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Práctica 13 - Agentes químicos

Microbiología Experimental (Universidad Nacional Autónoma de México)

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Descargado por Mario Rangel (chikito.rangel@gmail.com)
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MICROBIOLOGÍA EXPERIMENTAL

Grupo: 6 Horario: Lunes y Miércoles (13:00 – 16:00) Equipo: 2


Integrantes: Correa García, Víctor Josué
Torres Santander, Fernando

Informe práctico 13: « Agentes químicos»

Las sustancias químicas al igual que otros factores ambientales, tienen un importante efecto en el
desarrollo de los microorganismos, estos pueden ser estimulatorios (en forma de nutrientes), o bien
inhibitorios o destructivos (conocidos como agentes antimicrobianos). El que una sustancia química tenga
un efecto u otro, depende del tipo de microorganismo, de la concentración de la sustancia y de otros
factores ambientales que pueden determinar el aumento o disminución del efecto causado por dicha
sustancia.
(Keywords: Desinfectantes, sanitizantes, quimioterapéuticos, biocidas)

Resultados son suficientemente inofensivos para no


dañar los tejidos animales.
En esta práctica se analizaron las sustancias que Quimioterapéuticos: Sustancia química
perjudican a los microorganismos, causándoles que actúa selectivamente sobre los
lesiones y alteraciones en el equilibrio y microorganismos causantes de las
fisiología celular, ocasionando la muerte de estos infecciones sin dañar a las células del
mismo o bien, la inhibición de su actividad; es hospedero.
decir se analizan los antimicrobianos. Esterilizantes: Agentes químicos que
Este tipo de compuestos, comprende un grupo destruyen todo tipo de microorganismos.
muy heterogéneo de sustancias, sin embargo se
pueden agrupar en diferentes categorías: El efecto antimicrobiano que se evaluó con
 Biocida: Agentes químicos nocivos que los diferentes agentes químicos en este
causan lesiones irreversibles y matan a práctica, se llevó a cabo con la utilización de
los microorganismos. una cepa de Salmonella sp.
 Biostáticos: Agentes químicos nocivos Para llevar a cabo esto, se realizó la
que causan lesiones reversibles y inoculación masiva por medio de la técnica
determinan la inhibición de la actividad, de hisopo, de 7 cajas con agar TSA.
crecimiento y proliferación de los Posteriormente, se colocaron pequeños
microorganismos, sin causar la muerte círculos de papel filtro estéril, impregnados
de los mismos. con las diferentes sustancias químicas. Estos
Con base en el tipo de aplicación por la que se se colocaron en el centro del sector
usan los diferentes antimicrobianos, estos se correspondiente para cada evaluación.
pueden clasificar de la siguiente manera: Una vez realizo lo anterior, las cajas se
Sanitizantes: Sustancias que disminuyen llevaron a incubar a una temperatura de 37ºC
la carga microbiana y se utilizan en una / 24 horas, pasado este tiempo, se realizó la
superficie inerte (tejido no vivo). medición de los halos que se generaron por
Desinfectantes: Sustancias químicas el uso del antimicrobiano. Nuevamente, las
muy toxicas que, aseguran la destrucción cajas se volvieron a incubar por otras 24
de la mayoría de los microorganismos horas más y se realizó una segunda medición
particularmente de las formas del halo, observándose los resultados
vegetativas pero no necesariamente de descritos en la Tabla 1 (Anexo 1).
las formas esporuladas.
Antiséptico: Sustancia química que
destruye o inhiben la actividad de la
mayoría de los microorganismos, y que

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microorganismos para poder determinar si el
Análisis de resultados producto funciona o solamente no actúa
sobre Salmonella sp.(Figura 2)
- Antibiótico natural
En la evaluación de este producto se observó - Microdyn.
que no produce un efecto inhibitorio, sin El efecto inhibitorio de este producto
embargo esto es justificable debido a que el comercial se debe al mecanismo de acción
microorganismo con el que se trabajo fue del cloruro de plata presente. En el caso de la
Salmonella sp., y este agente solo actúa inhibición de Salmonella sp. se vio un efecto
sobre microorganismos relacionados con inhibitorio muy pobre ya que solo se observó
enfermedades respiratorias como S. aureus. un halo de 1 cm. a las 24 horas. Debido a
(Figura 1) esto, este agente químico se categoriza como
un antiséptico. (Figura 2)
- Jabón líquido para manos.
El efecto inhibitorio causado por este - Lysol
producto es muy claro, debido a que Este agente químico, produce ruptura de las
desarrollo halos de 5 cm. a las 24 horas y, membranas celulares debido a su
aun después de 48 horas el halo permanecía composición en sales cuaternarias. Los
del mismo tamaño. Este producto está resultados muestran que este producto ejerce
destinado a la eliminación de una amplia un efecto inhibitorio de nivel medio ya que
variedad de microorganismos, dentro de los permitió la formación de halos de inhibición
cuales se encuentra Salmonella sp., es por de 2.5 cm, sin embargo se considera como
ello que se puede observar un efecto bactericida ya que el efecto de inhibición
inhibitorio muy grande. (Figura 1) sobre Salmonella sp. continuó aun después
de las 48 horas. (figura 3)
- Doradilla
La acción de la doradilla se debe a la - Merthiolate
inhibición de cierto tipo de microorganismos Este producto es considerado un antiséptico
mediante una inhibición enzimática, este de amplio espectro ya que actúa tanto en
efecto solo se ha observado bacterias Gram positivas como en bacterias
significativamente en el microorganismo H. Gram negativas. El caso de Salmonella sp.,
pylori, en el caso de Salmonella sp., no se se observa un efecto bacteriocida ya que
observó algún efecto inhibitorio. (Figura 1) desarrollo un halo de inhibición de 2.5 cm y
este no se modificó aun después de las 48
- Hierbabuena horas. (Figura 3)
En este caso, la hierbabuena mostro un
efecto inhibitorio solo durante las primeras - Propóleos
24 horas, ya que se observó un halo pequeño, El propóleo es un agente químico que ejerce
su mecanismo de acción consiste en afectar efectos inhibitorios sobre algunas bacterias
algunas de las funciones de los Gram positivas, sin embargo al realizar la
microorganismos y causar daño a la pared evaluación del efecto inhibitorio sobre
por medio de la acción de los polifenoles y Salmonella sp. (Gram negativa), se observó
taninos. El efecto observado por tanto es un pequeño halo de inhibición de 0.5 cm a
bacteriostático. (Figura 2) las 24 horas, por lo que podría indicar que
quizá la concentración de este producto era
- Gel antibacterial. muy grande, lo cual puedo ejercer ese
Este producto es un inhibidor de bacterias pequeño efecto. (Figura 3)
Gram negativas, sin embargo al realizar la
evaluación del efecto inhibitorio, no mostró - Isodine
efecto alguno. Por lo tanto, habría que El isodine es un agente químico que actúa
observar si ejerció algún efecto en otros sobre varios tipos de microorganismos, el

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compuesto activo de este producto es el yodo que formo el halo de inhibición mas grande.
el cual forma complejos con aminoácidos y (Figura 6)
ácidos grasos. En Salmonella sp. causó un
efecto inhibitorio bactericida ya que se - Amikacina
desarrollaron halos de inhibición de 1.5 cm, La amikacina es un antibiótico de amplio
los cuales permanecieron aun después de las espectro que inhibe el crecimiento de
48 horas. (Figura 4) bacterias Gram negativas y positivas,
mediante la inhibición de la síntesis de
- Pinol proteínas. En Salmonella sp. causó un efecto
El pinol es un producto que contiene agentes inhibitorio que permaneció aun después de
tensoactivos, este tipo de agente químico actúa las 48 horas, por lo que se considera un
sobre una gran variedad de bacterias entéricas. agente químico bactericida. (Figura 7)
Como era de esperarse, causo la inhibición de
Salmonella sp., sin embargo el efecto solo se - Eritromicina
observó durante las primeras 24 horas, a las 48 La eritomicina es un antibiótico usado en el
horas ya no se tuvo la presencia de un halo. Este tratamiento principalmente de bacterias
producto es del tipo bactericida, aunque en la Gram positivas, sin embargo también causa
práctica no se observó un efecto muy bueno con importantes efectos inhibitorios en bacterias
este microorganismo. (Figura 5) Gram negativas. En el caso de Salmonella
sp., a pesar de que esta bacteria es del tipo
- Enjuague Bucal Gram negativo se observa una buena
Este producto es un agente químico que inhibición del crecimiento, llegando a formar
inhibe bacterias de una amplia variedad y halos de 2.4 cm. aun después de 48 horas.
algunos hongos. En el caso de Salmonella (Figura 7)
sp., se observó que este agente causo la
inhibición del microorganismo formando - Cefoxitina
halos de inhibición de 0.8 cm, y aun después Este agente químico es un antibiótico que
de 48 horas se observó la presencia del halo tiene importantes efectos inhibitorios sobre
solo que un poco más pequeño, debido a microorganismos Gram positivos, debido a
esto, este tipo de agente químico se que afecta la síntesis de la pared bacteriana.
categoriza como un bactericida. (Figura 5) En el caso de Salmonella sp., se observa un
buen efecto inhibitorio debido a que permitió
- Violeta de Genciana la formación de halos de inhibición de 2.8
El cristal violeta se utiliza para inhibir cm, los cuales permanecieron sin
microorganismo Gram positivos, su modificación aun después de 48 horas.
mecanismo consiste en combinarse con los (Figura 7)
ácidos nucleicos de las bacterias debido a
que este colorante es de tipo básico. A pesar - SSI
de esto, en Salmonella sp., causo un efecto La solución salina isotónica al 0.9%, no
inhibitorio, muy probablemente se debe a el causo efectos inhibitorios, debido a que la
exceso de colorante agregado lo cual pudo concentración de sales es muy baja y no
de alguna manera atravesar las membranas afecta el desarrollo de Salmonella sp. (Figura
del microorganismo. (Figura 6) 4)

- Agua Oxigenada - Sin inocular


El poder bactericida del agua oxigenada se Este cuadrante se dejó sin inocular para
debe a que produce radicales libres los supervisar las condiciones de asepsia al
cuales oxidan a los microorganismos. En momento de realizar la práctica, como
Salmonella sp., causo un efecto inhibitorio resultado no se observó ningún crecimiento,
muy grande, siendo este el agente químico por lo que podríamos decir que el

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procedimiento se realizó con las condiciones Belkis. Bacterias patógenas en
de asepsia óptimas. (Figura 4) infecciones del tracto respiratorio.
Servicio Autónomo Hospital
- Tinción de Gram. Universitario “Antonio Patricio de
El resultado de la tinción de Gram indica que Alcalá”. Cumaná, Estado Sucre.
el microorganismo Salmonella sp., es un Kasmera v.33 n.1 Maracaibo jun. 2005.
bacilo Gram negativo. (Figura 8)  Jorge Araujo Díaz; Ramsés Salas
Asencios. Actividad Antimicrobiana de
Plantas. REVISTA CIENTÍFICA
(2008) de la Universidad Científica del
Sur, Lima Perú.
 E. Vega-Portocarrero y A. López-Malo,
Agentes microbianos presentes en
especies y hierbas. Departamento de
Ingeniería de Química y Alimentos,
Universidad de las Américas de Pueblas,
San Andrés Cholula, Pue., México.
Temas Selectos de Ingeniería de
Alimentos 3 – 1 (2009): 85-95.
Figura 8. Resultados de la Tincion de Gram  Torno Maicas Vicente, Julián Rochina
de una cepa de Salmonella sp. (1000x) Ivan, Antiséptico, Fundamentos de uso
en la práctica clínica. Consultado en
Conclusiones http://www.uv.es/curafisiologica/docum
Los agentes químicos son utilizados de manera entos/publicaciones/muestra_web_antise
muy frecuente en cualquier ámbito de la vida, pticos.pdf, el 20 de Noviembre del 2015
por lo que es importante conocer la forma en la  Negroni Marta, Microbiología
que actúan y los efectos que causan para asi Estomatología, fundamentos y práctica
poder obtener buenos resultados al momento de clínica. 2da Edición, Edit.
requerir el control de microorganismos. En el Panamericana, Argentina (2009). pp:
laboratorio de microbiología representan un 109-118
componente importante para poder llevar a cabo
los distintos procedimientos que se deben
realizar, ya que cuando se trabaja en este lugar,
se requiere de condiciones de trabajo casi
inocuos para certificar que los procedimientos se
llevan a cabo eficazmente.

Bibliografía

 Ramírez, R., Luna, B., et. all. Manual de


Prácticas de Microbiología General, 6ª
ed.; Universidad Nacional Autónoma de
México: México, 2013; pp. 291-292.
 Tortora G., et all. Introducción a la
Microbiología, 9na ed.; Editorial
Panamericana: Argentina, 2007; pp. 144
 Luis Redondo Márquez, La equinacea
purpurea. Rev. Cir. Traumatol. Buco-
Maxilo-fac., Camaragibe v.7, n.2, p. 37 -
54, abr./jun. 2007.
 Guzmán L., Militza1; Albarado I.,
Luzmila1; Betancourt, José1 y Medina,

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Anexo 1. Resultados del efecto antimicrobiano de los diferentes agentes químicos.

Halo de Halo de
Sustancia Composición Modo de Acción Grupo Microbiano sobre el Efecto que se
Inhibición a Inhibición a
Empleada Química (Estructura que afecta) que actúa observa
las 24 horas las 48 horas
No se observa
Aumenta la concentración
Inhibe bacterias presentes en algún efecto con
de glóbulos blancos,
el tracto respiratorio como S. respecto a los
Antibiótico Echinacea contiene arabinogalactanos
pyogenes o S. pneumoniae, 0 cm 0 cm resultados, sin
Natural Purpurea que se unen a la membrana
aunque su principal blanco es embargo
bacteriana para facilitar la
inhibir el virus H. Influenzae teóricamente es un
fagocitosis
Quimioterapéutico
El detergente disminuye la
tensión superficial y
emulsiona partículas
liposolubles.
Inhibe bacterias como
Jabón Líquido El Triclosan inhibe el Bactericida,
Detergente estafilococos, estreptococos,
para manos crecimiento de bacterias y 5 cm 5 cm Bacteriostático y
Triclosan E. coli, Salmonella sp. y
Marca Dial hongos debido a que Fungistático
algunas levaduras.
interfiere con la síntesis de
ácidos grasos necesarios
para la construcción de la
membrana
Se considera que la acción
de los fenoles se debe a la
inhibición enzimática No se observó
posiblemente por acción algún efecto con
Ácidos
sobre los grupos respecto a los
Doradilla Fenólicos Inhibe H. pylori 0 cm 0 cm
sulfhidrílos de sus resultado, sin
Flavonoides
aminoácidos de cisteína o embargo es un
por medio de reacciones Quimioterapéutico
más inespecíficas con
proteínas bacterianas.
Mentol La gran variedad de aceites,
Salmonella Typhimurium y
Hierbabuena Flavonoides flavonoides y taninos, 0.8 cm 0 cm Biostático
Helicobacter pylori
Taninos causa daño en la pared

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Polifenoles celular, desordenes en la
membrana citoplasmática,
agotamiento de la fuerza
protón motriz, coagulación
de los contenidos celulares
y alteraciones en el
transporte activo.
El alcohol etílico disuelve
No se observa
los lípidos de las
algún efecto
Gel membranas de las bacterias Inhibe bacterias Gram
Alcohol etílico 0 cm 0 cm antimicrobiano.
Antibacterial y produce la negativas
Teóricamente es
desnaturalización de
Bactericida
bacterias.
Afecta pared celular,
Staphylococcus aureus,
mitocondrias y material
Cloruro de Pseudomonas
Microdyn genético debido a que los 1 cm 0 cm Antiséptico
Plata aeruginosa y Streptococcus
iones Ag+ precipitan
hemolyticus
proteínas y se une al DNA
Provocan ruptura de la
Trietilenglicol
membrana, inactivan las
Dimetil bencil Elimina virus, hongos y
enzimas productoras de Bactericida,
Lysol amonio alquil bacterias de variedades 2.5 cm 2.5 cm
energía y desnaturalizan las fungicidas
sacarinato diversas.
proteínas esenciales de las
O-fenilfenol
bacterias
Actúa principalmente sobre
Su efecto se debe a una bacterias Gram positivas, Bacteriostático,
Tiosalicilato de
Merthiolate inhibición enzimática con aunque también sobre 2.5 cm 2.5 cm bactericida y
etilmercúrico
grupos sulfhidrilo algunas Gram negativas y Antiséptico
hongos
Inhibición de la división
Flavonoides Bacterias Gram positivas
Propóleo celular y desorganización 0.5 cm 0 cm Bacteriostático
Resinas como M. luteus y S. aureus
del citoplasma.
Altera la síntesis proteica y
Bacterias tanto Gram
las membranas celulares,
positivas como Gram Desinfectante y
Isodine Yodo por la formación de 1.5 cm 1.5 cm
negativas, algunos hongos y Antiséptico
complejos con los
protozoarios
aminoácidos y los ácidos

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grasos insaturados
Genera una disminución en
Elimina principalmente
Aceite de pino la tensión superficial
bacterias que causan
Detercon debido a que posee
enfermedades Bactericida y
Pinol potasico tensoactivos no ionicos, lo 1.4 cm 0 cm
gastrointestinales como Desinfectante
Nonil fenol que genera la
Salmonella choleraesuis, E.
etoxilado emulsificación de
coli y Staphylococcus aureus
compuesto lipofílicos
El alcohol etílico disuelve
los lípidos de las
membranas de las bacterias
Alcohol Etílico y produce la
Aceites desnaturalización de Actúa sobre Bacterias Gram
Enjuague
Esenciales bacterias. negativas, Gram positivas y 0.8 cm 0.7 cm Antiséptico
Bucal
Cloruro de El cloruro de cetilpiridinio algunos hongos
cetilpiridinio genera un desequilibrio en
la regulación osmótica
debido a que es un
surfactante catiónico.
Debido a que este es un
colorante básico, se
combina con constituyentes
ácidos de la célula
Violeta de Cloruro de
bacteriana esenciales para Bacterias Gram positivas 2.5 cm 2.4 cm Antiséptico
Genciana metilrosanilinio
la vida, como los grupos
ácidos de los ácidos
nucleicos, en especial el
ácido fosfórico.
Produccion de iones
Inhibe bacterias Gram Bactericida,
Agua Peróxido de hidroxilo y radicales libres
positivas y negativas, además 4.5 cm 4.5 cm Bacteriostático y
Oxigenada Hidrogeno que oxida componentes de
de levaduras Antiséptico
la célula bacteriana
Se une a la subunidad S30
Inhibe preferentemente
del ribosoma bacteriano,
Amikacina bacterias Gram negativas, y Quimioterapéutico
Amikacina impidiendo la transcripción 1.5 cm 0.5 cm
(120mcg/disco) muy poco bacterias Gram y bactericida
del DNA bacteriano y, por
positivas
tanto, la síntesis de

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proteínas en los
microorganismos
susceptibles
Se une a la subunidad 50S Su actividad frente a
Eritromicina del ribosoma bacteriano bacterias gram-positivas es Bacteriostático y
Eritromicina 2.4 cm 2.4 cm
(15mcg/disco) inhibiendo la síntesis de mayor que frente a las gram- Quimioterapéutico
proteínas. negativas
Inhibe a bacterias Gram
Cefoxitina Inhibe la síntesis de la Quimioterapéutico
Cefoxitina negativas y bacterias Gram 2.8 cm 2.8 cm
(30mcg/disco) pared celular bacteriana y Bactericida
positivas
La concentración de NaCl No presento algún
SSI NaCl no es lo suficiente para Ninguno 0 cm 0 cm efecto
inhibir microorganismos antimicrobiano
No se observa
Sin inocular No hay No hay inhibición No hay inhibición 0 cm 0 cm algún efecto
antimicrobiano

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Anexo 2. Halos de inhibición formados por los distintos agentes químicos

Figura 1. Resultados obtenidos para el antibiótico


natural (sector 1), el jabón líquido para manos
(sector 2) y la infusión de doradilla (sector 3)

Figura 2. Resultados obtenidos para la hierbabuena


(sector 4), el gel antibacterial (sector 5) y el cloruro
de plata (sector 6) después de 48 horas.

Figura 3. Resultados obtenidos para el Lysol


(sector 7), Merthiolate (sector 8) y el propóleo
(sector 9) después de 48 horas.

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Figura 4. Resultados obtenidos para el Isodine (sector


10), solución salina (sector derecho superior) y el
sector sin inocular después de 48 horas.

Figura 5. Resultados obtenidos para el Pinol


(sector 11) y Enjuague bucal (sector 12) después de
48 horas.

Figura 6. Resultados obtenidos para el violeta de


genciana (sector 13) y Agua Oxigenada (sector
14) después de 48 horas.

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Figura 7. Resultados obtenidos para Amikacina


(sector inferior izquierdo), Eritromicina (sector
superior derecho) y Cefoxitina (sector medio
izquierdo) después de 48 horas.

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