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Determinación de sulfitos

5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) Para-rosaniline (PRA)-formaldehyde


5,5’-dithiobis(2 -nitrobenzoic acid) Cloruro Para-rosaniline
Etanol Formaldehido
Solución buffer fostato salina pH 7,2 HCl
Agua Etanol
Agua
Bisulfito de sodio /EDTA

Preparación de reactivos:

 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid)

Se disuelve 0.060 gramos de 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) en 10 mL de etanol y se afora a 100mL con la


solución salina de buffer fosfato (pH 7,2).

 Para-rosaniline (PRA)-formaldehyde

Se prepara una solución al 1% (p/v) de cloruro de para-rosanilina disolviendo 1,0 gramos de cloruro de para-
rosanilina en 10 mL de etanol y diluido a 100mL con agua. De la solución anterior preparar una solución de
trabajo de para-rosanilina al 0,2% con ácido clorhídrico 1,2M. Preparar una solución de formaldehido al
0,1% de formaldehido comercial (36-38%). Se mezclan las dos soluciones anteriores (para-rosanilina al 0,2%
y formaldehido al 0,1%) en proporción 1:1.

 Solución de bisulfito de sodio.

Disolver 0,10 g de bisulfito de sodio en agua y diluir a 100mL. Las soluciones de trabajo de sulfito de sodio
son preparadas diluyendo la solución anterior con una solución 1 mM de EDTA.

Procedimiento:

 Para-rosaniline (PRA)-formaldehyde

Se coloca un mililitro de la solución de la mezcla de para-rosanilina y formaldehído en un tubo volumétrico


de 5 ml. Se añade 1 ml de solución de trabajo de sulfito o solución de muestra real y se agita bien. Para la
detección semicuantitativa de los niveles de sulfito, la solución se comparó con la tarjeta de color de
referencia estándar después de 5 min. Para una cuantificación precisa, la absorbancia se midió a 575 nm con
agua desionizada como referencia después de 10 minutos de reacción a temperatura ambiente.

 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid)(DTNB)

Una cantidad conocida de solución de trabajo de sulfito o solución de muestra real se coloca en un tubo
volumétrico de 10 ml y se diluye con agua hasta 8 ml. Luego se añade 1 ml de solución de DTNB y la
solución se diluye hasta la línea de 10 ml con agua. La absorbancia se mide a 412 nm con agua desionizada
como referencia después de 5 minutos de reacción a temperatura ambiente.

 Preparación de muestras

Cada una de las muestras de alimentos reales se pesaron con precisión (para alimentos sólidos) o se
pipetearon (para alimentos líquidos) en un vaso de precipitados, al que se agregaron 30 ml de agua
desionizada. La mezcla se agitó bien y se sometió a ultrasonidos durante 15 minutos antes de filtrarla con un
filtro de membrana de jeringa de 0,45 l. El filtrado se diluyó a 100 ml con agua y se midió de acuerdo con lo
siguiente procedimientos.