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Bioquímica hepática

(II) El metabolismo del


glucógeno. Glucogenolisis

El hepatocito muestra abundantes


gránulos de glucógeno

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Ultraestructura de los gránulos de glucógeno
35nm
Rosetas de glucógeno Partícula β

Estructura de cadenas
macromolécula ramificadas
de
glucógeno
Lado catalítico

Capa exterior de enzimas


implicados en el
metabolismo del
1 µm glucógeno Lado regulador

Glucógeno
fosforilasa

Estructura del Glucógeno


CH2 OH CH2OH
H O O
glucógeno
H H H
H H
OH H OH H 1
O
OH O
H OH H OH

CH2OH CH2 OH 6 CH2 CH2 OH CH2 OH


H O H H O H H 5 O H H O H H O H
H H H H H
OH H OH H OH H 1 4 OH H OH H
O O 4 O O OH
OH 2
3
H OH H OH H OH H OH H OH

El glucógeno es un polímero de glucosa unidas por dos tipos


de enlaces:
w α(1à4) glicosídicos, mayoritariamente
w α(1à6) glicosídicos, en las ramificaciones

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El glucógeno es una macromolécula de
estructura ramificada con ramificaciones
más frecuentes en la zona central que en
la periférica. La molécula de glucógeno
tiene un peso molecular ≥ 10.000.000

Glicogenina

Extremo reductor (4-OH)

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CH 2OH
H O H
H
OH H
OH OPO32−

H OH
glucosa-1-fosfato

El enzima glucógeno fosforilasa cataliza la fosforolisis de los


enlaces α (1à4) glicosídicos, liberando glucosa-1-fosfato:

glucógeno (n) + Pi à glucógeno (n–1) + glucosa-1-fosfato

Hidrolisis : R-O-R' + HOH à R-OH + R'-OH


HO--PO32- à R-OH + R'-O-PO32-
Fosforolisis: R-O-R' + HO

La reacción de fosforolisis catalizada por la glucógeno fosforilasa

Glucógeno (N)

Pi
Glucógeno fosforilasa

Glucógeno (N-1)

α-D-Glucosa 1-fosfato

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El piridoxal fosfato, un derivado de la
vitamina B 6, actúa de grupo prostético de la
glucógeno fosforilasa

H O El coenzima está anclado al sitio activo


del enzima a través de un enlace de
O− C
−O H2
P C OH base Schiff l(formado por la
O
O condensación del aldehido y un e-amino
de una lisina.
+
N CH3
H
piridoxal fosfato Enz

(CH2)4

N+
O− HC H
−O H2

P C O
O
O
+
N CH3
H

Enzyme (Lys)-PLP Schiff base

¿Cómo actúa la glucógeno fosforilasa?

Glucógeno
fosforilasa

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¿Cómo actúa el enzima desramificante?

α-1,6/α-1,4 transglicosilasa

α-1,6 glicosilasa

El enzima desramificante tiene dos centros catalíticos


independientes, resultante del plegamiento de una única cadena
polipeptídica:
w La actividad transferasa permite hidrolizar un trisacárido de
glucosa, y transferirlo al extremo de otra cadena.Queda una
glucosa unida por un enlace α (1à6).
w La actividad α (1à6) glucosidasa hidroliza el enlace
α(1à6) y libera glucosa. Es la única ocasión en la que se
libera glucosa del glucógeno.

El producto resultante del catabolismo del glucógeno es:


glucosa-1-fosfato.

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¿Cómo actúa el enzima desramificante?

α1-6 glicosilasa

Glucógeno
fosforilasa

Lugar de hidrólisis de la α-1,6 glucosidasa

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Una visión global de la degradación del glucógeno

Glicogenina

Fosforilasa

h i j k

Transferasa

α-1,6-glucosidasa

2−
Enzyme-Ser-OPO 3 Enzyme-Ser-OH Enzyme-Ser-OPO 32−

2− 2−
CH 2OH CH2OPO 3 CH 2OPO 3
H O H H O H H O H
H H H
OH H OH H OH H
2− 2−
OH OPO3 OH OPO3 OH OH
H OH H OH H OH
glucosa-1-fosfato glucosa-6-fosfato

• La fosfoglucomutasa cataliza la reacción reversible:

glucosa-1-fosfato ßà glucosa-6-fosfato

• La serina-OH en el centro activo del enzima es el lugar en el que


se fija el Pi.
• La glucosa-6-fosfato puede entrar en la vía glicolítica

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Glucógeno Glucosa
Glucokinasa
G-6 -Pasa
Glucosa-1-P Glucosa-6-P Glucosa + P i
Glicolisis

Piruvato

La glucosa-6-fosfatasa, que solo existe en el hígado, cataliza la


reacción:
glucosa-6-fosfato + H2 O à glucosa + Pi

Es clave para la función reguladora de la homeostasis de la


glucosa que ejerce el hígado. Los demás tejidos carecen de ella

Destino metabólico de la glucosa 6-fosfato

Fosfoglucomutasa

α-D-Glucosa 1-fosfato α-D-Glucosa 6-fosfato

Glucosa Glicolisis
sanguínea (Ciclo Krebs)

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La regulación de la glucogenolisis

• Mecanismo dependiente de cAMP (Hígado)


•Mecanismo dependiente de Ca2+ (Músculo e hígado)

Regulación de la glucogenolisis

w La glucógenofosforilasa existe bajo dos formas


w "a" es la forma activa del enzima, cuya actividad es
independiente de reguladores alostéricos. En el caso de la
glucógeno fosforilasa se trata de la forma fosforilada del
enzima.
w "b" es una forma mucho menos activa del enzima, pero cuya
actividad depende de efectores alostéricos (en el caso de la
glucógeno fosforilasa, la forma defosforilada.

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Covalent modification: Glucagon & epinephrine activate
cAMP cascades in liver and in muscle, respectively. Both
hormones are produced in response to low blood glucose.
Epinephrine is also part of the “fight or flight” response.
The cAMP cascade results in phosphorylation of a serine
hydroxyl of Glycogen Phosphorylase, which promotes
transition to the active (relaxed) state.
The phosphorylated enzyme is less sensitive to allosteric
inhibitors. Even if cellular ATP & glucose-6-phosphate
are high, Phosphorylase will be active.
The glucose-1-phosphate produced from glycogen in liver
may be converted to free glucose for release to the blood.
With this hormone-activated regulation, the needs of the
organism take precedence over needs of the cell.

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Hormone (epinephrine or glucagon)
via G Protein (Gα -GTP)

Adenylate cyclase Adenylate cyclase


(inactive) (active)
catalysis
ATP cyclic AMP + PPi
Activation Phosphodiesterase
cAMP AMP

signal Protein kinase A


(inactive)
Protein kinase A
(active)
cascade ATP
ADP

Phosphorylase kinase Phosphorylase kinase (P)


(b-inactive) (a-active)
Phosphatase ATP
Pi ADP

Phosphorylase Phosphorylase (P)


(b-allosteric) (a-active)
Phosphatase
Pi

Effect of cAMP on Glycogen Synthesis


The cAMP cascade induced in liver by glucagon or
epinephrine has the opposite effect on glycogen synthesis.
Glycogen Synthase is directly phosphorylated by
cAMP-Dependent Protein Kinase as well as by
Phosphorylase Kinase.
Phosphorylation of Glycogen Synthase promotes the "b"
(less active) conformation.
The cAMP cascade inhibits glycogen synthesis. Instead
of being converted to glycogen, glucose-1-phosphate in
liver may be converted to glucose-6-phosphate, and
dephosphorylated for release to the blood.

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Insulin, produced in response to high blood glucose,
triggers a signal cascade that activates Phosphoprotein
Phosphatase.
This phosphatase catalyzes removal of regulatory
phosphate residues from Phosphorylase, Phosphorylase
Kinase, & Glycogen Synthase enzymes.
Thus insulin antagonizes effects of the cAMP cascade
induced by glucagon & epinephrine.

Ca++ also regulates glycogen breakdown in muscle.


During activation of skeletal muscle, Ca++ is released
from stores in the sarcoplasmic reticulum (muscle ER),
to activate actin/myosin interactions.

Fosforilasa Quinasa inactiva

Fosforilasa Quinasa Ca++ parcialmente activa

P-Fosforilasa Quinasa-Ca++ totalmente activa

La Fosforilasa quinasa de músculo, cuya subunidad δ es


la calmodulina, puede activarse vía Ca++ además de la
fosforilización vía la proteinquinasa “A” dependiente de
cAMP. De esta manera se asegura la liberación de G1P a
partir del glucógeno y la entrada en la glicolisis tras
isomerización a G6P para proveer el necesario ATP para
la contracción muscular.

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La doble regulación de la Glucógeno fosforilasa muscular

Fosforilasa “b” Fosforilasa “a”

Fosforilasa
quinasa

Fosfoproteína
Forma T
fosfatasa Forma T Forma R
Forma R
(inactiva)
(activa) Glucosa

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La glucógeno fosforilasa de músculo es regulable
alostéricamente por AMP, ATP, y G6P.
El isoenzima hepático es menos sensible a estos controles
alostéricos.
w AMP (que aumenta cuando los niveles de ATP son
bajos) activa promoting the relaxed conformation.
w ATP & glucose-6-phosphate, which both have
binding sites that overlap that of AMP, inhibit
Phosphorylase, promoting the tenformation.
w Thus glycogen breakdown is inhibited when ATP and
glucose-6-phosphate are plentiful.

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Señalización ligada a canales de Ca 2+ (I)
Ca2+ (10-3M)

10-7 M Ca 2+

Ca2+

La entrada de Ca2+ y su elevación


intracelular activa procesos en la célula

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Señalización ligada a canales de Ca 2+ (II)

10-7 M Ca 2+
Ca2+ (10-3M)

Ca2+

La salida de Ca2+ de los depósitos


intracelulares activa procesos en la célula

Na+ -driven Ca2+ Ca2+ Ca2+ -ATPase


Ca2+ antiport
Ca2+ ( ≈10 -3 M)

Ca2+ ( ≈10 -7 M) Na+


CYTOPLASM ATP ADP + P

(A)

Ca2+ -ATPase in Ca2+ -binding molecules Active Ca2+ import


endoplasmic reticulum in cytoplasm in mitochondrion
plasma membr
ane
ATP ADP + P

Ca2+ Ca 2+
Ca2+

calmodulina

Retículo endoplásmico CITOPLASMA mitocondria


(B)

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