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GUÍA DE LABORATORIO Nº1: ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

Unidad: Célula Profesora: Brenda Soto Venegas


Subsector: Biología
Objetivo fundamental: Comprender el proceso de actividad enzimática en tejidos y sustancias de
origen animal y vegetal.
Objetivo de la guía: Integrar conocimientos y habilidades a través del desarrollo de las
actividades prácticas y teóricas contenidas en la guía.
Nivel: Primero medio
Nombre:_______________________________________ Curso: _________Fecha: __________

Puntaje obtenido: ______________ Puntaje total: 53 puntos. Nota:________________

Instrucciones:
 Lea atentamente cada una de las actividades prácticas y teóricas de la guía.
 Trabaje en grupo.
 Tienes 3 horas de clases para realizar el trabajo práctico y teórico.

INTRODUCCIÓN
Los enzimas son proteínas altamente especializadas que catalizan numerosas reacciones
en los sistemas biológicos. Una propiedad importante es su especificidad a la hora de reaccionar
con sustratos, acelerando determinadas reacciones químicas en disolución. En general, un enzima
proporciona el ambiente en que una reacción determinada es, energéticamente, más favorable. El
rasgo distintivo de una reacción catalizada enzimáticamente es que ocurre en un lugar específico
del enzima, el sitio activo. La molécula fijada en el sitio activo y sobre la que actúa el enzima se
denomina sustrato. El complejo enzima-sustrato formado es de vital importancia para definir el
comportamiento cinético de las reacciones catalizadas. Una reacción enzimática sencilla puede
formularse como sigue:
E + S ES  E + P
donde E, S y P representan enzima, sustrato y producto, respectivamente. ES y EP son complejos
del enzima con el sustrato y con el producto. La función del catalizador es aumentar la velocidad de
una reacción reduciendo la energía de activación de la misma, Ea. Los catalizadores no modifican
los equilibrios de la reacción ni se consumen durante el proceso.

OBJETIVOS
1. Poner de manifiesto la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.
2. Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
3. Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.

MATERIALES
 Gradilla  Tubos de ensayo  Mechero
 Pipetas  Agua oxigenada  Solución de lugol
 Soluciones de Fehling  Baño María  Almidón
 Trocitos de hígado  Trocitos de tomate

PROCEDIMIENTO
1º RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales. La
función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma
una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima, la
catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La reacción de la
catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:
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La existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el agua oxigenada
como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchas de las bacterias patógenas
son anaerobias (no pueden vivir con oxígeno), mueren con el desprendimiento de oxígeno que se
produce cuando la catalasa de los tejidos actúa sobre el agua oxigenada.

En esta primera experiencia vamos a demostrar su existencia.


1. Colocar en un tubo de ensayo unos
trocitos de hígado.
2. Añadir 5 mililitros de agua oxigenada.
3. ¿Qué se observará?
Reacción A
4. ¿Qué componente contiene la
sustancia liberada?. Figura 1 (Observa
la reacción A) Figura 1

NOTA: Se debe repetir esta experiencia con muestras de distintos tejidos animales y
vegetales. ¿Cómo es la actividad de la enzima en ambos tejidos? Observa, compara las
muestras y responde la pregunta anterior. (4 puntos)

2º DESNATURALIZACIÓN DE LA CATALASA
Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de las proteínas, que es la
desnaturalización. Ya que la catalasa químicamente es una proteína, podemos desnaturalizarla al
someterla a altas temperaturas. Responda: ¿Qué ocurrirá con la catalasa?.
1. Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos de hígado.
2. Añadir agua para hervir la muestra. Hervir durante unos minutos.
3. Después de este tiempo, retirar el agua sobrante.
4. Añadir el agua oxigenada.
5. Responder pregunta anterior y anota tus observaciones. (3
puntos)

Figura 2
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3º HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN
Mediante esta experiencia, vamos a ver la actividad de otra enzima, la amilasa o ptialina, presente
en la saliva. Esta enzima actúa sobre el polisacárido almidón, hidrolizando el enlace O-glicosídico,
por lo que el almidón se terminará por transformar en unidades de glucosa.

1. Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo, numerados


del 1 al 4.
2. Añadir en cada tubo 5 mililitros de una solución diluida de
almidón.
3. A los tubos 3 y 4 añadir una pequeña cantidad de saliva.
Figura 3

Figura 3
 En el tubo 1, haz la Reacción de Fehling
(2 ml). Figura 4
 En el tubo 2, realiza la Reacción de Lugol
(2 ml). Figura 5 Figura 4
 ¿Qué color presentan el tubo 1 y 2?
¿Qué significan ambos colores? (2
puntos)

Figura 5

 Los tubos 3 y 4 que


contienen el almidón, al
que le hemos echado la
saliva, ponerlos en un vaso
de precipitados al baño
María, controlando la
temperatura del agua para
que no hierva, ya que lo
que intentamos, es que la
enzima de la saliva trabaje Figura 7 Figura 8
Figura 6 a unos 37ºC. Dejarlo unos
15 minutos Figura 6

A continuación se deben realizar las siguientes reacciones:


 En el tubo número 3, realizar la Reacción de Fehling. Figura 7. En el tubo número 4,
realizar la Prueba del Lugol. Figura 8
 ¿Por qué la reacción de Fehling es positiva en el tubo de ensayo 3? ¿Por qué la
reacción de lugol es negativa en el tubo 4? (4 puntos)

ACTIVIDADES
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ACTIVIDAD Nº1: Una vez terminada la actividad, con su grupo respondan las siguientes
preguntas que se plantean a continuación.

1. ¿En qué consiste una reacción de hidrólisis? (1 punto)

2. Explique el proceso de desnaturalización de las proteínas. (2 puntos)

3. ¿De qué manera se evidencia la acción enzimática de la catalasa? (1 punto)

4. ¿De qué manera influye la temperatura sobre la acción de esta enzima? (2 puntos)

5. ¿En qué organelo encontramos la enzima catalasa? (1 punto)

6. Al cocinar los alimentos demasiado ¿Cómo influye en la actividad de las enzimas? (2


puntos)
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NOTA: ELABORE CUATRO INTERROGANTES CREADAS POR USTED DANDO LA RESPUESTA
CORRESPONDIENTE, RELACIONADAS CON EL PRÁCTICO O LA MATERIA EN ESTUDIO. (2
puntos cada pregunta con su respuesta)

ACTIVIDAD N°2: Dibujo aplicado. (8 puntos)

Las enzimas son moléculas que ayudan a realizar las reacciones metabólicas de las células de
nuestro organismo. Para realizar su trabajo en forma óptima, éstas deben tener un ambiente
adecuado. De acuerdo a lo explicado en clases, observa, analiza las imágenes y responde las
siguientes preguntas.

1.- ¿Qué ocurre con la actividad de la amilasa salival si llega a los 50°C?. Explique (2 puntos)
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2.- ¿Cómo se relaciona la actividad de las enzimas con nuestra temperatura corporal? Explique (2
puntos)

3.- ¿Qué importancia tiene para el organismo la acción de la amilasa salival? (2 puntos)

4.- ¿Cuál es el pH óptimo de la tripsina? Explica. (2 puntos)

Modelo POE Actividad experimental


Descripción del experimento o fenómeno (3 puntos):

1. Predicción
a) Escribe o dibuja todo lo que pueda pasar. (2 puntos)

b) Escribe las razones sobre por qué las cosas pasan de esa forma. (4 puntos)

2. Observación (Dibuja o describe lo que viste) (2 puntos)

3. Explicación (Compara tus observaciones con tus predicciones. ¿Fueron acertadas las
predicciones? ¿Se pueden sostener las razones de las predicciones? Explica qué ocurrió y por
qué.) (4 puntos)
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