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TEMA

3. TUBOS Y ANTICOAGULANTES

ANTICOAGULANTES

− Son sustancias que evitan la coagulación de la sangre una vez está fuera del cuerpo à estudio de la sangre
total (hematimetría) o el plasma (coagulación) requiere la utilización de anticoagulantes.

(Suero à se emplea para los estudios bioquímicos habituales y el coágulo se puede utilizar para investigar la
presencia de células en el LES).

− Anticoagulante ideal à características:

o No alterar el volumen de los eritrocitos.
o No producir hemólisis.
o No alterar la morfología de los leucocitos.
o Evitar la agregación de las plaquetas.

− Normalmente los tubos vienen con una línea que indica la cantidad de sangre que hay que adicionar:
o Exceso de anticoagulante à provoca malformaciones leucocitarias y retracción eritrocitaria ( ↓ HTO
y ↑ CHCM).
o Déficit de anticoagulante à provoca una insuficiente coagulación y formación de microcoágulos
(alteran los resultados).

1. EDTA (eltilendiaminotetraacético).

− Efecto à quelante de Ca2+ (lo fija pero no lo precipita).

− Usos à HEMATIMETRÍA (recuentos celulares y parámetros hematológicos).

- Sal sódica à EDTA-Na2.
− Forma de administración
- Sal potásica à EDTA-K2 y EDTA-K3.

− Concentración à1,5-2,2 mg/mL sangre.

− Las sales de potasio son las más recomendadas que las de sodio por su mayor solubilidad en la sangre:

o EDTA-K3:

§ Se usa en forma líquida à puede ejercer algún efecto de dilución sobre la sangre total.
§ A determinada concentración disminuye el tamaño de los GR (especialmente a partir de las
2 horas tras extracción).
§ Puede inducir agregación plaquetaria in vitro à pseudotrombopenia cuando se realiza
recuento en métodos electrónicos (fenómeno denominado pseudotrombopenia por EDTA).
Ante esta situación se debe:
• Determinación de plaquetas en el tubo de citrato, si lo tenemos en el laboratorio.
• Al resultado de plaquetas obtenido del autoanalizador, le sumaremos un 10%.
• Revisión microscópica, con recuento manual de plaquetas.

o EDTA-K2 à recomendado por el ICSH para la hematimetría.

§ Se usa en forma sólida à no ejerce ningún efecto de dilución sobre la sangre entera.
§ Respeta morfología eritrocitaria y leucocitaria permitiendo 2 horas de demora en la
realización de la extensión tras la extracción.

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§ Asegura conservación de las células durante 24 horas a 4ºC.
§ Inhibe la aglutinación de las plaquetas à permite recuento semicuantitativo en extensión.

EDTA-K3 provoca mayor contracción de GR y produce un mayor aumento en el volumen de células a medir,
además, por ser líquido, provoca la dilución de la muestra.
2. Citrato.

− Efecto à quelante de Ca2+ (lo precipita).

- Determinación de la VSG à proporción 1:4.
− Usos
- COAGULACIÓN à proporción 1:9.

− Forma de administración à solución de citrato trisódico (sal de sodio). Líquido.

− Concentración à 3,8% ó 3,2%.

3. Oxalato.

− Efecto à quelante de Ca2+ (lo precipita).

- Sal amónica (oxalato amónico) y sal potásica (oxalato potásico) à mezcla
− Forma de administración Wintrobe (se suministra en polvos en proporción 3 a 2).

- Sal sódica à oxalato sódico 0,1M.

- Mezcla Wintrobe à HEMATIMETRÍA (sustituido actualmente por EDTA).
− Usos y concentración 2mg mezcla/mL sangre

- Oxalato sódico à HEMOSTASIA. Proporción 1:4 (sustituido actualmente por
citrato).
4. Heparina.

− Efecto à inhibe el paso de protrombina a trombina y por tanto el paso de fibrinógeno a fibrina e impide
la agregación plaquetaria (anticoagulante fisiológico).

− Usos à para MAYORÍA DE PRUEBAS BIQUÍMICAS EN PLASMA y FRAGILIDAD OSMÓTICA.

- Sal de sodio o potasio à heparina sódica.
− Forma de administración - Sal de amonio.
(forma sólida o líquida) - Sal de litio à heparina de litio (pruebas bioquímicas en urgencias).

− Concentración à 15-20 UI/mL sangre (1 mg heparina en polvo equivale a 125 UI).

− Ventajas à interfiere muy poco en los parámetros bioquímicos.

− Desventajas:
o Si no se agita rápidamente tras la mezcla con sangre se forman microcoágulos.
o Coloración azulada en el fondo de las extensiones.
o Desaconsejado para este tipo de análisis hematológico, ya que favorece la agregación de
plaquetas (in vivo) y conserva peor la morfología celular.

5. Fluoruro.

− Efecto à inhibe la enolasa (glucolisis). Se usa combinado con oxalato potásico o EDTA-K para obtener
plasma. Además, es quelante de calcio (tiene poca acción anticoagulante).
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− Usos à para CONSERVACIÓN DE MUESTRAS SANGUÍNEAS, GLUCEMIA EN MUESTRAS QUE SE VAN A
RETRASAR y DETERMINACIÓN DE LACTATO Y ETANOL.

− Forma de administración à sal de sodio (fluoruro sódico).

6. Iodoacetato:

− Efecto à reacciona con los grupos –SH de las enzimas que tienen tales grupos en sus residuos de cisteína.
Inhibe la gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (glucolisis). También inhibe la creatin-kinasa.

− Usos à para CONSERVACIÓN DE MUESTRAS SANGUÍNEAS.

TUBOS DE EXTRACCIÓNSANGUÍNEA

− Características
- Plástico (polietilen ftalato (PET)).
o Material
- Vidrio.

o Existen diferentes tamaños.
o Están pre-esterilizados y contienen vacío.
o Pueden ser siliconados à evitan la lisis de la muestra.
o Pueden contener activadores à facilitan y acelera la retracción del coágulo.
o Pueden contener gel o gránulos separadores à facilitan la separación del suero y el coágulo tras la
centrifugación.

− Tipos de tubos à dependiendo de las peticiones analíticas solicitadas.

1. Tubo seco à para determinaciones bioquímicas, serología y banco de sangre. TAPÓN
ROJO/DORADO y MARRÓN.

§ Sin anticoagulante à se obtiene el suero tras centrifugación.

- Activadores de la coagulación.
§ Pueden contener (no obligatoriamente)
- Geles o gránulos separadores del coágulo.

2. Tubo con EDTA à para hematimetría, banco de sangre y hemoparásitos. TAPÓN LAVANDA/ROSA.

§ Anticoagulante à EDTA-K2/K3 (se utiliza sangre entera).

3. Tubo con citrato à para pruebas de coagulación. TAPÓN AZUL CELESTE.

§ Anticoagulante à citrato trisódico (se utiliza el plasma tras centrifugación).

• Viene una cantidad prefijada para mezclarse con un volumen determinado de
sangre (1 parte de citrato y 9 partes de sangre).

4. Tubo con citrato à para VSG. TAPÓN NEGRO.

§ Anticoagulante à citrato trisódico (se utiliza sangre entera).

• La concentración es distinta que el tubo de coagulación (1 parte de citrato y 4
partes de sangre).

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5. Tubo con heparina à para determinaciones bioquímicas. TAPÓN VERDE.

§ Anticoagulante à heparina de litio (se utiliza plasma tras centrifugación).

§ Pueden contener (no obligatoriamente) gel separador del coágulo.

− Código internacional de colores à el color del tapón identifica el tipo de sustancia que contiene el tubo.

o Tapón rojo/oro à sin anticoagulantes. Se utiliza para determinaciones bioquímicas, serológicas y
banco de sangre en suero.

o Tapón lavanda à contiene EDTA-K2/K3. Se utiliza para hematimetría (recuentos celulares y
parámetros hematológicos) y banco de sangre en sangre entera.

o Tapón azul celeste à contiene citrato trisódico (proporción 1:9). Se utiliza para pruebas de
coagulación en plasma.

o Tapón negro à contiene citrato trisódico (proporción 1:4). Se utiliza para determinar la VSG en
sangre entera.

o Tapón verde à contiene heparina. Se utiliza para pruebas bioquímicas en plasma y otras.

o Tapón gris à contiene fluoruro. Se utiliza para determinación de glucosa en muestras que se va a
retrasar el análisis en plasma.

















ORDEN DE LLENADO DE LOS TUBOS à para evitar errores por la contaminación cruzada de los aditivos.














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PREGUNTAS EXÁMENES TEMA 3. TUBOS Y ANTICOAGULANTES
1. Si queremos obtener plasma de una muestra de sangre, el tubo adecuado para la extracción de la misma
deberá llevar:
a) Nada.
b) Suero salino.
c) Un anticoagulante.
d) Un gel separador.

2. Con respecto a las muestras del hemograma, señale lo INCORRECTO:


a) Invertir el tubo manualmente unas 8-10 veces antes de procesar.
b) Son válidos refrigerados a 4ºC durante 24 horas.
c) Deben agitarse fuertemente antes de ser procesados.
d) No pueden contener coágulos.

3. De entre los siguientes anticoagulantes, uno es de elección para la determinación de los parámetros
hematológicos básicos:
a) Heparina.
b) Mezcla Wintrobe.
c) EDTA K3.
d) Citrato sódico.

4. ¿De qué elemento, de los que a continuación se citan, se trata de medir, si recomendamos como
anticoagulante el fluoruro sódico?
a) Aminoácidos.
b) Hierro.
c) Enzimas.
d) Glucosa.
e) Urea.

5. ¿Cuál de los siguientes tipos de muestras consideras el más indicado para la determinación de glucosa en
cualquier circunstancia?
a) Plasma con heparina de litio.
b) Suero en tubo con gel separador.
c) Plasma con EDTA.
d) Plasma con oxalato-fluoruro.

6. Para el hemograma el anticoagulante de elección es:


a) La heparina.
b) El citrato sódico.
c) EDTA como sal sódica.
d) EDTA como sal potásica.

7. Señalar la afirmación correcta en la comparación entre el iodoacetato y el fluoruro en la utilización como


estabilizante de las muestras sanguíneas:
a) El fluoruro inhibe la glucolisis pero el iodoacetato no.
b) El iodoacetato inhibe la ureasa y por tanto no es útil para determinar urea.
c) El fluoruro no es apto para la determinación de lactato ni etanol.
d) El iodoacetato inhibe la actividad de la creatinkinasa.

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8. Existen diversas formas para evitar la coagulación de la sangre y permitir su examen. El tratamiento de la
muestra con anticoagulantes es uno de los utilizados. Indicar el que no está relacionado con el calcio.
a) Oxalato doble.
b) Heparina.
c) EDTA.
d) Citrato sódico.

9. En relación al orden de llenado en extracción de muestras de sangre ¿qué tubo será el último en llenar con el
fin de evitar la contaminación de los anteriores?
a) Tubo de hemograma.
b) Tubo de bioquímica.
c) Tubo de coagulación.
d) Tubo VSG.

10. El EDTA produce su efecto anticoagulante por el siguiente mecanismo:


a) Es un quelante del calcio.
b) Inhibe el paso de protrombina a trombina.
c) Interfiere en el proceso de ionización del calcio.
d) Diluye la sangre.

11. Los anticoagulantes empleados en la obtención de plasma basan su acción en la combinación con el calcio
excepto:
a) El fluoruro sódico, que además inhibe la glucolisis.
b) El oxalato potásico.
c) La heparina, que inhibe la protrombina, trombina y agregación plaquetar.
d) Iodoacetato, que además de inhibir la glucolisis evita la ligera hemólisis que produce el fluoruro sódico.

12. Los tapones con tubos de vacío están codificados con colores, existiendo una relación entre el color del
tapón y la sustancia añadida. Para el color rojo de tapón, le corresponde la sustancia:
a) Heparina.
b) Fluoruro.
c) Ninguno.
d) EDTA.

13. El EDTA y el citrato sódico se usan en el laboratorio de hematología:


a) Como desinfectantes.
b) Como agentes de limpieza.
c) Como antiagregantes plaquetarios.
d) Como anticoagulantes.

14. En ocasiones, el anticoagulante EDTA tripotásico plantea un inconveniente en algunos pacientes


produciéndoles una pseudotrombopenia, denominado fenómenos EDTA. ¿Qué no se debe hacer ante la
sospechade éste para descartarlo?
a) Determinación de plaquetas en el tubo de citrato, si lo tenemos en el laboratorio.
b) Al resultado de plaquetas obtenido del autoanalizador, le sumaremos un 10%.
c) Revisión microscópica, con recuento manual de plaquetas.
d) Centrifugar la muestra del tubo de citrato para determinación de plaquetas.

15. Señale cuál es el anticoagulante usado para la realización de los recuentos celulares hematológicos:
a) Heparina.
b) EDTA.
c) Citrato.
d) Oxalato.

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16. El anticoagulante que se utiliza preferentemente en los estudios bioquímicos procedentes de urgencias es:
a) Heparina de litio.
b) EDTA.
c) Citrato trisódico.
d) Heparina sódica.

17. De los siguientes tubos, ¿cuál es más adecuado para recoger una muestra de sangre en la que queremos
determinar el lactato?
a) De tapón rojo.
b) De tapón azul.
c) De tapón gris.
d) De tapón amarillo.

18. Para la determinación de un hemograma urgente, ¿qué anticoagulante es el más adecuado?


a) Citrato sódico al 3%.
b) Oxalato.
c) Ácido etilendiaminotriacético.
d) Ninguna de las anteriores es correcta.

19. ¿Cuál de las siguientes características de la heparina es falsa?


a) Inhibe el paso de fibrinógeno a fibrina.
b) Impide la agregación plaquetaria.
c) Favorece el paso de protrombina a trombina por su acción tromboplástica.
d) Actúa tanto in vivo como in vitro.

20. El tiempo que puede pasar desde la extracción de sangre hasta la realización de un recuento de hematíes,
manteniendo la sangre a 4ºC y utilizando EDTA K3 como anticoagulante es:
a) 2 horas.
b) 5 horas.
c) 48 horas.
d) 24 horas.

21. En las pruebas de coagulación se utilizan tubos con un anticoagulante especial ¿Cuál?:
a) Heparina sódica en proporción anticoagulante/sangre de 1/9.
b) Citrato sódico en proporción anticoagulante/sangre de 1/4.
c) Citrato potásico en proporción anticoagulante/sangre de 1/9.
d) Citrato sódico en proporción anticoagulante/sangre de 1/9.

22. Para realizar la prueba de hemólisis, el anticoagulante de elección es:


a) El EDTA (ácido etilendiamino tetracético).
b) El citrato sódico.
c) La heparina.
d) El oxalato amónico y potásico.

23. ¿Qué tipo de muestras se necesitaría para un hemograma?


a) EDTA.
b) Citrato.
c) Suero.
d) Plasma con EDTA.




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24. ¿Qué anticoagulante presenta el tubo de suero?
a) Heparina sódica.
b) Citrato sódico.
c) EDTA.
d) Ninguno.

25. ¿Cuál es el anticoagulante de elección para la realización de recuento celulares y la preparación de
extensiones de sangre?
a) EDTA.
b) Heparina.
c) Citrato.
d) Oxalato.

26. En el laboratorio de hematología puede producirse una pseudotrombopenia cuando se utiliza como
anticoagulante para su recuento en tubo:
a) Citrato.
b) Heparina.
c) Calcio.
d) EDTA.

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