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Práctica 2:
Diagnóstico coprológico
y coproparasitológico
QUÉ HAGO???
TOMA DE MUESTRA
Envase recolector
Seriado/Concentrado
A 1 2 3
B 1 2 3
Fresca
Nº de
Parásitos
días
El análisis debe ser realizado en su totalidad
por un Licenciado en Bioanálisis
Muestra fresca
Muestra fijada
(Seriado*)
1
Análisis
Macroscópico 2
Análisis
Químico/microscópico
3
Análisis
* Muestras de heces de tres (3) días diferentes Microscópico
Análisis macroscópico
Tipo de
alimentación
Mantequilla ESTEATORREA
Pegajosa-alquitranada MELENA
DISPEPSIA DE LA
Pastosa, espumosa
FERMENTACIÓN
Balcells-Gorina (1997). La Clínica y el Laboratorio
HEATON Y LEWIS, 1997.
ANÁLISIS MACROSCÓPICO
Duras
Blandas
Pastosas
Líquidas
Heces disentéricas Heces lientéricas
• Nunca administrar
Aceites
Leche Magnesia (forma cristales)
Polietilenglicol (forma cristales)
ANÁLISIS MACROSCÓPICO Color
Castaño
Dieta cárnica
oscuro
Dieta láctea
Amarillo
Diarreas de fermentación
canario
hidrocarbonada
Espinaca, Brócoli
Biliverdina
Verde
(Tránsito acelerado)
Diarreas infantiles
Morcillas, espinacas,
Carbón, hierro, bismuto
Negro
Hemorragias digestivas
superiores
Remolacha
Rojo Hemorragias digestivas
inferiores
Tiras y Gleras
Recubriendo el Colon Distal
Bolo fecal
Causas en el RN:
.- Sangre materna deglutida (Apt-Downey)
.- Alergia a la proteína de la leche de vaca
.- Fisuras anales
.- Infecciones invasivas
Dispepsia de la fermentación
Diarrea por intolerancia a la
Ácido lactosa (< 5)
Diarreas bacterianas y virales (<6)
Blastocistosis
Putrefacción
Moco
Alcalino
Parásitos
Bacterias invasivas
Muestra de heces
fresca
1 gr de muestra
fecal Homogenizar Introducir una tira de pH.
+ Esperar 1 minuto y comparar
1 ml de solución con la escala de colores
salina
Sangre Oculta
Hemoglobina
ANÁLISIS QUÍMICO
+ Color
+ H2O2 (3%)
Bencidina Verde-azulado
Guayacol
Desventajas
Prueba de Guayacol:
papel utilizado tiene
un compuesto fenólico,
el ácido alfa-
guayacónico, que se
extrae de la resina de
la madera de los
árboles de Guayaco
Controles
ANÁLISIS QUÍMICO Sangre Oculta
Microscopio:
Positivo
Positivo Negativo
ANÁLISIS QUÍMICO-MICROCÓPICO
Esteatorrea
Bailenger-Faraggi:
Cristal Violeta 50 mg
Fuscina Básica 10 mg
Alcohol 96% 20 ml
Fenol 4 ml
H20 destilada c.s.p 100 ml
Microscopio:
Castro y Paredes. Métodos de Laboratorio par ael Diagnóstico de Parasitosis intestinales: 2001
ANÁLISIS QUÍMICO-MICROCÓPICO Esteatocrito Ácido
Phuapradit (1981)
Técnica
.- Colocar 0,5 g de heces en un tubo de plástico. Diluir a 1/3 con H20 destilada
.- Mezclar durante 2 min a temperatura ambiente
.- Filtrar en doble gasa
.- Colocar 500 µl del filtrado en un tubo de vidrio y agregar 100 µl de Ácido
perclórico 5M
.- Mezclar en vórtex
.- Introducir por capilaridad la muestra en un capilar heparinizado de
microhematocrito
.- Sellar con plastilina
.- Centrifugar a 1200 rpm durante 15 min
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Esteatocrito Ácido
Se diferencian cuatro fases:
FMF → Fase formada por Materia fecal
ANÁLISIS QUÍMICO
Valores de referencia:
Normal= 0-2%
Dudoso= 2%-4% FMF
Patológico: > 4%
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ANÁLISIS QUÍMICO-MICROCÓPICO Creatorrea
Fibras musculares sin digerir
MD PD D
Mal digeridas(MD):
Bordes rectos, fragmentos estriados transversales y
longitudinales y color amarillento (aquilia gástrica)
Digerida (D)
Bordes redondos, sin estrías
Creatorrea
(sin digerir)
Examen Directo
Solución Yodada
(400X)
►
►
►
Fibra muscular
(creatorrea)
►
► Fécula de almidón
(Amilorrea)
►
►
Examen Directo
Solución Yodada
(100X)
ANÁLISIS QUÍMICO-MICROCÓPICO Amilorrea
Es la presencia de células de fécula y almidón por insuficiencia
gástrica o pancreática (amilasa), tránsito acelerado
A B C
Examen Directo
Solución Yodada
(100X)
Amilorrea
(Sin digerir) Creatorrea
(digerida)
Amilorrea
(digerida)
Creatorrea
(parcialmente
digerida)
Examen Directo
Solución Yodada
(100X)
ANÁLISIS QUÍMICO-MICROCÓPICO Pigmentos biliares
Prueba de Sublimación:
Investigar la presencia de bilirrubina y estercobilinógeno
Tubo de ensayo
Dilución de heces 5 ml
Sublimado (ClHg) 5 ml
Agitar e incubar a 37ºC durante 1-2 horas
Resultado:
Rojo → Estercobilina o estercobilinógeno
Verde → Bilirrubina
Blanco → Ausencia de pigmentos
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DIAGNÓSTICO COPROPARASITOLÓGICO Coprología
Diagnóstico Coproparasitológico
Realización de Examen de Heces Directo
Visualización:
Trofozoítos y/o quistes de protozoos
Huevos y larvas de Helmintos
Examen Directo
ANÁLISIS MICROSCÓPICO
Lectura de las
preparaciones
NO CUANTIFICAR PARÁSITOS
Blastocystis spp.
No es una técnica estandarizada
NO CUANTIFICAR BACTERIAS
Lo correcto es sugerir un coprocultivo
Microbiota bacteriana comensal
ANÁLISIS MICROSCÓPICO
>500
especies
¿ Qué elementos podemos encontrar en
una muestra de heces ?
•Parásitos
•Células blancas
•Eritrocitos
•Levaduras
•Cristales
•Artefactos
A C
A
B
C
B
A
B
E D
E D
B
C E
E C
C
E
A
A
B E D
D
B
D
B
A
B
C E
B E
C
C
D A
A E
D
C A
A A
C
D
B
A
D
B
D
D
A
A
A
D
D E
A F
C
E
B G D
A
B
D
Núcleo segmentado
Núcleo redondeado
con cariosoma central hasta 4
Citoplasma granular
Citoplasma limpio, eritrocitos
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Polimorfonucleares
Entamoeba histolytica
/ E. dispar Polimorfonucleares
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Citología fecal
Recuento diferencial
Leucocitos Fecales
ANÁLISIS MICROSCÓPICO
Azul de Metileno 1%
Cuantificar por campo
hasta contar 100 células
Viral Mononucleares
Leucocitos
ANÁLISIS MICROSCÓPICO
Normal: ausencia de leucocitos
Presencia de PMN inflamación intestinal
PMN + moco= invasión intestinal
Amibiasis intestinal
Shigelosis
Salmonelosis
Escherichia coli invasivas
Yersinia
Campilobacter
Enfermedad inflamatoria intestinal
Tumores
Macrófago (►)
Examen Directo con solución salina (400X)
Macrófago*
►
►
Macrófago
Linfocito
mononuclear ►
Macrófago ►
*: emisión de seudópodo
Moco
Moco
PMN ►
Moco
►
Células
epiteliales
Oxalato de Calcio y
Charcot-Leyden
Cristales de Charcot-Leyden
ANÁLISIS MICROSCÓPICO
Fibras de Piña
http://www.dpd.cdc.gov/DPDx/HTML/ImageLibrary/A-F/Artifacts/body_Artifacts_il2.htm
ANÁLISIS MICROSCÓPICO Cristales de Oxalato de Calcio
Examen Directo
con solución
yodada (400X)
Normal
Aumentan en:
•Desequilibrio de microbiota bacteriana
•Terapia con antibióticos
•Uso de probióticos con levaduras (Sacharomyces boulardii)
Pseudohifas
PROBIOTICOS (FLORESTOR)
Sacharomyces boulardii
Levaduras (→→). Hifas
→)
En división (→
Diagnóstico coproparasitológico
Muestra fresca
Analizar antes de una hora de emitida
pueden deteriorarse los trofozoítos de
amibas
Técnica de Graham
Técnica de Concentración
Diagnóstico coproparasitológico por Sedimentación
de Ritchie
Coloraciones Protozoarios
Diagnóstico coproparasitológico Tinciones en Fresco
• Solución de Yodo
•Solución de Eosina 1%
•Verde de Metilo acidificado
• Quensel
• Azul de Metileno regulado de Nair
• Tinta China
• Hematoxilina Cristal Violeta
• Merthiolate-Iodo-Formaldehido (M.I.F.)
• Tionina
• Bailenger-Faraggi
Diagnóstico coproparasitológico
Tinciones Permanentes
• Hematoxilina Férrica de Heidenhain
• Hematoxilina Férrica modificada por Pessoa
• Hematoxilina Férrica rápida
• Hematoxilina Férrica de Tompkins-Miller
• Hematoxilina Férrica – Ácido Fosfotúngstico
•Hematoxilina – Eosina
• Lawless
• Tricrómica de Gomori
• Tricrómica Wheatley
•Rárida de Noble
• Ziehl-Neelsen modificada
• Kinyoun
RECORDAR