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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

CARRERA DE BIOQUÍMCA Y FARMACIA

ANÁLISIS INSTRUMENTAL II

Integrantes:
 Erika Carillo (4)
 Libni Guerra (10)
 Pamela Mañay (16)
 Jessica Pagalo (22)
 Ana Francisca Ricaurte (28)

Semestre:
Cuarto “B”

Fecha:
08/01/2019

Docente:
Msc. Simón Moreano

Tema:
Cromatografía de gases (introducción e instrumentación)
Contenido
CROMATOGRAFÍA DE GASES........................................................................................................ 3
Tipos de cromatografía de Gases ................................................................................................. 3
Instrumentación ........................................................................................................................... 4
Sistema de suministro de gas portador ................................................................................... 4
Sistema de inyección de la muestra......................................................................................... 5
 Inyección con división: ................................................................................................. 6
 Inyección sin división .................................................................................................... 6
 Inyección directa en la columna................................................................................... 6
Columnas y hornos ................................................................................................................... 7
Sistemas de detección .............................................................................................................. 7
Tipos de detectores .............................................................................................................. 8
Sistema de registro y tratamiento de datos .............................................................................. 11
BIBLIOGRAFIA: ............................................................................................................................ 11
CROMATOGRAFÍA DE GASES

La cromatografía es una técnica de separación, de mezclas moleculares, basada en el


intercambio de los solutos entre dos fases. Su gran capacidad para resolver muestras
complejas ha conducido a utilizarla cada vez más como técnica analítica.

La cromatografía de gases, es una técnica que permite trabajar con muestras sólidas,
líquidas o gaseosas, siempre que sean volátiles y estables térmicamente.

Entre las técnicas cromatográficas utilizadas con fines analíticos, la cromatografía de


gases es probablemente la técnica de más amplia utilización, ninguna técnica analítica
puede ofrecer su capacidad de separación o sensibilidad a la hora de analizar
compuestos volátiles.

Por lo general la utilización de la cromatografía de gases está restringida a la separación


de compuestos con un peso molecular menor de 1000 a una temperatura máxima de
trabajo de aproximadamente 400°C; dentro de estos límites, la única limitación que
existe será la estabilidad térmica de la muestra.

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:


• Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que
puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
• Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En
este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

Para realizar una separación mediante esta técnica se inyecta una pequeña cantidad de
muestra a separar en una corriente de un gas inerte a elevada temperatura, esta
corriente de gas atraviesa una columna cromatográfica que separa los componentes de
la mezcla por medio de un mecanismo de partición, de adsorción o en algunos casos una
mezcla de ambos.
Los componentes separados, emergerán de la columna a intervalos discretos y pasarán
a través de algún sistema de detección adecuado, o bien serán dirigidos hacia un
dispositivo de recogida de muestras.

Tipos de cromatografía de Gases

1. Cromatografía Gas-Sólido
 Separación basada en absorción y desorción.
 FE es una capa de sólido adsorbente simple: Alúmina, sílica
 O sólido poroso: tamiz molecular
 Columnas empaquetadas o capilares

2. Cromatografía Gas-Líquido
 Cromatografía de partición
 FE es una sustancia líquida
 Fines analíticos
 Columnas capilares y empaquetadas

Instrumentación

Un cromatógrafo de gases consiste en varios módulos básicos ensamblados para:


1) proporcionar un gasto o flujo constante del gas transportador (fase móvil),
2) permitir la introducción de vapores de la muestra en la corriente de gas que
fluye,
3) contener la longitud apropiada de fase estacionaria,
4) mantener la columna a la temperatura apropiada (o la secuencia del programa
de temperatura),
5) detectar los componentes de la muestra conforme eluyen de la columna, y
6) proveer una señal legible proporcional en magnitud a la cantidad de cada
componente.

Una cromatografía de gases consta de los siguientes componentes básicos:

 Sistema de suministro de gas portador


 Sistema de inyección de la muestra
 Columna y fase estacionaria
 Sistema de detección
 Sistema de registro y tratamiento de datos

Sistema de suministro de gas portador


La fase móvil en la cromatografía de gases es inerte y no interactúa con la muestra, por
lo que su función es la de transportar la muestra y se denomina gas portador, este debe
cumplir con una serie de características:
 Debe ser químicamente inerte y no interaccionar con las moléculas de analito ni
con la columna.
 Debe obtenerse en un grado de pureza alto, debe estar libre de contaminantes
que pueden interaccionar con la muestra, degradar la columna o dar algún tipo
de señal en el detector.
 Debe ser compatible con el sistema de detección empleado.

Gases más usados


 Hidrógeno tiene máxima eficiencia con columnas capilares
 Helio usado en sistemas acoplados
 Nitrógeno empacadas
 Argón

Sistema de inyección de la muestra


Los dispositivos de inyección de muestras para cromatografía de gases tienen la mision
de vaporizar la muestra a analizar e incorporarla a la corriente de gas portador que se
dirige hacia la columna. La vaporización e introducción de las muestras en el sistema,
debe realizarse cumpliendo una serie de requisitos:
1. La vaporización de la muestra deber ser lo más rápida posible.
2. La vaporización debe realizarse sin discriminar ningún componente de la
muestra.
3. La muestra debe llegar a la columna como una banda lo mas fina posible.

Para obtener una alta eficiencia la muestra debe ser del tamaño adecuado y la inyección
debe ser rápida, caso contrario se produce una mayor dispersión de las bandas y una
menor resolución.
La elección del sistema de inyección viene dictada por el tipo de columna empleada, ya
sea empaquetada o capilar y por la naturaleza de los solutos a separar.
Inyectores para columnas empaquetadas: en esta no presenta problemas, en este tipo
de columnas admiten cantidades de muestra relativamente elevadas y la inyección de
unos cuantos micro litros de muestra no conduce a una merma apreciable de la eficacia
de la columna.

En columnas empaquetadas el sistema de introducción de la muestra (0’5 a 20 μL)


consiste en la inyección empleando un micro jeringa calibrada en un bloque.

Inyectores para columnas capilares: esta se diferencia en que estas se puede separar
menor cantidad de muestra, además las columnas capilares son muy afectadas por los
disolventes ya que los volúmenes que se inyectan en ellas son extremadamente bajos.

En columnas capilares (volúmenes 100 veces menores) la inyección es un aspecto crítico


y puede realizarse de tres formas:

 Inyección con división:


Es el más sencillo de los que se utiliza en cromatografía capilar, este tipo de
inyección se lo conoce como inyección “Split”. Cuando los analitos se encuentran
en una proporción mayor del 0,1 % en la muestra. La muestra se inyecta a través
de un septum y el gas portador arrastra la muestra hacia una cámara donde se
la muestra se vaporiza y mezcla.

 Inyección sin división


Es apropiada para análisis de trazas de analitos menos de 0,01 % de la
muestra. Se usa el mismo inyector, se introduce en un volumen elevado de
muestra, se evapora y se dirige a la columna, esta presenta una temperatura
inferior al punto de ebullición del disolvente, de modo que se condensa a la
entrada, y se forma una fina película en la que quedan atrapados
componentes de la muestra, después, la temperatura de la columna aumenta
y se inicia la separación.
 Inyección directa en la columna
Sin existir una cámara de vaporización previa. Se emplea para muestras
térmicamente inestables o con analitos cuya volatilidad varía en un amplio
rango de temperaturas. Al inicio, la columna se mantiene fría y después de la
inyección, se aumenta la temperatura volatilizando la muestra a la
temperatura más baja posible.

Columnas y hornos
Se usan dos tipos de columnas:
 Columnas empacadas, de baja eficiencia. Varían desde 1 a 5 metros.
 Columnas tubulares abiertas o capilares, más eficaces y rápidas. Pueden ser de
hasta 100 metros.

Están construidas con sílice fundida, acero inoxidable, vidrio o teflón, con una forma
helicoidal de 10 a 30 cm de diámetro, con el fin de acomodarlas al interior del horno.

El horno debe permitir un preciso control de la temperatura, de ella depende la


velocidad del proceso cromatográfico y su resolución. Debe ser ligeramente superior a
la temperatura de ebullición promedio de la muestra, de manera que la elución se
produzca en un tiempo razonable.

 La temperatura de la columna es un parámetro básico: a mayor temperatura


mayor presión de vapor, análisis más rápidos y menor separación

Sistemas de detección
Es el sistema encargado de poner de manifiesto la presencia de soluto o de
componentes de la muestra que abandonan la columna. Las características que debe
tener un detector ideal son las siguientes:
 Universal
 Sensibilidad (de hasta 10–10 o 10–15 g)
 Estabilidad y reproducibilidad
 Respuesta lineal para la concentración de analito
 Amplio rango de temperaturas de trabajo hasta 400 ºC
 Tiempo de respuesta corto e independiente de la velocidad de flujo
 Fácil manejo
 No destructivo
Una vez que los componentes de la muestra han sido separados por la columna, se hace
preciso al disponer a la salida de esta de un sistema de detección, capaz de señalar la
elución de un componente de la muestra y ofrecer, al mismo tiempo, una señal
proporcional a la cantidad de substancia que pasa a través de él.
Los detectores utilizados en cromatografía de gases son de tipo diferencia, no ofrecen
señal cuando pasa por ellos solamente el gas portador y responden ante alguna
propiedad que pueda variar cuando este se encuentra mezclando con alguna substancia
eluida de la columna.
Tipos de detectores
Los detectores usados en cromatógrafo de gases, pueden dividirse de forma genérica en
detectores universales y detectores específicos; los primeros ofrecen las ventajas de
responder prácticamente ante cualquier compuesto que pueda eluir de la columna.

 Detector de conductividad térmica


Este es uno de los primeros detectores utilizados para la cromatografía de gases,
este detector responde a la diferencia de conductividad térmica existente entre el
gas portador puro y el gas portador mezclado con alguna otra substancia, la
respuesta dependerá de la diferencia de conductividad térmica entre el compuesto
que eluye de la columna y el gas portador.

El detector de conductividad térmica es universal y no es destructivo; por lo general


se utiliza para el análisis de gases permanentes, hidrocarburos ligeros y otros tipos
de compuestos que ofrecen una respuesta pobre en otros tipos de detectores.
 Detector de ionización de llama
El detector de ionización de llama es el más utilizado en cromatografía de gases, este
detector es en la práctica de respuesta universal, ya que es selectivo hacia los
compuestos que presenten enlaces C-H, por lo que son muy pocos los compuestos
que no dan señal a él.

El mecanismo de generación de iones en este detector es complejo ya que la energía


de la llama es demasiado baja para explicar la generación de iones. Los detectores
de ionización de llama ofrecen una elevada sensibilidad, gran estabilidad y un rango
dinámico lineal excepcionalmente elevado.

 Detector de captura electrónica


El detector de captura electrónica se utiliza en una fuente de radiación para
bombardear el gas portador que pasa a través de una cámara de ionización,
generándose de esta forma un plasma de iones positivos, radicales libres y
electrones térmicos.

El detector de captura electrónica responde de forma muy selectiva frente a


compuestos que presenten grupos con elevada afinidad electrónica en particular
halógenos y grupo nitro.
 Detector de nitrógeno-fosforo
El detector de nitrógeno fosforo esta basado en el hecho de que la adición de una
sal de metales alcalinos a la llama de un detector de ionización aumente la respuesta
de este haca determinados elementos, este detector depende de parámetros tales
como la temperatura, la forma y el tamaño de llama, la composición de la sal alcalina,
etc.; es por esto que el manejo de este tipo de detector es difícil.

Este tipo de detector es utilizado en el campo del medio ambiente,


fundamentalmente para la determinación de residuos de plaguicidas, debido a su
sensibilidad y a su especificidad, lo que permite minimizar la limpieza de las
muestras.

 Detector fotométrico de llama


Este detector utiliza una llama de hidrogeno para excitar a un estado electrónico
elevado fragmentos de moléculas que contengan átomos de azufre o fosforo, estos
dos elementos son excitados de forma óptima por la llama de hidrogeno y cuando
retornan a su estado fundamental emiten las líneas características de sus espectros
y la intensidad de las radiaciones emitida es medida por medio de un
fotomultiplicador.
Sistema de registro y tratamiento de datos

Es un sistema de registro e integración, el cual genera un cronograma que representa


un registro del análisis, la muestra pasan a través de un detector, donde se mide la
cantidad de cada componente y se genera una señal eléctrica. Esta señal se transmite a
un sistema de registro e integración, el cual genera un cromatograma que representa
un registro del análisis. En la mayor parte de los casos, el sistema integra
automáticamente el área de cada pico, realiza los cálculos e imprime un reporte con los
resultados cuantitativos y los tiempos de retención.

BIBLIOGRAFIA:

1. Burget, C. A.; Green, L. E. And Bonelli, E. J. Chromatographic Methods In Gas


Analysis. Hewlett Packard. USA. 1979
2. Crippen, Raymond C. Identification Of Organic Compounds With Aid Of Gas
Chromatography. Mc Graw-Hill. Usa. 1973.
3. http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/
cromatografia_de_gases.pdf
4. https://es.slideshare.net/malenacuellar/instrumentacin-cromatografa-de-
gases-2012ii
5. Skoog, Douglas A. y Leary, James J. (1994). Análisis Instrumental. Armenia:
McGraw-Hill. ISBN 84-481-0191-X.
6. McNair, Harold M. & Miller, James M. (1998). Basic Gas Chromatography.
Canada: John Wiley & Sons, Inc. ISBN 0-471-17260-X (alk. paper); ISBN 0-471-
17261-8 (pbk.: alk. paper).