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Práctica 1

DETERMINACIÓN DE FÓSFORO EN BEBIDAS DE COLA POR


ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS
ÍNDICE

ANTECEDENTES……………………………………………………………….….....3

OBJETIVOS……………………………………………………………………..……..5

METODOLOGÍA…………………………………………………………………..…...5

RESULTADOS………………………………………………………………….…......7

DISCUSIONES………………….……………………………….………….……..…..9

CONCLUSIONES……..…………………………………………..……………........10

REFERENCIAS.…………………………………………………………..………….10

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ANTECEDENTES

La espectrofotometría de absorción en las regiones de ultravioleta visible del


espectro electromagnético, es, posiblemente la más utilizada en la práctica del
análisis cuantitativo de todas las técnicas espectroscópicas. Se basa en la
absorción de radiación ultravioleta y visible por el analito, como consecuencia
de lo cual se origina un estado activado que posteriormente elimina su exceso
de energía en forma de calor.1

Leyes de absorción de radiación

Cuando un haz de radiación monocromática de una determinada longitud de


onda atraviesa una capa de disolución conteniendo una especie absorbente, la
potencia (energía por unidad de tiempo y unidad de área) del haz incidente Po
se atenúa, disminuyendo hasta P.1

Ley de Beer – Lambert2

La relación entre la absorción de luz por una solución diluida o por un gas y la
concentración de la fase absorbente vienen dada por la ley de Beer. La relación
entre la absorbancia de la luz y el camino recorrido por ésta viene dada por la
ley de Lambert. Es conveniente considerar ambas leyes conjuntamente.

Se postula que cada molécula de la sustancia que absorbe tiene igual


oportunidad de interceptar o absorber un cuanto de luz, cualquiera que sea su
situación dentro de la celda. Esto implica que la solución es suficientemente
diluida para que ninguna molécula quede oculta en la sombra de otra.

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Todos los espectrofotómetros se componen de los elementos representativos
(figura 1). Los materiales y los detalles de construcción dependen del margen
de longitud de onda que se va a estudiar.

Imagen 1.- Disposición esquemática de un espectrofotómetro.

Las partes básicas de un espectrofotómetro son las siguientes3:

1. Fuente de Luz: Puede ser una lámpara de Tungsteno o Deuterio.


2. Selector de frecuencias: Determinación de un espectro de absorbanción
requiere la medida de la absorbancia o de la transmitancia como función
de la longitud de onda.
3. Control de la intensidad: La cantidad de luz requerirá dependerá de su
longitud de onda y de la naturaleza de la muestra.
4. Celda: Celdas de vidrio en la región visible y celdas de sílice en el
ultravioleta.
5. Detector: Dispositivo electrónico sensibilizador, que se conocen como
fototubos y tubos fotomultiplicadores para detectar la intensidad de luz
transmitida por la muestra.
6. Medidor o registrador: La señal del detector se alimenta con un circuito
potenciométrico que se gradúa para obtener un dato o lectura de
absorbancia.

El ácido fosfórico, aditivo utilizado comúnmente en a elaboración de las colas,


pueden producir un efecto desmineralizante del sistema óseo puesto que el el
fósforo estimula la perdida de calcio. Cuando estas sustancias (fósforo y calcio)

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se encuentran en proporciones equilibradas dentro del organismo no existe
ningún problema asociado, pero cuando se aumenta la concentración de uno
inmediatamente se genera la incapacidad de absorber el otro generando un
desequilibrio que en medianos plazos que daña la salud particularmente de los
huesos.4

OBJETIVOS

1. Conocer las partes y el manejo de un espectrofotómetro de UV-VIS.


2. Realizar una curva de calibración para cuantificar, por UV-VIS, el
contenido de fósforo en una muestra de refresco de cola.

METODOLOGIA

Preparación de las Soluciones:

Se prepararon 100 mL de una solución stock de 100 ppm de P2O5, pesando


0.025 g de KH2PO4 se disolvió y se aforo a 100 mL en un matraz aforado. A
continuación se preparó la solución de trabajo de 4 ppm tomando 1 mL de la
solución stock previamente preparada y aforando a 25 mL en un matraz
aforado.

Posteriormente se preparó la solución reductora de la siguiente manera:

 Se pesaron 0.1563 g de molibdato de amonio y se disolvió en 5 mL de


agua destilada;
 Después se pesaron 0.2135 g de ácido ascórbico los cuales se
disolvieron en 10 mL de agua destilada;
 A continuación se midieron 2.2 mL de ácido sulfúrico concentrado los
cuales se diluyeron en 15 mL de agua destilada,
 Por último se mezclaron las tres soluciones anteriores y se aforaron a 50
mL en un matraz aforado.

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Curva de Calibración:

Para la curva de calibración se tomaron alícuotas de 1, 2, 3, 4 y 5 mL de la


solución trabajo, se le agrego 4 mL de la solución reductora a cada una y se
aforaron a 10 mL en matraces aforados.

Se desgasificaron las 2 muestras de refresco de cola en un baño de ultrasonido


sumergiéndolas por aproximadamente 5 minutos cada una.

Preparación de las Muestras:

Posteriormente se preparó la muestra tomando 1 mL de cada una de las


muestras de refresco desgasificado y se aforo a 50 mL en un matraz aforado
respectivamente; de estas soluciones se tomó 1 mL y se le añadió 4 mL de
solución reductora a cada una y se aforaron a 10 mL con agua destilada en
matraces aforados.

A continuación se preparó el blanco para la lectura tomando 4 mL de la solución


reductora y aforando a 10 mL en un matraz aforado.

Posteriormente se pusieron a incubar las alícuotas, el blanco y las muestras


preparadas a baño María durante 30 minutos a 50°C.

Transcurrido este tiempo se procedió a leer en el Espectrofotómetro de


ultravioleta visible una longitud de onda de 827 nm; esta longitud de onda se
encontró realizando un barrido en el equipo utilizando la alícuota de mayor
concentración.

Primeramente se calibro el equipo con el blanco preparado y después se


procedió a leer las absorbancias de las alícuotas para construir la curva y
posteriormente se leyeron las muestras tomando sus absorbancias para
interpolarlas en la curva obtenida y así encontrar la concentración de las
mismas.

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RESULTADOS

Tabla 1.- Concentración y absorbancia de las alícuotas.

Alícuotas Concentración (ppm) Absorbancia (nm)


1 0.400 0.001
2 0.800 0.002
3 1.200 0.003
4 1.600 0.004
5 2.000 0.005

Las alícuotas nos servirán para realizar la curva de calibración y poder sacar
una conclusión concreta respecto a la concentración de nuestras muestras que
serán analizadas.

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Grafica de resultados y = 0.0025x
0.006 R² = 1

0.005

0.004
Adsorbancia

0.003

0.002

0.001

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
Concentracion

Gráfica 1.- Curva de calibración del P2O5 (concentración / absorbancia)

Con ayuda de la curva de calibración se puede concluir que si se lograra


encontrar la concentración de las muestras, puesto que dio una línea recta
ascendente, sin mencionar que las absorbancias arrojadas por el
espectrofotómetro están dentro de la recta, por lo cual se utilizara la ecuación
(ley de Lambert - Beer) de la recta, para luego sustituir la x con la Absorbancia
dada anteriormente y así poder calcular la concentración de las muestras,
obteniendo como ecuación de la recta Y=0.0025

Tabla 2.- Absorbancias obtenidas de las muestras.

Muestra Absorbancia
Pepsi Kick 0.003
My Brand cola 0.004

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Sustituyendo Y por las absorbancias obtenidas de las muestras podremos
obtener la concentración de estas.

Pepsi kick:

X=0.003/0.0025 = 1.2

My brand cola:

X= 0.004/0.0025 = 1.6

Tabla 3.- Concentración de las muestras de Pepsi kick y My Brand Cola.

Muestra Concentración (ppm)


Pepsi kick 1.200
My brand cola 1.600

DISCUSIONES

La espectrofotometría de absorción UV-Vis posee diversas aplicaciones, una de


ellas es el análisis de un solo componente. Para esta práctica se utilizó esta
técnica con el fin de determinar el nivel de fósforo presente en una bebida de
cola elegida previamente (Coca-Cola). Lo anterior estuvo basado en el método
espectrofotométrico del azul de molibdeno con el molibdato de amonio y ácido
ascórbico para desarrollar color.6

Durante la formación de los ácidos molíbdicos un exceso de molibdato


reacciona en solución ácida (razón por la cual se le añadió H2SO4 a la solución
reductora) con el fosfato (especie de interés para este experimento) para luego
determinar el nivel de fósforo presente.6 La reacción siguiente ilustra el proceso:

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7H3PO4 + 12(NH4)6Mo7O24 7(NH4)3(PO4(MoO3)12) + 51NH4 +51OH-
+33H2O

Reacción 1. Formación del complejo de fosfomolibdato 7

El H3PO4 es el que se encuentra presente en la bebida de cola a analizar.

En la reacción 1 se observa la formación del complejo de fosfomolibdato que


posteriormente fue reducido a un compuesto azul soluble cuya absorbancia es
medida espectrofotométricamente y es proporcional a la cantidad de fósforo
presente en la muestra. Para lograr lo anterior se utilizó en esta práctica ácido
ascórbico debido a sus propiedades reductoras.5

En la tabla 1 se puede percibir que conforme aumentaba la concentración de


P2O5, la absorbancia también aumentaba, lo anterior se debe a que había una
mayor presencia de fósforo (proveniente del P2O5) y en consecuencia se formó
una mayor cantidad del complejo de fosfomolibdato, lo anterior se comprobó por
una mayor intensidad en la coloración azul. Por esa razón, para realizar el
barrido de exploración, se utilizó el punto de la curva de calibración más
concentrada (aquél con 2ppm de P2O5) para establecer la longitud de onda
máxima de absorción, la cual fue registrada en 827 nm. Se puede afirmar que
existe una relación directamente proporcional entre la concentración en ppm y
la absorbancia de los puntos de la curva de calibración, es decir, conforme una
variable aumenta, la otra también lo hace, esto se debe al valor positivo cercano
a 1 (que indica correlación perfecta) del coeficiente de correlación. 7

CONCLUSIONES

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Se conoció y aprendió el funcionamiento del espectrofotómetro de UV-VIS,
además del uso del equipo de baño de ultrasonido. Esto se realizó con el
propósito de construir una curva de calibración para cuantificar el contenido de
fósforo en muestras de refresco de cola de las marcas Pepsi Kick y My Brand
cola usando el equipo de espectrofotometría de UV-VIS.

Se conoció el uso del punto de la curva de calibración más concentrado para la


realización del barrido de exploración para que las demás absorbancias
obtenidas estén dentro de la longitud de onda establecida.

REFERENCIAS

1. HERNANDEZ Hernández, Lucas; González Pérez, Claudio. Introducción


al análisis instrumental. Primera Edición. España 2002 Editorial. Arial
Ciencia. Pp. 45-46.
2. WALTON F. Harold; Reyes Jorge. Análisis químico e instrumental
moderno. Editorial Reverté. Pp. 146.
3. CONNORS A. K. Curso de Análisis Farmacéutico. Segunda edición.
España 1981. Editorial Reverté. Pp. 239-242.
4. http://www.supernatural.cl/azucarenbebidas.asp. Consultado el día 31 de
Enero del 2014.
5. Cavazos, Norma C.; Zárate, L.; Torres de Navarro, E.. Determinación de
fósforo y cafeína en bebidas de cola. Educación Química, 2001, 12,2,
pp.116-120.
6. Ortíz R.; Martínez Y. Laboratorio de Análisis Instrumental. Universidad de
los Andes, Facultad de Ciencias. Departamento de Química. Mérida,
2003. 48 pp. 9-11.
7. Angelici R.J. Técnica y Síntesis en Química Inorgánica. Editorial
Reverté. 1979, España. p 247.

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