OBTENCIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES, IDENTIFICACIÓN DE

PIGMENTOS VEGETALES POR COLUMNA.

1. RESUMEN

En estas tres prácticas de laboratorio se trabajará con espinaca como principal

material; a medida del avance de estas prácticas se logrará la observación de los
pigmentos vegetales que este alimento tiene. Primeramente para la obtención de
estos pigmentos se trabajó en primera instancia con etanol y se maceró las hojas
del vegetal; seguido de esto se decantaron los pigmentos junto con éter de petróleo
y se g metílico y la parte inferior de esta se decantó con éter etílico y una solución
KOH en alcohol metílico al 30%. Allí se pudieron observar la coloración de las fases.
Para la segunda experiencia se maceró el vegetal con etanol y posteriormente se
filtra y se añade una cantidad de este filtrado a un capilar, su extremo se coloca en
una placa de cromatografía para ser analizada y posterior a esto hallar el valor Rf.
Para la separación de pigmentos vegetales por cromatografía en columna se
realizará el empaquetamiento húmedo con gel de sílice y una mezcla de
hexano/acetato de etilo.

2. PALABRAS CLAVES: color, fases, extracto, fase móvil

3. INFORMACIÓN GENERAL

Los pigmentos son compuestos en las plantas que dan color. Absorben ciertos
espectros de luz y reflejan otros. Los pigmentos de la espinaca sirven para una
variedad de funciones, tanto para la planta como para quienes la consumen.
La clorofila es el pigmento verde en la mayoría de las plantas que está asociado con
la fotosíntesis, también, el beta caroteno es el pigmento carotenoide principal que
se encuentra en las espinacas; cuando los carotenoides se oxidan, o adquieren una
molécula de oxígeno, son conocidos como xantofilas y se reconocen por su color
amarillento, igualmente las feofitinas, son productos de descomposición, clorofila
"usada" que ha perdido un ion pero que permanece en la hoja y continúa brindando
color a la hoja. [1]. Estos pigmentos se encuentran en el interior de la células
vegetales específicamente en un organelo llamado cloroplasto.
La cromatografía en capa fina es una forma de cromatografía de adsorción sólido-
líquido que constituye una técnica para el análisis ligero de muestras que en algunos
casos pueden estar en el rango de los 10-9g. Se usa para el control de las
separaciones que se producen mediante una cromatografía en columna
preparativa. Se utiliza un adsorbente sólido como gel de sílice (SiO2.H2O) que sirve
de fase estacionaria. [2]
A medida que el eluyente pasa por el lugar donde está la mancha de la mezcla
problema se establece un equilibrio entre las moléculas de cada uno de los
componentes en la mezcla que son adsorbidas y las que se encuentran en
disolución. Los componentes difieren en solubilidad y en la fuerza de su adsorción,
de forma que unos componentes se desplazarán más que otros. [3]
En el proceso de cromatografía en columna el absorbente se coloca en el interior
de una columna de vidrio con una llave que controla el paso de sustancias al exterior
esta. La fase estacionaria se impregna con el eluyente y así la mezcla orgánica que
nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y
así podrá ir atravesando el sistema. Los compuestos que se encuentran poco a
poco saldrán de la columna y se recogen en fracciones, siendo las menos polares
las primeras en salir de la columna [4].

4. ANTECEDENTES
- Decantación
- Cromatografía
- Soluciones
- Polaridad

5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Capa delgada Capa gruesa

0.1cm 0.8cm
𝑅𝑓1 = =0.20 𝑅𝑓1 = =0.14
4.9cm 5.7cm
0.35cm 1.8cm
𝑅𝑓2 = =0.71 𝑅𝑓2 = =0.31
Hexano- 4.9cm 5.7cm
4.9cm 4.0cm
acetato de etilo 𝑅𝑓3 = =1 𝑅𝑓3 = =0.70
4.9cm 5.7cm
1:1 5.0cm
𝑅𝑓4 = =0.87
5.7cm
5.2cm
𝑅𝑓5 = =0.91
5.7cm
 5.45cm
𝑅𝑓6 = =0.95
5.7cm
5.6cm
𝑅𝑓7 = =0.98
5.7cm

0.8cm 0.7cm
𝑅𝑓1 = =0.17 𝑅𝑓1 = =0.14
4.7cm 4.8cm
1.7cm 1.5cm
𝑅𝑓2 = =0.36 𝑅𝑓2 = =0.31
4.7cm 4.8cm
2.4cm 2.7cm
Hexano- 𝑅𝑓3 = =0.51 𝑅𝑓3 = =0.56
4.7cm 4.8cm
acetato de etilo 3.1cm 3.8cm
𝑅𝑓4 = =0.65 𝑅𝑓4 = =0.79
4.7cm 4.8cm
4.2cm 4.4cm
𝑅𝑓5 = =0.89 𝑅𝑓5 = =0.91
4.7cm 4.8cm
4.5cm 4.7cm
𝑅𝑓6 = =0.95 𝑅𝑓6 = =0.97
4.7cm 4.8cm

1.0cm 0.5cm
𝑅𝑓1 = =0.22 𝑅𝑓1 = =0.11
4.5cm 4.5cm
1.8cm 0.8cm
Diclorormetano- 𝑅𝑓2 = =0.40 𝑅𝑓2 = =0.17
Metanol 4.5cm 4.5cm
2.2cm 2.7cm
9:1 𝑅𝑓3 = =0.48 𝑅𝑓3 = =0.60
4.5cm 4.5cm
4.1cm 3.5cm
𝑅𝑓4 = =0.91 𝑅𝑓4 = =0.77
4.5cm 4.5cm

0.8cm
𝑅𝑓1 = =0.14
5.7cm

Hexano-acetato de
etilo

5.6cm
𝑅𝑓7 = =0.9
5.7cm

CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA

3.9 1.8 2.0

𝑅𝑓 = =1 𝑅𝑓 = = 0.46 𝑅𝑓 = = 0.51
3.9 3.9 3.9

 Se realizó satisfactoriamente la extracción de los pigmentos vegetales donde

se pudieron observar sus coloraciones.
 Se logró realizar la cromatografía en columna y la cromatografía en capa fina
para observar la coloración de los pigmentos vegetales más claramente.
 Se determinó el Rf de cada una de las placas de cromatografía de los
pigmentos vegetales, con diferentes disolventes.
 6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIAS

1) Recuperado de: www.ehowenespanol.com/pigmentos-vegetales-

encontrados-espinacas-info_192238/ recopilado el 01/02/10
2) Recuperado de: www.ugr.es/~quiored/doc/p23.pdf recopilado el 01/02/19
3) Recuperado de
www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html recopilado el
01/02/19
4) Recuperado de quimica.laguia2000.com/general/cromatografía-en-columna
recopilado el 01/02/19
5) Recuperado de www.ctr.com.mx/pdfcert/Eter%20de%20Petroleo.pdf
recopilado el 01/02/19
6) Recuperado de
www.javeriana.edu.co/documents/4486808/5015300/HIDROXIDO+DE+PO
TASIO+85%25_CCS.pdf/8b6496a3-8dbe-421b-aaf1-
390b7db596df?version=1.0 recopilado el 01/02/19
7) Recuperado de www.uacj.mx/IIT/CICTA/Documents/Quimicos/metanol.pdf
recopilado el 10/02/19
8) Recuperado de www.ctr.com.mx/pdfcert/Hexano.pdf recopilado el 10/02/19
9) Recuperado de
www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/F
icheros/301a400/nspn0367.pdf recopilado el 10/02/19
10) Recuperado de
www.ctr.com.mx/pdfcert/Silica%20Gel%20con%20Indicador.pdf recopilado
el 10/02/19