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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD


Profesores:
M en C Aura Hernández Olicón
M en C Elizabeth Jiménez Gutierrez
M en C Hilda Pérez Cervantes
Dr. Luis R. Carreno Durón

Autor: Suarez Gómez Alexis Gabriel


Práctica: Material de calibración y material para control de
calidad.
Grupo: 5QM2
Sección: 4
Equipo: 10

Ciclo escolar 2019


Fecha de entrega
Ciudad de México, 29 de febrero de 2018
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INTRODUCCIÓN
Existen varios métodos para determinar un mesurado de interés. En el argot de la química
menciona que se utilizan dos métodos: el método definitivo y el método de referencia .Se
considera que el método definitivo es de difícil accesibilidad, debido a que utiliza
metodologías caras en cuanto a equipos y reactivos y con frecuencia requiere de analistas
especializados .Por ello, en la determinación analítica rutinaria de un mensurado se utilizan
metodologías de mayor accesibilidad de reactivos y equipos, además de ser fáciles de
realizar por el analista, sin embargo, antes de ser utilizadas se deben de comparar con el
método de referencia, el cual se considera de bastante exactitud.
En el laboratorio, es de interés evitar desviaciones analíticas al determinar un mensurado;
para asegurar los resultados es necesario verificar el buen funcionamiento de los métodos,
realizando la calibración del método analítico con el uso de especímenes de una sustancia
de concentración conocida, relacionado de forma matemática la lectura analítica con el
valor nominal de la sustancia que se mide .Asimismo, la preparación de los materiales de
calibración debe hacerse con el mayor cuidado posible, ya que la exactitud del calibrador
afecta directamente a la exactitud de los resultados.
Para la realización de una metodología química, se requiere de materiales primarios que
son utilizados para la preparación de estándares a partir de los cuales se pueden preparar
soluciones de concentraciones conocidas llamadas calibradores (estándar de calibración)
que contengan una cantidad conocida del componente que se analiza, los cuales se utilizan
en todas las medidas cuantitativas.

OBJETIVOS
 Realizar una corrida analítica completa para la determinación de un mensurado de
interés controlando el proceso analítico y la calidad de los resultados, a través de
comprender la diferencia entre calibradores y controles.
 Establecer la importancia del uso de los calibradores y controles para validar y vigilar
el proceso analítico.

FUNDAMENTO
Haciendo referencia a los materiales de control son preparaciones utilizadas para evaluar
la exactitud y la precisión de substancias empleadas en las mediciones de diversos
componentes en fluidos, secreciones, excresiones o tejidos corporales. Estos se utilizan
para la comparación de métodos, sin embargo tienen un alto grado de sensibilidad dado a
que los resultados pueden verse influenciados por la manipulación, los procedimientos en
el laboratorio.
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RESULTADOS

BITÁCORA DE RESULTADOS FECHA: 10 de abril de 2018


Material de calibración y material para control de calidad
Resultados y observaciones
Corrida analítica
Determinación de: Glucosa sérica Método: Glucosa oxidasa
Unidades: mg/dl
Blanco utilizado: Solución de glucosa oxidasa
λ seleccionada: 510 nm

Datos del estándar:


Estándar utilizado: Estándar de glucosa

Concentración
Concentración
Absorbancia del estándar
Estándar del estándar %error
obtenida calculada
(mg/dL)
(mg/dL)
1 50 0.163 49.99 -0.02
2 100 0.326 99.99 -0.01
3 200 0.631 193.55 -3.22
4 300 0.932 285.88 -4.70
5 400 1.191 365.32 -8.67
6 700 1.645 504.58 -27.91
Linealidad: Si hay linealidad.

Calculos para la obtención de la concentración calculada del estándar en mg/dL

Fórmula para calcular las concentraciones de las diluciones:


Conc. de tubo[100]
Factor =
A100
100
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = = 306.74
0.326
Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas
Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia
[ ] = 306.74 ∗ 0.163 = 49.99
Tomando en cuenta los valores observados se determinó mediante la siguiente ecuación
el porciento de error:

valor observado- valor real 49.99- 50


%E= = x100= -0.02%
valor real 50
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Datos del suero control.


Suero Conc. Intervalos Absorbancia Conc. del Conc. del Conc. del
control del mg/dL obtenida estándar estándar estándar
suero calculada calculada calculada
mg/dL ec recta factor interpolar
mg/dL mg/dL mg/dL
Normal 238-324 0.245 72 75.15 70
Patológico 95.1-129 0.761 244 233.42 235
Ecuación de reacta: y=a+bx
𝑦 = 0.003𝑥 + 0.029
Ecuación empírica para calcular las concentraciones
𝑦−𝑎
𝑥=
𝑏
0.245 − 0.029
𝑥= = 72
0.003
Factor utilizado: 306.74 mg/dL
100
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = = 306.74
0.326
Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas
Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia
[ ] = 306.74 ∗ 0.245 = 75.15

Datos de las muestras:


Conc. Obtenida de la muestra

Muestra Ecuación Factor


Absorbancia Curva tipo
problema de la recta mg/dL
(interpolado)
mg/dL mg/dL

M3 0.745 240 238.66 228.66

Características de la muestra: se observó que el suero presentaba una coloración muy


amarillenta .
Ecuación de reacta: y=a+bx
𝑦 = 0.003𝑥 + 0.029
Ecuación empírica para calcular las concentraciones
𝑦−𝑎
𝑥=
𝑏
0.745−0.029
𝑥 = 0.003 =238.66
Factor utilizado: 306.74 mg/dL
100
𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = = 306.74
0.326
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Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas


Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia
[ ] = 306.74 ∗ 0.745 = 49.99
Método con mayor error:
Método con menor error:
Método ideal para calcular la concentración de las muestras:
Identificaciòn de puntos críticos del Acciones correctivas
proceso
 Errores en la toma de volúmenes.  Mejorar el trabajo experimental.
 Falta de atención de mezclar el
reactivo antes de usar.
Acciones preventivas para los procedimientos:
Dado a ser una simulación de trabajo con una reacción tipo colorimétrica, hay que tener
en cuenta que para hacer una corrida analítica todos nuestros instrumentos deben estar
calibrados para la obtención confiable de resultados.
Importancia del uso de los materiales de control
Calibradores Controles
Sirve para construir curva tipo Sirve como apoyo para saber como estoy
trabajando con muestra.
Diferencias entre los materiales de control
Calibradores Controles
Ayuda a conocer la linealidad Valida funcionamiento del sistema
analítico

2
1.8
1.6
1.4
Absorbncia

1.2
1
0.8
y = 0.0023x + 0.1438
0.6 R² = 0.9677
0.4
0.2
0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
Conc. del estándar mg/dL

Figura 1. Curva tipo para la determinación de la concentración de glucosa sérica por


el método de glucosa oxidasa en un intervalo de concentraciones de 50 a 700 mg/dL.
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1.4

1.2

1
Absorbancia

0.8

0.6

0.4 y = 0.003x + 0.029


R² = 0.9986
0.2

0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450
Conc. del estándar mg/dL

Figura 2. Curva tipo ajustada para la determinación de la concentración de glucosa


sérica por el método de glucosa oxidasa en un intervalo de concentraciones de 50 a
400 mg/dL.

400
Concentración del estándar calculada

350

300

250
(mg/dL)

200

150
y = 0.905x + 8.9032
100 R² = 0.9986

50

0
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450
Concentración del estándar (mg/dL)

Figura 3. Verificación de la linealidad considerando un intervalo de concentraciones


de 50 a 400 mg/dL.
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DISCUSIÓN
Con respecto a la primer experiencia con una simulación de trabajo con una reacción tipo
colorimétrica al hacer una corrida analítica desde estándares, suero control y muestra es
necesario asegurar la linealidad mediante una curva tipo, para ello se midieron las
absorbancias de los estándares obteniendo una curva tipo para la determinación de la
concentración de glucosa sérica por el método de glucosa oxidasa al manejarlo en un
intervalo de concentraciones de 50 a 700 mg, se observó que el coeficiente de correlación
se alejaba del valor esperado para tener una linealidad por ello se modificó el intervalo de
trabajo como se muestra en la figura 2 usando un intervalo de concentraciones de 50 a 400
mg/dL, teniendo una curva con un ángulo aproximado de 45 grados y un coeficiente de
correlación cercano a uno por lo que podríamos inferir que se cumple con la linealidad, sin
embargo la misma se verificó con la figura 3 considerando un intervalo de concentraciones
de 50 a 400 comparando las concentraciones estándar y las concentraciones calculadas,
se comprueba que hay una linealidad dado al valor del coeficiente de correlación que es
cercano a 1 con una diferencia de 0.0014.
Haciendo referencia a los valores de concentración de los controles obtenidos por distintos
métodos: interpolación, multiplicación por factor y a partir de la ecuación de la recta, cabe
mencionar que fue apartir del último que dio valores más acertados acercándose más al
intervalo de concentraciones del suero control patológico obteniendo experimentalmente.
Sin embargo cabe mencionar que ninguna de las concentraciones entran en el intervalo de
los sueros por lo tanto no se puede reportar el resultado y por lo tanto no se valida el
resultado.

CONCLUSIONES

 La curva tipo cumple con la ley de Bouger-Beer.


 No se puede reportar el resultado, ya que los controles no se encuentran dentro
del intervalo y por lo tanto no se valida el resultado.
PREGUNTAS EXTRA
Fundamento del método de la glucosa oxidasa
La glucosa se determina después de una oxidación enzimática en presencia de glucosa
oxidasa. Le peróxido de hidrógeno formado reacciona, catalizado por la peroxidasa, con
fenol y 4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina rojo-violeta.
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La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peróxido


de hidrógeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxígeno,
fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa presente en
la muestra ensayada.
r y r2.
De manera general la diferencia entre los coeficientes de correlación lineal (r) y el de
determinaciòn (r2), radica en que le primero mide el grado de relación que hay entre dos
variables, mientras que la segunda corresponde al porcentaje de variación de la variable
de respuesta

REFERENCIAS

 Arderiu Fuentes X., Lacambra Castiñeiras M. J., Compaño Queralto M. J.,


Bioquímica clínica y patología molecular, Vol. I., Ed. Reverte, ed. 2a, Barcelona,
1998.
 Archivo PDF, Randox: insertos de laboratorio, disponible en:
http://sistemainterno.com/web/wp-
content/themes/aaaclientesflash/gaamsa2011/pdf/MANUAL_QC_2013.pdf

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