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INTRODUCCION
Los primeros aislamientos fecales se hicieron inoculando los medios de cultivo con
filtrados de heces, que se hacían a través de filtros Millipore con porosidad de 0,65
um de diámetro, los cuales retenían gran parte de la flora fecal y permitían el paso
del Campylobacter, de manera que se eliminaban microorganismos que posiblemen·
te inhibían su crecimiento por competición (9).
Posteriormente se simplificaron los métodos para el aislamiento de este agente,
cuando se desarrollaron medios de cultivo selectivos a base de antibióticos, como el
descrito por Bützler (5) y el de Skirrow (26), los que permiten el aislamiento de la
bacteria directamente a partir de heces.
AISLAMIENTO
MEDIOS DE CULTIVO:
1
2 REVISTA MEDICA HOSPITAL NACIONAL DE NIl'lOS DR. CARLOS SAENZ HERRERA
En el Laboratorio Clínico del Hospital Nacional de Niños (HNNl, uno de los auto-
res (MLH) ha logrado buena recuperación del Campylobacter a partir de tubos con
tetrationato·iodo (15) siguiendo la metodolOQT'a empleada en el aislamiento de
enterobacterias. Los tubos con tetrationato se inoculan con una torunda impreg-
nada en heces y se incuban a 37 oC durante 24 horas. Luego se homogenizan y se
saca una asada que se raya en un plato de agar Bützler, tal como se hace con un<l
muestra de heces. Hasta el momento este método ha permitido el aislamiento del
95,5 % de las cepas con respecto a la inoculación directa de las heces en Bützler,
incluso en algunas ocasiones la bacteria sólo se aisló del tetrationato.
CONDICIONES DE CULTIVO:
El ~ fetus ssp j~juni es capaz de crecer a temperaturas entre 37 y 42 oC, sin em-
bargo, la temperatura recomendada para su aislamiento es de 42 OC, ya que inhibe a
otras bacterias y a la vez permite diferenciarla de ~ fetus intestinalis que sólo crece
a 37°C (Cuadro 2) (16).
MORFOLOGIA DE LA COLONIA:
Además, es posible encontrar tipos de colonias intermedios entre los descritos ante-
riormente.
IDENTlFICACION:
En tercer lugar, deben realizarse las pruebas de oxidasa y cata lasa, ya que las tres
especies son oxidasa positivas y con excepción de ~. 1P.utorum las otras son catalasa
positivas.
La identificación de C. fetus. ssp jgjuni puede confirmarse por otras pruebas, por
ejemplo: no reduce nitratos, es capaz de crecer en soluciones tanto de glicina como
de bilis al 1 %, pero no en NaCI al 3 % Y es H 2S negativo. Además, crece a tempe·
raturas entre 35 y 42 oC, es sensible al ácido nalidíxico (30 ug/disco) y es resistente
a la cefalotina (30 ug/disco). Estas pruebas sencillas permiten diferenciar el género
Campylobacter hasta subespecie, como se resume en el Cuadro 2.
Posiblemente las formas normales son los tipos 11 y 111. El tipo" (monocurvadas)
posiblemente corresponde a células jóvenes de reciente división (Figura 6), en tanto
las formas bi y tricurvadas serían células maduras. Por otra parte, las formas cocoi-
des pueden corresponder a células en degeneración, ya que se observan con más
frecuencia en los cultivos viejos y las formas filamentosas pueden deberse a altera-
ciones metabólicas, tal como se ha propuesto que podría ocurrir en Legionella
p'neumop'hila (12), o bien, se deben a alteraciones inducidas por antibióticos beta
lactámicos. Así, cuando se cultiva el Campylobacter en presencia de ampicilina
frecw:mtemente se observan formas filamentosas, tal como se encontró en un estu-
dio que se está realizando para evaluar las alteraciones morfológicas inducidas por
antibióticos. En la Figura 7 se observa un Campylobacter cultivado en tioglicolato
con 30 ug/ml de ampicilina.
las formas bi y tricurvadas miden como promedio 1,9 .t 0,1 um de largo y su diá-
metro promedio es de 0,49 ±. 0,1 um. los flagelos pueden medir hasta 15 um de
largo y salen de sendos poros caliciformes localizados en los extremos de la bacteria.
la pared muestra una serie de surcos que le brindan un aspecto cerebriforme (Fi-
gura 8a). Además, la bacteria presenta una microcápsula (Figura 8b) (14).
CUADRO ClINICO
EPIDEMIOLOGIA
Por otra parte, al comparar la etiología bacteriana de las diarreas entre enero y julio
de 1983, se observó que el principal agente era ~. fetus ssp j~1l!!.L aislándose gene·
ralmente en mayor proporción que Shigella y Salmonella (25).
Estos datos, junto con los de etiología de diarrea en niños no hospitalizados del área
rural (35), colocan al c..
fetus ssp ~juni como uno de los principales agentes bacte-
rianos causantes de diarrea.
CONCLUSION
Este informe resume los principales métodos de aislamiento y diagnóstico del Cam-
I!}'lobacter fetus ssp ~juni. A pesar de que a primera vista la metodología parece un
tanto compleja, es relativamente simple.
a) Incubadora a 42°C.
6 REVISTA MEDICA HOSPITAL NACIONAL DE NII'lOS DR. CARLOS SAENZ HERRERA
b) Jarra de anaerobíosis tipo Gas Pack con válvula (incluso a las jarras corrientes
puede adaptársele una válvula tal como se hizo en el HNNl.
e) Una bomba de vacío, que puede sustituirse por una trampa de agua.
d) Cilindro de N z y COz
CUADRO 1
Familia Spirillaceae
Género Carnpy!obacter
C. recalis
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(*) Modificación de Kaplan, R. L. 1980. (16)
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CUADRO 2 :'"
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DIFERENCIACION BIOQUIMICA DE CAMPYLOBACTER
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ANTIMICROBIANOS (30U9/discO) CRECIMIENTO }>
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OXIOASA CATALASA H S AC. NALlDIXICO CEFALOTINA 25 OC 42°C Z
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C. fecalis + + + + V - + O
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C. fetus SSp fetus + + - R + - Z
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C. fetus SSp intestinalis + + - R S + + - ()
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C. sputorum ssp sputorum + - + + + - ~
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C. sputorum ssp bubulus + - + + + + V r
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Tomado de Kaplan, R. L., 1980 (6) ::ti
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8 REVISTA MEDICA HOSPITAL NACIONAL DE NIÑOS DR. CARLOS SAENZ HERRERA
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INOCULADOR
~··::9~ PARA DILUCION
EN PLATO
TIOGLlCOLATO
1,5 O/o agar
10 % sangre Iml
antibióticos amortiguador
de fosfatos
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FIGU RA 5: Microfotografías electrónicas de transmisión de una preparación de Campylobacter, procesada mediante la técnica de
réplicas de platino. Se presentan cuatro tipos morfológicos (números romanos) descritos en el texto. Barras - 1um. -'
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14 REVISTA MEDICA HOSPITAL NACIONAL DE NIÑOS DR. CARLOS SAENZ HERRERA
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FIGURA 8: A. Microfotografía electrónica de transmisión del extremo de un
CampyJ.Qbacter en el que se aprecia el poro polar del cual sale el flagelo. Además,
se observa el aspecto ccrebri forme de la pared bacteriana. Barra = 0.25 um.
B. Mi::rofotografía electrónica de transmisión de '.In Campylobacter teñido con
ácido fosfotúngstico (tinc;ón negativa). Se observa la microcápslJfa que envuelvp. el
cuerpo de la bacteria (flecha\. Barra = 1 um.
Hernández, F. et al: AISLAMIENTO V DIAGNOSTICO OE CAMPVLOBACTER 17
RESUMEN
SUMMARY
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