CUESTIONARIO Nº9

a. ¿Por qué se usa buffer de lisis de eritrocitos y la DNAsa?

El uso de buffer de lisis de eritrocitos, la sangre presenta una fase sólida, que
comprende eritrocitos, linfocitos y plaquetas; así como también una fase
líquida, representada por el plasma sanguíneo. Los eritrocitos pueden
separarse del resto de la sangre mediante un buffer de lisis (NH 4Cl, KHCO3,
EDTA) para obtener ARN a partir de células blancas y hacer un análisis de
polimorfismos.

El uso de DNAsa en genética estas enzimas son usadas para cortar residuos
en los extremos de las moléculas de ADN (exo- desoxirribonucleasa, un tipo de
exonucleasa), otras cortan en cualquier punto de la cadena (endo-
dexorribonucleasa, un subconjunto de endonucleasas)1.

b. ¿Qué cuidados se debe tener al manipular ARN?

Las RNAsas (enzimas que rompen ARN) pueden ser introducidas

accidentalmente durante el procedimiento de manipulación del ARN para
obtener la segunda cadena o cadena complementaria, por lo cual deben
tenerse en cuenta los siguientes aspectos cuando se trabaja con ARN:

 Siempre deben utilizarse guantes de látex, ya que la piel contiene

algunas bacterias que poseen estas enzimas y contaminan el ARN a
extraer.
 Utilizar pipetas y micropipetas estériles, reservadas para trabajo de
ARN, evitando así contaminaciones cruzadas.
 Utilizar material tratado con inhibidores de RNAsas (libre de RNAsas).
 Equilibrar los tubos previos a la centrifugación - Tapar o sellar
correctamente los tubos durante la centrifugación y durante la
incubación para evitar la evaporación2,3.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Novachem. Solución buffer. Lisis células sangre roja. Disponible en:

https://cientificasenna.com/producto/buffers-para-lisis.
2. Morfoudec. Desoxirribonucleasa. 2014. Disponible en:
http://morfoudec.blogspot.com/2014/04/dnasa.html.
3. Biología Celular y Molecular. Extracción de ARN. España.2013.
pág. 11-12. Disponible
en:https://biologiamolecularinteractiva.files.wordpress.com/2013/01/labor
atorio-no-4-extraccion-de-arn.pdf.