COLEGIO DE BACHILLERES DEL ESTADO DE MÉXICO PLANTEL 05 VALLE DE

BRAVO

Módulo Laboratorista Químico

Reporte de práctica: tinción de Gram

Docente: Hernán Vargas Gómez

Grupo: 503 vespertino

Integrantes:

 Luis García dalia alelí .......... 17

 Santiago Marcelino Martinez ..........19
 Ricardo Ocaña Morales....... 21
 Litzi Yanet Rivera Loreto ............25
 Cristian Salinas Castillo.......27

Introducción

La tinción de Gram, también conocida como coloración de Gram, es una técnica de laboratorio
que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias. Fue diseñada por
Christian Gram, un científico danés, en el año 1884. El objetivo de Gram era conseguir una
prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder
estudiarlas y clasificarlas. La prueba resultó todo un éxito y pronto se convirtió en una técnica
muy útil no solo para el estudio de las bacterias, sino también para poder identificarlas
rápidamente en una infección y seleccionar el antibiótico más adecuado para tratarla.

La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen (esputo,
orina, pus, etcétera) que supuestamente contenga bacterias no identificadas. Los colorantes
tiñen la pared de las bacterias de color morado y, tras unos minutos, se realiza un lavado del
colorante. Después de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se
haya ido. En el primer caso permanecería el color morado, y se trataría de bacterias Gram
positivas y, en el segundo, la pared tendría un color rosado, y serían Gram negativas.

La tinción de Gram también tiene ciertas limitaciones. Algunas bacterias no tienen pared, como
por ejemplo las Chlamidias, y no se podrán identificar, al igual que los virus. En esos casos la
tinción no coloreará ningún germen. Otro aspecto negativo de la prueba es que no puede
identificar el tipo exacto de bacteria responsable de la infección. Para ello es necesario realizar
un cultivo microbiológico que se acompaña siempre de un antibiograma para estudiar de forma
exacta el antibiótico más efectivo

Objetivos.

Que el alumno morfología colonial y celular de las bacterias que hizo crecer en su medio de
cultivo

Que el alumno aprenda a distinguir físicamente las diferencias entre las bacterias gram
positivas y gram negativas

Hipótesis

Si logramos elaborar correctamente la tinción de gram, entonces podremos identificar las

bacterias gram positivas y gram negativas físicamente.

Material

 Mechero Bunsen o Fisher

 Asa bacteriológica
 Portaobjetos
 Microscopio
 Aceite de inmersión
 Kit de tinción de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol acetona y
safranina).
Desarrollo
 Limpiar el portaobjetos y secar con el mechero
 coloca una gota de solución salina en el portaobjetos y
esterilizar el asa bacteriológica
 Tome una pequeña muestra del medio de cultivo con
crecimiento y diluirla en el portaobjetos una vez hecho
esto esteriliza nuevamente a el asa
 fijé la muestra en el puerto objetos pasándola de dos a
tres veces sobre La Flama del mechero teniendo cuidado
de no quemarla
 Coloque el portaobjetos en el lavabo
 Cubren la muestra con cristal Violeta y Espere un
minuto después proceda a enjuagar con agua
lentamente y escurre el portaobjetos
 Cubra la muestra con solución de lugol y esperas
que transcurra un minuto posteriormente
enjuagar y escurrir
 cubrir la muestra con la mezcla de alcohol
acetona y espere unos cuantos segundos
enjuague y escurra
 agregue la solución de safranina a la muestra y
esperé que transcurra un minuto luego enjuague
y escurra
 dejé secar el portaobjetos y después añada una
gota de aceite de inmersión vea al microscopio
la muestra a 100x

Resultados
 Después de realizar el proceso de tinción de Gram, nos arrojó una muestra con
bacterias que se podían apreciar cuáles eran positivas y negativas, las identificamos
gracias al color que adoptaron, algunas se mostraban rosas y otras de otro tono de
morado.

Discusión

La primera muestra a
la que le aplicamos
la tinción, no se alcanzaba
a distinguir nada de alguna
bacteria, nos pusimos a
analizar el proceso
que hicimos y nos dimos
cuenta que tal vez no nos
dió los resultados deseados por haber aplicado el cristal violeta mientras el portaobjetos estaba
caliente. Volvimos a elaborar el proceso de tinción y está vez nos dió los resultados deseados.

Conclusión
En conclusión, la tinción de Gram es un método de identificación de bacterias muy útil y con
bastante precisión, es un método donde los resultados son de fácil interpretación.

Bibliografía

 Webconsultas.com
 Wikipedia.org
 Microinmuno.qb
 Cuenciatoday.com
 Culturacientifica.com