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PRODUCCIÓN DE ERITROMICINA POR FERMENTACIÓN

Daniela Marín Torres

Universidad Nacional de Colombia, Sede Medellín, Calle 59A No 63 - 20; Núcleo El


Volador, damarinto@unal.edu.co, Medellín.

Abstract: En el siguiente trabajo se presenta el diseño de un biorreactor de 132 m3 para la


producción del antibiótico eritromicina, tomando los datos disponibles en la literatura. Se
muestran los parámetros cinéticos estudiados y los balances que se consideran para su
producción. También se ha tratado sobre los diversos problemas y vacíos en torno al
análisis de este sistema y lo necesario que es implementar desde escala de laboratorio
condiciones adecuadas para garantizar un diseño planificado y escalados exitosos, sin que
se vean afectadas las variables del diseño.

Palabras clave: Metabolito secundario, tanque agitado, cinética, escalado, eritromicina,


Saccharopolyspora erythraea.

1. INTRODUCCIÓN Existen tres productos que se obtienen de la


fermentación: la eritomicina A (eri-A), eritromicina B
La Eritromicina es un antibiótico macrólido de 14 (eri-B) y eritromicina C (eri-C), pero solo la eri-A es
carbonos, producida por la bacteria activa farmacológicamente, además de ser la que
Saccharopolyspora erythraea a través de fermentación presenta interés industrial, por lo que la eri-B y eri-C
industrial (Celler, 2012) y en algunos casos de E. coli en muchos casos son transformadas químicamente
modificada (Jiang & Pfeifer, 2013). Entre sus para la obtención de eri-A. Por ello, se adiciona
derivados se encuentran la azitromicina, claritromicina compuestos como el propanol mayor obtención de eri-
y telitromicina, obtenidos de la eritromicina A (Cheng, A (Cheng, Huang, Wang, & Chu, 2013).
2013). En investigaciones recientes también han
encontrado efectos como agente antiparasitario, Para la producción, generalmente se usan
anticancerígeno, inmunosupresor, neurotrópico y fermentadores de tanque agitado de 132 m3, con
antiinflamatorio (Celler, 2012), por lo que la tiempos de permanencia de 180h a pH 7.0 y
producción de sales de eritromicina representa temperaturas de 30-35 °C, pero se ha llegado a escalar
movimientos de billones de dólares anualmente hasta volúmenes de 372 m-3 (Zou, Hang, Chu, Zhuang,
(Cheng, Huang, Wang, & Chu, 2013), y que sea objeto & Zhang, 2009).
de constantes estudios para mejorar los parámetros de
su producción, pues a pesar de que ha pasado más de El objetivo de este trabajo es el diseñar con base a las
medio siglo de su descubrimiento, enfrenta serios diferentes investigaciones el biorreactor apropiado
problemas en la fabricación industrial (Zou, Hang, para llevar a cabo la ferementación de un medio de
Chu, Zhuang, & Zhang, 2009). cultivo con Saccharopolyspora erythraea para la
obtención de eritromicina, teniendo en cuenta los
La Saccharopolyspora erythraea es una bacteria parámetros necesarios para llevar a finalidad el diseño
filamentosa perteneciente al orden de los de un proceso industrial, a saber, su cinética, modos de
actinomicetos, microorganismos reconocidos por la operación, instrumentación, dimensiones y escalado.
generación de diversos metabolitos secundarios. Como
microorganismo unicelular, se reproduce por fisión 2. RUTA METABÓLICA
binaria generando nuevas células que crean
filamentos, formando ramificaciones en el micelio La eritromicina A, que es la que se quiere obtener en
inicial, llamadas hifas. Los diferentes tipos de micelios el proceso fermentativo posee tres partes estructurales:
son clasificados como pellets (masas compactas de un anillo macrólido de 14 miembros y dos
alrededor de 1mm de diámetro) (Celler, 2012). La deoxiazúcares D-deosiamina y L-cladinosa (Jiang &
forma de este microorganismo genera altas Pfeifer, 2013).
viscosidades en el medio, así como dificultades para la
transferencia de masa (Cheng, 2013). En la biosíntesis de eri-A, una unidad de propionil-
CoA y seis unidades de metilmalonil-CoA se
condensan en 6-deoxeritronolida B (6-dEB) que luego producto es necesario que haya una condición de
es convertida en eritromicina D (eri-D) (Cheng, agotamiento del sustrato, así que 𝑟𝑠 está dada por la
Huang, Wang, & Chu, 2013). Luego eri-D puede ecuación (2), (Liu, Xing, & Han, 2005):
tomar dos rutas para convertirse en eri-B o (Zhang,
𝑟𝑥 𝜌𝐴 𝑚𝜌𝐴 ∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥
Wang, Wu, Skalina, & Pfeifer, 2010) eri-C y 𝑟𝑠 = + (2)
𝑌𝑥𝑠 𝐾𝑚+𝐶𝑜
posteriormente en eri-A (Zhang, Wang, Wu, Skalina,
& Pfeifer, 2010). El metilmalonil-CoA se deriva del En el cultivo el compartimento hifal es la forma
propionil-CoA que se produce por la ruta del propanol, morfológica más abundante. Para realizar una correcta
o del succinil-CoA, componente de la ruta de los determinación de 𝑟𝑝 , se debe considerar que la
ácidos tricarboxílicos, y es el factor limitante en la ruta Saccharopolyspora erythraea presenta inhibición por
metabólica. En los cultivos sumergidos de producto. Según Liu et al, la ecuación (3) representa la
Saccharopolyspora erythraea se agrega propanol para formación de producto:
Fomentar la producción de eritromicina, por otro lado
se debe tener precaución con la concentración de 𝑘𝑝 ∗𝑠∗𝜌∗𝐴∗∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥
glucosa puesto que fomenta el metabolismo energético 𝑟𝑝 = 𝑠 (3)
𝐾𝑝 +𝑠(1+ )
𝐾𝐼
primario, ocasionando que el succinil-CoA no se
transforme en metilmalonil-CoA (Cheng, Huang, La desactivación de la Saccharopolyspora erythraea
Wang, & Chu, 2013). se representa con una cinética de primer orden (Liu,
Xing, & Han, 2005) dada por:
3. CINÉTICA 𝑟𝐻 = −𝐾𝐻 𝑝 (4)
La cinética para la producción de eritromicina sigue un 3.1 Método
modelo estructurado del crecimiento celular. Antes
que todo resulta importante explicar que en la Tabla 1: Parámetros cinéticos
Saccharopolyspora erythraea la producción de
metabolitos secundarios está asociada a la Parámetro Valor Unidad Fuente
diferenciación morfológica. Un actinomiceto posee 𝜌 320 Kg m-3 (Liu, et al, 2005)
una hifa dividida en tres partes:
d 200 µm (van Veluw, et al,
i) Región apical 2012)
ii) Región subapical
iii) Compartimento hifal 𝛼𝑚𝑎𝑥 5 µm h-1 (Celler, 2012)

m 0.029 h-1 (Liu, Xing, & Han,


Cuando se inicia el crecimiento al germinar las esporas
2005)
se empieza a desarrollar la región apical, durante el 1.0*10-4 Kg m-3
𝐾𝑚 (Celler, 2012)
crecimiento, la sección apical alcanza una longitud
máxima, convirtiéndose en una región subapical que
A 0.27*10- cm-3 (Liu, et al, 2005)
forma nuevas ramas apicales. La ramificación es 8
perpendicular a los segmentos parenterales y ocurre de
acuerdo a la concentración local de oxígeno así que (Liu, et al, 2005)
Yxs 0.45
probablemente disminuya hacia el interior del pellet.
Si el sustrato se agota, las células subapicales optan
𝑘𝑝 0.092 h-1 (Liu, et al, 2005)
por la forma de compartimento hifal el cual es el
responsable de la aparición de metabolitos
𝐾𝑝 5.79 h-1 (Liu, et al, 2005)
secundarios.

La rata de crecimiento total de una sección situada a 𝐾𝐼 0.038 h-1 (Liu, et al, 2005)
una distancia r del centro del pellet se calcula de
acuerdo con la ecuación de Monod tomando en cuenta 𝐾𝐻 7.88 h-1 (Liu, et al, 2005)
todas las tasas de extensión de las puntas (Celler,
2012). La expresión por la cual está definida es: 𝐶𝑜 0.015 Kg m-3 (Celler, 2012)

𝜌 𝑑4 𝑥𝑖 0.035 Kg m-3 (Celler, 2012)


(𝜋 4 )𝐶𝑜
𝑥
𝑟𝑥 = ∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥 (1)
𝐾𝑚+𝐶𝑜 𝑝𝑖 0 Kg m-3 (Celler, 2012)
Tomando las concentraciones dadas por Celler et al, se
El microorganismo consume sustrato para crecimiento pasó a modelar las cinéticas de crecimiento, consumo
y mantenimiento, puesto que para la aparición de
de sustrato y formación de producto. El tiempo hecho de que el volumen pudo convertirse en un
considerado fue de 7 días, que es el necesario para que impedimento para el crecimiento, se concluye que el
crezca el inóculo y en un volumen de 500 ml, con una poco consumo de glucosa se debe a la poca cantidad
agitación de 200rpm (van Veluw, y otros, 2012). La de micelio que se forma en esta cantidad de volumen,
cinética se obtuvo con el programa Berkeley Madonna además que para la producción de eritromicina si bien
versión 8.3.18, usando el método de Rounge-Kutta de es un sustrato limitante, su consumo no es alto por
cuarto orden (Zou, Hang, Chu, Zhuang, & Zhang, parte de las células, puesto que se desea que las células
2009). entren en senescencia para obtener mayor producción
de metabolitos secundarios.
3.2 Resultados
Se observa que la aparición de producto también es
Se puede observar como la curva de crecimiento en la baja, posiblemente porque las células no alcanzaron el
figura 1 toma una leve curva de acuerdo a la ecuación estado de madurez necesario para la producción.
de Monod sin embargo posee un muy bajo
crecimiento, por lo que se comprueba que estos
cultivos requieren una cantidad de inóculo tal que
garantice poder suplir todo el sistema, empero también
se denota en la misma gráfica que el consumo de
glucosa es bajo. Considerando estos factores y el
(1)

Figura 1: Curvas cinéticas de biomasa (x) y sustrato (s)

Figura 2: Curva cinética del producto


En diseños estadísticos de producción, se ha
demostrado que el orden de importancia de los
4. DISEÑO MATEMÁTICO DEL nutrientes secundarios del medio es: 𝑍𝑛 𝑆𝑂4 , ácido
BIORREACTOR cítrico y treonina, los tres ampliamente involucrados
en las rutas biosintéticas del metabolito secundario.
El medio de cultivo para la fermentación por
Saccharopolyspora erythraea posee múltiples La producción de eritromicina a nivel industrial se
componentes además de los ya mencionados, desarrolla en los modos de operación continuo, por
necesarios para la síntesis del antibiótico de interés. En lotes alimentados y por lotes o batch. De estos tres, el
la tabla (2) se enumeran los componentes esenciales batch es el que presenta mayores productividades, por
del medio: lo que es el que se escoge para el diseño. Los
volúmenes en los cuales trabaja este proceso son de
Tabla 2: Algunos componentes importantes del medio de 132 m3 y 372 m3. En este numeral se hablará del
cultivo
diseño para el primero, puesto que en la sección de
escalado se desenvolverá el último.
Componente Concentración Unidades
Licor de Maíz 17 Kg m-3 4.1 Balances de Materia
fermentado
𝑍𝑛 𝑆𝑂4 0.039 Kg m-3 En términos generales podemos definir la acumulación
Ácido cítrico 0.24 Kg m-3 en la siguiente ecuación:
Treonina 0.42 Kg m-3
(𝑁𝐻4 )𝑆𝑂4 2 Kg m-3 𝑑𝑀
̂𝑖 − 𝑀
=𝑀 ̂𝑜 + 𝑅𝐺 − 𝑅𝐶 (5)
𝑑𝑡
licor de soya 27 Kg m-3
NaCl 5 Kg m-3 ̂𝑖 es el la tasa de flujo másico de entrada, 𝑀 ̂𝑜
Donde 𝑀
𝐶𝑎 𝐶𝑂3 7 Kg m-3
es la tasa de flujo de salida del reactor, 𝑅𝐺 es la tasa de
Propanol 13.68 Kg m-3
generación másica, y 𝑅𝐶 es la tasa de consumo másico,
Dextrina 5 Kg m-3
luego la ecuación (5) representa el cambio de masa
Antiespumante 147.84 l
total en todo el sistema.
Oxígeno disuelto 40 %
Para el balance de biomasa consideramos que no
existe ningún flujo de entrada o salida del sistema por
Entre estos elementos, son relevantes los siguientes: lo que
Licor de maíz fermentado: Es importante como fuente 𝑑𝑀
de nitrógeno orgánico, necesario en este tipo de = 𝑟𝑥 𝑉 − 𝑟𝐻 𝑉 (6)
𝑑𝑡
procesos para la obtención de metabolitos secundarios
y precursores de aminoácidos necesarios para el Reemplazando:
proceso celular. También algunos estudios sostienen
𝜌 𝑑4
su relevancia para garantizar el OUR en la 𝑑𝑥 (𝜋 4 )𝐶𝑜
𝑥
= ∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥 − 𝐾𝐻 𝑝 (7)
fermentación. Además favorece el crecimiento celular 𝑑𝑡 𝐾𝑚+𝐶𝑜
(Zou, Hang, Chu, Zhuang, & Zhang, 2009) y por ende
el aumento en la producción de eritromicina. De modo similar las ecuaciones (8) y (9) dan los
Asimismo ayuda a disminuir la viscosidad del medio balances para el sustrato y el producto
(Chen, 2013). Se debe resaltar que el licor de maíz no respectivamente:
es la única fuente de nitrógeno, también los son el licor 𝑑𝑠 𝑟𝑥 𝜌𝐴 𝑚𝜌𝐴 ∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥
de soya y el (𝑁𝐻4 )𝑆𝑂4 , y otras sales nitrogenadas = −( + )𝑥 (8)
𝑑𝑡 𝑌𝑥𝑠 𝐾𝑚+𝐶𝑜
según las consideraciones particulares del proceso.
Pero así como las fuentes nitrogenadas resultan 𝑑𝑝 𝑘𝑝 ∗𝑠∗𝜌∗𝐴∗∑ 𝛼𝑚𝑎𝑥
esenciales, deben estar reguladas puesto que a altas =( 𝑠 )𝑥 (9)
𝑑𝑡 𝐾𝑝 +𝑠(1+ )
𝐾𝐼
concentraciones impiden el consumo de glucosa por
parte de la célula e incrementa el pH.
Tomando los parámetros dados por Zou, et al, para un
Propanol: Como precursor de la eritromicina se ha fermentador de 132 m3 se presenta la evolución del
demostrado que adicionarlo aumenta la producción de proceso en las figuras 3 y 4
la misma por parte de la célula, ya que ésta es capaz de
convertirlo en propionil-CoA (Cheng, Huang, Wang,
& Chu, 2013).
Tabla 3: Valores para el diseño del biorreactor Chu, Zhuang, & Zhang, 2009). Luego, calculamos el
número de Reynolds para el impulsor:
Parámetro Valor unidad
Agitación 60-126 rpm 𝐷𝑖 2 𝑁𝑖𝜌
𝑅𝑒𝑖 = = 647.01 (10)
Aireación 0.8-1.2 vvm 𝜇

Viscosidad (µ) 2.77 Pa.s


Usando correlaciones empíricas llegamos a :
Tiempo de duración 180 h
Tiempo de mezcla (𝑡𝑏 ) 39.6 s 𝐷𝑖 2/3
Temperatura 33 °C 40 = 𝑡𝑏 𝑁𝑖 ( ) (11)
𝑇
[𝑥] 10 Kg m-3
[𝑠] 30 Kg m-3 Así que:
[𝑝] 0 Kg m-3
𝐶∗ 0.0175 Kg m-3 𝑡𝑏 = 39.6 𝑠

El tiempo de mezcla se determina con correlaciones


adimensionales encontradas en la literatura (Dickey &
Fenic, 1976). Según las referencias para el sistema, las
turbinas usadas son tipo paletas inclinadas (Zou, Hang,

Figura 3 : Cambio de concentración biomasa y sustrato con el tiempo.

Figura 4: Cambio de concentración de producto con el tiempo.


4.1 Resultados Tabla 4: Dimensiones del biorreactor de 132 m3

Los resultados obtenidos bajo la cinética propuesta por Variable Relación Valor Unidad
algunos autores, no muestra respuesta positiva en Volumen 132 m3
grandes volúmenes del proceso, puesto que aquí como Diámetro del Obtenido de 1.27 m
se ve en las gráficas las concentraciones permanecen impulsor (Di) la literatura
constantes en el tiempo. El error posiblemente se Diámetro total (T) T=3Di 3.81 m
encuentre en el considerar un sistema homogéneo, Altura (H) H=3.01T 11.58 m
cuando en realidad posee flóculos en su interior que Bafles (w) w=1/10T 0.381 m
hacen que difícilmente se aproxime a dicho Espacio entre C=T/2 1.9 m
miramiento. Otro aspecto es la insistencia en fondo y primer
determinar una cinética homogénea cuando en la impulsor (C)
fermentación teórica y visiblemente se observa que Espacio impulsor - E/Di=1.0 1.27 m
existen varios elementos determinados por la impulsor (E)
transferencia de masa, puesto que los pellets hacen que Número de 8
se presenten múltiples diferencias entre la captación de impulsores (n)
oxígeno por parte de las células. Aunque algunos
autores han planteado al oxígeno como sustrato
limitante, no existe de su parte un modelo apropiado
para describir la difusión heterogénea del mismo
(Celler, 2012). Para grandes volúmenes, se encuentra
que se apoyan en las mediciones directas adoptadas
del proceso y no en una planificación desde escala de
laboratorio. para la fermentación en la producción de
eritromicina, se encuentran múltiples investigaciones
donde se estudia parámetros de alimentación
diferentes pero no integrados a una cinética que
represente al proceso fielmente. Por ello aunque se
continua con los distintos ítems propuestos para este
diseño se específica que éste aún no cumple con las
condiciones de idealidad de un proceso ingenieril, el
cual es la planificación desde escala de laboratorio
hasta escala industrial de cada una de las variables del
proceso y que estas mantengan concordancia entre sí
en las diferentes escalas.

4.2 Diseño geométrico del biorreactor

De acuerdo con el agitador de palas inclinadas


referenciado para este proceso (Zou, Hang, Chu,
Zhuang, & Zhang, 2009) con un diámetro interno de
1270 mm y según las dimensiones encontradas en la
literatura para un tanque agitado con múltiples
impulsores (Doran, 2013) (Kippers, Gordon, &
Holloway, 2014), se determinó el diseño geométrico
del biorreactor.

Figura 5: Diagrama del biorreactor (Kippers, Gordon, &


Holloway, 2014)

4.3 Aireación

En las fermentaciones miceliales la aireación se


convierte en un factor crucial pues si bien es
indispensable para el crecimiento de los
microorganismos, también la presencia de oxígeno
afecta negativamente la producción de antibióticos 𝑄 = 285.112 𝐾𝑊
(Celler, 2012). Para cada etapa del proceso, OUR y
OTR deben de ser máximas para garantizar la
aireación adecuada, puesto que la carencia de
oxigenación se garantiza con la formación propia del 5. INSTRUMENTACIÓN
pellet, que hace que haya menor concentración de
oxígeno en el interior del mismo, así que la tarea será 5.1 Agitadores y aireación
suministrar un óptimo OD tal que los pellets crezcan lo
suficiente para tener carencia del mismo en su interior Para el proceso están especificados a nivel industrial
(García, 2010). agitadores de paletas inclinadas de 45° con un
∅=1270mm para un proceso de media escala de 132m3
Definimos el número de Damköhler como: y de ∅=1900mm para el tanque a escala industrial de
372 m3 (Zou, Hang, Chu, Zhuang, & Zhang, 2009). La
𝑂𝑇𝑅𝑚𝑎𝑥 ventaja de este tipo de propulsores es que provee un
𝐷𝑎 = =1 (12)
𝑂𝑈𝑅𝑚𝑎𝑥 flujo radial y axial, además de que funcionan a
viscosidades elevadas (Dickey & Fenic, 1976). Para la
Donde
planta piloto de 50l y escalas prepilotos se usa una
turbina de disco de hoja curva con un diámetro interno
𝑂𝑇𝑅𝑚𝑎𝑥 = 𝐾𝐿 𝑎. 𝐶 ∗ (13)
(para el reactor de 50l) ∅=830mm. Para la aireación
y están reportados de tipo anillo (Chen, 2013).

𝑂𝑈𝑅𝑚𝑎𝑥 =
𝑟𝑥
(14) 5.2 Material del fermentador e intercambiadores de
𝑌𝑥𝑠 calor
Reemplazando 𝐾𝐿 𝑎 = 4.3 ∗ 10−10 Por el tamaño del sistema propuesto el tanque agitado
debe de ser de acero inoxidable, puesto que además de
Según este valor, existe poca transferencia de masa
ser totalmente liso, es posible obtenerlo de las
entre el medio y las células, que se explica por el
dimensiones requeridas. Los bafles pueden ir soldados
esfuerzo a que el proceso sea aerobio pero restringido
pero las uniones deben ser totalmente lisas. A pesar de
para estimular la producción de eritromicina
que los bafles pueden implicar zonas muertas, en este
4.4 Balances de energía. proceso no es relevante tal situación puesto que la no
presencia de oxígeno en algunas células hifales ayuda
El balance general de energía se expresa con la a la producción de metabolitos secundarios.
siguiente ecuación (Doran, 2013):
Por ser el sistema de proporciones tan altas, no es
𝑑𝑈 posible tener un solo sistema para el intercambio de
=𝐻 ̂𝑠 + 𝑄̂ − 𝑊
̂𝑖 − 𝐻 ̂ (15) calor, puesto que la capacidad de transferencia de calor
𝑑𝑡
se reduce. Pero como recomendación básica debe ser
Para el biorreactor en estado estacionario nos queda un intercambiador exterior al tanque, puesto que su
(Despreciando el calor producido metabólicamente): tamaño dificulta las labores de limpieza. Se propone
varios sistemas de tubos en espiral por lo menos tres
𝑄̂ = 𝑊
̂ (16) con sistemas de control integrados. Tubos de acero
inoxidable con un diámetro interno de 0.1m, sch80
El trabajo se puede determinar con la suma de las (Gregory & Green, 2013).
potencias requeridas por cada uno de los impulsores,
para ello se usa correlaciones encontradas en la 5.3 Elementos de control.
literatura (Dickey & Fenic, 1976), en las cuales se
halló que el número de potencia (Np), por lo que se Electrodo de oxígeno disuelto: Para la fermentación se
puede usar la siguiente ecuación para procesos usa un electrodo polarográfico de Mettler-Toledo
aerobios (Kippers, Gordon, & Holloway, 2014): (Chen, 2013). Su funcionamiento consiste en un
cátodo compuesto de un metal noble, que toma otro
𝑃 electrodo de referencia, por lo general de cloruro de
𝑁𝑝 = = 3.5 (17) plata, en una solución neutral de cloruro de potasio.
𝑁𝑖 3 𝐷𝑖 5 𝜌
Muestran alta fiabilidad y durabilidad en las
Despejando: mediciones y posee un fácil mantenimiento. Puede
reportar concentración y porcentaje de saturación Con la ayuda de los balances de materia:
(Abarca, 2013).
𝐾𝐿 𝑎 = 1.7 ∗ 10−10
Electrodo de pH: Como en todos los procesos
fermentativos, controlar el pH es fundamental, por lo Sin embargo, para el escalado solo hará falta
que está referenciado para la producción de parámetros geométricos, ya que para el volumen dado,
eritromicina un sensor de pH con bobina acoplada de ya está establecido el Diámetro del impulsor (tabla 5) ,
capacitor, donde se conecta a una bobina la cual da la si la potencia por unidad de volumen se mantiene
lectura de resistencia. De acuerdo con el sistema lector igual, dado que aumentara los gastos energéticos es
de frecuencias, se tendrá por leyes de resonancia la económicamente inviable considerando los altos
lectura del sistema (Bhadra, Dynowski, & McDonald, costos que acarrea esta potencia, tenemos que:
2014).
3 𝐷𝑖 2 1
𝑁𝑖2 = √𝑁𝑖13 ∗ (18)
Termómetros: Las termocuplas de resistencia son las 𝐷𝑖 2 2
más comunes para estos procesos, usan como medida
la resistencia conocida de un metal por lo general Por consiguiente, se pasa a calcular cada una de las
platino, que luego es convertida a unidades de voltaje dimensiones del reactor, representadas en la tabla (5)
para ser tomadas por el sistema de control (Baiyong,
Lai, & Xueren, 1997). Tabla 5: Dimensiones del fermentador de 372 m3

Rotámetros: Con el fin de garantizar el suministro de Variable Relación Valor Unidad


oxígeno adecuado, se utilizan este tipo de equipos que Volumen 372 m3
por medio de un elemento flotante en su sistema Diámetro del Obtenido de 1.9 m
gradúa la cantidad de flujo que se requiere pasar por la impulsor (Di) la literatura
tubería (Bhadra, Dynowski, & McDonald, 2014) Diámetro total (T) T=3Di 5.7 m
Altura (H) H=2.7T 14.6 m
Para la concentración de biomasa no se establece un Bafles (w) w=1/10T 0.57 m
método directo, puesto que en el sistema está Espacio entre C=T/2 2.85 m
condicionado por la morfología y no por la fondo y primer
concentración del mismo. Los métodos reportados no impulsor (C)
incluyen un monitoreo en línea. Espacio impulsor - E/Di=1.0 1.9 m
impulsor (E)
Número de 6
impulsores (n)
6. METODOLOGÍA DE ESCALADO rpm Ecuación () 152.9 rpm

6.1 Proceso y tarea de escalado 7. ANÁLISIS REAL


Punto de operación: De acuerdo a la tabla (3) y a los Ya en numerales anteriores con la ayuda de
estudios realizados (Zou, Hang, Chu, Zhuang, & correlaciones empíricas, se estableció que el tiempo de
Zhang, 2009) con una producción de eritromicina de mezcla es igual a 𝑡𝑏 = 39.6 𝑠 . Si nos basamos en la
320.88 Kg m-3 y una T=33°C, se define el punto de aparición de producto en el tiempo de cultivo batch,
operación. nos arroja un resultado de 22.3h. Considerando que un
día no es suficiente para que hay una cantidad de
Variables manipuladas: Flujo de entrada de oxígeno,
eritromicina importante, deducimos que para un
velocidad de la punta del impulsor, temperatura, nivel
sistema de 132 m3 , no es válido el modelo cinético
de espuma.
planteado ya que no considera las fluctuaciones
importantes relacionadas con la transferencia de masa,
Variables de diseño: 𝐾𝐿 𝑎, diámetro del impulsor,
posible causa de que en grandes volúmenes como se
potencia por unidad de volumen
discutió anteriormente, no sea posible usarlo para
Volumen blanco: 372 m3 determinar los parámetros del proceso (Ver numeral
4).
Para el proceso se debe mantener el número de Da,
definido en la sección 4 constante, lo que no implica
que el 𝐾𝐿 𝑎 se mantenga igual.
8. CONCLUSIONES oxygen in wine. Instrumentation Science and
Technology, 41, 60-71.
Este tipo de sistemas a gran escala exhibe un manejo
complicado, basado en determinaciones empíricas, por Baiyong, L., Lai, P., & Xueren, Z. (1997). A two-
las características cinéticas complicadas del dimensional flow sensor using integrated silicon
spreading-resistance temperature detectors.
microorganismo. Es posible que en el futuro deba Science Instruments, 68(10), 3785-3789.
optarse por tener volúmenes más mesurados y mayor
número de equipos, considerando que los existentes Bhadra, S., Dynowski, C., & McDonald, M. (2014). Fluid
son de mega escalas de difícil control. Faltan estudios Embeddable Coupled Coil Sensor for Wireless pH
en cuanto a la cinética del proceso y cómo se ve Monitoring in a Bioreactor. IEEE Transactions on
afectada a grandes escalas, igualmente de la influencia Instrumentation and Measurement, 63(5), 1337-
de los fenómenos de transferencia de masa y sobre qué 1346.
se puede implementar para disminuir la viscosidad del
Celler, K. (2012). Structured morphological modeling as a
medio. Aunque en los últimos años, la industria de
framework for rational strain design of
producción de antibióticos ha optado por reacciones de Streptomyces species. Antonie van
síntesis total para producir medicamentos por las Leeuwenhoek(102), 409–423.
mismas complicaciones expuestas en este trabajo, no
deja de ser importante el estudio detallado de estos Chen, Y. (2013). Significant decrease of broth viscosity and
procesos, ya que los organismos miceliales poseen glucose consumption in erythromycin fermentation
múltiples metabolitos secundarios de gran utilidad. by dynamic regulation of ammonium sulfate and
phosphate. Bioresource Technology(134), 173–
Pero a pesar de todas las complicaciones que posee 179.
este proceso, es viable en la medida de que la
Cheng, Y., Huang, M., Wang, Z., & Chu, J. (2013).
eritromicina es altamente utilizada, por lo que los
Controlling the feed rate of glucose and propanol
costos elevados que representan su producción, son for the enhancement of erythromycin production
factibles por la demanda de la misma. and exploration. Bioprocess Biosystem
Engineering(36), 1445–1453.

Dickey, D., & Fenic, J. (1976). Dimensional analysis for


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