Portada

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y TEXTIL

Departamento Académico de Ingeniería Química

“Purificación de sustancias y criterios de pureza”

GRUPO N° 6

INTEGRANTES:
Katlin Rojas Valqui
Janampa Rodriguez yelts
Aylas Espinoza Giancarlo

DOCENTES: Ing. Emilia Hermoza Guerra

Ing. Tarsila Tuesta Chávez .

LIMA – PERÚ

2017
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Índice general

Portada ........................................................................................................................ 1
Índice general............................................................................................................... 2
Técnicas de separación e identificación por cromatografía .......................................... 3
Objetivos .................................................................................................................. 3
Fundamento teórico ..................................................................................................... 3
La técnica del reflujo .................................................................................................... 4
Parte experimental ....................................................................................................... 4
Diagrama de flujo...................................................................................................... 5
Diagrama de proceso ............................................................................................... 7
Observaciones .......................................................................................................... 9
Conclusiones................................................................................................................ 9
Bibliografía ................................................................................................................. 10
Anexos ....................................................................................................................... 11
Aplicación industrial ............................................................................................... 11
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Técnicas de separación e identificación por cromatografía

Objetivos
- Entrenar en técnicas de separación e identificación de pigmentos naturales.
- Conocer los fundamentos fisicoquímicos implicados en los procesos de separación
por cromatografía.

Fundamento teórico

Separación por cromatografía en capa fina

La técnica de separación de TLC consta de dos fases, una sólida (fase estacionaria)
que se aplica en forma de capa delgada, absorbente, usualmente de entre 0.1 a 0.25 mm
de grueso para fines analíticos. Esta capa es fijada a una placa o lámina firme de vidrio
que actúa como soporte. A través de la fase estacionaria transita un líquido o solvente
(fase móvil o eluente). (Franco, 2009)

Fig. Montaje típico en cromatografía en capa fina. (Franco, 2009)

La efectividad de una fase móvil para eluir o desplazar un componente a lo largo de la

fase estacionaria depende del adsorbente, de la mezcla y el disolvente. La polaridad de
la muestra , el disolvente y de la fase en conjunto, son el factor importante.

Cuanto más polar sea el compuesto de la muestra, más firmemente se unirá a la fase
estacionaría. Inversamente, cuanto más polar sea la fase sólida, más fuertemente se
unirá aun compuesto de la fase móvil. Por consiguiente, cuanto mayor sea la polaridad
del disolvente, mayor será su capacidad de desalojar o desplazar un compuesto polar de
la superficie estacionaria. (Durst, 2007)
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La técnica del reflujo

El reflujo es el proceso que consiste en la ebullición de los reactivos mientras el vapor
al ser condensado retorna al matraz de destilación como líquido. Este es usado para
calentar mezclas por un tiempo prolongado a cierta temperatura an la cual no se puede
permitir la evaporación excesiva de los líquidos.

Técnica cromatografía en columna

En la cromatografía en columna, el adsorbente se halla en el interior de la columna de

vidrio. Contando con este soporte mecánico, pueden emplearse para la separación de
una gran variedad de materiales. Los adsorbentes más comunes son también alúmina y
el gel de sílice como en la cromatografía en capa fina. (Franco, 2009)

Parte experimental

Cromatografía en capa fina

Determinación del Rf

𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑢𝑛 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜

𝑅𝑓 =
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒

a) Para éter puro

4.3𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.878
4.9 𝑐𝑚

b) Mezcla 4-1 (éter - acetona)

2.5 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.833
3 𝑐𝑚

c) Mezcla 3-1 (éter – petróleo – acetona)

𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.
𝑐𝑚

Elegimos el disolvente ideal para la cromatografía en capa fina

a) Éter puro: disolvente
b) Mezcla 4-1 (éter - acetona): disolvente
c) Mezcla 3-1 (éter – petróleo – acetona): disolvente
Por tanto el disolvente ideal para la cromatografía es
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Diagrama de flujo

Cromatografía en capa fina

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Diagrama de flujo

Cromatografía de columna
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Diagrama de proceso (elaborado con chemlab)

1
cucharada de
silicagel + 5ml
de agua

Aplicación
uniforme de papilla
Lavado y secado Preparado de la Papilla
de placas

Pigmento
en tubo Papel Filtro
capilar
Cromatógrafos:

1. Éter de petróleo
2. Éter de petróleo
+acetona
3. acetona pura
Proceso de Secado Preparación de las
en estufa a 105ºC tres placas
Luna de
Reloj
Esperamos a que
todo el papel filtro se

+ =
humedezca

Placa con
pigmento Cromatógraf Proceso de
o cromatografía capa fina

Esperamos a que el COMPUESTO A

punto llegue hasta
1cm de distancia del COMPUESTO B
otro extremo F
S B
A ORIGEN

Medición de Distancias y posterior

cálculo del Rf para cada compuesto
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Solvente no
polar: éter de
petróleo
Columna de
Cromatografía

Algod
ón
Llenado de
Solvente (Fase Móvil) Llenado de Alúmina (Fase
Estacionaria) Cromatografía Llenado del Pigmento

Éter de
Mezcla
petróleo
de éter de
petróleo y
acetona

Separación
Fracción P1
(carotenoide)
Proceso de Separación
del carotenoide

Proceso de Separación
de la clorofila

Productos obtenidos

Separació
Fracción P2
n Fracción P2 Fracción P1
(CLOROFILA)
(Clorofila) (CAROTENOIDE)
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Observaciones

Cromatografía en capa fina

 El sílicagel y agua con una pisca de yeso, deben tener una viscosidad adecuada
para luego esparcir uniformemente en la placa.
 Esperamos qu seque un poco a temperatura ambiente, luego colacamos en una
estufa precalentada a 100 °C por unos 70 min.
 Nuestra fase estacionaria es el sólido colocado encima de las placas, y la fase
móvil son los 3 disolventes utilizados para cada una.
Cromatografía de columna

 Nuestro solvente (éter de petróleo) siempre tenía que estar por encima del resto
de componentes.
 Observamos después de un tiempo, la separación del pigmento color amarillo que
recogimos en un tuvo de ensayo, hasta que el color empieza a bajar en
intensidad.
 Luego recogimos en otro tuvo de ensayo el pigmento color verde oscuro
(separado).

Conclusiones

 Entrenamos dos técnicas de separación e identificación de pigmentos naturales

que son: cromatografía en capa fina y cromatografía de columna.
 Los fundamentos físico – químicos implicados en la separación por cromatografía
son: adsorción y solubilidad, que determinan su movilidad en la fase estacionaria
y fase móvil.
 El Rf aumenta a medida que el disolvente es más polar.
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Bibliografía

Durst, H. D. (2007). Química orgánica experimental. Barcelona: Reverté.

Franco, A. G. (2009). Experimentos de quimica orgánica. Colombia: Elizcom.

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Anexos

Beneficios de la cromatografía de capa fina en la industria farmacéutica

Las Huellas Dactilares para Aislar Compuestos Biológicamente Activos

de Plantas Medicinales Indígenas

Cromatografía en capa fina (TLC) ofrece un método rápido, barato para la detección de
materiales de plantas medicinales.

Las nuevas técnicas de la química que permite la rápida identificación de compuestos

potencialmente útiles médicos. . TLC es la herramienta ideal para encontrar estos compuestos
en particular el uso de alúminas.

Un ejemplo de una planta medicinal originaria de estudiarse en África es aethiopicum

Siphonochiles. La parte de la planta utilizada es el rizoma y las raíces carne. El producto está
disponible en las plantaciones comerciales y la ampliación acelerada de la producción de la
planta es posible. Utilización de TLC preparativa de DAI y luego el uso de DAI en seco de la
cromatografía de columna de ampliación acelerada acelera el proceso. Los rizomas y raíces se
cosechan al final de la temporada de crecimiento cuando las plantas comienzan a ir latentes.
Para identificar los compuestos biológicamente importantes, el material de rizoma es de tierra y
se extrae con agua, etanol y acetona. Los solventes separan los compuestos en compuestos
polares, intermedios y no polares. A continuación, se establecen las huellas dactilares de los
compuestos biológicamente activos mediante la tecnología de TLC. Idealmente, se sugiere
utilizar primeros el TLC de dos dimensiones para la separación de compuestos. La huella
química de TLC ha demostrado ser una herramienta de identificación de las medicinas
tradicionales.

http://www.dynamicadsorbents.com/spanishweb/thinlayerchromatography.htm