Bioprocesos Desarrollo: Un Desafío Interdisciplinaria

Bioprocesamiento es una parte esencial de muchos alimentos, industrias químicas y

farmacéuticas. operaciones de Bioprocesos hacen uso de microbianas, células y componentes
de las células de animales y plantas tales como enzimas para la fabricación de nuevos productos
y destruir residuos nocivos. El uso de microorganismos para transformar materiales biológicos
para la producción de alimentos fermentados tiene sus orígenes en la antigüedad. Desde
entonces, los bioprocesos se han desarrollado para una enorme gama de productos comerciales,
a partir de materiales relativamente baratos tales como alcohol industrial y disolventes
orgánicos, a los productos químicos de especialidad caros, tales como antibióticos, proteínas
terapéuticas y vacunas. enzimas industrialmente útiles y las células vivas, tales como productos
de panadería, y de cervecería levadura son también productos comerciales de
bioprocesamiento.

Tabla 1.1 da ejemplos de bioprocesos que emplean células completas. organismos típicos
usados y también se enumeran el tamaño del mercado aproximado para los productos. La mesa
es de ningún modo exhaustiva; No se incluyen los procesos para el tratamiento de aguas
residuales, la biorremediación, la recuperación de minerales y la producción microbiana de los
alimentos y bebidas tradicionales como el yogur, pan, vinagre, salsa de soja, cerveza y vino. Los
procesos industriales que emplean enzimas también no se enumeran en la Tabla 1.1; estos
incluyen elaboración de la cerveza, el bicarbonato, la producción de confitería, la clarificación
de zumos de frutas y transformación antibiótico. Grandes cantidades de enzimas se utilizan
comercialmente para convertir el almidón en azúcares fermentables, que sirven como
materiales para otros procesos biológicos de partida. Nuestra capacidad para aprovechar las
capacidades de las células y enzimas ha estado estrechamente relacionada con los avances en
microbiología, la bioquímica y la fisiología celular. El conocimiento en estas áreas se está
expandiendo rápidamente; herramientas de la biotecnología moderna tales como ADN
recombinante, sondas de genes, la fusión celular y cultivo de tejidos ofrecen nuevas
oportunidades para desarrollar nuevos productos o mejorar los métodos de bioprocesamiento.
Visiones de medicamentos sofisticados, tejidos cultivados humanos y órganos, biochips para los
ordenadores de la nueva era, pesticidas ambientalmente compatibles y potentes microbios que
degradan la contaminación anuncian una revolución en el papel de la biología en la industria. A
pesar de nuevos productos y procesos pueden ser concebidos y parcialmente desarrollados en
el laboratorio, con lo que la biotecnología moderna a buen puerto industrial requiere
conocimientos de ingeniería y know-how. Los sistemas biológicos pueden ser complejos y
difíciles de controlar; sin embargo, que obedecen a las leyes de la química y física y son por lo
tanto susceptibles de análisis de ingeniería. trabajo de ingeniería sustancial es esencial en
muchos aspectos de procesamiento biológico, incluyendo el diseño y operación de
biorreactores, esterilizadores y equipos de recuperación de producto, desarrollo de sistemas
para la automatización y control de procesos, y el diseño eficiente y seguro de las fábricas de
fermentación. El tema de este libro, ingeniería de bioprocesos, es el estudio de los principios de
ingeniería aplicados a procesos que implican catalizadores de células o enzimas.

II pasos en el desarrollo de bioprocesos: un nuevo producto típica de ADN recombinante

El carácter interdisciplinario de bioprocesamiento es evidente si nos fijamos en las etapas de

desarrollo necesarias para un proceso industrial completa. Como ejemplo, considerar la
fabricación de un nuevo producto derivado de ADN recombinante tal como insulina, hormona
del crecimiento o interferón. Como se muestra en la figura 1.1, se requieren varios pasos para
convertir la idea de que el producto en una realidad comercial; estas etapas implican diferentes
tipos de conocimientos científicos. Las primeras etapas de desarrollo de bioprocesos (pasos 1-
11) se ocupan de la manipulación genética del organismo huésped; en este caso, un gen a partir
de ADN animal se clonó en Escherichia bobina de ingeniería genética se realiza en los
laboratorios a pequeña escala por los científicos formados en biología molecular y bioquímica.
Herramientas de trabajo incluyen placas de Petri, micropipetas, microcentrífugas, cantidades
nano-o microgramos de enzimas de restricción, y los geles de electroforesis de ADN y
fraccionamiento de proteínas. En términos de desarrollo de bioprocesos, los parámetros de
mayor importancia son la estabilidad de las cepas construidas y el nivel de expresión del
producto deseado. Después de la clonación, las características de crecimiento y producción de
las células deben ser medidos como una función del entorno de cultivo (Paso 12). Se requieren
habilidades prácticas en la microbiología y análisis cinético; cultura a pequeña escala se lleva a
cabo en su mayoría utilizando matraces de agitación de 250 ml a 1-1itre capacidad. Composición
del medio, pH, temperatura y otras condiciones ambientales que permite el crecimiento y la
productividad óptima se determinan. parámetros calculados tales como la velocidad de
crecimiento celular, la productividad específica y rendimiento de producto se utilizan para
describir el rendimiento del organismo. Una vez que se conocen las condiciones de cultivo para
la producción, la ampliación del proceso se inicia. La primera etapa puede ser un biorreactor de
1 o 2-1itre de sobremesa equipado con instrumentos para medir y ajustar la temperatura, pH,
concentración de oxígeno disuelto, velocidad de agitación y otras variables del proceso (paso
13). Los cultivos pueden ser más estrechamente monitorizados en biorreactores que en
matraces de agitación de modo es posible un mejor control sobre el proceso. Se recoge
información sobre los requisitos de oxígeno de las células, su sensibilidad a la cizalladura, las
características de formación de espuma y otros parámetros. Las limitaciones impuestas por el
reactor sobre la actividad del organismo deben ser identificados. Por ejemplo, si el biorreactor
no puede proporcionar oxígeno disuelto a un cultivo aeróbico a una velocidad suficientemente
alta, el cultivo se convertirá en falta de oxígeno. Similar, en mezclar el caldo para exponer las
células a los nutrientes en el medio, el agitador en el reactor puede causar daño celular. Sea o
no el reactor puede proporcionar condiciones para la actividad óptima de las células es la
principal preocupación. La situación se evalúa utilizando los parámetros medidos y calculados
tales como coeficientes de transferencia de masa, el tiempo de mezclado, retención de gas, la
tasa de consumo de oxígeno, el número de potencia, el impulsor de cizallamiento de tasa, y
muchos otros. También debe decidirse si el cultivo es mejor operado como un proceso por lotes,
semi-discontinuo o continuo; los resultados experimentales para un rendimiento de cultivo en
diversos modos de funcionamiento del reactor pueden ser examinados. La viabilidad del proceso
como una empresa comercial es de gran interés; información sobre la actividad de las células se
utiliza en otros cálculos para determinar la viabilidad económica. Después de esta etapa de
desarrollo del proceso, el sistema se escala de nuevo a un bioreactor a escala piloto (Paso 14).
Ingenieros formados en el procesamiento biológico participan normalmente en las operaciones
a escala piloto. Un buque de la capacidad de 100-1000 litros está construido de acuerdo a las
especificaciones determinadas a partir del prototipo a escala de banco. El diseño es
generalmente similar a la que funcionaba mejor en la escala más pequeña. El objetivo de los
estudios a escala piloto es examinar la respuesta de las células a escala. Cambiar el tamaño de
los equipos parece relativamente trivial; sin embargo, la pérdida o la variación de rendimiento
a menudo se produce. A pesar de que la geometría del reactor, el método de aireación y mezcla,
diseño del impulsor y otras características puede ser similar en pequeñas y grandes
fermentadores, el efecto sobre la actividad de las células puede ser grande. La pérdida de
productividad siguiente escala de arriba puede o no puede ser recuperado;
Si el paso de ampliación se completa con éxito, el diseño de la operación a escala industrial
comienza (Etapa 15). Esta parte del proceso de desarrollo es claramente en el territorio de la
ingeniería de bioprocesos. Así como el propio reactor, todas las instalaciones de servicio auxiliar
debe ser diseñado y probado. Estos incluyen suministro de aire y equipo de esterilización,
generador de vapor y las líneas de suministro, preparación del medio y las instalaciones de
esterilización, el suministro de agua de refrigeración y de la red de control de procesos. Se
requiere especial atención para asegurar la fermentación puede llevarse a cabo de forma
aséptica. Cuando las células recombinantes u organismos patógenos están involucrados, el
diseño del proceso también debe reflejar requisitos de contención y seguridad. Una parte
importante del proceso total es la recuperación del producto (Paso 16), también conocido como
el procesamiento aguas abajo. Después de dejar el fermentador, caldo en bruto se trata en una
serie de pasos para producir el producto final. la recuperación del producto es a menudo difícil
y costoso; para algunos productos derivados de ADN recombinante, purificación representa el
80-90% del coste total de procesamiento. Los procedimientos reales utilizados para el
procesamiento aguas abajo dependen de la naturaleza del producto y el caldo; métodos
biológicos físicos, químicos o se pueden emplear. Muchas de las operaciones que son estándar
en el laboratorio se hacen antieconómico o poco práctico a escala industrial. procedimientos
comerciales incluyen filtración, centrifugación y flotación para la separación de células a partir
de la interrupción líquido, mecánica de las células si el producto es intracelular, extracción con
disolvente, cromatografía, filtración en membrana, adsorción, cristalización y secado. La
eliminación de efluente después de la eliminación del producto deseado también debe ser
considerado. Al igual que el diseño del biorreactor, las técnicas de aplicación industrial para el
procesamiento aguas abajo se desarrollan primero y se ensayaron usando un aparato de
pequeña escala. Los científicos capacitados en química, bioquímica, ingeniería química y la
química industrial desempeñan papeles importantes en el diseño de la recuperación de
producto y sistemas de purificación ". Después de que el producto ha sido aislado en una pureza
suficiente que se envasa y comercializa (Paso 17). Para los nuevos productos farmacéuticos tales
como humana recombinante la hormona del crecimiento o insulina, médica y ensayos clínicos
son necesarios para probar la eficacia del producto. los animales se utilizaron por primera vez,
entonces los humanos. Sólo después de estos ensayos se llevan a cabo y la seguridad del
producto establecidas ¿puede ser liberados para el cuidado de la salud en general se requieren
aplicaciones. Otras pruebas para los productos alimenticios. ingenieros de bioprocesos con un
conocimiento detallado de los procesos de producción están a menudo involucrados en la
documentación de los procedimientos de fabricación para su presentación a las autoridades
reguladoras. se deben cumplir las normas de fabricación; Este es particularmente el caso de los
productos recombinantes en donde se requiere un mayor número de medidas de seguridad y
precaución. Como se muestra en este ejemplo, una amplia gama de disciplinas está implicado
en el procesamiento biológico. Los científicos que trabajan en esta área se enfrentan
constantemente con biológica, química, física, ingeniería y cuestiones médicas veces. una amplia
gama de disciplinas está involucrada en el procesamiento biológico. Los científicos que trabajan
en esta área se enfrentan constantemente con biológica, química, física, ingeniería y cuestiones
médicas veces. una amplia gama de disciplinas está involucrada en el procesamiento biológico.
Los científicos que trabajan en esta área se enfrentan constantemente con biológica, química,
física, ingeniería y cuestiones médicas veces.

1.2 Un Enfoque Cuantitativo

Las características biológicas de las células y enzimas a menudo imponen limitaciones en el

procesamiento biológico; Por lo tanto, el conocimiento de ellos es un requisito previo
importante para el diseño racional de ingeniería. Por ejemplo, la termoestabilidad propiedades
deben tenerse en cuenta al elegir la temperatura de funcionamiento de un reactor de enzima,
mientras que la susceptibilidad de un organismo a sustrato inhibición determinará si sustrato se
alimenta al fermentador todos a la vez o de forma intermitente. No es menos cierto, sin
embargo, que los biólogos que trabajan en biotecnología deben tener en cuenta los aspectos de
ingeniería de bioprocesos; la selección o manipulación de los organismos deben llevarse a cabo
para lograr los mejores resultados en las operaciones de producción a gran escala. Sería
decepcionante, por ejemplo, pasar un año o dos la manipulación de un organismo para expresar
un gen extraño si las células en cultivo producen un caldo altamente viscoso que no se pueden
mezclar o se suministra con el oxígeno en los vasos de gran escala adecuadamente. Del mismo
modo, mejorando la permeabilidad celular para facilitar la excreción producto tiene una utilidad
limitada si el nuevo organismo es demasiado frágil para soportar las fuerzas mecánicas
desarrolladas durante el funcionamiento del fermentador.

Otra área que requiere la cooperación y el entendimiento entre los ingenieros y científicos de
laboratorio es la formación media. Por ejemplo, la adición de suero puede ser beneficioso para
el crecimiento de las células animales, pero puede reducir significativamente los rendimientos
del producto durante las operaciones de recuperación y, en procesos a gran escala, requiere
procedimientos especiales de esterilización y la manipulación. Todas las áreas de desarrollo de
bioprocesos - la célula o enzima utilizada, las condiciones de cultivo proporcionados, el equipo
de fermentación y producto de recuperación de las operaciones - son interdependientes. Debido
a la mejora en un área puede ser una desventaja a otro, a ser posible, el desarrollo de
bioprocesos debe proceder de una manera integrada. En la práctica, la combinación de las
habilidades de los ingenieros con los de los biólogos puede ser difícil debido a las muy diferentes
formas en que son entrenados biólogos e ingenieros. Los científicos biológicos en general, tienen
una fuerte técnica experimental y son buenos en pruebas de modelos cualitativos; Sin embargo,
debido a los cálculos y ecuaciones no son una característica destacada de las ciencias de la vida,
los biólogos suelen ser menos familiarizados con las matemáticas. Por otra parte, ya que los
cálculos son importantes en todas las áreas de diseño del equipo y análisis de procesos, métodos
cuantitativos, la física y las teorías matemáticas juegan un papel central en la ingeniería.
También hay una diferencia en la forma en que los biólogos e ingenieros bioquímicos piensan
acerca de los procesos complejos, tales como la función celular y la enzima. Fascinante como las
minucias de estos sistemas biológicos puede ser, con el fin de construir reactores y otros equipos
de trabajo, los ingenieros deben adoptar un enfoque simplificado y pragmático. A menudo es
decepcionante para el científico biología entrenados que los ingenieros parecen ignorar la
maravilla, la complejidad y la complejidad de la vida a centrarse sólo en aquellos aspectos que
tienen efecto cuantitativo significativo en el resultado final del proceso. Dada la importancia de
la interacción entre la biología y la ingeniería de bioprocesos, estas diferencias de perspectiva
entre los ingenieros y biólogos deben ser superados. Aunque es poco realista esperar que todos
los biotecnólogos para llevar a cabo la formación completa de ingeniería, hay muchas ventajas
en la comprensión de los principios prácticos de la ingeniería de bioprocesos si no el detalle
teórico completo. El objetivo principal de este libro es enseñar a los científicos formados en
biología aquellos aspectos de la ciencia de la ingeniería que son relevantes para el
procesamiento biológico. Se asume una formación adecuada en la biología. Al final de este
estudio, se han ganado un mayor aprecio por la ingeniería de bioprocesos. Usted será capaz de
comunicarse en un nivel profesional con los ingenieros de bioprocesos y saber cómo analizar y
evaluar críticamente las nuevas propuestas de procesamiento. Usted será capaz de realizar
cálculos y comprobaciones de rutina en los procesos; en muchos casos, estos cálculos no son
difíciles y pueden ser de gran valor. También sabrá qué tipo de experiencia ingeniero
bioprocesos puede ofrecer y cuando es necesario consultar a un experto en el campo. En el
laboratorio, el conocimiento de los métodos de ingeniería ayudará a evitar errores comunes en
el análisis y diseño de aparatos experimentales de datos. A medida que nuestra explotación de
la biología continúa, existe una demanda creciente de científicos formados en la tecnología de
bioprocesos que puedan traducir los nuevos descubrimientos en la producción a escala
industrial. Como experto en biotecnología, se podría esperar que trabajar en la interfaz de la
biología y la ingeniería de la ciencia. Este libro de texto sobre ingeniería de bioprocesos está
diseñado para prepararse para este desafío.