada
hasta su envío.
LÍQUIDOS:
Refrigerados, sin preservativos. Si es agua, 500 ml o un litro, o lo disponible. En caso de
otros líquidos, enviarlos en su envase original o en frasco estéril de boca ancha. No usar
frasco plástico si se solicitan pesticidas.
ALIMENTOS:
Muestras líquidas, 500 ml o lo disponible. Muestras sólidas, 250 gr. o lo disponible;
preferible enviar en el envase original. Mantener la muestra refrigerada hasta su envío. Si
son residuos de comida, especificar el tiempo transcurrido entre la ingestión y el envío. Si
quedan alimentos sin preparar enviarlos también para su análisis.
PLANTAS:
Muestra representativa, sin humedad, en bolsa de polietileno selladas al calor. Si es posible
enviar flores, frutos, hojas, etc.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
ESPERMATOZOIDES:
Enviar un escobillón con frotis vaginal secado a temperatura ambiente (sin solución salina).
Dos frotis para la búsqueda de espermatozoides. Los frotis se dejan secar y se fijan al calor,
se empacan entre dos cartones para evitar ruptura de las láminas. Los frotis deben ser
tomados por el médico o la bacteriólogo, de fondo de saco, cuello uterino, o frotis anal
(para la víctima). Para el agresor se toma muestra del glande.
PARA MANCHAS QUE CONTENGAN SEMEN:

Se dejan secar a la temperatura ambiente, se empacan individualmente doblando la prenda
sobre la mancha.
CONTAMINACIÓN VENÉREA:
Se toman dos frotis: Vaginal y anal en placas de vidrio (inmediatamente después de la
violación y ocho días después), cuando se trate de Gonococo. En caso de solicitar cultivo,
utilizar medio de Thayer Marti.
SUERO PARA SEROLOGIA DE: VDRL:

Se toma inmediatamente después de la violación y un mes después.
HIV:
Se toma inmediatamente después de la violación, tres semanas después y tres meses
después.
PRUEBA DE EMBARAZO:
Se realiza en sangre, suero u orina inmediatamente después de la violación y un mes
después de ella.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
PELOS:
Muestra obtenida por arrancado, enviarla en papel o bolsa plástica, Jamás utilizar
material adhesivo. Nombre a quien pertenece, sitio donde fue hallado. Favor enviar
contramuestra del sospechoso para fines comparativos.
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS TRANSPORTABLES:

Son todos aquellos elementos que por su tamaño y bajo peso pueden enviarse completos
para examinar manchas útiles. Deben dejarse secar a temperatura ambiente y enviar al
menor tiempo posible. Empacar en forma individual cada evidencia, cuidar que la
superficie manchada no esté en contacto directo con la envoltura. Si se trata de prendas se
protegerá la mancha con un papel por cada cara y fijado con alfileres. En caso de armas de
fuego o cortopunzantes donde la superficie no es absorbente y la mancha podría
desprenderse, utilizar un colchón de algodón y embalar entre cartones inmovilizando el
arma. Nunca utilizar material adhesivo o papel periódico impreso.
MANCHAS DE SANGRE TOMADAS DIRECTAMENTE DEL INDIVIDUO:

En ocasiones no es posible enviar un detenido hasta el laboratorio para hemoclasificar. En
este caso fabricar una mancha. Dejar secar la mancha en una tela a temperatura ambiente,
doblar la tela sobre la mancha, empacar en bolsa de papel y enviar.
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS NO TRANSPORTABLES:

Son elementos que por sus dimensiones no se pueden transportar (paredes, pisos, puertas,
etc.). Estas manchas se retiran por dos métodos: por raspado o por limpieza con un hisopo
de algodón humedecido en solución salina( ¼ de pocillo tintero con agua más una pizca de
sal de cocina), dejar secar y enviar en sobre de carta sellado.
ALCOHOLEMIA:
Muestra de sangre (punción venosa), asepsia SIN ALCOHOL, anticoagulante citrato de
sodio al 3.8%: 0.5 ml de anticoagulante para 4.5 ml de sangre, se adiciona 0.2 ml de
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
fluoruro de sodio al 1% por 4.5 ml de sangre como preservativo, se guarda en nevera hasta
su envío, si es posible también refrigerada. Sangre sin hemólisis. Post Morten: Muestra de
sangre tomada de vena femoral con fluoruro de sodio al 1%. 20 ml de sangre y 0.8 ml de
fluoruro de sodio al 1%. Los tubos donde se toman las muestras de sangre deben ser
herméticamente tapados para evitar pérdida de sustancias volátiles. Muestras coaguladas o
putrefactas no son aptas para el análisis.
OJO:
La toma de sangre venosa para determinar alcoholemia se recomienda en los siguientes
casos:
1. En ausencia de nistagmus postural, pero
con presencia de otros signos neurológicos y de aliento alcohólico.
2. En sujetos politraumatizados a quienes no sea posible realizar el examen clínico.
2. En sujetos sin aliento alcohólico, pero con
signos clínicos del área neurológica a quienes además, debe tomárseles orina para
investigación de psicofármacos y efectuarles un examen neurológico completo.
3. A criterio del perito médico, ante la duda
en los resultados de la valoración de los signos clínicos.
4. Por solicitud expresa de autoridad
competente.
ROTULACION:
Este procedimiento se utiliza en todas las muestras que se vayan a enviar:
Nombre de la víctima o sospechoso
Sexo
Edad
Fecha de la toma de la muestra
Hora de toma de muestra
Copia o fotocopia del oficio petitorio
No. de la necropsia (si es un cadáver)
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Firma y sello de la autoridad remitente

Identificación del examinado (cédula de ciudadanía o huellas dactilares)
Hora del accidente.
NOTA: En el caso de alcoholemia debe tomarse muestra tanto a la víctima como al

victimario.
El fluoruro de sodio lo provee medicina legal Seccional Ibagué.

Las casas comerciales venden tubos especiales para la toma de la alcoholemia.
OJO:…..
La toma de muestras en medicina legal es competencia del medico legista de turno, el
laboratorio puede ser un apoyo en ciertos procedimientos.
La custodia, embalaje y envío de muestras a medicina legal es competencia y
responsabilidad del médico legista quien realizo el procedimiento.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
COLORACIÓN DE ALBERT
Se realiza a solicitud del médico cuando se sospecha Difteria.

Reloj. Bandeja de coloración. Colorante de Albert.

- Cubra la preparación con el colorante de Albert y déjelo actuar por un minuto.
- Derrame el colorante, tomando la lámina por uno de los extremos o inclinándola hacia
adelante.
- Lave dejando caer agua corriente a baja presión donde no hay extendido.
- Deje secar la placa a temperatura ambiente.
- Lleve las placas al sitio indicado para su lectura microscópica.
NOTA:
Observe al microscopio bacilos de color azul y los gránulos al interior del cuerpo de color
rojo.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
COLORACIÓN DE GRAM
La coloración de GRAM es la más importante en Bacteriología. Adecuadamente realizada

permite en la mayoría de los casos establecer un diagnóstico presuntivo o la orientación
inicial del microorganismo presente en la muestra en estudio.

Reloj. Bandeja de coloración. Solución de cristal violeta.
Gradilla para láminas. Solución Iodo-iodurada de lugol.
Solución de safranina.
Agua.
Alcohol etílico al 95%.
Procedimiento
- Coloque las láminas sobre las varillas de coloración.
- Cubra la preparación con solución de cristal violeta y deje actuar por un minuto.
- Derrame el cristal violeta, tomando la lámina por un lado de los extremos e inclinándola
hacia adelante.
- Lave dejando caer agua corriente a baja presión donde no hay extendido.
- Cubra la preparación con Lugo y deje actuar por un minuto.
- Enjuague con agua corriente a baja presión.
- Decolore con alcohol etílico o alcohol acetona durante tres segundos hasta que
desaparezca el color azul.
- Lave con agua corriente a baja presión.
- Cubra la preparación con solución de safranina y deje actuar por minuto.
- Lave con agua corriente a baja presión.
- Deje secar la placa a temperatura ambiente.
- Lleve las placas al sitio indicado para su observación microscópica.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
CAUSAS DE ERROR EN LA COLORACIÓN GRAM
- Frotis muy gruesos. Se decoloran insuficientemente, el material aparecerá de un color

azul a púrpura.
- Frotis muy delgado. Se decoloran excesivamente y el material aparecerá de color rojo.
- Fijación al calor por la cara de la lámina donde está el material a examinar ocasionando
el deterioro o pérdida del material.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
REMISIÓN DE MUESTRAS PARA MICOLOGIA
La remisión de muestras de piel, uñas y pelo, a un Laboratorio de Micología debe realizarse

colocando las muestras en sobre de papel o cajas de Petri, o enviar en recipientes cerrados,
debido a que la humedad permite que los hongos no patógenos se multipliquen.
El procedimiento de toma de muestras, colocación y cultivos esta descrito en el manual

“Diagnóstico micologico por examen directo”.
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
BIBLIOGRAFIA
VELASQUEZ DE V GLORIA, MD , Normas de Bioseguridad en el laboratorio de

Parasitología.
MATTAR DE NAJLA, MD, ABBOTT, Apuntes sobre Hematología.
OMS-1992, Normas sobre Bioseguridad.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1986 , Manual de procedimientos Química Clínica

y Orinas.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1991 , Manual de Garantía de Calidad.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1987 , Manual de procedimientos -TBC -

LEPRA.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1988, Manual de procedimientos Microbiología

Médica.
HERNANDEZ DE DUQUE MARLENY, BACTERIOLOGA M,S,P., Manual de
procedimientos, el laboratorio en la fase preanálitica.
ORGANIZACION PARAMERICANA DE LA SALUD-1983, Manual de Técnicas básicas

para un laboratorio de salud

Protocolos de Laboratorio

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Protocolos de Laboratorio

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

LABORATORIO

NORMAS DE BIOSEGURIDAD .....................................................................................................................12

Complicaciones de la Venipuntura ............................................................................................................25

Condiciones de la Muestra ............................................................................................................................53

Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas ..........................................................................................79

Reacción Negativa: ................................................................................................................................95

1. Índice Bacilar (IB) ...........................................................................................................................117

Es el conjunto de procedimientos técnicos administrativos que le permiten al

Reducir al máximo los trámites en cada proceso.

Definir un manual de bioseguridad para implantar controles en el área que

Establecer un protocolo de limpieza y desinfección, un manual de toma de

Contar con un protocolo de control de calidad tanto interno como externo en

CARACTERÍSTICAS DEL SERVICIO.

de emergencias, los instructivos que se realizan son los correspondientes al nivel de

El trabajo en el laboratorio clínico se clasifica en tres grandes grupos temáticos.

En cada uno de estos temas, se requiere de numerosas medidas de atención y

Debemos enfatizar que el trabajo en el laboratorio clínico, como cualquier tipo de

PRINCIPALES RAZONES PARA UTILIZAR SERVICIOS DEL

Descubrir en etapas subclínicas.

Ratificar un diagnostico sospechado clínicamente.

Obtener información sobre el pronóstico de una enfermedad.

Establecer un dialogo basado en una sospecha bien definida.

Vigilar un tratamiento o conocer una determinada respuesta terapéutica.

El trabajador de la salud está permanentemente expuesto al riesgo de infectarse con los

- Designe y marque las áreas dedicadas al manejo de muestras.

- No coloque objetos personales (gafas, bolsos, libros) sobre la mesa de trabajo.

Nunca los guantes son un sustituto del lavado de manos.

5. Mantenga el laboratorio limpio y ordenado, evitando la presencia de equipo y material

7. Las agujas destruyalas en el equipo disponible (incinerador) en el laboratorio y

No vuelva a tapar las agujas usadas ni las desacople de las jeringas.

10. Manipulación y Evacuación de Material y Desechos Contaminados.

- Las batas y otras prendas protectoras contaminadas se depositarán en un recipiente

- El material contaminado desechable con sangre, materia fecal y otros instrumentos u

El material de vidrio es el de más uso en el laboratorio y por ello su inadecuado lavado y

- Use equipo personal de protección: delantal, guantes.

- Seleccione el material para ser lavado.

- Derrame los residuos de las muestras y los reactivos antes de lavar.

- Deje el material en remojo.

- Vierta abundante agua.

Lavado del Material en Hematología

La cristalería no debe estar contaminada con detergentes. Su presencia así sea en

Lavado del Material en Química Clínica

Lavado del Material en Parasitología

200 ml. de agua.

Lavado del Material de Orinas

Frasco para la recolección de muestras:

Proceda como en el lavado de material para parasitología.

Otro Material Contaminado

El material contaminado de líquidos y secreciones corporales que se utilicen en los análisis

Lavado del Material en Bacteriología

Control de la Limpieza del Material de Vidrio

Realice el siguiente procedimiento para comprobar si el detergente ha sido eliminado de la

POSITIVO, color púrpura. Indica presencia de detergente.

Preparación de la Mezcla Sulfocrómica

Esterilizar es eliminar de un objeto o una sustancia todas las formas de vida.

La esterilización se logra por medio de:

Preparación del Material

Esterilización por Calor Seco

Esterilice en el horno el material de vidrio y de metal a una temperatura de 170 Grados

Desinfectantes más Usados en Bacteriología

Solución de formaldehído al 5% ( formol ).

Ácido nítrico, agua oxigenada, hipoclorito, permanganato de potasio.

Son germicidas y fungicidas muy eficaces.